Bagian 3: Peran Yang Berbeda Untuk Domain Deasetilase HDAC3 di Hippocampus Dan Korteks Prefrontal Medial dalam Pembentukan Dan Kepunahan Memori

untuk informasi lebih lanjut:ali.ma@wecistanche.com

Pls klik di sini kembali ke Bagian 2

KlikCistanches dan Cistanche untuk meningkatkan memori

Ucapan Terima Kasih

Terima kasih khusus kepada Dr. Norbert J. Fortin atas bantuannya dalam analisis statistik.

Sumber Pendanaan: Karya ini didukung oleh National Institute on Drug Abuse dan National Institute of Mental Health grants (DA025922, DA036984, MH101491) kepada MAW dan NIDA dan hibah National Institute on Aging (NIA) (F32 DA043998 dan T32 AG{{ 6}}) ke YA.

Referensi

Alenghat T, Meyers K, Mullican SE, Leitner K, Adeniji-Adele A, Avila J, Bucan M, Ahima RS, Kaestner KH, Lazar MA. Corepressor reseptor nuklir dan histone deacetylase 3 mengatur fisiologi metabolisme sirkadian. Alam. 2008; 456:997–1000. [PubMed: 19037247]

Balderas I, Rodriguez-Ortiz CJ, Salgado-Tonda P, Chavez-Hurtado J, McGaugh JL, Bermudez-Rattoni F. Konsolidasi pengenalan objek dan konteksPenyimpananmelibatkan daerah yang berbeda dari lobus temporal. Pelajari Nona. 2008; 15:618–624. [PubMed: 18723431]

Baltan S, Bachleda A, Morrison RS, Murphy SP. Ekspresi histone deacetylases di kompartemen seluler otak tikus dan efek iskemia. Transl Stroke Res. 2011; 2:411–423. [PubMed: 21966324]

Barrett RM, Malvaez M, Kramar E, Matheos DP, Arrizon A, Cabrera SM, Lynch G, Greene RW, Wood MA. Knockout fokal hipokampus CBP mempengaruhi modifikasi histone spesifik, potensiasi jangka panjang, danPenyimpanan. Neuropsikofarmakologi. 2011; 36:1545–1556. [PubMed: 21508930]

Bowers ME, Xia B, Carreiro S, Ressler KJ. Penghambat HDAC Kelas I RGFP963 meningkatkan konsolidasi dari kepunahan ketakutan yang ditandai. Pelajari Nona. 2015; 22:225–231. [PubMed: 25776040]

Broide RS, Redwine JM, Aftahi N, Young W, Bloom FE, Winrow CJ. Distribusi histone deacetylases 1-11 di otak tikus. J Mol Neurosci. 2007; 31:47–58. [PubMed: 17416969]

Burger C, Gorbatyuk OS, Velardo MJ, Peden CS, Williams P, Zolotukhin S, Reier PJ, Mandel RJ, Muzyczka N. Vektor virus AAV rekombinan pseudotyped dengan kapsid virus dari serotipe 1, 2, dan 5 menampilkan efisiensi diferensial dan tropisme sel setelahnya pengiriman ke berbagai daerah dari sistem saraf pusat. Mol Ada. 2004; 10:302–317. [PubMed: 15294177]

Dere E, Huston JP, De Souza Silva MA. Farmakologi, neuroanatomi, dan neurogenetika pengenalan objek satu percobaan pada hewan pengerat. Neurosci Biobehav Rev. 2007; 31:673–704. [PubMed: 17368764]

Ennaceur A. Pengenalan objek satu percobaan pada tikus dan mencit: masalah metodologis dan teoretis. Perilaku Otak Res. 2010; 215:244–254. [PubMed: 20060020]

Fanselow MS, Dong HW. Apakah struktur hippocampus dorsal dan ventral berbeda secara fungsional? saraf. 2010; 65:7–19. [PubMed: 20152109]

Fischle W, Dequiedt F, Hendzel MJ, Guenther MG, Lazar MA, Voelter W, Verdin E. Aktivitas enzimatik yang terkait dengan HDAC kelas II bergantung pada kompleks multiprotein yang mengandung HDAC3 dan SMRT/N-CoR. Sel Mol. 2002; 9:45–57. [PubMed: 11804585]

Fuchs RA, Evans KA, Ledford CC, Parker MP, Case JM, Mehta RH, Lihat RE. Peran korteks prefrontal dorsomedial, amigdala basolateral, dan hippocampus dorsal dalam pemulihan kontekstual pencarian kokain pada tikus. Neuropsikofarmakologi. 2005; 30:296–309. [PubMed: 15483559]

Fuchs RA, Eaddy JL, Su ZI, Bell GH. Interaksi amigdala basolateral dengan hippocampus dorsal dan korteks prefrontal dorsomedial mengatur pemulihan pencarian kokain yang diinduksi konteks obat pada tikus. Eur J Neurosci. 2007; 26:487–498. [PubMed: 17650119]

Gräff J, Tsai LH. Asetilasi histon: mnemonik molekuler pada kromatin. Nat Rev Neurosci. 2013; 14:97–111. [PubMed: 23324667]

Guenther MG, Barak O, Lazar MA. Corepressors SMRT dan N-CoR mengaktifkan kofaktor untuk histone deacetylase 3. Biol Sel Mol. 2001; 21:6091–6101. [PubMed: 11509652]

Guenther MG, Yu J, Kao GD, Yen TJ, Lazar MA. Perakitan kompleks represi SMRT-histone deacetylase 3 memerlukan kompleks cincin TCP-1. Pengembang Gen. 2002; 16:3130–3135. [PubMed: 12502735]

Haberland M, Montgomery RL, Olson EN. Banyak peran histone deacetylases dalam pengembangan dan fisiologi: implikasi untuk penyakit dan terapi. Nat Rev Genet. 2009; 10:32–42. [PubMed: 19065135]

Hartig J, Stefanko DP, Multani ML, Figueroa DX, McQuown SC, Wood MA. Penghambatan HDAC memodulasi jangka panjang yang bergantung pada hipokampusPenyimpananuntuk lokasi objek dengan cara yang bergantung pada CBP. Pelajari Nona. 2011; 18:71–79. [PubMed: 21224411]

Haettig J, Sun Y, Wood MA, Xu X. Inaktivasi tipe-sel spesifik dari CA1 hipokampus mengganggu pengenalan objek yang bergantung pada lokasi pada mouse. Pelajari Nona. 2013; 20:139–146. [PubMed: 23418393]

Isaac WL, Nonneman AJ, Neisewander J, Landers T, Bardo MT. Lesi korteks prefrontal secara berbeda mengganggu preferensi tempat terkondisi yang diperkuat kokain tetapi bukan keengganan rasa yang dikondisikan. Perilaku Neurosci. 1989; 103:345–355. [PubMed: 2706078]

Jenuwein T, Allis CD. Menerjemahkan kode histone. Sains. 2001; 293:1074–1080. [PubMed: 11498575]

Kalivas PW, McFarland K. Sirkuit otak dan pemulihan perilaku mencari kokain. Psikofarmakologi (Berl). 2003; 168:44–56. [PubMed: 12652346]

Kojima N, Wang J, Mansuy IM, Grant SG, Mayford M, Kandel ER. Menyelamatkan penurunan potensiasi jangka panjang pada tikus yang kekurangan fyn dengan memperkenalkan transgen Fyn. Proc Natl Acad Sci US A. 1997; 94:4761–4765. [PubMed: 9114065]

Modifikasi Kouzarides T. Chromatin dan fungsinya. Sel. 2007; 128:693–705. [PubMed: 17320507]

Krasnova IN, Li SM, Wood WH, McCoy MT, Prabhu VV, Becker KG, Katz JL, Cadet JL. Tanggapan transkripsi untuk memperkuat efek kokain di hipokampus dan korteks tikus. Perilaku Otak Gen. 2008; 7:193–202. [PubMed: 17640290]

Kwapis JL, Alaghband Y, López AJ, White AO, Campbell RR, Dang RT, Rhee D, Tran AV, Carl AE, Matheos DP, Wood MA. Konteks dan Ketakutan Pendengaran Diregulasi Secara Berbeda oleh Aktivitas HDAC3 di Subnukleus Lateral dan Basal Amygdala. Neuropsikofarmakologi. 2017; 42:1284–1294. [PubMed: 27924874]

Lahm A, Paolini C, Pallaoro M, Nardi MC, Jones P, Neddermann P, Sambucini S, Bottomley MJ, Lo Surdo P, Carfi A, Koch U, De Francesco R, Steinkuhler C, Gallinari P. Mengungkap aktivitas katalitik tersembunyi dari vertebrata kelas IIa histone deacetylases. Proc Natl Acad Sci US A. 2007; 104:17335-17340. [PubMed: 17956988]

LaLumiere RT, Niehoff KE, Kalivas PW. Korteks infralimbic mengatur konsolidasi kepunahan setelah pemberian sendiri kokain. Pelajari Nona. 2010; 17:168–175. [PubMed: 20332188]

Laurent V, Westbrook RF. Inaktivasi korteks infralimbik tetapi tidak pada korteks prelimbik mengganggu konsolidasi dan pengambilan kepunahan rasa takut. Pelajari Nona. 2009; 16:520–529. [PubMed: 19706835]

Lebrón K, Milad MR, Quirk GJ. Ingatan yang tertunda dari kepunahan rasa takut pada tikus dengan lesi korteks prefrontal medial ventral. Pelajari Nona. 2004; 11:544–548. [PubMed: 15466306]

Levenson JM, Sweatt JD. Mekanisme epigenetik: tema umum pada vertebrata dan invertebrataPenyimpananpembentukan. Ilmu Kehidupan Sel Mol. 2006; 63:1009–1016. [PubMed: 16596331]

López AJ, Kramar E, Matheos DP, White AO, Kwapis J, Vogel-Ciernia A, Sakata K, Espinoza M, Wood MA. Efek Spesifik Promotor dari Modulasi DREADD pada Plastisitas Sinaptik Hippocampal danPembentukan memori. J Neurosci. 2016; 36:3588–3599. [PubMed: 27013687]

Malvaez M, Sanchis-Segura C, Vo D, Lattal KM, Wood MA. Modulasi modifikasi kromatin memfasilitasi kepunahan preferensi tempat terkondisi yang diinduksi kokain. Biola Psikiatri. 2010; 67:36–43. [PubMed: 19765687]

Malvaez M, Mhillaj E, Matheos DP, Palmery M, Wood MA. CBP dalam nukleus accumbens mengatur asetilasi histon yang diinduksi kokain dan sangat penting untuk perilaku terkait kokain. J Neurosci. 2011; 31:16941–16948. [PubMed: 22114264]

Narvaez M, McQuown SC, Rogge GA, Astarabadi M, Jacques V, Carreiro S, Rusche JR, Wood MA. HDAC3-inhibitor selektif meningkatkan kepunahan perilaku mencari kokain secara terus-menerus. Proc Natl Acad Sci US A. 2013; 110:2647–2652. [PubMed: 23297220]

Maren S. Neurobiologi ketakutan pavlovian terhadap kondisi. Annu Rev Neurosci. 2001; 24:897–931. [PubMed: 11520922]

Marie-Claire C, Laurendeau I, Canestrelli C, Courtin C, Vidaud M, Roques B, Noble F. Fos tetapi tidak Cart (transkrip yang diatur kokain dan amfetamin) diekspresikan secara berlebihan oleh beberapa penyalahgunaan obat: studi perbandingan menggunakan waktu nyata reaksi berantai polimerase kuantitatif di otak tikus. Neurosci Lett. 2003; 345:77–80. [PubMed: 12821175]

McQuown SC, Wood MA. HDAC3 dan hipotesis bantalan rem molekuler. Neurobiol Belajar Mem. 2011; 96:27–34. [PubMed: 21521655]

McQuown SC, Barrett RM, Matheos DP, Post RJ, Rogge GA, Alenghat T, Mullican SE, Jones S, Rusche JR, Lazar MA, Wood MA. HDAC3 adalah regulator negatif kritis daripembentukan memori jangka panjang. J Neurosci. 2011; 31:764–774. [PubMed: 21228185]

Meyers RA, Zavala AR, Neisewander JL. Lesi hippocampal pada bagian dorsal, tetapi bukan bagian ventral mengganggu pengkondisian tempat kokain. laporan saraf. 2003; 14:2127–2131. [PubMed: 14600510]

Mullican SE, Gaddis CA, Alenghat T, Nair MG, Giacomin PR, Everett LJ, Feng D, Steger DJ, Schug J, Artis D, Lazar MA. Histone deacetylase 3 adalah rem epigenomik dalam aktivasi alternatif makrofag. Pengembang Gen. 2011; 25:2480–2488. [PubMed: 22156208]

DG mumi. Perspektif pada memori pengenalan objek setelah kerusakan hipokampus: pelajaran dari studi pada tikus. Perilaku Otak Res. 2001; 127:159–181. [PubMed: 11718890]

Parkinson JA, Olmstead MC, Burns LH, Robbins TW, Everitt BJ. Disosiasi efek lesi inti dan cangkang nukleus accumbens pada perilaku pendekatan pavlovian yang menggugah selera dan potensiasi penguatan terkondisi dan aktivitas lokomotor oleh D-amphetamine. J Neurosci. 1999; 19:2401–2411. [PubMed: 10066290]

Peixoto L, Abel T. Peran asetilasi histone dalam pembentukan memori dan gangguan kognitif. Neuropsikofarmakologi. 2013; 38:62–76. [PubMed: 22669172]

Penney J, Tsai LH. Histone deacetylases dalam memori dan kognisi. Sinyal Sains. 2014; 7:re12. [PubMed: 25492968]

Peters J, LaLumiere RT, Kalivas PW. Korteks prefrontal infralimbic bertanggung jawab untuk menghambat pencarian kokain pada tikus yang mati. J Neurosci. 2008; 28:6046–6053. [PubMed: 18524910]

Peters J, Kalivas PW, Quirk GJ. Sirkuit kepunahan untuk ketakutan dan kecanduan tumpang tindih di korteks prefrontal. Pelajari Nona. 2009; 16:279–288. [PubMed: 19380710]

Pffl MW. Model matematika baru untuk kuantifikasi relatif secara real-time RT-PCR. Asam Nukleat Res. 2001; 29:e45. [PubMed: 11328886]

Pfaffl MW, Georgieva TM, Georgiev IP, Ontsouka E, Hageleit M, Blum JW. Kuantifikasi RT-PCR real-time dari insulin-like growth factor (IGF)-1, reseptor IGF-1, IGF-2, reseptor IGF-2, reseptor insulin, hormon pertumbuhan reseptor, protein pengikat IGF 1, 2 dan 3 pada spesies sapi. Endokrinol Anim Domestik. 2002; 22:91-102. [PubMed: 11900967]

Quirk GJ, Russo GK, Barron JL, Lebron K. Peran korteks prefrontal ventromedial dalam pemulihan ketakutan yang padam. J Neurosci. 2000; 20:6225–6231. [PubMed: 10934272]

Quirk GJ, Garcia R, Gonzalez-Lima F. Mekanisme prefrontal dalam kepunahan ketakutan terkondisi. Biola Psikiatri. 2006; 60:337–343. [PubMed: 16712801]

Rescorla RA. Perbandingan tingkat perubahan asosiatif selama akuisisi dan kepunahan. J Exp Proses Perilaku Psikol Anim. 2002; 28:406–415. [PubMed: 12395498]

Rogge GA, Singh H, Dang R, Wood MA. HDAC3 adalah pengatur negatif pembentukan memori terkait konteks kokain. J Neurosci. 2013; 33:6623–6632. [PubMed: 23575859]

Roozendaal B, Hernandez A, Cabrera SM, Hagewoud R, Malvaez M, Stefanko DP, Haettig J, Wood MA. Aktivitas glukokortikoid terkait membran diperlukan untuk modulasi memori jangka panjang melalui modifikasi kromatin. J Neurosci. 2010; 30:5037–5046. [PubMed: 20371824]

Rumbaugh G, Sillivan SE, Ozkan ED, Rojas CS, Hubbs CR, Aceti M, Kilgore M, Kudugunti S, Puthanveettil SV, Sweatt JD, Rusche J, Miller CA. Selektivitas Farmakologis Dalam Kelas I Histone Deacetylases Memprediksi Efek pada Fungsi Sinaptik dan Penyelamatan Memori. Neuropsikofarmakologi. 2015; 40:2307–2316. [PubMed: 25837283]

Sando R 3rd, Gounko N, Pieraut S, Liao L, Yates J 3rd, Maximov A. HDAC4 mengatur program transkripsi yang penting untuk plastisitas dan memori sinaptik. Sel. 2012; 151:821–834. [PubMed: 23141539]

Sierra-Mercado D Jr, Corcoran KA, Lebron-Milad K, Quirk GJ. Inaktivasi korteks prefrontal ventromedial mengurangi ekspresi ketakutan yang dikondisikan dan merusak ingatan kepunahan berikutnya. Eur J Neurosci. 2006; 24:1751–1758. [PubMed: 17004939]

Stafford JM, Raybuck JD, Ryabinin AE, Lattal KM. Meningkatkan asetilasi histon di jaringan hippocampus-infralimbic meningkatkan kepunahan rasa takut. Biola Psikiatri. 2012; 72:25–33. [PubMed: 22290116]

Stefanko DP, Barrett RM, Ly AR, Reolon GK, Wood MA. Modulasi memori jangka panjang untuk pengenalan objek melalui penghambatan HDAC. Proc Natl Acad Sci US A. 2009; 106:9447–9452. [PubMed: 19470462]

Sun Z, Feng D, Fang B, Mullican SE, You SH, Lim HW, Everett LJ, Nabel CS, Li Y, Selvakumaran V, Won KJ, Lazar MA. Fungsi independen-deasetilase dari HDAC3 dalam transkripsi dan metabolisme membutuhkan korepresor reseptor nuklir. Sel Mol. 2013; 52:769–782. [PubMed: 24268577]

Tzschentke TM, Schmidt WJ. Lesi asam quinolinic yang terpisah dari korteks prefrontal medial prelimbic tikus mempengaruhi kokain dan MK-801-, tetapi tidak hadiah dan aktivasi psikomotor yang diinduksi morfin dan amfetamin sebagaimana diukur dengan paradigma pengkondisian preferensi tempat. Perilaku Otak Res. 1998; 97:115–127. [PubMed: 9867237]

Tzschentke TM, Schmidt WJ. Heterogenitas fungsional korteks prefrontal medial tikus: efek lesi spesifik subarea diskrit pada preferensi tempat terkondisi yang diinduksi obat dan sensitisasi perilaku. Eur J Neurosci. 1999; 11:4099–4109. [PubMed: 10583498]

Vogel-Ciernia A, Matheos DP, Barrett RM, Kramar EA, Azzawi S, Chen Y, Magnan CN, Zeller M, Sylvain A, Haettig J, Jia Y, Tran A, Dang R, Post RJ, Chabrier M, Babayan AH, Wu JI, Crabtree GR, Baldi P, Baram TZ, Lynch G, Wood MA. Subunit pengatur kromatin spesifik neuron BAF53b diperlukan untuk plastisitas dan memori sinaptik. Nat Neurosci. 2013; 16:552–561. [PubMed: 23525042]

Vogel-Ciernia A, Wood MA. Remodeling kromatin spesifik neuron: mata rantai yang hilang dalam mekanisme epigenetik yang mendasari plastisitas sinaptik, memori, dan gangguan disabilitas intelektual. Neurofarmakologi. 2014; 80:18–27. [PubMed: 24140580]

White AO, Kramar EA, López AJ, Kwapis JL, Doan J, Saldana D, Davatolhagh MF, Alaghband Y, Blurton-Jones M, Matheos DP, Wood MA. BDNF menyelamatkan plastisitas sinaptik yang bergantung pada BAF53b dan memori terkait kokain dalam nukleus accumbens Komunitas Nat. 2016; 7:11725. [PubMed: 27226355]

Winters BD, Saksida LM, Bussey TJ. Memori pengenalan objek: mekanisme neurobiologis pengkodean, konsolidasi, dan pengambilan. Neurosci Biobehav Rev. 2008; 32:1055–1070. [PubMed: 18499253]

Zhang J, Kalkum M, Chait BT, Roeder RG. Kompleks korepresor reseptor nuklir N-CoR-HDAC3 menghambat jalur JNK melalui subunit integral GPS2. Sel Mol. 2002; 9:611–623. [PubMed: 11931768]

Highlight

Memblokir aktivitas deasetilase HDAC3 di hippocampus dorsal meningkatkan memori lokasi objek jangka panjang tetapi tidak berpengaruh pada pembentukan memori terkait kokain. Merusak domain HDAC3 deacetylase di korteks prelimbic tidak berpengaruh pada pembentukan memori terkait kokain. Memblokir aktivitas deasetilase HDAC3 di korteks infralimbic tidak berpengaruh pada kepunahan. Mengganggu aktivitas deasetilase HDAC3 di hippocampus dorsal mengakibatkan kepunahan yang difasilitasi.

Gambar 1.

Virus mutan titik negatif dominan (HDAC3(Y298H)-v5 diekspresikan secara efektif di hipokampus dorsal. (A) epitop V5 ditambahkan ke virus mutan titik. (B) Gambar imunofluoresensi representatif yang menunjukkan ekspresi tag epitop V5 (hijau) di dorsal hippocampus (DH) setelah infus AAV-HDAC3(Y298H)-v5. Tidak ada pewarnaan V5 yang diamati dengan virus kontrol AAV-EV. Sel di-counterstain dengan DAPI (biru). (C) V5 mRNA meningkat secara signifikan pada DH ofmice diresapi dengan AAV- HDAC3(Y298H)-v5, AAV-EV n {{20}}, HDAC3(Y298H)-v5 n=4.(D) HDAC3 juga meningkat secara signifikan di DH tikus yang diinfus dengan AAV-HDAC(Y298H)-v5 dibandingkan dengan kontrol AAV-EV, AV-EV n=6, HDAC3(Y298H)-v5 n=6.*p < 0,05.

Gambar 2.

Memblokir aktivitas HDAC3 dalam memori yang ditingkatkan DH untuk lokasi objek (OLM), tetapi tidak untuk pengenalan objek (ORM). (A) Tikus menerima pelatihan sub-ambang (3 menit) di lingkungan dengan dua objek identik dan menerima uji retensi 24 jam kemudian di mana satu objek dipindahkan ke lokasi baru. Skema menjelaskan metode untuk B dan C. (B) Tikus yang diberi AAV-HDAC3(Y298H)-v5 menunjukkan preferensi yang signifikan untuk lokasi objek baru 24 jam setelah pelatihan dibandingkan dengan kontrol EV, AAV-EV n {{10 }}, HDAC3(Y298H)-v5 n=6. (C) Kelompok tidak berbeda dalam total waktu eksplorasi kedua objek. (D) Tikus menerima pelatihan subthreshold (3 menit) di lingkungan dengan dua objek identik dan menerima tes retensi 24 jam kemudian di mana satu objek diganti dengan objek baru (ORM), AAV-EV n=9, HDAC3(Y298H)-v5 dan=7. Skema menjelaskan metode untuk E dan F. (E) Baik kontrol AAV-EV atau tikus AAV-HDAC3(Y298H)-v5 tidak menunjukkan preferensi yang signifikan untuk objek baru. (F) Kelompok tidak berbeda dalam total waktu eksplorasi kedua objek. *p <>

Gambar 3.

Memblokir aktivitas HDAC3 di hippocampus dorsal tidak berpengaruh pada pembentukan memori CPP yang diinduksi kokain. (A) Skema prosedur kokain-CPP. (B) Ekspresi kokain-CPP ditunjukkan dengan skor CPP rata-rata (waktu yang dihabiskan dalam pasangan kokain (CS plus ) dikurangi pasangan-salin (CS−) ± sem). Pada dosis pengkondisian kokain 5 mg/kg, tikus AAV-HDAC3(Y298H)-v5 menunjukkan skor CPP yang serupa dengan kontrol EV selama pasca-tes, AAV-EV n=15, HDAC3(Y298H)-v5 n {{ 19}}.

Gambar 4.

Penghapusan gen homozigot fokal dari Hdac3 di hippocampus dorsal tidak berpengaruh pada pembentukan memori CPP yang diinduksi kokain. (A) Skema prosedur kokain-CPP. (B) Ekspresi kokain-CPP ditunjukkan dengan skor CPP rata-rata (waktu yang dihabiskan dalam pasangan kokain (CS plus ) dikurangi pasangan-garam (CS−) ± sem). Pada dosis pengkondisian kokain 5 mg/kg, tikus Hdac3flox/flox menunjukkan skor CPP yang serupa dengan kontrol Hdac3 plus / plus selama post-test. ( C ) Gambar imunofluoresensi representatif yang menunjukkan ekspresi HDAC3 (hijau) di hippocampus dorsal setelah infus AAV2.1 Cre yang diinfuskan pada tikus Hdac3 plus / plus dan Hdac3flox / flox. Sel diwarnai dengan DAPI (biru). (D) Kuantifikasi immunostaining menegaskan bahwa HDAC3 berkurang secara signifikan pada tikus Hdac3flox/flox dibandingkan dengan kontrol Hdac3 plus / plus, Hdac3 plus / plus n=12, Hdac3flox/flox n=11. *p <>

Gambar 5.

Memblokir aktivitas HDAC3 di korteks prelimbic (PrL) tidak berpengaruh pada pembentukan memori CPP yang diinduksi kokain. (A) Skema prosedur kokain-CPP. (B) Ekspresi kokain-CPP ditunjukkan dengan skor CPP rata-rata (waktu yang dihabiskan dalam pasangan kokain (CS plus ) dikurangi pasangan-salin (CS−) ± sem). Pada dosis pengkondisian kokain 5 mg/kg, tikus AAV-HDAC3(Y298H)-v5 menunjukkan skor CPP yang serupa dengan kontrol EV selama pasca-tes, AAV-EV n=12, HDAC3(Y298H)-v5 n {{ 19}}. ( C ) Gambar imunofluoresensi representatif yang menunjukkan ekspresi tag epitop V5 (hijau) setelah infus AAV-HDAC3 (Y298H) -v5 yang menargetkan PrL. Tidak ada pewarnaan V5 yang diamati dengan virus kontrol AAV-EV. Sel-sel diwarnai dengan DAPI (biru) dan neuron diwarnai dengan NeuroTrace (merah). Ekspresi V5 sebagian besar terbatas pada wilayah prelimbik korteks prefrontal medial. (D) Infus virus yang ditargetkan di PrL. Daerah yang diarsir dari gambar atlas tikus menggambarkan perluasan infus virus yang representatif.

Gambar 6.

Memblokir aktivitas HDAC3 di korteks infralimbic (IL) tidak berpengaruh pada kepunahan memori CPP yang diinduksi kokain. (A) Skema prosedur kokain-CPP. (B) Ekspresi kokain-CPP ditunjukkan dengan skor CPP rata-rata (waktu yang dihabiskan dalam pasangan kokain (CS plus ) dikurangi pasangan-salin (CS−) ± sem). Hewan awalnya dilatih dengan kokain 20 mg/kg. Selanjutnya, hewan menerima infus virus intra-IL AAV-EV atau AAV-HDAC3(Y298H)-v5, dan memori kepunahan diperiksa. Tikus AAV-HDAC3(Y298H)-v5 menunjukkan skor CPP yang serupa dengan kontrol EV selama pasca-tes 2–5, AAV-EV n=17, HDAC3(Y298H)- v5 n=16. ( C ) Gambar imunofluoresensi representatif yang menunjukkan ekspresi tag epitop V5 (hijau) setelah infus AAV-HDAC3 (Y298H) -v5 yang menargetkan IL. Tidak ada pewarnaan V5 yang diamati dengan virus kontrol AAV-EV. Sel-sel diwarnai dengan DAPI (biru) dan neuron diwarnai dengan NeuroTrace (merah). Ekspresi V5 sebagian besar terbatas pada wilayah infralimbic dari korteks prefrontal medial. (D) Infus virus yang ditargetkan di IL. Daerah yang diarsir dari gambar atlas tikus menggambarkan tingkat perwakilan infus virus.