Glikosida Total Dari Batang Cistanche Tubulosa Mengurangi Perilaku Seperti Depresi: Interaksi Dua Arah Fitokimia Dan Mikrobiota Usus

untuk informasi lebih lanjut:ali.ma@wecistanche.com

Li Fan, dkk

ABSTRAK

Latar belakang: Sebagai ramuan penguat ginjal-yang yang paling sering digunakan dalam pengobatan tradisional Tiongkok, batang sukulen kering dariBentengtubulosa(Schenk) Wight (CT) telah terbukti efektif dalam pengobatan depresi. Namun, komponen antidepresan dan mekanisme dasarnya masih belum jelas.

Tujuan: Untuk mengeksplorasi komponen aktif CT(Bentengtubulus)terhadap depresi, serta mekanisme potensial. Desain dan metode studi: Tes keputusasaan perilaku digunakan untuk menilai aktivitas antidepresan polisakarida, oligosakarida, dan fraksi yang diperkaya glikosida berbeda yang dipisahkan dari CT, serta metabolit mikrobiota usus yang khas termasuk 3-asam hidroksifenilpropionat ({{2 }}HPP) dan hidroksitirosol (HT). Selanjutnya, efek fraksi bioaktif dan metabolit pada model stres ringan kronis yang tidak dapat diprediksi (CUMS) dieksplorasi dengan beberapa farmakodinamik dan analisis biokimia. Perubahan histologi kolon dan penghalang usus diamati dengan pewarnaan dan analisis imunohistokimia. Fitur mikroba usus dan metabolisme triptofan-kynurenine masing-masing dieksplorasi menggunakan pengurutan 16S rRNA dan western-blotting.

Hasil: Totalglikosida(TG) secara dramatis mengurangi perilaku seperti depresi dibandingkan dengan fraksi terpisah yang berbeda, yang mencerminkan efek sinergis dari glikosida fenilethanoid dan iridoid pada hiperaktivasi sumbu hipotalamus-hipofisis-adrenal (HPA), neuro-, dan peradangan perifer yang parah, dan defisiensi di 5-hydroxytryptamine (5-HT) dan faktor neurotropik yang diturunkan dari otak di hipokampus. Selain itu, TG(glikosida total)mengurangi peradangan tingkat rendah di usus besar dan gangguan penghalang usus, dan kelimpahan beberapa genera bakteri sangat berkorelasi dengan sumbu HPA dan peradangan pada tikus CUMS. Secara konsisten, ekspresi indoleamine 2, 3-dioxygenase 1 (IDO1) di usus besar berkurang secara signifikan setelah TG(glikosida total)administrasi, disertai dengan penekanan metabolisme triptofan-kynurenine. Di sisi lain, HT juga memberikan efek antidepresan yang nyata dengan memperbaiki fungsi sumbu HPA, pelepasan sitokin pro-inflamasi, dan metabolisme triptofan-kynurenine, sementara itu tidak dapat menyesuaikan sebagian besar mikrobiota usus yang tidak teratur dengan cara yang sama seperti TG. Anehnya, lebih unggul dari fluoxetine, TG dan HT dapat lebih meningkatkan disfungsi sumbu hipotalamus-hipofisis-gonad dan metabolisme nukleotida siklik yang abnormal.

Kata kunci: Bentengtubulosa, glikosida total, hidroksitirosol, depresi, mikrobiota usus

Klik untuk cistanche deserticola ma produk

pengantar

Depresi adalah gangguan mental kronis, berulang, dan berpotensi mengancam jiwa yang mempengaruhi hingga 20 persen populasi di seluruh dunia (Nabavi et al., 2017). Saat ini, meskipun banyak antidepresan telah disetujui, efek sampingnya mengkhawatirkan. Khususnya, pengobatan jangka panjang dengan inhibitor reuptake serotonin selektif (SSRI) seperti fluoxetine, agen farmakologis utama untuk depresi, memperburuk masalah seperti disfungsi seksual kronis (Bijlsma et al., 2014); ini telah menarik perhatian yang meningkat pada penemuan antidepresan baru dari herbal alami (Wang et al., 2019). Dalam teori pengobatan tradisional Tiongkok (TCM), defisiensi ginjal-yang menghasilkan fitur kinerja yang mirip dengan gejala klinis depresi seperti perasaan sedih, kehilangan minat, dan sentimentalitas (Yang et al., 2020), mempromosikan pikiran untuk meringankan perilaku seperti depresi dengan mengencangkan ginjal-yang. Secara kebetulan, banyak herbal pembentuk ginjal-yang memiliki manfaat untuk meningkatkan fungsi seksual (Wu et al., 2015). Studi semacam itu membuat kita memperhatikan aplikasi potensial dariCistanchesjamu, yang merupakan ramuan penguat ginjal-yang paling sering digunakan di TCM dan efektif dalam mengobati disfungsi seksual pria (Wang et al., 2020), dalam hal perkembangan antidepresan.Cistanchesjamu, secara resmi tercatat sebagai batang sukulen kering dariBentengtubulosa(Schrenk) Berat (CT) danBentengdeserticola(YC Ma) dalam Chinese Pharmacopoeia (Wang et al., 2017), telah digunakan di Cina dan negara-negara Asia Timur lainnya sejak abad ke-15 untuk mengobati kondisi seperti defisiensi ginjal-yang, impotensi, dan infertilitas wanita. Studi farmakologi modern menunjukkan bahwaCistanchesHerba memiliki beberapa bioaktivitas, seperti peningkatan imunitas, neuroproteksi, antioksidan, antipenuaan, dan efek antifatigue (Wang et al., 2017). Sifat neuroprotektif dariCistanchesHerba menyarankan potensi terapeutiknya pada penyakit terkait kognitif seperti stroke, depresi, dan penyakit Alzheimer (Wang et al., 2020). Dalam penelitian kami sebelumnya, kami menemukan bahwa CT(Bentengtubulus)ekstrak meringankan perilaku seperti depresi tikus stres ringan kronis yang tidak dapat diprediksi (CUMS) (Li et al., 2018). Sampai saat ini, analisis kimia CT(Bentengtubulus)menunjukkan bahwa penyusun utamanya meliputi glikosida fenilethanoid, glikosida iridoid, polisakarida, dan oligosakarida (Jiang dan Tu, 2009), namun jenis senyawa yang berperan dominan dalam efek antidepresannya masih belum jelas.

Sejumlah penelitian telah mengkonfirmasi bahwa tindakan fisiologis usus (terutama mikrobiota komensal) memainkan peran penting dalam perkembangan depresi dan dapat mengatur neuroendokrin, sistem saraf otonom, dan sistem kekebalan (Yang et al., 2020). Selain itu, hubungan yang menghubungkan metabolisme triptofan, mikrobiota usus, dan depresi secara bertahap telah menarik banyak perhatian. Mikrobiota usus yang berubah dapat mengaktifkan jalur triptofan-kynurenine, selanjutnya mengurangi ketersediaan triptofan perifer dan otak, yang mengakibatkan 5-defisiensi HT (Agus et al., 2018). Penelitian kami sebelumnya menunjukkan bahwa glikosida fenilethanoid di CT(Bentengtubulus)umumnya memiliki bioavailabilitas yang rendah, dan dapat dengan cepat dimetabolisme menjadi 3-asam hidroksifenilpropionat (3-HPP) dan hidroksitirosol (HT) oleh mikrobiota usus (Li et al., 2016). Selain itu, CT(Bentengtubulus)ekstrak dilaporkan mengembalikan homeostasis mikrobiota usus pada tikus CUMS (Li et al., 2018). Berdasarkan penelitian tersebut, kami menyimpulkan bahwa interaksi dua arah dari fitokimia dan mikrobiota usus mungkin mengatur efek antidepresan dari komponen bioaktif spesifik CT.(Bentengtubulus). Secara khusus, senyawa dapat diubah menjadi metabolit yang dapat diserap (seperti 3-HPP dan HT) di saluran pencernaan oleh mikrobiota usus, dan selanjutnya, memberikan efek antidepresan. Pada gilirannya, perubahan struktural mikrobiota usus yang diinduksi komponen bioaktif dapat secara bersamaan memainkan peran penting dalam aktivitas antidepresan.

Di sini, dalam penelitian kami, kami menggunakan tes keputusasaan perilaku untuk menilai aktivitas antidepresan polisakarida, oligosakarida, dan beragam fraksi yang diperkaya glikosida yang dipisahkan dari CT(Bentengtubulus)ekstrak air (CTE), dan metabolit khas oleh mikrobiota usus (termasuk 3-HPP dan HT), yang selanjutnya kami konfirmasikan dalam model stres ringan kronis yang tidak dapat diprediksi (CUMS) dengan beberapa analisis farmakodinamik dan biokimia. Selanjutnya, kami menyelidiki apakah mekanismenya melawan depresi relevan dengan interaksi dua arah dari fitokimia dan mikrobiota usus.

Bahan dan metode

Bahan:

Semua standar yang digunakan untuk analisis kimia dibeli dari Durst (Sichuan, Cina). 3-HPP, HT, fluoxetine, dan imipramine dibeli dari Aladdin (Shanghai, China). Kit kuantitatif protein BCA dibeli dari Boster (Wuhan, Cina). Nanjing Jiancheng (Nanjing, Cina) menyediakan 5-HT, BDNF, tumor necrosis factor-alpha (TNF- ), interleukin-1beta (IL-1 ), dan interferon-gamma (IFN- ) kit enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Kit ELISA corticosterone (CORT), adrenocorticotropic hormone (ACTH), dan corticotrophin-releasing hormone (CRH) dibeli dari MultiSciences (Hangzhou, Cina). Cyclic adenosine monophosphate (cAMP), cyclic guanosine monophosphate (cGMP), testosteron (T), dan kit ELISA gonadotropin-releasing hormone (GnRH) dibeli dari Enzyme-linked Biotechnology (Shanghai, China). Kit ELISA triptofan dan kynurenine diperoleh dari Antibodi Molekul Kecil (Bordeaux, Prancis). Antibodi primer/sekunder termasuk zonula occludens 1 (ZO-1), indoleamine 2, 3-dioxygenase 1 (IDO1), -aktin, dan IgG anti-kelinci kambing HRP (H plus L) dibeli dari Proteintech (Wuhan, Tiongkok). Semua reagen lain dari tingkat analitis atau kemurnian yang lebih tinggi diperoleh dari pemasok komersial.

Persiapan fraksi yang berbeda dipisahkan dari CTE(Bentengekstrak tubulosa)

CT(Bentengtubulus)dikumpulkan pada November 2015 di Hetian, Xinjiang, China, dan disahkan oleh Prof. Xiaobo Li. Spesimen voucher (20151108) disimpan di School of Pharmacy di Shanghai Jiao Tong University.

Sampel hancur diekstraksi tiga kali dengan air suling (1:10, b/v) selama 2 jam pada 80~90 C untuk mendapatkan CTE(Bentengekstrak tubulosa)(hasilnya adalah 57,1 persen). CTE dilarutkan dalam air suling kemudian diaduk perlahan dengan etanol (1:4, v/v) dan ditempatkan pada suhu 4 C selama 24 jam. Kemudian, endapan dan supernatan dikumpulkan dengan sentrifugasi pada 4000 rpm selama 20 menit. Polisakarida total (TP; hasil adalah 5,7 persen) diperoleh dengan mencuci dengan etanol 80 persen, dan deproteinisasi dengan pereaksi Savage tiga kali dari endapan yang dikumpulkan. Supernatan yang tersisa kemudian dikromatografi di atas kolom resin mikropori D101 dan dielusi dengan air suling dan etanol 40 persen. Air yang dielusi dan fraksi etanol 40 persen mengandung oligosakarida total (TO; hasil adalah 35,1 persen) dantotalglikosida(TG; hasil adalah 12,1 persen), masing-masing. TG(glikosida total)selanjutnya dielusi dengan air suling dan 5 persen , 10 persen , dan 40 persen etanol melalui resin mikropori D101 lagi, dan fraksi yang dielusi dari 5 persen dan 40 persen etanol adalah glikosida iridoid total (TG-IrG; hasil adalah 2,7 persen) dan total glikosida fenilethanoid (TG-PhG; hasil adalah 8,7 persen), masing-masing.

Analisis kimia

Pertama, konstituen kimia utama dari fraksi yang berbeda dipisahkan dari CTE(Bentengekstrak tubulosa)dikarakterisasi dengan UPLC-QTOF-MS. Kedua, kandungan relatif dari total karbohidrat dan glikosida ditentukan dengan metode UV-Vis. Ketiga, komponen utama (echinacoside, verbascoside, adalah verbascoside, 8-asam epiloganat, dan asam teniposide) diukur dengan metode HPLC yang divalidasi. Parameter rinci dan validasi metode ditunjukkan dalam Bahan Tambahan.

Eksperimen hewan

Jadwal hewan percobaan spesifik ditunjukkan pada Gambar. 1. Semua hewan percobaan ditempatkan dan diaklimatisasi selama 1 minggu sebelum percobaan di Laboratorium Pusat Hewan Universitas Shanghai Jiao Tong (Shanghai, Cina), di bawah suhu kamar yang terkendali (25 ± 2 C; kelembaban relatif 55 ± 10 persen) dengan siklus terang-gelap 12:12 jam. Penelitian ini dilakukan sesuai dengan Pedoman Perawatan dan Penggunaan Hewan Laboratorium SJTU. Fasilitas dan protokol hewan telah disetujui oleh Komite Etik Hewan SJTU (No. A2019008).

Seratus lima puluh tikus ICR jantan (berat 18-20 g, berumur 6 minggu) dibeli dari Perusahaan Bioteknologi Shanghai Slack (Shanghai, Cina) dan dibagi secara acak menjadi 10 kelompok (n=15/kelompok). Subjek dan dosis untuk tikus putus asa perilaku di setiap kelompok ditunjukkan pada Tabel 1. Dosis CTE(Bentengekstrak tubulosa) dan fraksi-fraksinya yang terpisah dihitung dengan rumus berikut: dosis=4.55 g/kg.d.bw × hasil, yang ditentukan menurut tiga perhitungan dosis setara manusia berdasarkan luas permukaan tubuh. Dosis obat positif imipramine dan metabolit mikrobiota usus (3-HPP dan HT) ditetapkan sesuai dengan penelitian sebelumnya (Gupte et al., 2016; Pablos et al., 2019). Setelah pemberian intragastrik sekali sehari selama 7 hari, uji lapangan terbuka (OFT), uji suspensi ekor (TST), dan uji renang paksa (FST) dilakukan masing-masing pada hari ke-8, ke-9, dan ke-10. Metode spesifik dari tes perilaku diuraikan dalam Materi Tambahan.

Tujuh puluh dua tikus jantan Sprague-Dawley (berat 160-180 g, berumur 6 minggu) dibeli dari Perusahaan Hewan Laboratorium Slack Shanghai (Shanghai, Cina). Sebelum percobaan formal, semua tikus menjadi sasaran uji preferensi sukrosa (SPT) setelah pelatihan yang sesuai. Tikus-tikus tersebut dibagi menjadi 8 kelompok (n=9/kelompok) menurut preferensi sukrosa mereka (Gambar Tambahan S1). Subyek dan dosis untuk tikus di setiap kelompok ditunjukkan pada Tabel 1. Dosis ditetapkan sesuai dengan koefisien konversi antara tikus dan tikus berdasarkan dosis efektif mereka pada tikus perilaku putus asa. Dan dosis obat kontrol positif fluoxetine konsisten dengan penelitian sebelumnya (Hou et al., 2017). Semua kelompok menerima serangkaian stres ringan kronis tak terduga (CUMS) kecuali untuk kelompok kontrol. Stresor diterapkan secara terus menerus dan acak selama 4 minggu (lihat Tabel Tambahan S1 untuk detailnya). Makanan dan air tersedia secara bebas untuk tikus kontrol, yang tetap tidak terganggu di ruangan lain, kecuali untuk tes perilaku. Subyek diberikan intragastrik 1 jam sebelum prosedur CUMS selama 4 minggu. Setelah 28 hari stresor terus menerus dan pemberian obat, OFT, SPT, dan FST dilakukan masing-masing pada hari ke-29, ke-31, dan ke-33. Metode khusus dari eksperimen perilaku ditunjukkan dalam Bahan Tambahan.

Pengumpulan sampel dan analisis biokimia

Setelah tes perilaku, tikus puasa dibius dengan natrium pentobarbital, dan seluruh darah dikumpulkan untuk mendapatkan sampel serum. Setelah perfusi jantung dengan saline, isi hipokampus, kolon, dan cecal dikumpulkan dan disimpan di -80 C. Segmen kolon distal dihilangkan dan difiksasi dalam 4 persen paraformaldehyde. Kadar CORT, CRH, ACTH, TNF- , IL-1 , IFN- , cAMP, cGMP, T, GnRH, triptofan, dan kynurenine dalam serum, 5-HT, BDNF, dan TNF- di hipokampus, dan TNF- dan IFN- di usus besar diukur sesuai dengan instruksi yang diberikan dengan kit ELISA yang sesuai.

Histologi, imunohistokimia, dan uji western-blotting

Pewarnaan hematoxylin dan eosin (H&E) dan Alcian blue-periodic acid-Schiff (AB-PAS) digunakan untuk mengamati perubahan patologis pada jaringan usus besar. Selain itu, penilaian imunohistokimia dari bagian ini dilakukan untuk mengamati ekspresi protein ZO-1 dalam sel epitel kolon (Ding et al., 2020). Rincian mengenai persiapan sampel dan uji western-blotting untuk menentukan ekspresi protein IDO1 di usus besar dan hipokampus juga dijelaskan dalam Bahan Tambahan.

Analisis profil komposisi mikrobiota usus

Pengurutan throughput tinggi 16S rRNA dilakukan oleh MajorBio Co., Ltd. (Shanghai, China), dan metode serta pemrosesan data terperinci ditunjukkan dalam Bahan Tambahan.

Analisis statistik

Data dinyatakan sebagai mean ± standard error of mean (SEM). Analisis varians satu arah (ANOVA) digunakan untuk membandingkan beberapa kelompok dengan menggunakan perangkat lunak SPSS 20.0. Sebuah perbedaan dianggap signifikan pada p <0,05. korelasi="" antara="" mikroba="" usus="" dan="" faktor="" fisiologis="" terkait="" depresi="" tertentu="" dianalisis="" menggunakan="" koefisien="" korelasi="" spearman="" berdasarkan="" analisis="" peta="">

Hasil

Analisis kimia dari fraksi yang berbeda dipisahkan dari CTE(Bentengekstrak tubulosa)

Komponen utama dikarakterisasi menggunakan UPLC-QTOF-MS (Tambahan Tabel S2 dan Gambar. S2), dan total 21 konstituen diidentifikasi, termasuk 16 konstituen glikosida fenilethanoid, 2 konstituen glikosida fenolik di CTE(Bentengekstrak tubulosa), TG, dan TG-PhG; dan 3 konstituen glikosida iridoid di CTE(Bentengekstrak tubulosa), TG, dan TG-IrG. Secara keseluruhan, kandungan relatif karbohidrat total dalam TP dan TO masing-masing adalah 60,3 persen dan 80,8 persen . Isi relatif daritotalglikosidadi TG adalah 87,7 persen. Sejalan dengan itu, glikosida fenilethanoid dan iridoid masing-masing menyumbang 86,7 persen dan 53,4 persen TG-PhG dan TG-IrG. Kandungan echinacoside, verbascoside, adalah verbascoside, 8-asam epiloganat, dan asam teniposide di setiap fraksi ditunjukkan pada Tabel 2, dan kromatogram HPLC dan data validasi metode tercantum dalam Tabel Tambahan S3 dan Gambar. S3.

Efek fraksi berbeda yang dipisahkan dari CTE(Bentengekstrak tubulosa)dan metabolit khas oleh mikrobiota usus pada tes keputusasaan perilaku pada tikus

Seperti yang ditunjukkan pada Gambar. 2, dibandingkan dengan kelompok kontrol, tikus yang diberi imipramine (kontrol positif) selama 7 hari menunjukkan pengurangan waktu imobilitas yang signifikan pada FST dan TST dan tidak menunjukkan pengaruh yang signifikan pada total jarak yang ditempuh dalam OFT. . Perubahan serupa juga diamati pada CTE(Bentengekstrak tubulosa), TG, dan kelompok HT, menunjukkan bahwa CTE, TG(glikosida total), dan HT memberikan aktivitas antidepresan dan efeknya tidak terkait dengan rangsangan. Oleh karena itu, TG(glikosida total)dan HT masing-masing adalah fraksi bioaktif dominan yang dipisahkan dari CTE dan metabolit tipikal oleh mikrobiota usus. Menariknya, tidak ada perubahan signifikan dalam waktu imobilitas dalam FST yang ditunjukkan setelah pemberian TG-PhG dan TG-IrG dibandingkan dengan kontrol, atau pada TST setelah pemberian TG-PhG, yang menunjukkan bahwa keberadaan glikosida fenilethanoid dan iridoid mungkin penting dalam aktivitas antidepresan CTE.

Efek farmakodinamik dan perubahan biokimia dari berbagai fraksi yang diperkaya glikosida dan HT pada tikus CUMS

Seperti yang ditunjukkan pada Tabel 3, tikus yang menjalani 28 hari paradigma CUMS menunjukkan pengurangan yang signifikan (p < 0.001)="" dalam="" preferensi="" sukrosa="" di="" spt,="" total="" jarak="" yang="" ditempuh,="" dan="" jumlah="" pemeliharaan="" di="" oft,="" serta="" peningkatan="" yang="" signifikan="" (p=""><0,01) dalam="" total="" waktu="" imobilitas="" di="" fst="" dibandingkan="" dengan="" kontrol,="" menunjukkan="" induksi="" fenotipe="" seperti="" depresi="" pada="" tikus="" cums.="" performa="" depresi="" terbalik="" pada="" kelompok="" flx="" (kontrol="" positif).="" demikian="" pula="" dengan="" perlakuan="" cte,="" tg,="" tg-phg,="" tg-irg,="" dan="" ht="" menghasilkan="" pemulihan="" preferensi="" sukrosa="" ke="" kadar="" normal="" pada="" tikus="" cums,="" yaitu="" 102,7="" persen,="" 94,1="" persen,="" 89,8="" persen,="" 91,9="" persen,="" dan="" 94,3="" persen.="" kontrol,="" masing-masing.="" secara="" konsisten="" pada="" kelompok="" fst,="" cte="" dan="" tg="" menunjukkan="" efek="" yang="" paling="" jelas,="" dan="" waktu="" imobilitas="" masing-masing="" mencapai="" 103,3="" persen="" dan="" 93,4="" persen="" dari="" kelompok="" kontrol,="" sedangkan="" waktu="" imobilitas="" kelompok="" tg-phg,="" tg-irg,="" dan="" ht="" baru="" mencapai="" 62,1="" persen,="" 73,2="" persen,="" dan="" 69,9="" persen="" pada="" kelompok="" kontrol.="" peningkatan="" signifikan="" serupa="" (p=""><0,05) diamati="" pada="" total="" jarak="" tempuh="" dan="" jumlah="" pemeliharaan="" di="" oft="" setelah="">(Bentengekstrak tubulosa), TG, dan HT administrasi, dan pengobatan TG-PhG dan TG-IrG cenderung merevisi jumlah pemeliharaan pada tikus CUMS. Hasil penelitian menunjukkan bahwa TG adalah fraksi antidepresan bioaktif dominan yang dipisahkan dari CTE, dan glikosida fenilethanoid dan iridoid sangat diperlukan dalam mengerahkan efek antidepresannya. Selain itu, HT terbukti menjadi salah satu metabolit aktif TG in vivo.

Secara konsisten, menderita CUMS secara signifikan meningkatkan kadar CORT, CRF, ACTH, TNF-, IL-1, dan IFN- dalam serum dan TNF- di hipokampus tikus dibandingkan dengan kelompok kontrol (hal.< 0.05),="" resulting="" in="" significant="" reductions="" (p="" <="" 0.05)="" in="" the="" levels="" of="" hippocampal="" 5-ht="" and="" bdnf="" (fig.="" 3).="" except="" for="" a="" non-significant="" difference="" in="" the="" level="" of="" hippocampal="" bdnf="" between="" flx="" and="" cums="" groups,="" the="" above-mentioned="" alterations="" in="" cums="" rats="" could="" be="" significantly="" reversed="" (p="" <="" 0.05)="" after="" administration="" of="" fluoxetine,="" cte="">(Bentengekstrak tubulosa), TG, dan HT, menunjukkan bahwa CTE, TG(glikosida total), dan HT menunjukkan efek perbaikan pada hiperaktivasi sumbu HPA, peradangan perifer dan saraf yang parah, dan defisiensi {{0}}HT dan BDNF. Demikian juga, pengobatan TG-IrG dan TG PhG secara signifikan mengurangi kadar serum CORT, TNF-, IFN-, dan TNF- hipokampus, dan meningkatkan kadar hipokampus 5-HT pada tikus CUMS (p < {{8}="" }.05).="" penurunan="" yang="" signifikan="" (p="">< 0.05)="" di="" tingkat="" serum="" crf="" dan="" acth="" juga="" diamati="" pada="" kelompok="" tg-irg="" dibandingkan="" dengan="" kelompok="" cums.="" menariknya,="" kadar="" serum="" cort,="" tnf-,="" acth,="" dan="" crf="" pada="" kelompok="" tg-phg="" dan="" tg-irg="" secara="" signifikan="" lebih="" tinggi="" daripada="" kelompok="" tg="" (p=""><0,05), dan="" kadar="" hipokampus="" 5-ht="" dan="" bdnf="" menunjukkan="" pola="" ekspresi="" yang="" berlawanan="" (p=""><0,05). hasil="" ini="" menunjukkan="" bahwa="" efek="" tg-phg="" dan="" tg-irg="" pada="" hiperaktivitas="" aksis="" hpa,="" peradangan="" perifer="" dan="" saraf,="" dan="" kekurangan="" 5-ht="" jelas="" lebih="" rendah="" daripada="" tg,="" menunjukkan="" bahwa="" glikosida="" fenilethanoid="" dan="" iridoid="" mungkin="" bekerja="" efek="" sinergis="" pada="" beberapa="" aspek="" yang="" disebutkan="" di="">

TG dan HT mengatur sumbu HPG dan metabolisme nukleotida siklik pada tikus CUMS

Kadar T, GnRH, cAMP, dan cGMP dan rasio cAMP dan cGMP (cAMP/cGMP) dalam serum yang dikenai CUMS diukur, dan hasilnya ditunjukkan pada Tabel 4. Konsentrasi T, GnRH, cAMP, dan cAMP/cGMP dalam serum secara signifikan menurun, dan tingkat cGMP meningkat secara signifikan (p < 0.05)="" pada="" kelompok="" cums="" dibandingkan="" dengan="" kontrol,="" menunjukkan="" bahwa="" sasaran="" cums="" mengakibatkan="" penekanan="" sumbu="" hpg="" dan="" disfungsi="" metabolisme="" nukleotida="" siklik.="" dibandingkan="" dengan="" kelompok="" cums,="" tidak="" ada="" perubahan="" yang="" signifikan="" pada="" kelompok="" flx.="" anehnya,="" setelah="">(glikosida total)dan pengobatan HT, peningkatan yang signifikan (p < {{0}}.05)="" ditunjukkan="" pada="" tingkat="" serum="" t,="" gnrh,="" camp,="" dan="" camp/cgmp,="" sedangkan="" tingkat="" cgmp="" serum="" berkurang="" secara="" signifikan="" (p="">< 0,05).="" hasil="" ini="" menunjukkan="" bahwa="">(glikosida total)dan HT mengatur aksis HPG dan metabolisme nukleotida siklik, yang jelas lebih unggul daripada kontrol positif fluoxetine.

TG dan HT mengurangi peradangan tingkat rendah di usus besar dan gangguan penghalang usus pada tikus CUMS

Pewarnaan H&E digunakan untuk menilai kerusakan morfologi kolon, dan tidak ada perbedaan signifikan pada kolon yang diamati di antara kelompok eksperimen (Gbr. 4a). Selanjutnya, efek TG dan HT pada peradangan di usus besar dan gangguan penghalang usus juga dianalisis (Gbr. 4b-d). Dibandingkan dengan kelompok kontrol, jumlah sel goblet dan ketebalan lapisan lendir berkurang pada kelompok CUMS. Secara konsisten, ekspresi protein ZO-1, dan kadar IFN- dan TNF- di usus besar menurun secara signifikan (p < 0.05)="" dan="" meningkat="" (p=""><0,05 ),="" masing-masing,="" menunjukkan="" bahwa="" meskipun="" tidak="" ada="" kerusakan="" histologis="" yang="" jelas="" diinduksi,="" dikenakan="" cums="" mengakibatkan="" peradangan="" tingkat="" rendah="" di="" usus="" besar="" dan="" gangguan="" penghalang="" usus.="" setelah="" fluoxetine,="">(glikosida total), dan pengobatan HT, jumlah sel goblet dan ketebalan lapisan mukus meningkat, dan kadar IFN- dan TNF- kolon berkurang secara signifikan (p < 0.05).="" selain="" itu,="" tg="" dan="" ht="" secara="" signifikan="" meningkatkan="" (p=""><0,05) ekspresi="" protein="" zo-1="" ke="" tingkat="" yang="" sama="" dengan="" kelompok="" kontrol.="" hasil="" ini="" menunjukkan="" bahwa="">(glikosida total)dan HT dapat meringankan peradangan tingkat rendah di usus besar dan gangguan penghalang usus pada tikus CUMS.

Efek TG dan HT pada komposisi mikrobiota usus

Setelah menghapus urutan yang tidak memenuhi syarat, total 1.874.721 pembacaan efektif diperoleh. Hasil keragaman alfa (Gbr. 5a) dan beta (Gbr. 5b) menunjukkan bahwa meskipun kekayaan (Chao) dan keragaman (Shannon) mikrobiota usus dalam isi cecal tidak berbeda, struktur keseluruhan mikrobiota usus di plot analisis koordinat utama (PCoA) menunjukkan perbedaan mencolok antara kelompok kontrol dan CUMS. Selain itu, TG(glikosida total)dan pengobatan HT secara signifikan meningkatkan kekayaan bakteri tikus CUMS dan menginduksi perbedaan nyata dalam plot PCoA dibandingkan dengan tikus CUMS, menunjukkan kesamaan yang jelas dengan kontrol, terutama ketika TG(glikosida total)diuji.

Perubahan taksonomi dalam mikrobiota lebih lanjut menegaskan bahwa TG(glikosida total)memberikan efek pengaturan dramatis pada komposisi mikrobiota usus. Setelah TG(glikosida total)administrasi, kelimpahan mayoritas taksa diubah pada tikus CUMS dibalik ke tingkat yang mirip dengan kelompok kontrol. Pengurangan yang signifikan (14,2 persen , p < 0.05)="" dan="" pengayaan="" (53,6="" persen,="">< 0.05)="" in="" the="" abundances="" of="" the="" phylum="" firmicutes="" and="" bacteroidetes="" were="" observed="" in="" the="" tg="">(glikosida total)kelompok dibandingkan dengan kelompok CUMS (Gbr. 5c), masing-masing. Secara konsisten, di tingkat keluarga (Tabel Tambahan S4), TG menurunkan kelimpahan Ruminococcaceae (filum Firmicutes) dan Peptococcaceae (filum Firmicutes) masing-masing sebesar 33,9 persen dan 82,9 persen , dibandingkan dengan kelompok CUMS (p < 0.="" {{10}}5).="" sebaliknya,="" pengayaan="" yang="" signifikan="" dalam="" kelimpahan="" keluarga="" erysipelotrichaceae="" (filum="" firmicutes,="" 78,4="" persen,="" p=""><0,05) dan="" muribaculaceae="" (filum="" bacteroidetes,="" 77,3="" persen,="" p=""><0,05) ada="" di="" kelompok="" tg.="" secara="" konsisten="" pada="" tingkat="" genus="" (gbr.="" 5d),="" kelimpahan="" anaerotruncus,="" harryflintia,="" ruminiclostri="" dium_9,="" tidak="" terklasifikasi_f_ruminococcaceae="" (anggota="" famili="" rumino-coccaceae),="" dan="" peptococcus="" (anggota="" famili="" peptococcaceae)="" menurun="" secara="" signifikan="" sedangkan="" norank_f_erysipelotrichaceae,="" allo="" baculum,="" dubosiella="" (anggota="" famili="" erysipelotrichaceae)="" dan="" norank_f{{24}="" }muribaculaceae="" (anggota="" famili="" muribaculaceae)="" menunjukkan="" kelimpahan="" yang="" lebih="" tinggi="" pada="" kelompok="" tg="" daripada="" kelompok="" cums="">< 0.05).="" in="" addition,="" tg="" decreased="" the="" abundances="" of="" tyzzerella_3,="" acetatifactor,="" and="" norank_f_lachnospiraceae="" assigned="" to="" the="" family="" lachnospiraceae="" (p="" <="" 0.05),="" although="" the="" abundance="" of="" the="" family="" lachnospiraceae="" was="" similar="" across="" all="" experimental="" groups.="" unlike="" tg,="" ht="" decreased="" the="" abundances="" of="" partially="" altered="" taxa="" induced="" by="" cums,="" including="" the="" family="" ruminococcaceae,="" 3="" genera="" (anaerotruncus,="" harryflintia,="" and="" ruminiclostridium_9)="" assigned="" to="" the="" family="" ruminococcaceae="" and="" 2="" genera="" (tyzzerella_3,="" acetatifactor)="" assigned="" to="" the="" family="" lachnospiraceae.="" additionally,="" converse="" variations="" were="" observed="" in="" the="" abundances="" of="" ruminococcaceae_ucg_013="" and="" streptococcus="" in="" the="" ht="" group.="" these="" results="" indicated="" that="" tg="" and="" ht="" exerted="" clear="" differences="" in="" the="" regulation="" of="" gut="" microbiota="" composition,="" and="" the="" effect="" of="" tg="" was="" superior="" to="" that="" of="" tg="" especially="" in="" altering="" the="" genera="" assigned="" to="" the="" family="" erysipelotrichaceae,="" peptococcaceae,="" and="">

Analisis korelasi genera mikroba yang diubah dipengaruhi oleh TG(glikosida total)dan HT, hormon terkait aksis HPA, sitokin pro-inflamasi, 5-HT, dan BDNF

Untuk menjelaskan hubungan antara perubahan komposisi mikrobiota usus yang dipengaruhi oleh TG(glikosida total)dan HT, dan sifat terkait depresi yang sesuai, analisis korelasi Spearman dilakukan. Seperti ditunjukkan pada Gambar. 6, kadar 5-HT dan BDNF di hipokampus hanya berkorelasi positif secara signifikan dengan norank_f_Muribaculaceae. Jika tidak, korelasi yang jelas dapat diidentifikasi antara genera mikroba yang diubah dan hormon terkait sumbu HPA. Secara khusus, Dubosiella, norank_f_Muribaculaceae, norank_f_ Erysipelotrichacea, dan Peptococcus sangat terkait dengan fungsi sumbu HPA. Serum CORT, CRF, dan ACTH memiliki korelasi negatif dengan Dubosiella, norank_f_Muribaculaceae, dan norank_f_Erysipelotrichacea, dan asosiasi positif dengan Peptococcus. Selanjutnya, Dubosiella dan norank_f_ Erysipelotrichacea menunjukkan asosiasi negatif dengan IFN- kolon dan TNF- hipokampus, sementara hubungan serupa ada di Allobaculum, Harryfinita, dan serum dan TNF- hipokampus, serta di norank _f_Lachnospirasea, dan serum IFN- dan TNF- . Sebaliknya, Peptococcus berhubungan positif dengan TNF- kolon dan TNF- serum. Demikian juga, norank_f_Muribaculaceae berhubungan positif dengan IFN- dan TNF- serum. Hasil ini menunjukkan bahwa genera mikroba yang diubah, terutama genera tertentu milik keluarga Erysipelotrichaceae, Peptococcaceae, dan Muribaculaceae, yang secara khusus dipengaruhi oleh TG, menunjukkan hubungan yang kuat dengan hormon terkait sumbu HPA dan sitokin pro-inflamasi secara bersamaan, menunjukkan peran penting mikrobiota usus dalam mengatur fungsi aksis HPA dan inflamasi.

TG(glikosida total)dan HT menghambat metabolisme triptofan-kynurenine pada tikus CUMS

Efek dari TG(glikosida total)dan HT pada tingkat triptofan dan kynurenine dalam serum tikus, serta ekspresi IDO1 di usus besar dan hipokampus, ditentukan. Seperti ditunjukkan pada Gambar. 7 dan Gambar. 8, dibandingkan dengan kelompok kontrol, tingkat triptofan dalam serum berkurang secara signifikan pada kelompok CUMS, berbeda dengan peningkatan tingkat rasio kynurenine dan kynurenine-to-tryptophan (Kyn /Trp) dan ekspresi protein IDO1 di usus besar dan hipokampus. Dibandingkan dengan kelompok CUMS, serum Kyn/Trp pada kelompok FLX berkurang secara signifikan (p< 0.05).="" tg="">(glikosida total)dan pengobatan HT menghasilkan peningkatan yang signifikan dalam kadar triptofan serum pada tikus CUMS (p < {{0}}.05),="" dan="" penurunan="" kadar="" serum="" kynurenine="" dan="" kyn/trp="" (p="">< 0,05).="" selain="" itu,="" tg="" secara="" signifikan="" menghambat="" ekspresi="" protein="" ido1="" di="" usus="" besar="" tikus="" cums="" (p=""><0,05), sementara="" perbedaan="" yang="" tidak="" signifikan="" dalam="" ekspresi="" protein="" ido1="" di="" hipokampus="" diamati="" antara="" kelompok="" cums="" dan="" tg.="" namun,="" efek="" ht="" pada="" ekspresi="" protein="" ido1="" di="" usus="" besar="" dan="" hipokampus="" bertentangan="" dengan="" tg,="" menunjukkan="" bahwa="" tg="" dan="" ht="" menghambat="" metabolisme="" triptofan-kynurenine="" dengan="" menurunkan="" ekspresi="" ido1="" di="" usus="" besar="" dan="" hipokampus="" tikus="" cums.="">

Diskusi

Dalam penelitian ini, dua model hewan yang berbeda digunakan untuk menyaring senyawa bioaktif di CT(Bentengtubulus)yang meringankan perilaku seperti depresi untuk pertama kalinya. TP dan TO kemungkinan besar merupakan bahan yang tidak efektif dalam CTE, sementara TG(glikosida total)menunjukkan potensi paling besar dalam pengobatan depresi. Studi sebelumnya tentang CT(Bentengtubulus), sebaikBentengtanaman, sebagian besar berfokus pada bioaktivitas glikosida fenilethanoid dengan kandungan tertinggi dan mengabaikan pentingnya glikosida iridoid dan bahan lain yang kurang melimpah. Menariknya, penelitian kami menunjukkan bahwa glikosida fenilethanoid dan iridoid menunjukkan efek sinergis pada hiperaktivitas sumbu HPA, peradangan perifer dan saraf yang parah, dan defisiensi hipokampus 5-HT dan BDNF, yang mungkin menjadi alasan kritis untuk antidepresan yang menguntungkan. efek TG(glikosida total). Hasil ini lebih lanjut menunjukkan karakteristik multikomponen dan multitarget dari obat herbal dan mengingatkan kita bahwa konstituen dengan tingkat yang lebih rendah, bahkan jejak bahan mungkin juga memainkan peran kunci dalam efek farmakologis.

Stres kronis menginduksi hiperaktivitas aksis HPA, yang memicu timbulnya depresi, serta penekanan aksis HPG melalui penurunan pelepasan GnRH dan/atau sensitivitas hipofisis dari GnRH (Kirby et al., 2009). Sementara itu, cAMP dan cGMP adalah hub perantara penting yang mengandalkan banyak neurotransmiter dan hormon untuk mengerahkan efek fisiologisnya (Siawrys et al., 2002). Studi terbaru secara konsisten menunjukkan bahwa terjadinya defisiensi ginjal-yang terkait erat dengan disfungsi sumbu kelenjar target hipotalamus-hipofisis (Zhang et al., 2019). Pada sindrom defisiensi ginjal-yang, penurunan kadar serum cAMP dan cAMP/cGMP juga telah diamati. Dalam penelitian ini, kami menemukan bahwa TG(glikosida total)dapat menghambat kadar serum CORT, CRF, dan ACTH, dan meningkatkan kadar serum T dan GnRH pada tikus CUMS, menunjukkan pemulihan disfungsi aksis HPA dan HPG setelah pemberian TG. Selain itu, TG(glikosida total)membalikkan penurunan yang signifikan dalam tingkat serum cAMP/cGMP pada tikus yang menjalani CUMS. Dengan demikian, mekanisme potensial yang mendasari CT(Bentengtubulus) dalam pengobatan depresi dan defisiensi ginjal-yang mungkin sebagian serupa dan layak untuk dieksplorasi lebih lanjut. Selain itu, produksi hasrat dan perilaku seksual adalah proses refleks saraf yang kompleks. Hormon seks merupakan sumber utama rangsangan seksual sentral dan kekurangan hormon seks dapat menyebabkan berkurangnya hasrat seksual atau disfungsi seksual (Holloway dan Wylie, 2015). Secara khusus, 5-HT yang berlebihan menghambat pelepasan GnRH, yang merupakan alasan dominan terjadinya disfungsi seksual kronis setelah pengobatan jangka panjang dengan SSRI (Prasad et al., 2015). Dalam penelitian kami, fluoxetine (perwakilan SSRI) tidak efektif dalam disfungsi aksis HPG. Namun, meskipun TG(glikosida total)secara signifikan meningkatkan tingkat 5-HT di hipokampus, perubahan serupa pada tingkat serum T dan GnRH juga diamati, sehingga memperbaiki penekanan sumbu HPG. Hasil ini menunjukkan keuntungan yang berbeda dari CT(Bentengtubulus) dalam pengobatan depresi, dan mekanisme intrinsik yang bertanggung jawab atas efek ini perlu dipelajari lebih lanjut.

Semakin banyak bukti menunjukkan bahwa usus merupakan target potensial untuk pengobatan penyakit kronis menggunakan senyawa alami dengan bioavailabilitas rendah (Zhou et al., 2020). Penelitian terbaru (Wei et al., 2019) telah menunjukkan bahwa pengobatan CUMS menginduksi perubahan mikrobioma tinja dan cacat penghalang usus, yang memfasilitasi invasi bakteri ke dalam mukosa kolon dan memperburuk reaksi inflamasi di usus besar. Konsisten dengan laporan itu, hasil kami menunjukkan bahwa 4 minggu paparan CUMS menginduksi penipisan luas jumlah sel piala dan ketebalan lapisan lendir di usus besar tikus, serta timbulnya gangguan penghalang usus yang diwakili oleh peningkatan permeabilitas usus, yang ditentukan oleh mengukur protein ZO-1. Selain itu, peningkatan ekspresi faktor pro-inflamasi (seperti TNF- dan IFN-) diamati di usus besar. Dengan demikian, temuan ini menunjukkan bahwa meskipun tidak ada kerusakan histologis yang jelas diinduksi, pengobatan CUMS memulai peradangan kolon dan gangguan penghalang usus. Studi sebelumnya telah melaporkan bahwa CT memberikan peningkatan kemanjuran dalam mencegah kolitis yang diinduksi DSS pada tikus (Jia et al., 2014). Tidak konsisten, TG(glikosida total)juga terbukti mengurangi peradangan tingkat rendah di usus besar dan gangguan penghalang usus tikus CUMS, yang menggarisbawahi potensinya untuk mengobati penyakit terkait peradangan kolon secara klinis.

Studi ekstensif juga menunjukkan bahwa hubungan yang menghubungkan mikrobiota usus komensal, sumbu HPA, dan peradangan adalah kompleks dan memainkan peran penting dalam perkembangan depresi (Misiak, et al., 2020). Perubahan komposisi mikrobiota usus dapat berkontribusi pada peningkatan pelepasan sitokin dan sintesis molekul bioaktif kecil (Du et al., 2020). Sitokin tertentu (seperti TNF- ) mungkin melewati sawar darah-otak dan merupakan aktivator kuat dari aksis HPA (Misiak et al., 2020). Pada gilirannya, hiperaktivasi sumbu HPA dapat berkontribusi pada disbiosis mikrobiota usus, peradangan kronis di usus besar, dan perubahan permeabilitas usus (Misiak et al., 2020). Konsisten dengan penelitian sebelumnya, modifikasi mikrobiota usus yang diobati dengan TG kemungkinan bertanggung jawab atas efek perbaikannya pada depresi. Kami mengamati bahwa TG(glikosida total)membalikkan kelimpahan taksa mikroba pada tingkat yang berbeda pada tikus yang dikenai CUMS ke tingkat yang serupa dengan kontrol. Secara khusus, genera utama yang diubah milik keluarga Peptococcaceae, Erysipelotrichaceae, dan Muribaculaceae ditemukan sangat berkorelasi dengan sumbu HPA dan peradangan. Konsisten dengan hasil kami, keluarga Peptococcaceae, Erysipelotrichaceae, dan Muribaculaceae telah dilaporkan memainkan peran penting dalam menjaga integritas penghalang mukosa dan terjadinya peradangan (Kankoush, 2015; Borton et al., 2017; Zhang et al., 2020). Oleh karena itu, kami menduga bahwa TG dapat memoderasi kelimpahan beberapa genera yang ditugaskan ke keluarga Erysipelotrichacea, Peptococcaceae, dan Muribaculaceae, kemudian mengurangi peradangan tingkat rendah di usus besar, hiperaktifitas sumbu HPA, dan gangguan integritas penghalang mukosa. Menariknya, dalam penelitian kami, hanya satu genus bernama nor ank_f_Muribaculaceae yang berkorelasi dengan 5-HT dan BDNF di hipokampus. Mekanisme spesifik dari hubungan tersebut masih belum jelas dan perlu diteliti lebih lanjut. Jika tidak, temuan juga menunjukkan bahwa sangat sulit bagi sebagian besar genera yang diubah yang disebabkan oleh TG untuk secara langsung mempengaruhi tingkat 5-HT di hippocampus. Untuk menjelaskan bagaimana perubahan komposisi mikrobiota usus mempengaruhi tingkat hipokampus 5-HT setelah pengobatan TG, hubungan rumit yang menghubungkan metabolisme triptofan, sumbu HPA, sitokin inflamasi, dan 5-HT menarik perhatian kami. Triptofan adalah asam amino esensial bagi manusia dan kurang dari 1 persen digunakan dalam sintesis protein, dengan mayoritas (lebih dari 90 persen ) diubah oleh IDO1 dan triptofan 2,3-dioksigenase 2 (TDO2) menjadi kynurenine, dan kira-kira 5 persen didorong oleh triptofan hidroksilase di jalur serotonin (Duan, et al. 2018). Tingkat 5-HT di otak sangat tergantung pada ketersediaan triptofan perifer, mengingat triptofan diangkut ke otak melalui transporter asam amino netral (Duan et al., 2018). IDO1, enzim pembatas laju pada langkah pertama jalur kynurenine, terutama diinduksi oleh IFN-, dan sitokin pro-inflamasi lainnya, seperti IL-1 dan TNF- (Kennedy et al., 2017), yang terbukti terkait dengan mikrobiota usus dalam penelitian kami. Seperti yang dilaporkan, lebih banyak triptofan dimetabolisme melalui jalur kynurenine, sehingga secara kompetitif mengurangi konversi triptofan menjadi 5-HT, dan terkait dengan penurunan 5-HT yang umumnya ditemukan pada depresi (O'Mahony et al., 2015). Dengan demikian, tingkat triptofan yang lebih rendah dan Kyn/Trp yang lebih tinggi sering terjadi dan bertepatan dengan peningkatan risiko suasana hati depresi. Setelah pemberian TG, ekspresi berlebih IDO1 di usus besar dihambat, menghasilkan peningkatan kadar triptofan serum dan penurunan serum Kyn/Trp, yang mengungkapkan hubungan potensial antara mikrobiota usus dan kadar HT hipokampus 5-yang dipengaruhi oleh TG. Sementara itu, BDNF, anggota keluarga neurotropin, sangat penting untuk diferensiasi sel, kelangsungan hidup neuron, pembentukan sinaps, dan proses neuroplastisitas dalam depresi (Greenberg et al., 2009). Studi terbaru menunjukkan bahwa BDNF telah ditemukan terkait erat dengan fungsi penghalang mukosa usus dan mikrobiota usus (Maqsood dan Stone, 2016). Selain itu, perubahan mikrobiota usus telah dilaporkan memiliki potensi untuk meningkatkan level ekspresi BDNF dan dengan demikian mempengaruhi perkembangan perilaku seperti depresi (Du et al., 2020). Namun, mirip dengan variasi 5-HT, sangat tidak mungkin bagi sebagian besar genera yang diubah yang disebabkan oleh TG dalam penelitian kami untuk secara langsung mempengaruhi tingkat BDNF di hippocampus, dan koneksi dan mekanisme molekul intrinsik memerlukan pemeriksaan lebih lanjut.

Sebaliknya, HT, metabolit mikrobiota usus dari TG(glikosida total), juga menunjukkan efek antidepresan dalam penelitian ini, yang konsisten dengan aktivitas neuroprotektif yang diuntungkannya (Hu et al., 2014). Yang memprihatinkan, HT juga dapat memoderasi sitokin pro-inflamasi, hormon terkait aksis HPA dan HPG, dan konsentrasi 5-HT hipokampus ke tingkat yang serupa dengan kontrol pada tikus CUMS, sementara sebagian besar genera mikroba yang diubah terpengaruh. oleh HT memiliki korelasi yang lemah dengan indeks fisiologis di atas, menunjukkan bahwa mikrobiota usus mungkin bukan target aktivitas antidepresan HT. Selanjutnya, HT menekan ekspresi berlebih IDO1 di hipokampus tetapi tidak di usus besar, disertai dengan peningkatan kadar triptofan serum. Terjadinya perbedaan yang jelas antara TG(glikosida total)dan HT mungkin karena penyerapan HT yang sangat baik ke dalam aliran darah dan kapasitas HT untuk melintasi sawar darah-otak (Robles-Almazan et al., 2018), yang juga menunjukkan bahwa kapasitas metabolisme yang kuat dari mikrobiota usus sangat penting dalam aktivitas antidepresan TG, selain fungsi fisiologisnya. Oleh karena itu, kami sebelumnya telah membuktikan bahwa interaksi dua arah dari fitokimia dan mikrobiota usus memainkan peran penting dalam pengobatan depresi dengan pemberian TG (seperti yang ditunjukkan pada Gambar. 9).

Kesimpulan

Singkatnya, TG(glikosida total)terutama bertanggung jawab atas aktivitas antidepresan CT(Bentengtubulus), yang mencerminkan efek sinergis glikosida fenilethanoid dan iridoid pada hiperaktivasi sumbu HPA, peradangan perifer dan saraf yang parah, dan defisiensi 5-HT dan BDNF di hipokampus. Selanjutnya, mekanisme molekuler potensial dari efek antidepresan TG(glikosida total)dicapai melalui interaksi dua arah dari fitokimia dan mikrobiota usus. Selain itu, perbaikan sumbu HPG yang ditekan dan kelainan nukleotida siklik oleh TG(glikosida total)dan HT, yang tidak diatur oleh pengobatan dengan SSRI yang diwakili oleh fluoxetine, menunjukkan keuntungan yang berbeda dari CT dalam pengobatan depresi. Modulasi semacam itu mewakili strategi yang menjanjikan untuk pengobatan depresi menggunakan CT(Bentengtubulus) dan obat herbal tradisional sejenis.

Kontribusi penulis

XL, YP, dan LF merancang eksperimen dan menganalisis data. LF dan JW melakukan eksperimen dan menganalisis data. LF dan XL menyusun naskah. PM berkontribusi pada percobaan hewan dan pengujian sampel, dan LZ berkontribusi pada analisis komposisi mikrobiota usus. Semua data dihasilkan sendiri, dan tidak ada pabrik kertas yang digunakan. Semua penulis setuju untuk bertanggung jawab atas semua aspek pekerjaan yang memastikan integritas dan akurasi.

Pernyataan Kepentingan Bersaing

Para penulis menyatakan bahwa tidak ada konflik kepentingan.

Ucapan Terima Kasih

Pekerjaan ini didukung oleh hibah dari Proyek Penelitian dan Pengembangan Kunci Nasional (2017YFC1702400).

Bahan pelengkap

Materi tambahan yang terkait dengan artikel ini dapat ditemukan, dalam versi online, di doi:10.1016/j.phymed.2021.153471.

Dari: 'glikosida total dariBentengtubulosameringankan perilaku seperti depresi: interaksi dua arah dari fitokimia dan mikrobiota usus 'olehLi Fan, dkk

---Phytomedicine 83 (2021) 153471/ https://doi.org/10.1016/j.phymed.2021.153471