Parameter Ekstraksi Dan Metode Pengeringan Cistanche Deserticola

Cistanche adalah Cistanche deserticola YC Ma atauCistanche tubulosa (Schenk) Wightbatang berdaging kering dengan daun bersisik dari tanaman OrobanchiaceaeCistanche deserticola YC Ma[1]. Bahan aktif utama Cistanche deserticola adalah feniletanol glikosida [2-4]. Studi farmakologis telah menunjukkan bahwa ia memiliki fungsizat perangsang nafsu berahi, meningkatkan kekebalan, Danmeningkatkan daya ingat[4-9].

Dalam beberapa tahun terakhir, metodologi permukaan respons telah banyak digunakan dalam ekstraksi pengobatan tradisional Tiongkok [{{0}}]. Metode permukaan respons memiliki keunggulan inheren berupa akurasi pendeteksian yang tinggi, jumlah eksperimen yang diperlukan lebih sedikit, prediksi model fungsi yang akurat, dan kemampuan untuk mencerminkan hubungan antara faktor dan nilai prediksi [15-17]. Oleh karena itu, percobaan ini menggunakan skor komprehensif kandungan lima glikosida feniletanol sebagai nilai respon, dan menggunakan perangkat lunak Design-Expert 8.0.6.1 untuk merancang percobaan, mengoptimalkan proses ekstraksi Cistanche deserticola, dan memberikan informasi untuk identifikasi dan penetapan standar mutuCistanche desertikola.

Saat ini, indekskomponen echinaceaside dan verbascosideadalah topik penelitian hangat dalam teknologi ekstraksi dan pemrosesanCistanche desertikola. Farmakope Tiongkok edisi 2015 menetapkan bahwa cara pengolahan Cistanche deserticola adalah "menghilangkan kotoran, mencuci, melembabkan, memotong menjadi irisan tebal, dan mengeringkan". [1], tidak ada peraturan yang jelas mengenai cara pengeringan. Oleh karena itu, percobaan ini menggunakan delapan metode pengeringan yang berbeda, termasuk pengeringan matahari, pengeringan di tempat teduh, pengeringan oven (40, 60, 80, 100, 120 derajat), dan pengeringan beku, untuk memproses Cistanche deserticola [18], yang memberikan landasan teori untuk proses pengeringan Cistanche deserticola.

Tentang bimbingan.

EKSTRAK CISTANCHE DENGAN 30% ECHINCAOSIDE

1 Bahan dan instrumen

Cistanche deserticola segar dipanen pada Oktober 2018. Tempat asalnya adalah Kotapraja Mitan, Kabupaten Minqin, Baiyin, Provinsi Gansu. Associate Professor Guo Yehong dari Universitas Pertanian Gansu mengidentifikasinya sebagai Cistanche deserticola YC Ma, batang berdaging dengan daun bersisik. Zat referensi echinaceaside (nomor batch 82854-37-3, fraksi massa lebih besar dari atau sama dengan 98%), cistancheaside A (nomor batch 93236-42-1, fraksi massa lebih besar dari atau sama dengan 95%), verbascoside (nomor batch { {5}}, Fraksi massa Lebih besar dari atau sama dengan 98%), isomurabasin (nomor batch 61303-13-7, fraksi massa Lebih besar dari atau sama dengan 98%), 2′-asetil verbascoside (nomor batch 94492-24-7 , fraksi massa Lebih besar dari atau sama dengan 95%) dibeli dari Chengdu Pu. Feide Bioteknologi Co., Ltd.; asam format dan metanol memiliki kualitas kromatografi, Perusahaan Merck Jerman; air adalah air murni, dan reagen lainnya memiliki tingkat analitis.

Kromatografi cair Waters Acquity, detektor PDA, stasiun kerja kromatografi Empower dan sistem manajemen pelarut kuaterner; KQ-100Pembersih ultrasonik E, Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.

Perusahaan; neraca analitik AL104, Mettler-Toledo Instruments Co., Ltd.; LyoQuest-85 pengering beku, Telstar, Spanyol.

2 Metode dan hasil

2.1 Persiapan larutan referensi

Timbang secara tepat jumlah yang tepatechinaceaside, cistancheoside A, verbascoside, isorbascoside, dan standar referensi 2'-asetil verbascoside, dan tambahkan 70% metanol untuk membuat konsentrasi massa 1.04, 0.61, 0.63, 0,39, dan 0,48 mg/ mL larutan referensi campuran.

2.2 Kondisi kromatografi Cistanche deserticola

Simetri Perairan C18 (250 mm×4,6 mm, 5 μm); suhu kolom 30 derajat, aliran volume 1,0 mL/mnt; fase gerak adalah metanol-0.1% larutan asam format, gradien elusi: 0~12 menit, 29%~34% Metanol; 12-40 mnt, 34%-40% metanol; 30-35 mnt, 40%-35% metanol; 35-40 mnt, 30% metanol;

1-echinacoside 2-cistanche A 3-verbascoside 4-isoacteoside 5-2′-acetylacteoside

Gambar 1 HPLC referensi campuran (A) dan sampel C. deserticola (B)

2.3 Persiapan larutan uji

Timbang tepat 1 g bubuk Cistanche deserticola kering ke dalam labu Erlenmeyer (melewati saringan 65-mesh), tambahkan 50 mL metanol 50%, timbang massa, ultrasonik pada 40 kHz pada 150 W, dinginkan hingga suhu kamar , dan buat massa untuk mendapatkannya.

2.4 Investigasi hubungan linier

Ambil {{0}}.1, {{20}}.5, 1, 2, 4, dan 8 mL larutan referensi campuran di atas ke dalam 10 mL labu takar, dan tambahkan metanol 70% hingga tanda batas. Ambil 10 μL secara tepat dan ukur sesuai dengan kondisi kromatografi "2.2". Konsentrasi massa adalah absis (X) dan luas puncaknya adalah ordinat (Y). Lakukan regresi linier dan persamaan regresinya adalah: Echinacea Y=128 049 X -830 189, r=0.999 5, rentang linier 10,4~832,0 ug/mL; Cistancheside AY=87 980 -447 963, r＝0.999 8, rentang linier 6.3-504.0 ug/mL; Isomurabasin Y＝92 831 Glikosida Y=79 207 X-304 428, r=0.999 4, rentang linier 4,8~384,0 ug/mL.

2.5 Tinjauan metodologis

2.5.1 Inspeksi presisi

Ambil 20 μL larutan referensi campuran pada item "2.1" dan suntikkan 6 kali terus menerus untuk mengukur area puncak echinaceaside, cistancheaside A, verbascoside, isorebascoside, dan 2'-acetylverbascoside. RSD masing-masing sebesar 0,23%. , {{10}}.71%, 0.59%, 0.41%, 0.29%, menunjukkan bahwa instrumen mempunyai presisi yang baik.

2.5.2 Uji keterulangan

Ambil 6 porsi sampel Cistanche deserticola yang sama, siapkan larutan uji sesuai butir "2.3", suntikkan sampel pada kondisi kromatografi butir "2.2", dan ukur luas puncaknya. Hasil Rata-rata fraksi massa echinaceaside, cistancheoside A, verbascoside, isorebascoside, dan 2′-acetyl verbascoside adalah 1.83%, 0.21%, 2.34%, 0.13%, dan {{15 }},68% masing-masing, dan RSD masing-masing sebesar 1,32. %, 0,83%, 1,24%, 2,19%,

0.78%, menunjukkan bahwa metode tersebut memiliki kemampuan pengulangan yang baik.

2.5.3 Uji stabilitas

Tentukan kestabilan larutan uji yang sama (dibuat menurut "2.3") pada 0, 2, 4, 8, 12, 24, dan 48 jam untuk memperoleh echinaceaside, cistancheoside A, verbascoside, dan isolebascoside. , area puncak 2′-asetil verbascoside, RSD masing-masing adalah 0,58%, 0,21%, 1,58%, 1,46%, 2,19%, yang menunjukkan bahwa larutan uji stabil dalam waktu 48 jam.

2.5.4 Uji perolehan kembali sampel

Ambil 1 g dari 6 sampel Cistanche deserticola dengan kandungan yang diketahui, dan tambahkan secara akurat sejumlah larutan referensi campuran (Echinaceaside 1.06 mg/mL, Cistancheoside A 0.86 mg /mL, Verbascoside 2,17 mg/mL, Isolebascoside 0,79 mg /mL, 2′-asetil verbascoside 0,91 mg/mL), tambahkan metanol 70% hingga menjadi 50 mL, dan menyuntikkan sampel sesuai dengan kondisi kromatografi "2.2". Rata-rata kesembuhan yang diukur masing-masing adalah 101,52%, 99,21%, dan 102,62%. , 98,62%, 97,36%, RSD masing-masing 1,64%, 1,95%, 0,87%, 1,59%, 1,13%, dan tingkat pemulihan sampel baik.

Cistanche merupakan ramuan tonik terkenal yang dapat menyehatkan dan melindungi ginjal. Dalam teori pengobatan tradisional Tiongkok, Cistanche merupakan ramuan terbaik untuk ginjal. Cistanche kaya akan echinacoside, acteoside, dan flavonoid. Bahan-bahan efektif dalam Cistanche ini dapat mengurangi apoptosis sel ginjal dan meningkatkan proliferasi sel ginjal. Oleh karena itu, Cistanche merupakan suplemen ginjal alami.