Aktivitas Xantin Oksidoreduktase pada Plasma Miskin dan Kaya Trombosit Sebagai Indikator Stres Oksidatif pada Pasien Diperlukan Terapi Penggantian Ginjal Ⅳ

Diskusi

Pengamatan Umum

Oksidoreduktase, karena aktivitas gandanya, merupakan enzim yang menarik dan sangat penting yang memungkinkan kita mengungkap mekanisme stres oksidatif dalam tubuh manusia. Namun, aktivitas ganda XOR juga berarti penafsiran fungsinya lebih menantang dibandingkan fungsi lainnyaenzim antioksidan.

Dalam penelitian ini, aktivitas XOR tertinggi diamati pada kelompok kontrol di PPP dan PRP (hasil kedua), yang berarti bahwa kelompok ini paling baik dalam kompensasi stres oksidatif. Aktivitas isoform antioksidan (XD) tertinggi yang diamati pada PPP dan aktivitas isoform XO yang tinggi menegaskan hal tersebut. Ini berarti keseimbangan pro-oksidatif dan antioksidan tetap terjaga. Pasien hemodialisis sebelum dan segera setelahnyatransplantasi ginjalsangat rentan terhadap stres oksidatif akibat penyakit yang mendasarinya serta jenis terapi pengganti ginjal. Hal ini menyoroti bahwa dialisis peritoneal mengurangi paparan pasien terhadap efek berbahaya spesies oksigen reaktif dibandingkan terapi pengganti ginjal lainnya.

Dołęgowska dkk. (2010) menyelidiki aktivitas isoform XOR dalam plasma pada individu setelahnyatransplantasi ginjal, dibagi menjadi tiga kelompok: awal, lambat, danfungsi tertundadari organ yang ditransplantasikan. Mereka menunjukkan peningkatan aktivitas XO dan XOR pada semua kelompok setelah 1 dan 5 menit setelah transplantasi. Aktivitas XD meningkat pada kelompok fungsi lambat dan tertunda juga setelah 1 dan 5 menit. Aktivitas tertinggi ditemukan pada isoform XD (antioksidan) dan terendah pada isoform XO (prooksidatif). Hal ini mungkin disebabkan oleh peningkatan stres oksidatif akibat transplantasi organ, yang coba dikompensasi oleh tubuh dengan peningkatan aktivitas isoform XD [3, 23].

Peningkatan konversi XD ke XO setelahnyatransplantasi ginjaldisampaikan oleh Kwiatkowska dkk (2010). Selama 6-bulan pengamatan pasien setelah transplantasi, terlihat bahwa rata-rata tingkat XOR dalam serum terus meningkat sejak hari pertama setelah operasi. Hal ini menunjukkan bahwa tingkat XOR mencerminkan tingkat kerusakan pada organ yang ditransplantasikan selama iskemia/reperfusi (I/R). Peningkatan lebih lanjut pada level XOR dapat dijelaskan dengan terapi imunosupresif, yang mencakup steroid [23-25]. Herken dkk. (2007) menunjukkan bahwa setelah transplantasi ginjal, transformasi isoform XD menjadi isoform XO dimulai pada periode iskemik dan kemudian dilanjutkan setelah reperfusi [25].

BERAPA LAMA CISTANCHE BEKERJA PADA PASIEN PENYAKIT GINJAL

Dalam penelitian ini, aktivitas XOR di PPP setelah transplantasi menurun secara signifikan, mirip dengan isoform XD dan XDO. Aktivitas isoform oksidase juga menurun baik pada plasma miskin maupun kaya trombosit, namun tidak ada hubungan yang signifikan secara statistik. Hal ini menunjukkan stres oksidatif yang lebih rendah setelah transplantasi ginjal karena konversi isoform XD menjadi XO tidak meningkat (aktivitas XDO lebih rendah setelah transplantasi ginjal). Hasil ini mungkin menunjukkan kerusakan kecil pada organ yang ditransplantasikan selama periode I/R. Perhatian juga harus diberikan pada aktivitas XOR dan isoformnya yang jauh lebih rendah pada pasien sebelum dan sesudah transplantasi ginjal dibandingkan dengan bentuk terapi pengganti ginjal lainnya serta dibandingkan dengan kelompok kontrol. Hal ini menunjukkan efisiensi yang lebih rendah dari sistem antioksidan pada kelompok pasien ini.

Jenis terapi pengganti ginjal yang optimal harus dipilih untuk setiap pasien untuk mencapai hasil pengobatan terbaik. Banyak faktor berbeda yang mempengaruhi keberhasilan terapi yang digunakan, salah satunya adalah stres oksidatif. Oleh karena itu, penting untuk mempelajari pengaruh dialisis terhadap aktivitas XOR.

Dalam penelitian kami, aktivitas XOR menurun setelah hemodialisis pada PPP dan PRP. Namun, angka ini lebih tinggi dibandingkan dengan kelompok lain yang diteliti (kecuali kelompok kontrol). Hal ini menunjukkan paparan stres oksidatif yang lebih tinggi pada kelompok pasien ini. Aktivitas isoform XD dalam plasma miskin trombosit meningkat setelah hemodialisis, dan isoform XDO menurun, serupa dengan isoform XO. Namun, perubahan tersebut bukanlah perubahan yang signifikan secara statistik. Pada gilirannya, pada trombosit, aktivitas XD secara signifikan lebih rendah setelah hemodialisis, sedangkan aktivitas XO lebih rendah pada kelompok HD A, dan aktivitas isoform perantara lebih tinggi setelah hemodialisis (walaupun tidak ada signifikansi statistik). Hal ini menunjukkan rendahnya konversi anti-oksidan menjadi isoform prooksidatif, yang berarti berkurangnya stres oksidatif setelah hemodialisis.

Pengaruh hemodialisis terhadap aktivitas XOR dan isoformnya pada plasma miskin trombosit dan trombosit dipelajari oleh Cecerska-Heryć dkk (2017). Mereka menunjukkan efek hemodialisis pada aktivitas XOR dan isoformnya pada PPP dan trombosit. Selain itu, mereka menunjukkan penurunan stres oksidatif setelah hemodialisis, yang dibuktikan dengan penurunan aktivitas XO dan peningkatan aktivitas XD dalam plasma PPP [26]. Penelitian ini juga menegaskan hasil yang diperoleh ilmuwan lain [3, 23-25]. Hemodialisis menyebabkan stres oksidatif yang intens, sehingga terjadi peningkatan konversi isoform pro-oksidatif menjadi antioksidan setelah hemodialisis.

On the other hand, Miric et al. (2013) showed higher XOR activity before hemodialysis compared to control, and increased XOR activity during renal replacement therapy in patients with GNRI (Geriatric Nutritional Risk Index)≤90 (high risk of complications and mortality due to malnutrition), and a reduction in XOR activity in patients with GNRI>90 (risiko rendah kematian akibat gizi buruk) yang dilakukan hemodialisis. Ini mungkin berarti bahwa oksidoreduktase terlibat dalam kerusakan oksidatif yang disebabkan oleh hemodialisis, yang dapat berkontribusi terhadap percepatan penghancuran protein pada pasien dengan GNRI kurang dari atau sama dengan 90 [27].

Boban dkk. (2014) menunjukkan bahwa aktivitas XOR total lebih tinggi pada kelompok pasien yang menderita hipertensi esensial dibandingkan pasien yang menjalani cuci darah. Aktivitas tertinggi pada kelompok ini juga ditunjukkan oleh isoform XD pada pasien kontrol atau dialisis. Di sisi lain, aktivitas XO, yang terutama berkontribusi terhadap produksi ROS, adalah yang tertinggi pada pasien dialisis [28].

Dalam kasus dialisis peritoneal, hasil yang kami capai tidak jelas. Pada plasma miskin trombosit, aktivitas XD secara signifikan lebih rendah dibandingkan pada pasien yang menjalani hemodialisis, begitu pula aktivitas XO. Hal ini dapat menunjukkan paparan stres oksidatif yang jauh lebih rendah pada pasien yang menjalani dialisis peritoneal dibandingkan pasien yang menjalani hemodialisis. Namun, polanya berbeda pada trombosit. Aktivitas XD secara signifikan lebih rendah pada pasien dari kelompok PD dibandingkan pada pasien hemodialisis, namun ketajaman XO secara signifikan lebih tinggi pada pasien dialisis peritoneal.

Aktivitas antara DXO lebih tinggi pada pasien yang menjalani dialisis peritoneal, yang mungkin mengindikasikan peningkatan konversi menjadi isoform antioksidan. Namun, harus diingat bahwa di bawah pengaruh RFT, terjadi kebocoran oksidoreduktase dari sel ke plasma. Oleh karena itu, aktivitas isoform XOR pada trombosit yang berhubungan dengan hemodialisis dan dialisis peritoneal dapat mengganggu gambaran ini. Selama hemodialisis, terjadi peningkatan aktivasi trombosit disertai dengan stres oksidatif yang kuat, mengakibatkan ROS yang dapat menyebabkan pelepasan XOR ke plasma, yang mungkin tidak terjadi pada kasus dialisis peritoneal: oleh karena itu, aktivitas XO dan XDO jauh lebih tinggi pada pasien. dari kelompok PD. Pasien yang diobati secara konservatif juga terkena stres oksidatif yang disebabkan oleh penyakit yang mendasarinya, yang dapat ditunjukkan dengan aktivitas isoform XDO tertinggi dan tingginya aktivitas isoform XO pada PPP.

Aktivitas isoform xanthine oxidoreductase menurut jenis kelamin, durasi dialisis, usia pasien, penyebab, dan stadium CKD

Penelitian kami menunjukkan tidak ada hubungan antara aktivitas XOR dan jenis kelamin, kecuali adanya hubungan signifikan antara aktivitas XDO pada trombosit. Pada pria, aktivitas XDO secara signifikan lebih rendah dibandingkan pada wanita. Hal ini mendukung teori bahwa aktivitas enzim antioksidan mungkin lebih tinggi pada wanita. Namun, tujuan utama mengukur aktivitas XDO adalah menganalisis transformasi XD ke XO. Hal ini mengkonfirmasi hasil yang dilaporkan dalam penelitian sebelumnya, dimana hubungan seperti itu tidak diamati [19, 25]. Sebelumnya, hanya Decker dkk. (1982) melaporkan aktivitas XOR yang lebih tinggi pada tikus jantan dibandingkan tikus betina [29].

Efek usia diamati pada aktivitas semua isoform XOR PPP dan trombosit di semua kelompok. Pasien dalam kelompok PD dan TE rata-rata berusia lebih muda, dan aktivitas XD dan XO dalam plasma miskin trombosit lebih rendah pada pasien ini dibandingkan kelompok lainnya. Hanya aktivitas isoform XO pada trombosit yang lebih tinggi pada kelompok (yang lebih muda). Hasil ini berbeda dengan yang diperoleh enzim antioksidan lainnya. Ini mungkin berarti bahwa kelompok pasien ini belum kehilangan aktivitas XOR di bawah pengaruh RFT. Namun, kemungkinan besar jenis terapi pengganti ginjal yang diterapkan lebih memengaruhi aktivitas XOR dibandingkan usia. Hal ini tampaknya dikonfirmasi oleh hasil regresi multivariat kami, serta penelitian yang dilakukan oleh Cecerska-Heryć et al.(2017).

Tabel 8 Pengaruh parameter tertentu terhadap aktivitas isoform xantin oksidoreduktase

Tabel ini menyajikan nilai p yang menentukan signifikansi statistik. Hubungan antara jenis kelamin, durasi dialisis, usia, stadium penyakit ginjal kronis danpenyebab penyakit ginjal kronisdan aktivitas isoform XOR dinilai menggunakan ANOVA HD satu arah dan durasi dialisis - hubungan antara jenis terapi (hemodialisis, dialisis peritoneal, pasien sebelum transplantasi ginjal), durasi dialisis dan aktivitas isoform XOR HD dan usia - ketergantungan antara kelompok yang diteliti (hemodialisis, dialisis peritoneal, pengobatan konservatif, pasien sebelum transplantasi ginjal dan kelompok kontrol), usia pasien dan aktivitas isoform XOR Tahapanpenyakit ginjal kronis- hubungan antara tingkat keparahan penyakit ginjal kronis berdasarkan eGFR dan aktivitas isoform XOR Penyebab penyakit ginjal kronis - hubungan antara penyebab penyakit kronis tertentu dan aktivitas isoform XOR NS tidak ditemukan hubungan yang signifikan secara statistik

Dalam penelitian ini, ditemukan hubungan yang signifikan antara durasi dialisis, jenis terapi pengganti ginjal yang digunakan, dan aktivitas semua isoform XOR pada plasma miskin trombosit dan platelet. Namun, pada PPP dari dialisis yang tahan lama, terjadi penurunan aktivitas isoform XD dan XO. Selain itu, aktivitas isoform XD, XDO, dan XO meningkat di trombosit. Aktivitas XOR meningkat pada trombosit karena aktivasi terus menerus akibat dialisis jangka panjang dan penyakit ginjal progresif yang menyebabkan peningkatan stres oksidatif, dan produksi ROS, yang pada gilirannya menghancurkan trombosit darah. Namun, penurunan aktivitas isoform XOR pada PPP menegaskan hasil yang diperoleh peneliti lain mengenai penurunan aktivitas enzim antioksidan seiring dengan dialisis jangka panjang.

Berdasarkan analisis regresi multivariat ditemukan bahwa parameter seperti jenis terapi pengganti ginjal yang digunakan, usia pasien, durasi dialisis, dan stadium CKD mempengaruhi aktivitas XO pada PPP, XD pada PRP, dan XO pada PRP, masing-masing, sekitar 33% XO dalam plasma miskin trombosit, 39% XD dalam trombosit dan 32% XO dalam trombosit. (Tabel 9).

Penelitian kami menunjukkan pengaruh penyakit ginjal kronis terhadap aktivitas XD dan XO di PPP. Aktivitas isoform XOR tertinggi terjadi pada pasien hipertensi dan nefropati diabetik, dan terendah pada pasien ADPKD (penyakit ginjal polikistik yang diturunkan secara autosomal dominan). Analisis regresi multivariat menunjukkan adanya korelasi negatif independen antara aktivitas XO pada PRP dan tingkat keparahannyapenyakit ginjal kronis.

Karena XOR memainkan peranan penting dalam produksi asam urat, hubungan antara aktivitas XOR dan hipertensi atau risiko kardiovaskular dijelaskan secara luas. Peningkatan kadar asam urat dalam serum berhubungan dengan kerusakan oksidatif pada dinding pembuluh darah, perubahan inflamasi dan proliferasi pembuluh darah, hipertensi, dan gangguan fungsi ginjal. Peningkatan kadar asam urat mungkin menjadi faktor peningkatan risiko kejadian kardiovaskular. Oleh karena itu, upaya difokuskan pada pemblokiran aktivitas XOR untuk mengurangi konsentrasi UA. Efek positif dari penghambatan produksi XOR pada sistem kardiovaskular telah didokumentasikan [33]. Penelitian kami menunjukkan korelasi negatif antara aktivitas XD pada konsentrasi PPP dan asam urat dan korelasi positif antara aktivitas XO konsentrasi PPP dan UA. Hasil ini menegaskan pentingnya fisiologis XOR juga dalam perlindungan terhadap penyakit kardiovaskular.

Nakatani dkk. (2017) menunjukkan adanya korelasi positif antara glukosa, konsentrasi asam urat, dan aktivitas XOR pada pasien yang menjalani hemodialisis. Dalam penelitian yang sama, analisis regresi multivariat menunjukkan korelasi positif dan independen antara konsentrasi glukosa, dan diabetes tipe 2 yang didiagnosis dengan aktivitas XOR. Sebaliknya, konsentrasi asam urat berkorelasi positif dengan aktivitas XOR pada pasien hemodialisis dengan diabetes tipe II yang tidak terdiagnosis. Studi ini menunjukkan bahwa kontrol glikemik dapat menurunkan kemungkinan produksi ROS yang dimediasi oksidoreduktase pada pasien hemodialisis [34].

Tingginya aktivitas XO dan XD pada PPP yang diamati dalam penelitian ini pada pasien dengan nefropati diabetik dan hipertensi mengkonfirmasi peningkatan aktivitas XOR pada jenis penyakit ini, karena distorsi kadar glukosa dan asam urat, yang dapat memperburuk keadaan.penyakit ginjal kronis. Bagi pasien hipertensi, aktivitas XO dan XD yang tinggi mungkin merupakan indikator peningkatan risiko kejadian kardiovaskular. Tidak ada hubungan antara aktivitas XOR dan ADPKD dalam literatur.

Kesimpulan

1. Jenis terapi pengganti ginjal yang digunakan pada pasien CKD, usia pasien, durasi dialisis, penyebab CKD, dan stadium perkembangannya berpengaruh signifikan terhadap aktivitas XOR dan isoformnya.

2. Pasien dialisis peritoneal mengalami lebih sedikit stres oksidatif dibandingkan pasien hemodialisis

Keterbatasan Obat-obatan yang digunakan oleh pasien Pasien dalam kelompok penelitian (terutama hemodialisis) mengambil dari ide, yang dapat meningkatkan kadar asam urat, suatu antioksidan kuat. Ini juga merupakan produk terakhir dalam jalur degradasi hipoksantin, yang dikatalisis oleh XOR. Namun, penelitian kami menunjukkan tidak ada korelasi antara kadar asam urat dan aktivitas XOR, kecuali korelasi negatif isoform XD dan XO pada PPP. Korelasi ini hanya menegaskan sifat fisiologis oksidoreduktase; semakin tinggi konsentrasi asam urat, semakin rendah aktivitas isoform oksidatif XO.

Transplantasi ginjal Awalnya, kami berencana mengumpulkan bahan biologis dari pasien setelah transplantasi ginjal 5-7 hari setelah transplantasi, diikuti oleh satu bulan, tiga bulan, dan enam bulan setelah transplantasi. Sayangnya, karena masalah logistik, tidak mungkin menyediakan material berkualitas baik ke unit kami setiap saat. Oleh karena itu, kami memutuskan untuk mengumpulkan materi hanya sekitar 7 hari setelah transplantasi.

Referensi

1. Okamoto K, Matsumoto K, Hille R, Eger BT, Pai EF, Nishino T. Struktur kristal xanthine oxidoreductase selama katalisis: implikasi terhadap mekanisme reaksi dan penghambatan enzim. Proc Natl Acad Sci US A. 2004;101:7931–6. 2. Meneshian A, Bulkley GB. Fisiologi xantin oksidase endotel: dari katabolisme urat hingga cedera reperfusi hingga transduksi sinyal inflamasi. Mikrosirkulasi. 2002;9:161–75. 3. Dolegowska B, Blogowski W, Domanski L. Bukti klinis hubungan antara perubahan serum perioperatif dalam aktivitas enzim pemetabolisme xantin dan fungsi allograft ginjal awal pasca transplantasi. J Am Coll Bedah. 2010;211:587–95. 4. Hille R, struktur dan mekanisme Nishino T. Flavoprotein. 4. Xantin oksidase dan xantin dehidrogenase. FASEB J.1995;9:995–1003. 5. Vorbach C, Harrison R, Capecchi MR. Xantin oksidoreduktase sangat penting dalam evolusi dan fungsi sistem kekebalan bawaan. Tren Imunol. 2003;24(9):512–7. 6. Kaminski ZW, Jezewska MM. Bentuk dehidrogenase-oksidase perantara dari xantin oksidoreduktase di hati tikus. Biokimia J. 1979;181:177–82. 7. Dołęgowska B. Prediktor analisis fungsi ginjal transplantasi tertunda prooksidasi dan keseimbangan antioksidan dan metabolisme asam arakidonat dalam trombosit darah dan plasma selama reperfusi iskemia. Szczecin: Wydawncitwo Pomorskiej Akademii Medycznej; 2009.