Menjelajahi Mekanisme Kerja Glikosida Total Cistanche Pada Penyakit Radang Usus Berdasarkan Jaringan Farmakologi Dan Eksperimen Hewan Ⅲ

3 Hasil dan analisis

3.1 Analisis target total glikosida Cistanche tubulosa dan target penyakit

Impor file struktur tiga dimensibahan aktifke dalam database PharmMapper untuk mendapatkan titik target yang sesuai dengan bahan yang berbeda. Basis data UniProt digunakan untuk mendapatkan informasi nama protein dan nama gen yang sesuai dengan masing-masing target. Dengan menggabungkan titik-titik sasaran yang sesuai dengan ketujuh komponen tersebut, diperoleh total 354 sasaran. Dalam database GeneCards, gen yang relevan dicari dengan menggunakan kata kunci "penyakit radang usus", dan hasil pencarian diurutkan, dan akhirnya diperoleh 7851 target. Gunakan peristiwa untuk menggambar diagram Venn online untuk mendapatkan perpotongan target bahan aktif Cistanche tubulosa dan titik target IBD. Seperti yang ditunjukkan pada Gambar 1, 254 target bahan aktifCistanche tubulosayang memiliki efek perlindungan pada IBD diperoleh.

Gbr.2 Diagram jaringan PPI dari target umum

Gbr.5 Jaringan jalur komponen-target

Gbr.7 Total glikosida Cistanche tubulosa menurunkan regulasi mRNA jalur pensinyalan TGF- dan mTOR pada tikus IBD

3.4 Glikosida total Cistanche tubulosa meningkatkan skor DAI yang diinduksi DSS

Hasil tes menunjukkan bahwa, kecuali kelompok CZ, tiga kelompok lainnya mengalami tingkat penurunan berat badan dan darah samar tinja yang berbeda-beda (Gambar 6). Di antara mereka, kelompok kontrol DSS memiliki tingkat penurunan berat badan tertinggi, darah tinja paling parah, DAI tertinggi, dan pendarahan tinja yang jelas pada hari ke-6. Setelah intervensi glikosida total Cistanche tubulosa, skor DAI secara bertahap menurun, dan situasi darah gaib secara bertahap menurun. Kelompok HZ memiliki tingkat penurunan berat badan terendah dan jumlah darah tersembunyi dalam tinja terendah. Hasil penelitian menunjukkan bahwa glikosida total Cistanche tubulosa meningkatkan respon fisiologis yang disebabkan oleh penyakit radang usus.

SUPLEMEN CISTANCHE UNTUK PENGOBATAN IBD PHGS75% ECH 30% ACT 12%

3.5 Glikosida total Cistanche tubulosa menurunkan regulasi IBD

Ekspresi jalur pensinyalan mTOR dan TGF pada limpa tikus Jalur pensinyalan mTOR dan TGF adalah dua jalur pensinyalan penting yang mengaktifkan respons inflamasi. Ekspresi mTOR dan TGF- pada jaringan limpa mencit dideteksi dengan qRT-PCR. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekspresi mRNA mTOR dan TGF- pada tikus kelompok kontrol DSS meningkat secara signifikan dibandingkan dengan tikus normal. Dibandingkan dengan tikus kontrol DSS, Dibandingkan dengan Cistanche tubulosa, ekspresi mTOR dan TGF- pada tikus berkurang secara signifikan setelah intervensi Cistanche tubulosa. Di antara mereka, kelompok dosis tinggi mengalami penurunan paling signifikan, dan tingkat ekspresi pada dasarnya konsisten dengan kelompok normal (Gambar 7). Hasilnya menunjukkan bahwa total glikosida Cistanche tubulosa menurunkan regulasi ekspresi jalur pensinyalan mTOR dan TGF.

Gbr.8 Peta panas pengelompokan kelimpahan fungsional PICRUSt

3.6 Analisis anotasi fungsional PICRUSt2

PICRUSt2 adalah alat bioinformatika untuk memprediksi fungsi metagenomik berdasarkan informasi biologis 16S rRNA, pohon ASV, dan gen ASV dalam database Greengene. Basis data COG terpilih digunakan untuk prediksi fungsional, dan hasilnya menunjukkan bahwa fungsi flora usus terutama melibatkan pemrosesan RNA; struktur dan dinamika kromatin; kontrol siklus sel, pembelahan sel, segmentasi kromosom; mekanisme pertahanan; memberi sinyal pada dinding sel/membran sel/biogenesis selubung; sel Ia memiliki lebih dari 20 fungsi seperti struktur ekstraseluler; transportasi intraseluler, sekresi, dan transportasi vesikel; produksi dan konversi energi; transportasi dan metabolisme karbohidrat. Pilih 15 fitur paling melimpah dan informasi kelimpahannya di setiap sampelPeta panas (Gambar 8) diambil untuk informasi dan dikelompokkan dari tingkat fungsional yang berbeda.

Dibandingkan dengan kelompok CZ, tikus kelompok kontrol DZ memiliki COG1132 (sistem transpor multidrug tipe ABC), COG0745 (regulator respons pengikatan DNA), COG1131 (sistem transpor multidrug tipe ABC), COG1961 (rekombinase DNA spesifik lokasi terkait dengan Pin DNA invertase), COG0438 (Glikosiltransferase terlibatdalam biosintesis dinding sel), COG0534 (Na +-digerakkanpompa penghabisan multidrug), COG0642 (Transduksi sinyal histidin kinase), COG1595 (subunit sigma khusus RNA polimerase terarah DNA), COG0463 (Endonuklease), COG4974 (Rekombinase spesifik situs XerD), COG2207 (domain pengikatan DNA tipe AraC dan AraC - mengandung protein), COG1136 (sistem ekspor lipoprotein tipe ABC), dan kelainan ekspresi gen fungsional COG1309 (regulator transkripsi pengikat DNA). Gen-gen ini terutama terlibat dalam: V: mekanisme pertahanan; T: mekanisme transduksi sinyal; M: dinding sel/membran sel/biogenesis selubung; I: transportasi dan metabolisme lipid; K: transkripsi; L: replikasi, rekombinasi dan perbaikan.

Setelah keenam fungsi ini diberikan glikosida total Cistanche tubulosa, ekspresi fungsi fisiologis yang berbeda ini mendekati ekspresi kelompok normal. Dibandingkan dengan tikus pada kelompok CZ dan DZ, tikus pada kelompok HZ memiliki ekspresi gen COG1028 (keluarga alkohol dehidrogenase rantai pendek) dan COG0451 (Nucleoside-phosphate-sugar epimerase) yang tinggi. Kedua gen ini berhubungan dengan I: transportasi lipid dan metabolisme. Dan M: Fungsi biogenesis dinding sel/membran sel/selubung sangat erat kaitannya. Oleh karena itu, diperkirakan bahwa total glikosida Cistanche tubulosa dapat mengatur kerusakan tikus IBD dengan mengatur metabolisme lipid, metabolisme glukosa dan mekanisme transduksi sinyal pertahanan terkait pada tikus.