Kajian Fungsi Neuroendokrin-Imun Glikosida Fenilethanoid Herba Desertliving Cistanche Pada Tikus Model Perimenopause
Mar 20, 2022
untuk informasi lebih lanjut:ali.ma@wecistanche.com
Shuo Tiana, dkk
Abstrak
Relevansi etnofarmakologi:
Kehidupan gurunBentengherbapertama kali tercatat di "Shen Nong'Herbal Classic" dan terdaftar sebagai obat herbal kelas atas di dalamnya.Feniletanoidglikosidaadalah komponen indikatif untuk identifikasi dan penentuan konten kehidupan GurunBentengherbadalam farmakope Cina, yang juga merupakan salah satu komponen aktif utama. Dalam penelitian ini, kami mengeksplorasi mekanismefeniletanoidglikosidakehidupan gurunBentengherbauntuk tikus model perimenopause.
Tujuan:
Tujuan dari penelitian ini adalah untuk meneliti efek darifeniletanoidglikosidadari Desertliving Cistancheherb (PGC) dineuroendokrin-imunfungsi sindrom perimenopause oleh tikus model perimenopause.
Bahan dan metode:
Tikus betina wistar dipilih. Ovarium kiri untuk semua tikus kecuali pada kelompok kontrol kosong (BC) diangkat, dan ovarium kanan diangkat pada 80 persen . Apusan vagina menunjukkan perubahan siklus estrus yang tidak teratur untuk tikus model perimenopause. Dan tikus model perimenopause digergaji Gengnian'an,FeniletanoidGlikosidadari DesertlivingBentengherbatinggi, sedang, suspensi rendah yaitu 450mg/(kg hari), 133,33mg/(kg hari), 66,67mg/(kg hari), 33,33mg/(kg hari); kelompok BC dan kelompok model (MC) diberi akuades dengan volume yang sama dengan kelompok obat selama 30 hari berturut-turut. Skor latihan vertikal horizontal diukur pada 29 hari pemberian dosis. Setelah pemberian terakhir, darah diambil dari aorta perut, dan kadar E2, LH, FSH, GnRH, BGP dalam serum, dan kadar -EP dalam plasma diukur masing-masing. Indeks organ timus, limpa, dan rahim dihitung. Kandungan reseptor estrogen (ER) di hipotalamus, hipofisis, dan jaringan rahim dan kandungan reseptor androgen (AR) dalam homogenat hipotalamus diukur. Perubahan patologis pada timus, limpa, uterus, ovarium diamati dengan pewarnaan HE.
Hasil:
Dibandingkan dengan MC, PGC meningkatkan aktivitas, indeks organ (timus, limpa, rahim), tingkat E2, T, BGP dalam serum, tingkat -EP dalam plasma, tingkat AR di hipotalamus, tingkat ER di hipotalamus, hipofisis, rahim pada tikus model perimenopause. Dan itu juga mengurangi kadar FSH, LH, GnRH dalam serum, dan memperbaiki lesi uterus dan ovarium pada tikus model perimenopause.
Kesimpulan:
Setiap dosis PCG dapat menangkal gangguan hormon seks pada tikus model perimenopause, memperbaiki ketidakseimbangan kadar ER dan AR, meningkatkan dan mengembalikan efek uterus dan sel saraf hipotalamus, serta memperbaikiimunfungsi.
Kata kunci:Feniletanoidglikosidakehidupan gurun,Bentengherba, Tikus model perimenopause,Neuroendokrin-imunfungsi
FeniletanoidglikosidadariBentengHerbamempunyai sebuahNeuroendokrin-imunfungsi
1. Perkenalan
Dengan bertambahnya usia populasi, kejadian sindrom perimenopause meningkat. Beberapa penelitian telah menemukan bahwa usia timbulnya sindrom perimenopause telah menurun secara internasional dan telah menurun dari 65 menjadi 35 tahun. Pengobatan modern percaya bahwa sindrom perimenopause mengacu pada gejala yang disebabkan oleh penurunan fungsi ovarium (Miao et al., 2017a,b). Tingkat estrogen rendah, yang menyebabkan fungsi abnormal seperti endokrin, saraf, danimunfungsi. Manifestasi klinis utama adalah hot flashes, berkeringat, jantung berdebar, insomnia, lekas marah, menstruasi tidak teratur, osteoporosis, dan timbulnya penyakit kardiovaskular (Lobo et al., 2014; Alvarado-García et al., 2015), yang sangat mempengaruhi kehidupan. dari wanita perimenopause. Terapi penggantian hormon (HRT) adalah metode utama untuk pengobatan sindrom ini, tetapi terapi penggantian estrogen jangka panjang dapat menyebabkan efek samping seperti coprophagia, nyeri distensi pada payudara, karsinoma endometrium, kanker payudara, dan peningkatan insidensi. penyakit kardiovaskular dan serebrovaskular, dan rentan terhadap kekambuhan (Perrone et al., 2013). Gejala-gejala ini membatasi penerapan klinisnya, sehingga orang-orang semakin memperhatikan masalah tahap khusus menopause ini.
Karakteristik sindrom seperti "viscera", "pembekuan darah lama", "penyakit lily", "sindrom depresi", dan "tidak patuh" yang tercatat dalam pengobatan tradisional Tiongkok mirip dengan sindrom menopause medis modern. Mereka termasuk dalam kategori berbagai gejala sebelum dan sesudah menopause. "Suwen: Shanggu Tianzhen Lun," berkata: "Saluran Ren lemah ketika orang berusia 49 tahun, dan Kapal Jalan Raya akan berkurang, esensi perangsang seks habis, dan fenomena lainnya, oleh karena itu, seorang wanita kehilangan fungsi a janin." Dan esensi perangsang seks diubah oleh esensi ginjal, sehingga Pengobatan Tradisional Cina (TCM) percaya bahwa patogen utama penyakit ini adalah defisiensi ginjal (Peng, 2014). Studi juga menunjukkan bahwa penurunan fungsi ovarium adalah penyebab sindrom ginjal-asthenia dalam terminologi TCM. Penurunan kadar E2, LH, FSH, merupakan ekspresi dari asthenia ginjal (Liu et al., 2010), dan penelitian telah menemukan bahwa sebagian besar obat yang mengisi ginjal memiliki efek pengobatan yang lebih baik pada sindrom perimenopause (Zhang dan Miao, 2011; Cao et al., 2016; Wang et al., 2016; Tian et al., 2017a,b), jadi kita harus benar-benar memahami peran "defisiensi ginjal" dalam terminologi TCM sebagai patogenesis utama dalam klinis pengobatan, dan menekankan tujuan utama pengisian ginjal. Penelitian telah menunjukkan bahwa dengan mengisi ginjal obat Cina dapat mengatur disfungsi sumbu HPO, menunda penuaan ovarium, mengaturendokrin saraf-imunsistem kekebalan tubuh, dan mencegah osteoporosis (Shi et al., 2007), di antara efek lainnya. Kehidupan gurunBentengherbaadalah batang berdaging kering dan bersisik dari Cistanche deserticoLa YCMa atau Cistanche tubulosa (Schenk) Wight, itu adalah tanaman obat parasit abadi. Ini memiliki efek mengisi ginjal, mengisi esensi dan darah, melonggarkan usus untuk meredakan sembelit dan efek lainnya. Kehidupan gurunBentengherbaumumnya digunakan dalam pengobatan tradisional Tiongkok untuk menyegarkan ginjal dan memperkuat Yang, yang disebut "ginseng gurun." Penelitian modern telah menunjukkan bahwa ia memiliki efek anti-penuaan, meningkatkan kekebalan tubuh, meningkatkan kemampuan belajar dan memori, efek anti-inflamasi, dan anti-kelelahan, antara lain (Li et al., 2010). Komposisi kimia ramuan Desertliving Cistanche sangat kompleks, dan kandunganfeniletanoidglikosidaadalah yang tertinggi dalam bahan obat asli. Itu juga salah satu komponen aktif utama dari DesertlivingBentengherbauntuk mengerahkan efek seperti androgen dan sifat imunomodulator (Zhao dan Pan, 2013). Dan PGC dapat meningkatkan gangguan hormon seksual (E2, T, FSH, LH) pada tikus perimenopause, dan memiliki efek terapeutik yang baik pada tikus perimenopause, lihat penelitian terkait (Tian et al., 2017a,b).
Saat ini, penelitian tentang sindrom perimenopause berfokus pada sistem endokrin, sistem saraf,imunfungsi, dll, tetapi gangguan endokrin-imunregulasi adalah penyebab utama sindrom perimenopause (Wang et al., 1999; Zhang dan Wang, 2001). Penelitian ini menguji pengaruh PGC pada tikus model perimenopause dari perspektif endokrin-imunfungsi.
2. Bahan-bahan dan metode-metode
2.1. Hewan percobaan
Tikus betina Wistar (210–230 g) dibeli dari ShandongLukang Pharmaceutical Co., Ltd., Nomor izin hewan: 0017216, sertifikat lab No. SYXK (Henan) 2010–001. Semua tikus dipelihara dengan akses gratis ke makanan dan air di kandang plastik pada 22 ± 2 derajat, kelembaban relatif 50 persen -60 persen. Dan hewan ditempatkan selama satu minggu sebelum percobaan.
2.2. Bahan dan reagen
Sodium Carboxymethyl Cellulose, Tianjin Hengxing Chemical Reagent Manufacturing Co., Ltd., Batch No.: 20120418; Benzylpenicillin potassium untuk Injeksi, Huabei China Pharmaceutical Co., Ltd., Spesifikasi: 4 juta unit, Produksi Batch No.: c1206807; Solusi Formaldehida (Analitik Murni), Yantai Shuangshuang Chemical Co., Ltd., Produksi Batch No.: 20130902; kloral hidrat, Institut Penelitian Kimia Halus Tianjin Guangfu, nomor batch 20120827; tikus E2, T, FSH, LH, GnRH, AR, ER, BGP, -EP Reagen pendeteksi ELISA Kotak, R&D, nomor lot: 20140101A.
2.3. Obat eksperimental
Metode persiapan spesifik dan deteksi konten PGC telah diterbitkan. Lihat literatur dan isinya adalah 66,47 persen (Tian et al., 2017a,b). Gengnian Capsule, komposisi: Rehmannia, Rehmannia glutinosa, Alisma, Ophiopogon japonicas, Scrophulariaceae, Cortex Moutan, Poria, Mother of Pearl, Curculigo, Schisandra, Magnet, Shouwu Vine, Uncaria, Floating Wheat, Polygonum multiflorum. Indikasi : Menyehatkan yin dan yang, menghilangkan masalah dan menenangkan pikiran, dan digunakan untuk menopause dengan hot flashes berkeringat, vertigo tinnitus, lekas marah, dan insomnia. Spesifikasi: 0,3 g per kapsul. Penggunaan dan Dosis: Oral, 3 kapsul sekaligus, 3 kali sehari. Perusahaan produksi: Shanxi Tianxing Pharmaceutical Co., Ltd. Nomor batch produksi: 121104. Nomor persetujuan: Obat Nasional Zhunzi Z14021848.
FeniletanoidglikosidadariBentengHerbamempunyai sebuahNeuroendokrin-imunfungsi
2.4. Instrumen eksperimental
Membuka ruang uji aktivitas, Chengdu Taimeng Software Co., Ltd., model OFT-100; mikroskop bermotor, perusahaan OLYMPUS Jepang, model: BX61; pembaca pelat mikro, perusahaan BIO-RAD Amerika, model: 680; Centrifuge berpendingin berkecepatan tinggi X3R, USA Mercury Technology Co., Ltd.
2.5. Persiapan dan pengelompokan model hewan
Diambil delapan puluh ekor tikus dengan berat 20–230 g, dan 12 ekor tikus dipilih secara acak sebagai kelompok BC, dan sisanya digunakan untuk model hewan perimenopause. Metode preparasi tikus model perimenopause, metode literatur referensi (Miao et al., 2015), ovarium kiri diangkat seluruhnya, ovarium kanan diangkat 80 persen. Dibesarkan dengan hati-hati setelah operasi, dan untuk pencegahan infeksi dengan injeksi penisilin 20U/kg (0,1 ml) secara intramuskular, selama 3 hari berturut-turut, sekali sehari. Setelah 5 hari pembedahan, dilakukan pemeriksaan apus vagina tikus satu per satu, satu kali sehari, dan berturut-turut selama 5 hari. Tikus dengan reaksi estrus dibuang. Enam puluh tikus ovariektomi secara acak dan dibagi rata menjadi 5 kelompok untuk percobaan. Mereka adalah kelompok model (MC), kelompok Gengnian'an (GC),FeniletanoidGlikosidadari DesertlivingBentengherbatinggi (PGC-HD), sedang (PGC-MD), kelompok dosis rendah (PGC-LD).
2.6. Metode konfigurasi obat
(1) Dosis PGC-HD, PGC-MD, PGC-LD masing-masing adalah 133,33 mg/kg, 66,67 mg/kg, dan 33,33 mg/kg (volume pemberian 1 ml/100 g). Cara konfigurasi: Timbang PGC 1333,3 mg,666,7 mg, 333,3 mg, dilarutkan terlebih dahulu dengan sedikit akuades, kemudian ditambahkan akuades hingga 100 ml, dan diaduk rata, yaitu diperlukan PGC-HD, PGC-MD, PGC -LD suspensi.
(2) Dosis GC adalah 450 mg/kg, dan volume pemberiannya sama dengan di atas, yang setara dengan 10 kali dosis klinis. Cara konfigurasi: Ambil 15 kapsul GengnianCapsule, larutkan terlebih dahulu dengan sedikit air suling, lalu atur hingga 100 ml, dan campur. Ini adalah suspensi GC yang diinginkan.
2.7. Cara pemberian
Setiap kelompok hewan diberi obat yang sesuai pada hari ke-10 setelah operasi. Kelompok GC diberi suspensi Kapsul Gengnian 450 mg/kg, dan PGC-HD, PGC-MD, PGC-LD masing-masing diberi suspensi PGC-HD, PGC-MD, PGC-LD yaitu 133,33 mg/kg, 66,67 mg /kg, 33,33 mg/kg. Kelompok BC dan MC masing-masing diberikan dengan volume air suling yang sama, sekali sehari selama 30 hari.
2.8. Tes lapangan terbuka
Tikus-tikus di setiap kelompok diuji untuk skor latihan horizontal-vertikal pada 29 hari pemberian. Alat percobaan berupa kotak kubus terbuka dengan tinggi 40 cm dan panjang 80 cm dan lebar 80 cm. Dinding tepi dan permukaan bawah berwarna hitam, dan permukaan bawah terdiri dari 25 blok dengan luas yang sama, yang dibagi dengan garis putih. Selama percobaan, tikus ditempatkan di kotak kotak terbuka, dan skor aktivitas horizontal sinar yang melewati permukaan bawah dalam waktu 5 menit (kotak di mana keempat cakar dimasukkan) diamati, dan aktivitas vertikal skor jumlah kaki belakang didirikan (dua kaki depan dikosongkan atau memanjat dinding). Kotoran harus benar-benar dikeluarkan setelah setiap percobaan dan diukur sekali setelah 2 jam pemberian. Percobaan ini dilakukan di ruangan yang tenang.
2.9. Penentuan kadar E2, T, LH, FSH, GnRH, BGP dalam serum dan kadar -EP dalam plasma
Tikus pada masing-masing kelompok setelah pemberian terakhir 2 jam (puasa selama 12 jam), anestesi perut, darah diambil dari aorta perut, serum dan plasma dipisahkan (4 derajat , 3500 rpm, 10 menit), disimpan dalam lemari es di 80 derajat. Menggunakan enzyme-linked immunosorbent assay mengukur kadar E2, T, LH, FSH, GnRH, BGP dalam serum, dan kadar -EP dalam plasma. Metode spesifik operasi dilakukan sesuai dengan instruksi.
2.10. Penentuan ER dan AR di hipotalamus, hipofisis, dan homogenat jaringan rahim
Setelah diambil darah dari aorta abdominalis, tikus dikorbankan. Hipotalamus, hipofisis, dan rahim diambil dari tubuh. Hipotalamus, hipofisis, dan 1/2 uterus dihomogenisasi. Metode homogenisasi adalah sebagai berikut:
Blok jaringan dibilas dengan es dingin 0.9 persen natrium klorida, darah dikeluarkan, dan menggunakan kertas saring untuk mengeringkan jaringan, jaringan ditimbang, dan dipotong ke dalam tabung gelas homogenat, dan dihomogenkan dengan menambahkan 0,9 persen natrium klorida yang telah didinginkan sebelumnya (Perbandingan jaringan dan0,9 persen natrium klorida adalah 1:9). Tabung homogenisasi genggam kiri dimasukkan ke dalam bejana berisi campuran air es. Tangan kanan dimasukkan ke dalam casing secara vertikal dan diputar ke atas dan ke bawah beberapa kali (6-8 menit), menggiling sepenuhnya, menghomogenkan jaringan, centrifuge (4 derajat , 3500 rpm, 10 menit), dan simpan pada suhu 80 derajat di lemari es .
Kandungan ER dalam homogenat hipotalamus, hipofisis, dan jaringan rahim, dan konten AR dalam homogenat hipotalamus ditentukan dengan enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) sesuai dengan instruksi.
FeniletanoidglikosidadariBentengHerbamempunyai sebuahNeuroendokrin-imunfungsi
2.11. Perhitungan indeks organ
Tikus pada masing-masing kelompok setelah pemberian terakhir 2 jam (puasa selama 12 jam), tikus dikorbankan, timus, limpa, rahim, dan sisa 20 persen jaringan ovarium dikeluarkan, bobot basah ditimbang, dan organ indeks timus, limpa, rahim dihitung. Rumusnya adalah sebagai berikut:
Indeks Organ=Berat Organ Basah (mg)/ Massa Tubuh Tikus (g)
2.12. Pengamatan morfologi uterus, ovarium, timus, limpa, dan pengukuran ketebalan korteks timus dan nodul limpa
Timus, limpa, rahim, dan ovarium difiksasi dalam larutan formaldehida 10 persen, tertanam dalam parafin, dipotong, diwarnai HE, dan perubahan histomorfologi diamati di bawah mikroskop cahaya. Menggunakan mikrometer, ketebalan korteks timus diukur pada titik paling tebal dan tersempit dari setiap tikus di setiap kelompok eksperimen. Rata-rata adalah ketebalan korteks timus. Garis dasar mikrometer ditempatkan pada nodul limpa ke tengah. Penentuan Tebal Limpa pada kedua sisi dengan Arteri Sentral sebagai Pusat, dan rata-rata adalah ketebalan limpa.
2.13. Analisis statistik
Analisis data menggunakan SPSS21.0 paket statistik medis untuk melakukan pengolahan statistik data, dan data metrologi dinyatakan sebagai mean ± standar deviasi(x(-) ± s), perbandingan antar kelompok menggunakan faktor tunggal analisis varians. Metode LSD digunakan untuk homogenitas uji varians, metode Games-Howell digunakan untuk uji varians tidak merata, dan uji Ridit digunakan untuk data kelas.
3. Hasil percobaan
3.1. Pengaruh perilaku pada tikus model perimenopause
Dari Gambar 1 (A dan B). Dapat dilihat bahwa dibandingkan dengan BC, skor gerakan horizontal dan vertikal tikus kelompok MC berkurang secara signifikan (P < 0.01),="" yang="" mencerminkan="" keingintahuan="" tikus="" tentang="" hal-hal="" yang="" tidak="" dikenalnya.="" lingkungan.="" dibandingkan="" dengan="" mc,="" setiap="" kelompok="" dapat="" meningkatkan="" skor="" latihan="" horizontal="" tikus="" secara="" signifikan="" (p="">< 0.01),="" dan="" pgc-hd,="" pgc-md,="" pgc-ld="" secara="" signifikan="" meningkatkan="" skor="" gerakan="" vertikal="" tikus="" (p="">< 0,05).="" kelompok="" pgc-ld="" memiliki="" kecenderungan="" untuk="" meningkatkan="" integral="" gerak="" vertikal="">
3.2. Pengaruh indeks organ terkait pada tikus model perimenopause
Dari Gambar 2(A, B, C), kita dapat melihat bahwa dibandingkan dengan BG, indeks organ timus, limpa, dan rahim pada tikus kelompok MC menurun secara signifikan (P < 0.{{3}="" }1),="" yang="" menunjukkan="" bahwa="" timus,="" limpa,="" dan="" rahim="" tampak="" menyusut="" pada="" tikus="" model="" perimenopause="" yang="" disebabkan="" oleh="" pengangkatan="" ovarium="" yang="" tidak="" lengkap.="" dibandingkan="" dengan="" mc,="" indeks="" organ="" timus="" dan="" limpa="" tikus="" model="" perimenopause="" meningkat="" secara="" signifikan="" pada="" setiap="" kelompok="" obat="" (p="">< 0.01).="" kelompok="" pgc-hd,="" pgc-md,="" dan="" gc="" meningkatkan="" indeks="" uterus="" tikus="" model="" perimenopause="" secara="" signifikan="" (p=""><0,01). pgc-md="" meningkatkan="" indeks="" uterus="" tikus="" model="" perimenopause="" secara="" signifikan="" (p=""><>
3.3. Pengaruh indikator biokimia pada tikus model perimenopause
Seperti ditunjukkan pada Gambar. 3. (A, B, C, D), dibandingkan dengan kelompok BC, kadar E2 dan T dalam serum pada kelompok MC menurun secara signifikan (P < 0.{{4="" }}1),="" dan="" kadar="" lh="" dan="" fsh="" meningkat="" secara="" signifikan="" (p="">< 0.{{10}}1),="" yang="" menunjukkan="" bahwa="" pengangkatan="" ovarium="" yang="" tidak="" lengkap="" ke="" tikus="" model="" perimenopause="" mengarah="" untuk="" gangguan="" hormon="" seks,="" tikus="" model="" perimenopause="" berhasil="" direplikasi.="" dibandingkan="" dengan="" kelompok="" mc,="" masing-masing="" kelompok="" obat="" dapat="" secara="" signifikan="" meningkatkan="" kadar="" e2,="" t="" dalam="" serum="" dan="" menurunkan="" kadar="" fsh(p=""><0,01); pgc-md,="" kelompok="" gc="" dapat="" secara="" signifikan="" mengurangi="" tingkat="" lh="" yang="" meningkat="" (p=""><0,01), pgc-hd="" dapat="" secara="" signifikan="" mengurangi="" tingkat="" lh="" (p=""><0,05); pgc-ld="" dapat="" menurunkan="" kadar="">
Dari Gambar. 3 (E, F), dibandingkan dengan kelompok BC, tingkat GnRH kelompok MC dalam serum meningkat secara signifikan, dan tingkat - EP dalam plasma menurun secara signifikan (P < 0.="" 01),="" menunjukkan="" bahwa="" ablasi="" ovarium="" yang="" tidak="" lengkap="" menyebabkan="" gangguan="" hormon="" seks="" pada="" tikus="" model="" perimenopause,="" dan="" hormon="" terkait="" yang="" disekresikan="" oleh="" hipotalamus="" juga="" terganggu="" karena="" regulasi="" umpan="" balik="" negatif.="" dibandingkan="" dengan="" kelompok="" mc,="" tingkat="" gnrh="" di="" setiap="" kelompok="" obat="" berkurang="" secara="" signifikan="" (p="">< 0.01);="" tingkat="" -ep="" meningkat="" secara="" signifikan="" pada="" kelompok="" pgc-hd,="" pgc-md,="" gc="" (p=""><0,01), tingkat="" -ep="" dalam="" plasma="" meningkat="" secara="" signifikan="" pada="" pgc-ld="" (p=""><>
3.4. Pengaruh kadar BGP dalam serum pada tikus model perimenopause
Dari Gambar 4 dapat dilihat bahwa kadar BGP serum pada kelompok MC secara signifikan lebih rendah dibandingkan dengan kelompok BC (P < 0.01)="" yang="" menunjukkan="" bahwa="" kadar="" bgp="" pada="" tikus="" model="" perimenopause="" dengan="" ovarium="" tidak="" lengkap="" berkurang.="" dibandingkan="" dengan="" kelompok="" mc,="" kadar="" bgp="" pada="" kelompok="" pgc-hd,="" pgc-md,="" pgc-ld,="" gc="" meningkat="" secara="" signifikan="" (p=""><>
3.5. Pengaruh ER, AR pada tikus model perimenopause
Dapat dilihat dari Gambar 5 bahwa dibandingkan dengan kelompok BC, kadar ER dan AR pada tikus model perimenopause menurun secara signifikan (P < 0.01),="" hal="" ini="" menunjukkan="" bahwa="" hormon="" reseptor="" di="" jaringan="" tubuh="" tikus="" model="" perimenopause="" yang="" disebabkan="" oleh="" ovariektomi="" tidak="" lengkap="" berkurang,="" yang="" mengurangi="" efek="" biologis="" estrogen="" dan="" androgen.="" seperti="" ditunjukkan="" pada="" gambar.="" 5="" (a,="" b,="" c),="" dibandingkan="" dengan="" kelompok="" mc,="" masing-masing="" kelompok="" obat="" dapat="" secara="" signifikan="" meningkatkan="" tingkat="" er="" di="" hipotalamus,="" hipofisis,="" dan="" rahim="" (p="">< 0.01);="" dari="" gambar="" 5(d),="" kadar="" ar="" di="" hipotalamus="" pada="" kelompok="" pgc-hd,="" pgc-md,="" gc="" meningkat="" secara="" signifikan="" (p=""><>
3.6. Pengaruh morfologi patologis uterus pada tikus model perimenopause
Berdasarkan perubahan endometrium, kelenjar, dan lapisan otot tikus pada masing-masing kelompok, kriteria semi-kuantitatif digunakan untuk mengklasifikasikan histopatologi menjadi empat tingkatan yaitu "-, plus , plus plus , plus plus plus". Dari uji Ridit terlihat pada Gambar 6 dan Tabel .1 bahwa dibandingkan dengan BC, uterus MC menunjukkan perubahan patologis yang signifikan (P < 0.01).="" dibandingkan="" dengan="" mc,="" setiap="" kelompok="" obat="" dapat="" secara="" signifikan="" memperbaiki="" lesi="" jaringan="" patologis="" uterus="" (p=""><>
3.7. Pengaruh morfologi patologis pada jaringan ovarium pada tikus model perimenopause
Berdasarkan perubahan folikel ovarium, korpus luteum, sel granulosa, dan pembuluh darah pada tingkat yang berbeda dalam kelompok eksperimen, kriteria semi-kuantitatif diadopsi untuk mengklasifikasikan morfologi jaringan patologis menjadi empat tingkat: "-, plus , plus plus , tambah tambah tambah". Berdasarkan uji Ridit, dapat dilihat dari Gambar 7 dan Tabel .2 bahwa dibandingkan dengan kelompok BC, ovarium kelompok MC menunjukkan lesi patologis yang signifikan (P < 0.01="" ).="" dibandingkan="" dengan="" kelompok="" mc,="" masing-masing="" kelompok="" obat="" dapat="" secara="" signifikan="" meningkatkan="" perubahan="" patologis="" jaringan="" ovarium="" (p=""><>
3.8. Pengaruh morfologi jaringan timus pada tikus model perimenopause
Dari Gambar 8 terlihat bahwa ketebalan korteks timus pada kelompok MC menurun secara signifikan dibandingkan dengan kelompok BC (P < 0.01),="" yang="" menunjukkan="" bahwa="" timus="" mengalami="" atrofi.="" diamati="" pada="" tikus="" model="" perimenopause.="" dibandingkan="" dengan="" kelompok="" mc,="" semua="" kelompok="" secara="" signifikan="" dapat="" meningkatkan="" ketebalan="" kortikal="" timus="" (p=""><>
Gambar 8. Pengaruh morfologi patologis jaringan timus pada tikus model perimenopause. (A): Perubahan patologis jaringan timus (HE × 200); (B): Ketebalan timikortikal (μm); Dalam B, "a" menyatakan bahwa ada perbedaan yang signifikan antara kelompok MC dan kelompok BC (P <0,01); "b"="" menunjukkan="" bahwa="" ada="" perbedaan="" yang="" signifikan="" antara="" kelompok="" pemberian="" yang="" berbeda="" dan="" kelompok="" mc="" (p=""><0,01), n="" ="12">
3.9. Pengaruh morfologi jaringan limpa pada tikus model perimenopause
Dapat dilihat dari Gambar 9 bahwa dibandingkan dengan BC, volume nodul limpa kelompok MC berkurang secara signifikan (P < 0.01),="" yang="" menunjukkan="" bahwa="" limpa="" atrofi="" diamati="" pada="" tikus="" model="" perimenopause.="" dibandingkan="" dengan="" mc,="" tingkat="" volume="" nodul="" limpa="" meningkat="" secara="" signifikan="" pada="" kelompok="" pgc-hd,="" pgc-md,="" gc="" (p=""><>
Gambar 9. Pengaruh morfologi patologis limpa tikus model perimenopause. (A): Histopatologi limpa(HE × 200); (B): Ketebalan nodul limpa (μm); Pada B, "a" menunjukkan bahwa ada perbedaan yang signifikan antara kelompok MC dan kelompok BC (P <0,01); "b"="" menunjukkan="" bahwa="" ada="" perbedaan="" yang="" signifikan="" antara="" kelompok="" pemberian="" yang="" berbeda="" dan="" kelompok="" mc="" (p="">< 0,01),="" n="" ="">
4. Diskusi
4.1. Pemilihan model hewan
Dengan berkembangnya penelitian tentang sindrom perimenopause, metode preparasi berbagai model hewan perimenopause juga terus bermunculan, seperti model hewan pengebirian, penghancuran iradiasi sinar-X model hewan ovarium (Li et al., 2012), {{ 2}}cincin vinil Model hewan dari penipisan folikel etilen (Brooks et al., 2016), model hewan dari cedera ovarium akibat alkohol (Huang et al., 2007), model hewan dari depresi perimenopause (Miao et al., 2017a,b), model hewan dari sindrom peri-menopause dengan hot flashes (Zhang et al., 2010), model hewan peri-menopause alami (Cai et al., 2007), dll. Model hewan yang berbeda memiliki aplikasinya sendiri dan karakteristik mereka. Penelitian ini didasarkan pada analisis model hewan dari karakteristik gejala klinis sindrom perimenopause (Tian et al., 2015) menurut metode baru evaluasi model hewan pengobatan tradisional Tiongkok yang ditetapkan pada tahap awal laboratorium kami (Tian et al. al., 2017a,b) dan penyusunan model hewan untuk sindrom perimenopause (Draf) (Miao et al., 2018). Penelitian ini menggunakan tikus model perimenopause dengan metode kastrasi tidak lengkap, dan model hewan ini banyak digunakan untuk mempelajari wanita perimenopause dengan osteoporosis, obesitas, aterosklerosis, dan kondisi lainnya, serta menggunakan penelitian tentang faktor-faktor yang berhubungan dengan kerja estrogen, seperti hubungan antara estrogen dan autoimunitas, kanker (Sun dan Jin, 2005), dan model tersebut memiliki tingkat keberhasilan yang tinggi, matang dan stabil, dan banyak digunakan oleh para peneliti. Selain itu, ovarium tidak hanya mensintesis estrogen tetapi juga berpartisipasi dalamimunfungsi, mensekresi dan mensintesis hormon lain. Dan fungsi ovarium perimenopause manusia tidak sepenuhnya hilang, model hewan pengebirian tidak lengkap lebih dekat dengan perimenopause manusia. Hal ini lebih sesuai dengan karakteristik gejala klinis.
4.2. Pemilihan kontrol positif
Penelitian ini menggunakan kapsul Gengnian'an sebagai obat kontrol positif, Kapsul Gengnian'an adalah obat yang diakui secara klinis untuk pengobatan sindrom perimenopause, secara efektif dapat meningkatkan gejala klinis sindrom perimenopause demam pasang surut dengan berkeringat, vertigo dan tinnitus, terjaga, kegelisahan, dan lain-lain. Dan studi klinis dan eksperimental telah menunjukkan bahwa kapsul Gengnian'an mengatur endokrin danimunfungsi pasien perimenopause secara keseluruhan, dan dapat memperbaiki gejala klinis wanita perimenopause dengan berbagai cara. Ini memiliki efek terapeutik yang baik pada sindrom perimenopause (Ou et al., 2011; Wang et al., 2010; Yu et al., 2010; Li dan Liu, 2011; Xie, 2003).
FeniletanoidglikosidadariBentengHerbamempunyai sebuahNeuroendokrin-imunfungsi
4.3. Efek pada sistem neuroendokrin
Sumbu HPO manusia adalah sistem neuroendokrin terkoordinasi, dan dikendalikan oleh sistem saraf pusat. Dalam keadaan normal, hipotalamus mengeluarkan GnRH dan mempromosikan sintesis dan pelepasan FSH dan LH di hipofisis, sehingga meningkatkan sekresi hormon seks dan pertumbuhan dan perkembangan folikel. Interaksi HPO membuat endokrin reproduksi wanita relatif stabil. Ketika wanita memasuki periode perimenopause, fungsi ovarium menurun, sekresi estrogen menurun, dan umpan balik negatif ke hipotalamus dan hipofisis melemah, kelenjar hipofisis mengeluarkan sejumlah besar FSH dan LH, yang menyebabkan ketidakseimbangan HPO, gangguan. dari sistem endokrin, dan dengan demikian menghadiri gejala hot flashes, berkeringat, osteoporosis, dan gejala terkait lainnya.
Perubahan kandungan FSH dan LH merupakan ekspresi langsung dari fungsi sekresi hipofisis. Perubahan kandungan GnRH dan -EP secara langsung mencerminkan keadaan sekresi hipotalamus pada aksis HPO. Sekresi E2 dan T ditentukan oleh status fungsional ovarium. Hipotalamus, hipofisis, uterus, dan jaringan lain memiliki distribusi ER, AR didistribusikan secara luas di sistem saraf pusat dan korteks serebral, sehingga dapat mewakili fungsi sumbu HPO dan mencerminkan keadaan sistem neuroendokrin yang mendeteksi FSH , LH, GnRH, - EP, E2, T, ER, AR di jaringan, serum, dan plasma yang relevan. Selain itu, kadar BGP secara langsung dapat mencerminkan aktivitas osteoblas (Xun dan Wang, 2017), estrogen dapat menghambat jumlah dan aktivitas osteoklas, berdampak pada metabolisme tulang, penentuan indeks ini dapat mencerminkan tikus perimenopause. kasus osteoporosis. Oleh karena itu, percobaan ini menguji indikator biokimia di atas, dan mengamati perubahan patologis uterus dan ovarium pada tikus perimenopause, untuk lebih menentukan efekfeniletanoidglikosidapada sistem neuroendokrin tikus perimenopause.
4.4. Efek pada fungsi kekebalan tubuh
Kelenjar timus adalah pusat pentingimunorgan (Han dan Lu, 2017), dan juga merupakan organ endokrin. Selama periode perimenopause, karena kurangnya stimulasi estrogen fisiologis dan pengurangan reseptor estrogen intraseluler, struktur timus dapat dikurangi dan sekresi timosin dapat dikurangi, atrofi timus pasti akan secara langsung mempengaruhi seluler.imunfungsi dan memiliki efek tidak langsung pada imunitas humoral. Sel-sel timus yang aktif imun dapat melepaskan faktor polipeptida, dan meneruskan informasi ke dalam sistem neuroendokrin, menghasilkan respons fisiologis atau patofisiologis yang relevan, seperti tingkat estrogen diturunkan, dapat mengurangi produksi IL-2 , -EP, dan zat imunomodulator lainnya dalamimunsel. Limpa adalah perifer terbesarimunorgan dan juga merupakan tempat untuk menerima rangsangan antigenik dan respon imun. Limpa dan timus adalah komponen penting dari sistem kekebalan tubuh. Oleh karena itu tubuhimunFungsinya secara tidak langsung dapat bereaksi dengan indeks timus dan limpa.
Dalam makalah ini, melalui studi tentang timus, indeks organ limpa, perubahan histopatologis, ketebalan kortikal timus, ketebalan nodul limpa, dll., Ditanggapi bahwa PGC memiliki efek dalam meningkatkanimunfungsi tikus model perimenopause, dan meningkatkan perubahan patologis timus dan limpa.
5. Kesimpulan
Setiap dosis PGC tidak hanya dapat melawan gangguan hormon seks (E2, T, FSH, LH) pada sindrom perimenopause, meningkatkan kadar hormon seks, tetapi juga meningkatkan ketidakseimbangan kadar reseptor androgen (ER, AR), dan juga memperbaiki tubuhimunfungsi dan mengoreksi osteoporosis, dapat meningkatkan dan mengembalikan indeks organ organisasi terkait dan memperbaiki perubahan patologis rahim, timus, dan limpa. Selain itu, dibandingkan dengan GC, PGC tidak memiliki perbedaan yang signifikan dalam gerakan horizontal-vertikal, indeks organ, gangguan hormon seks, dll. Bahkan pada peningkatan kadar E2 dalam serum, penurunan kadar FSH dalam serum, peningkatan tingkat ekspresi ER di uterus dan hipotalamus, dan perubahan patologis jaringan terkait yang lebih efektif daripada GC, terutama PGC-HD, dan PGC-MD. Ini menunjukkan bahwa PGC diatur oleh endokrin danimunsistem secara keseluruhan, tidak hanya memainkan peran estrogen tetapi meningkatkan gejala dan kualitas hidup dengan berbagai mekanisme, ini memberikan dasar eksperimental untuk berbagai aplikasi klinis untuk DesertlivingBentengherbadan pengembangan obat baru untuk obat tradisional Tiongkok. Dalam tindak lanjut dari penelitian ini, mekanisme yang relevan sedang dilakukan untuk mengklarifikasi mekanisme kerja spesifik darifeniletanoidglikosidadari neuroendokrin-imunjaringan dalam pengobatan sindrom perimenopause.
Selain itu, penelitian ini menunjukkan bahwa PGC dapat meningkatkan kadar BGP dalam serum tikus model perimenopause, dan memiliki efek pada metabolisme tulang, hal ini menunjukkan bahwa PGC mungkin memiliki efek terapeutik yang lebih baik pada osteoporosis yang disebabkan oleh sindrom perimenopause, penelitian yang relevan. bahwa osteoporosis yang disebabkan oleh sindrom perimenopause dapat dilakukan pada tahap selanjutnya, dan mengembangkan aplikasi baru. Studi ini memberikan dasar eksperimental yang baik untuk penggunaan klinis baru PGC, dan memberikan ide penelitian baru untuk studi obat serupa.
Pernyataan kontribusi penulis
Mingan Miao dan Xiumin Li merancang dan memandu eksperimen, Mingsan Miao, Xiumin Li, Shuo Tian, Ming Bai, Yanyi Wu dan Zhenzhen Wei melakukan eksperimen dan menganalisis data terukur, Miao Mingsan, dan Xiumin Li membuat kesimpulan akhir. Kedua penulis meninjau naskah.
Ucapan Terima Kasih
Basis kerjasama internasional nasional (2016–65); Cendekiawan Cina tengah (162101510003); Terobosan sains dan teknologi provinsi Henan (162102310181). Kami berterima kasih kepada Bapak Henry Ehrlich karena telah membaca dan mengedit naskah kami.
FeniletanoidglikosidadariBentengHerbamempunyai sebuahNeuroendokrin-imunfungsi
Referensis
Alvarado-García, A., Hernández-Quijano, T., Hernández-Valencia, M., Negrín-Pérez, MC, Ríos-Castillo, B., Valencia-Pérez, GU, Vital-Reyes, VS, BasavilvazoRodríguez, MA, Torres-Arreola, LP, Ortiz-Luna, GF, Sánchez-Aguirre, F., Montaño-Uscanga, A., 2015. Diagnosis dan pengobatan pascamenopause dan perinemopausia. Pdt. Med. Inst. Meksiko Seguro Soc. 53, 214–225.
Brooks, HL, Pallow, DP, Hoyer, PB, 2016. Model tikus VCD menopause dan perimenopause untuk studi perbedaan jenis kelamin pada penyakit kardiovaskular dan sindrom metabolik. Fisiologi 31, 250–257.
Cao, S., Tian, S., Bai, M., Liu, SY, Jia, JJ, Miao, MS, 2016. Pengaruh Curculigo orchioides total glukosida pada model perimenopause tikus dari organisasi dan organ terkait Morfologi. Bangladesh J. Pharmacol. 11, S72-S81.
Cai, X., Huang, H., Wang, L., 2007. Kemajuan dalam penelitian pada model hewan klimakterik. Jurnal Cina Formula Medis Tradisional Eksperimental 13, 71-73.
Han, SH, Lu, JB, 2017. Pengaruh timektomi pada tubuh dan terapi alternatif baru. Chin J Sel Mol Immunol 12, 1722-1726.
Huang, C., Zhu, XF, Ye, P., 2007. Kemajuan dalam penelitian percobaan hewan tentang pencegahan dan pengobatan sindrom klimakterik dengan pengobatan tradisional Tiongkok. Jurnal Universitas Jiangxi TCM 19, 92-93.
Lobo, RA, Davis, SR, De Villiers, TJ, Gompel, A., Henderson, VW, Hodis, HN, Lumsden, MA, Mack, WJ, Shapiro, S., Baber, RJ, 2014. Pencegahan penyakit setelah menopause . Klimakterium 17, 540–556.
Li, H., Liu, GZ, 2011. Studi klinis pada pengobatan sindrom klimakterik dengan kapsul gengnianan. J. Shanxi Coll. Tradisi. Dagu. Med. 2, 34–35.
Li, Y., Song, YY, Zhang, HQ, 2010. Kemajuan dalam penelitian konstituen kimia dan aktivitas obat cistanche. Dagu. Tanaman Liar Res. 29, 7-11.
Liu, YL, Song, ZM, Ding, Y., 2010. Studi eksperimental tentang hubungan antara depresi menopause dan hipokampus dan korteks 5-HTR1A mRNA. Penelitian kedokteran dan materia medica Lishizhen 21, 1898–1900.
Li, RQ, Bai, M., Miao, MS, 2012. Karakteristik dan prospek model hewan dari sindrom menopause. Jurnal Cina pengobatan Cina 27, 708-710.
Miao, MS, Guo, L., Wang, T., Wang, T., Cao, S., Liu, SY, Fang, XY, 2015. Pengaruh total glikosida curculigo pada model tikus sindrom perimenopause berdasarkan teori hormon endokrin. Klinik Dasar. farmasi. racun. 117, 5–6.
Miao, MS, Tian, S., Bai, M., Xin, WY, 2017a. Total glukosida rimpang Curculigo pada model mencit periode perimenopause. Pak. J. Farmasi. Sci. 30, 975–978.
Miao, MS, Tian, S., Guo, L., Bai, M., Fang, XY, Liu, SY, 2017b. Pengaruh Curculigoside pada model tikus depresi perimenopause. Saudi J.Biol. Sci. 24, 1894–1902.
Miao, MS, Tian, S., Xin, WY, Bai, M., 2018. Standar (draft) untuk penyusunan model sindrom perimenopause. China Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy 3, 996–1000.
Ou, Y., Zhang, YP, Xu, J., Kong, DM, 2011. Studi eksperimental tentang pengaruh senyawa ligustrum lucidum pada regulasi neuro-endokrin -imunfungsi pada tikus betina tua. J. Guiyang Coll. Tradisi. Dagu. Med. 33, 18–19.
Perrone, G., Capri, O., Galoppi, P., Patacchioli, FR, Bevilacqua, E., De Stefano, MG, Brunelli, R., 2013. Gejala menopause setelah penghentian terapi penggantian hormon jangka panjang pada wanita di bawah 60 tahun: tindak lanjut 3-tahun. Ginekol. Obstet. Selidiki. 76, 38–43.
Peng, X., 2014. Perkembangan terkini dalam pengobatan tradisional Tiongkok untuk sindrom perimenopause. CJGMCM 29, 1118-1120.
Shi, HB, Miao, YB, Zhong, CL, Wang, W., 2007. Pengaruh butiran Fushun pada sistem neuroendokrin pada tikus dengan defisiensi yin menopause. Jurnal Cina Ilmu Pengetahuan dan Teknologi Medis Tradisional 14, 16-17.
Sun, YH, Jin, RM, 2005. Kemajuan penelitian tentang pembentukan model hewan sindrom klimakterik betina. Penelitian kedokteran dan materia medica Lishizhen 16, 570–573.
Tian, S., Miao, MS, Bai, M., Wei, ZZ, 2017a.Feniletanoidglikosidadaricistanchepada model sindrom menopause pada tikus. Farmasi Saudi. J.25, 537–547.
Tian, S., Bai, M., Miao, MS, 2015. Fitur klinis pada model hewan berdasarkan sindrom perimenopause. Jurnal Cina Formula Medis Tradisional Eksperimental 21, 217–221.
Tian, S., Cao, LH, Miao, MS, Bai, M., 2017b. Metode baru untuk evaluasi model hewan yang digunakan dalam Pengobatan Tradisional Tiongkok berdasarkan karakteristik klinis pengobatan Tiongkok dan Barat. Farmakologi dan Klinik China Materia Medica 33, 165–169.
Wang, R., Fu, Q., Li, LF, Ma, SP, 2010. Pengaruh kapsul gengnianan pada ovariektomi tikus betina. Penelitian Farmasi dan Klinis 18, 247–249.
Wang, T., Miao, MS, Li, Y., Li, M., Zhang, Y., Tian, S., 2016. Pengaruh flavonoid Mononomorium pada morfologi model tikus depresi perimenopause. Jurnal Farmasi Saudi 24, 322–328.
Wang, WJ, Yu, J., Li, DJ, Bu, SZ, 1999. Pengamatan pada perubahan ER limpa, IL-2, dan tingkat TNF pada tikus betina yang menua. Chin J Endokrinol Metab 15, 225-228.
Xie, CX, 2003. Sebuah kapsul Georgia digunakan untuk mengobati 100 kasus sindrom klimakterik. Jurnal Pengobatan Tradisional Tiongkok Hunan 6, 44.
Xun, CF, Wang, LZ, 2017. Korelasi antara kadar estrogen dan perubahan penanda metabolisme tulang pada wanita perimenopause. Perawatan Kesehatan Ibu dan Anak Cina 32, 1229-1232.
Yu, LL, Kong, DM, Zhang, YP, 2010. Studi eksperimental tentang efek kapsul gengnianyi pada fungsi peningkatan pada tikus yang diovariektomi. Penelitian kedokteran dan bahan kedokteran Lishizhen 21, 3131–3132.
Zhang, Y., Miao, MS, 2011. Studi umum digunakan obat tradisional Cina tonifying ginjal yang dalam mengobati sindrom klimakterik. Jurnal Cina pengobatan Cina 26, 1084-1087.
Zhao, W., Pan, YN, 2013. Kemajuan dalam penelitian aktivitas farmakologis darifeniletanoidglikosidadi cistanche. Pengobatan Tradisional Asia-Pasifik 9, 77-79.
Zhang, YP, Wang, XX, 2001. Pengaruh pil kunningan pada endokrin reproduksiimunfungsi pada pasiendengansindrom klimakterik. ITCM 18, 52–54.
Zhang, XP, Liu, ZP, Xiang, Q., Wang, W., Zhang, X., Li, N., 2010. Studi banding dari dua model hewan hot flashes wanita menopause. Penelitian kesehatan 39, 110–111.
