RNA M6 A Reader YTHDF2 Mengontrol Antitumor Sel NK dan Imunitas Antiviral Bagian 6

Model melanoma metastatik dan tantangan MCMV

Sel B16F10 (105) disuntikkan secara iv ke tikus. 14 hari setelah injeksi, tikus di-eutanasia untuk analisis postmortem. Nodul metastatik di paru dianalisis secara makroskopis dan dihitung. Jalur sel B16F10 disediakan oleh Hua Yu (City of Hope, Los Angeles, CA). Tikus Ythdf2ΔNK dan Ythdf2WT terinfeksi dengan injeksi ip strain Smith MCMV (2,5 × 104 PFU), yang dibeli dari American Type Culture Collection (VR-1399). Sampel darah tepi diperoleh melalui tusukan submandibular pada hari ke 0, 4, dan 7 setelah infeksi.

Nodul metastasis paru mengacu pada nodul yang dibentuk oleh sel tumor ganas dari tempat lain yang bermigrasi ke paru-paru melalui darah atau sistem limfatik. Bagi banyak pasien, ini adalah manifestasi umum dari kanker paru-paru.

Namun, meskipun nodul metastasis paru menimbulkan ancaman bagi kesehatan fisik pasien, tidak ada hubungan langsung antara nodul tersebut dan ingatan. Oleh karena itu, kita harus secara aktif menghadapi tantangan kanker paru-paru dan nodul metastasis paru-paru, dan tidak membiarkan emosi negatif dan kecemasan mempengaruhi kesehatan fisik dan mental kita.

Pada saat yang sama, kita dapat menjaga dan meningkatkan daya ingat melalui beberapa metode positif. Misalnya saja melakukan beberapa latihan daya ingat, seperti berhitung matematis, membaca, mendengarkan musik, bermain game, dan lain-lain. Selain itu, menjaga kebiasaan hidup yang baik, seperti olah raga teratur, tidur yang cukup, makan sehat, dan lain-lain, juga bisa. meningkatkan daya ingat kita.

Yang paling penting adalah menjaga sikap positif. Apa pun kesulitan yang Anda hadapi, Anda harus percaya pada kekuatan dan fleksibilitas sistem saraf Anda, dan melalui penyesuaian dan respons positif, pada akhirnya Anda akan berhasil mengatasi kesulitan tersebut.

Singkatnya, meskipun nodul metastatik di paru-paru menimbulkan ancaman bagi kesehatan fisik, namun tidak berhubungan langsung dengan ingatan. Kita harus menghadapinya secara positif dan menjaga serta meningkatkan daya ingat kita dengan mengatur gaya hidup dan menjaga sikap yang baik. Terlihat bahwa kita perlu meningkatkan daya ingat, dan Cistanche deserticola dapat meningkatkan daya ingat secara signifikan, karena Cistanche deserticola juga dapat mengatur keseimbangan neurotransmiter, seperti meningkatkan kadar asetilkolin dan faktor pertumbuhan. Zat-zat ini sangat penting untuk daya ingat dan pembelajaran. Selain itu, Cistanche deserticola juga dapat meningkatkan aliran darah dan meningkatkan pengiriman oksigen, yang dapat memastikan otak menerima nutrisi dan energi yang cukup, sehingga meningkatkan vitalitas dan daya tahan otak. Terlihat bahwa kita perlu meningkatkan daya ingat, dan Cistanche deserticola dapat meningkatkan daya ingat secara signifikan, karena Cistanche deserticola juga dapat mengatur keseimbangan neurotransmiter, seperti meningkatkan kadar asetilkolin dan faktor pertumbuhan. Zat-zat ini sangat penting untuk daya ingat dan pembelajaran. Selain itu, Cistanche deserticola juga dapat meningkatkan aliran darah dan meningkatkan pengiriman oksigen, yang dapat memastikan otak menerima nutrisi dan energi yang cukup, sehingga meningkatkan vitalitas dan daya tahan otak.

Klik suplemen tahu untuk meningkatkan daya ingat

Untuk mengukur viral load dalam darah tepi, limpa, dan hati, DNA diisolasi menggunakan QIAGEN DNeasy Blood and Tissue Kit untuk analisis qPCR. Primer berikut digunakan: MCMV-IE1,59-AGCCACCAACATTGACCACGCAC-39 (maju) dan MCMVIE1, ​​59-GCCCCAACCAGGACACACAACTC-39 (mundur).

Perawatan tikus in vivo dengan IL-15

Untuk pengobatan tikus in vivo dengan IL-15, tikus Ythdf2ΔNK dan Ythdf2WT disuntik dengan 2 µg ip IL manusia rekombinan-15 (cat.no. 745101; National Cancer Institute) selama 5 hari. Tikus yang diberi perlakuan dan kontrol kemudian di-eutanasia untuk analisis aliran sitometri.

Aliran sitometri

Suspensi sel tunggal dibuat dari BM, darah, limpa, hati, dan paru-paru tikus Ythdf2ΔNK dan Ythdf2WT seperti dijelaskan sebelumnya (Wang et al., 2018b). Analisis aliran sitometri dan penyortiran sel dilakukan masing-masing pada LSRFortessa X-20 dan FACSAriaFusion Flow Cytometer (BD Biosciences).

Data dianalisis menggunakan perangkat lunak NovoExpress (Agilent Technologies).

Antibodi berlabel pewarna fluoresensi berikut dari BD Biosciences, BioLegend, Invitrogen, atau Cell Signaling Technology digunakan: CD3ε (145-2C11), CD19 (1D3), Gr-1 (RB6-8C5 ),TER-119 (TER-119), CD11c (N418), CD4 (GK1.5), CD8 (53-6.7),CD122 (5H4), CD132 (TUGm2), NK1.1 (PK136), CD11b (M1/70),CD27 (LG.3A10), CD117 (2B8), CD127 (SB/199), CD135 (A2F10.1),KLRG1 (2F1), CD45 ({{46 }}F11), CD45.1 (A20), CD45.2 (104), IFN- (XMG1.2), 2B4 (m2B4), granzim B (QA16A02), perforin(S16009A), Ly49H (3D10), Ly49D ( 4e5), CD69 (H1.2F3), CD226(TX42.1), NKG2D (CX5), NKG2A (16A11), NKp46 (29A1.4), TIGIT(1G9), PD-1 (J43), lampiran V, Ki67 (b56), Tbet (4b10), dan Eomes (WD1928), fosfo-p44/42 Erk1/2 (Thr202/Tyr204, #9101), fosfo-Akt (Ser473, #5315), protein ribosom fosfo-S6 ,fosfo-Stat3 (Tyr705, #9145), dan fosfo-Stat5 (Tyr694,#9539).

Untuk evaluasi proliferasi sel NK, sel diberi label dengan 5 µM CTV (Invitrogen) sesuai dengan protokol pabrik sebelum mentransfernya ke tikus penerima. Pewarnaan intraseluler Ki67, Tbet, dan Eomes dilakukan dengan fiksasi dan permeabilisasi dengan Foxp3/Transcription Factor Staining Kit (eBioscience).

Untuk mendeteksi protein terfosforilasi, sel NK limpa yang dimurnikan diberi perlakuan awal dengan IL-15 manusia rekombinan (50 ng/ml) selama 1 jam dan kemudian difiksasi dengan Phosflow Fix Buffer I diikuti dengan permeabilisasi dengan Phosflow Perm Buffer III (BD Biosciences) dan pewarnaan dengan antibodi.

Transfer sel adaptif

Untuk menilai efek defisiensi Ythdf2 pada pematangan sel NK, campuran sel 5 × 106 BM dengan rasio 1:1 dari tikus CD45.1 atau Ythdf2ΔNK CD45.2 dipindahkan ke tikus Rag2−/−Il2rg−/−. Rekonstitusi penerima dinilai dengan flow cytometry8 minggu setelah transplantasi.

Untuk percobaan proliferasi homeostatik yang diinduksi limfopenia, jumlah yang sama dari sel NK limpa yang dimurnikan dari tikus CD45.1 atau Ythdf2ΔNK CD45.2 dipindahkan ke tikus Rag2−/−Il2rg−/− diikuti dengan penilaian persentase relatif sel WT dan Ythdf2ΔNK NK yang ditransfer di limpa penerima Rag2−/−Il2rg−/− dengan flow cytometry pada titik waktu yang ditentukan.

Untuk model melanoma metastatik, 106 sel NK yang diperluas IL-2 dari tikus Ythdf2ΔNK atau Ythdf2WT disuntikkan secara iv ke tikus Rag2−/−Il2rg−/−. 1 hari kemudian, sel B16F10 (105) disuntikkan iv ke tikus. 14 hari setelah injeksi, tikus di-eutanasia untuk analisis postmortem. Dalam beberapa percobaan, sel diberi label dengan CTV (5 µM, Invitrogen) untuk melacak proliferasi sel sebelum ditransfer.

Uji perdagangan in vivo

Untuk mendeteksi perdagangan sel NK dari BM ke darah tepi, 1 µg iv antibodi anti-CD45 berlabel APC disuntikkan ke tikus C57BL/6. Dua menit setelah injeksi antibodi, tikus segera di-eutanasia, dan sel-sel BM dikumpulkan untuk flow cytometry setelah sel-sel tersebut diwarnai dengan antibodi CD3 dan NK1.1. Sel NK parenkim diidentifikasi dengan kurangnya pewarnaan CD45, sedangkan sel NK sinusoidal diidentifikasi dengan adanya label CD45. Oleh karena itu, rasio sel NK di sinusoid (CD45+) dengan di daerah parenkim (CD45−) menunjukkan perdagangan sel NK dari darah toperipheral BM dalam kondisi stabil.

RT-qPCR dan imunobloting waktu nyata

RNA diisolasi menggunakan RNeasy Mini Kit (QIAGEN) dan kemudian ditranskripsi terbalik ke cDNA dengan PrimeScript RT Reagent Kit dengan gDNA Eraser (Takara Bio) sesuai dengan instruksi pabrik. Tingkat ekspresi mRNA dianalisis menggunakan SYBRGreen PCR Master Mix dan QuantStudio 12K Flex Real-TimePCR System (keduanya dari Thermo Fisher Scientific). Urutan primer tercantum pada Tabel S1.

Imunoblotting dilakukan sesuai prosedur standar, seperti yang dijelaskan sebelumnya (Denget al., 2015; Yu et al., 2006). Antibodi berikut digunakan: METTL3 (cat. no. 15073-1-AP; Proteintech), METTL14 (cat. no.26158-1-AP; Proteintech), YTHDF1 (cat. no. 17479-1-AP ; Proteintech), YTHDF2 (cat. no. RN123PW; MBL), YTHDF3 (cat. no.25537-1-AP; Proteintech), ALKBH5 (cat. no. ab195377; Abcam),FTO (cat. no. ab124892; Abcam), MDM2 (cat. no. 33-7100; Invitrogen), TDP-43 (cat. no. PA5-29949; Invitrogen), dan -actin(cat. no. {{20 }}Ig; Proteintech).

uji knockdown siRNA

IL-2–expanded NK cells were transfected with Accell mouse Tardbp siRNA (cat. no. E-040078-00-0005; Dharmacon) or Mdm2 siRNA (cat. no. E-041098-00-0005; Dharmacon) using Accell delivery media (Dharmacon) according to the manufacturer's instructions in the presence of IL-15 (50 ng/ml). The Accell eGFP control pool was used as siRNA control. The transfection efficiency was >90% diukur dengan flow cytometry. Efisiensi Geneknockdown ditentukan oleh qPCR dan immunoblotting. 3 hari setelah transfeksi, apoptosis sel, dan proliferasi sel dianalisis dengan flow cytometry seperti dijelaskan di atas.

Uji reporter Luciferase

Wilayah promotor Ythdf2 mulai dari –2,000 bp hingga +100 bp dari TSS diamplifikasi dari sel murine NK dan dikloning ke apGL4-Basic Luciferase Reporter Vector (Promega) untuk menghasilkan apGL{ {5}}Plasmid reporter Ythdf2. Sel HEK293T yang dibeli dari ATCC ditransfeksi dengan plasmida reporter pGL4-Ythdf2 serta plasmid ekspresi berlebih STAT5a atau STAT5b atau vektor kosong, bersama dengan plasmid reporter Renilla pRL-TK (Promega) untuk normalisasi efisiensi transfeksi. Sel dipanen untuk lisis 24 jam setelah transfeksi, dan aktivitas luciferase diukur secara fluorimetri dengan Sistem Dual-Luciferase (Promega). Urutan primer untuk mengkloning promotor Ythdf2 dan plasmid ekspresi berlebih STAT5a dan STAT5b tercantum pada Tabel S1.

tes ChIP

Pengujian ChIP dilakukan dengan menggunakan Pierce Magnetic ChIP Kit (kucing no. 26157; Thermo Fisher Scientific) sesuai dengan instruksi pabrik. Secara singkat, jumlah yang sama dari ananti-anti-fosfo-Stat5 (Tyr694, cat. No. 9351; Cell Signaling Technologies) atau IgG kelinci normal kontrol yang sesuai secara terpisah digunakan untuk mengendapkan kompleks DNA-protein ikatan silang yang berasal dari 5 × 106 sel NK primer tikus yang dimurnikan yang diberi perlakuan awal dengan IL-15 (50 ng/ml) selama 1 jam. Setelah pembalikan ikatan silang, DNA yang diimunisasi oleh antibodi yang ditunjukkan diuji dengan qPCR. Urutan semua primer tercantum pada Tabel S1.

Uji sitotoksisitas ex vivo

Sitotoksisitas ex vivo sel NK dievaluasi dengan uji pelepasan standar 51Cr. Garis sel limfoma tikus sel RMA-S (kelas MHC Ideficient) dan RMA (MHC kelas I cukup), hadiah dari Andre´Veillette (McGill University, Montreal, Kanada), digunakan sebagai sel target. Tikus diobati dengan injeksi ip poliinosinat: asam polisitidilat [poli (I: C); 200 µg/mencit] selama 18 jam. Sel NK yang teraktivasi poli (I: C) diisolasi dari limpa menggunakan EasySepMouse NK Cell Isolation Kit (STEMCELL Technologies). Sel NK yang dimurnikan dikultur bersama dengan sel target dengan perbandingan 5:1, 2,5:1, dan 1,25:1 dengan adanya IL-2 (50 U/ml).

m6A-seq

Sel NK limpa yang dimurnikan diperluas dengan IL-2 (1,000 U/ml,cat. no. Bulk Ro 23-6019; National Cancer Institute) in vitro selama 7 hari. Total RNA diisolasi dengan reagen TRIzol (Thermo FisherScientific) dari 50 juta sel NK yang diperluas IL-2. RNA poliadenilasi selanjutnya diperkaya dari RNA total dengan menggunakan Dynabeads mRNA Purification Kit (Invitrogen). Sampel mRNA difragmentasi menjadi fragmen sepanjang 100-nt dengan reagen fragmentasi RNA (Invitrogen).

MRNA terfragmentasi (5 µgmRNA) digunakan untuk imunopresipitasi m6A menggunakan antibodi m6A (202003; Synaptic) mengikuti protokol standar Magna MeRIP m6A Kit (Merck Millipore). RNA diperkaya melalui RNA Clean & Concentrator-5 (Zymo Research) untuk pembuatan perpustakaan dengan KAPA RNA HyperPrep Kit (Roche). Pengurutan dilakukan di fasilitas genomik City of Hope pada mesin Illumina HiSeq 2500 dengan mode baca tunggal 50-bp. Urutan pembacaan dipetakan ke mousegenome menggunakan perangkat lunak HISAT2 v101 (Kim et al., 2015).

Pembacaan imunopresipitasi dan perpustakaan input yang dipetakan disediakan menggunakan paket R exomePeak (Meng et al., 2014). m6Apeaks divisualisasikan menggunakan perangkat lunak Integrative Genomics Viewer (//www.igv.org). Motif pengikatan m6A dianalisis oleh MEME (https://meme-suite.org) dan HOMER (http://homer.ucsd.edu/homer/motif). Puncak yang disebut dijelaskan melalui perpotongan dengan arsitektur gen menggunakan Rpackage ChIPseeker (Yu et al., 2015).

StringTie was used to assess expression levels for mRNAs from input libraries by calculating the total exon fragments/mapped reads in millions × exon length in kb (Pertea et al., 2015). The differentially expressed mRNAs were selected with log2(fold change) >1 orlog2 (perubahan lipat)<−1 and P < 0.05 using the R package edgeR (Robinson et al., 2010).

YTHDF2 RIP-seq

50 juta IL-2–sel NK yang diperluas dipanen dan dicuci dua kali dengan PBS dingin, dan pelet sel dilisiskan dengan 2 vol buffer lisis (10 mM Hepes, pH 7,6, 150 mM KCl, 2 mM EDTA, 0,5% NP-40, 0,5 mM dithiothreitol, 1:100 protease inhibitorcocktail [Thermo Fisher Scientific], dan 400 U/ml SUPERase-In RNase Inhibitor [Thermo Fisher Scientific]).

Lisat diinkubasi dalam es selama 5 menit dan disentrifugasi selama 15 menit untuk membersihkan lisat. Sepersepuluh volume sel lisat disimpan sebagai masukan. Sisa sel lisat diinkubasi dengan 5 µg anti-YTHDF2 (cat.no. RN123PW; MBL) yang digabungkan dengan Protein A Magnetic Beads (cat. no. 10001D; Invitrogen) pada 4 derajat selama 2 jam dengan rotasi lembut. Setelah itu, manik-manik dicuci lima kali dengan 1 ml buffer pencuci dingin (50 mM HEPES, pH 7,6,200 mM NaCl, 2 mM EDTA, 0,05% NP-40, 0,5 mM dithiothreitol, dan 200 U/ml RNase penghambat).

Sampel yang imunopresipitasi menjadi sasaran pencernaan Proteinase K dalam buffer pencuci yang dilengkapi dengan 1% SDS dan 2 mg/ml Proteinase K (ThermoFisher Scientific) yang diinkubasi dengan pengocokan pada 1.200 rpm pada suhu 55 derajat selama 1 jam. Total RNA diekstraksi dari input dan RNA imunopresipitasi dengan menambahkan 5 vol reagen TRIzol diikuti oleh Direct-zol RNA Miniprep (Zymo Research).

Perpustakaan cDNA dihasilkan dengan KAPA RNA HyperPrep Kit (Roche) dan diurutkan pada platform Illumina HiSeq 2500. Hasil panggilan puncak dengan imunopresipitasi dan perpustakaan masukan dihasilkan oleh paket R RIPSeeker (Li et al., 2013). HOMER digunakan untuk menemukan motif distribusi data di wilayah puncak. Puncak yang disebut dianotasi melalui perpotongan dengan gen dan arsitektur transkripsi menggunakan ChIPpeakAnno (Zhu et al., 2010).

uji stabilitas mRNA

Sel NK limpa yang dimurnikan dari tikus Ythdf2ΔNK dan Ythdf2WT dikultur dengan IL-15 (50 ng/ml). 3 hari setelah kultur, sel diobati dengan aktinomisin D (5 µg/ml, cat. no. A9415; Sigma) untuk waktu yang ditentukan. Sel tanpa pengobatan digunakan pada 0 jam. Sel dikumpulkan pada waktu yang ditentukan, dan total RNA diekstraksi dari sel untuk qPCR. Waktu paruh mRNA dihitung menggunakan metode yang sebelumnya dijelaskan oleh Weng et al.(2018). Urutan primer tercantum pada Tabel S1.

Analisis basis data online

Kami menggunakan sumber online BioGPS (//biogps.org) untuk menganalisis ekspresi spesifik jaringan dari Ythdf2. Kumpulan RNA-seqdata berasal dari GEO dengan no aksesi. GSE106138,GSE113214, dan GSE25672. Data yang dinormalisasi dari analisis RNA-seq diekspor, dan ekspresi gen skor-z divisualisasikan dengan fungsi Peta Panas.2 dalam perpustakaan gplots R

Statistik

Uji-t Student yang tidak berpasangan (dua sisi) dilakukan dengan menggunakan perangkat lunak GraphPad Prism. ANOVA satu arah atau dua arah dilakukan ketika tiga atau lebih kelompok independen dibandingkan. Nilai P disesuaikan untuk beberapa perbandingan menggunakan prosedur Holm-Sˇ´ıdak. P < 0.05 dianggap signifikan. *, P < {{10}}.05; **, P <0,01; dan ***, P <0,001.

Materi tambahan online

Gambar S1 menunjukkan kadar protein YTHDF2 dalam sel imun, termasuk sel NK sebagai respons terhadap stimulasi IL-15, infeksi MCMV, dan perkembangan tumor; generasi tikus dengan penghapusan Ythdf2 spesifik sel NK. Gambar S2 menunjukkan titer virus pada limpa dan hati dari tikus yang terinfeksi MCMV serta persentase dan jumlah absolut sel Ly49H+ dan/atau Ly49D+ NK pada tikus yang terinfeksi MCMV. Gambar S3 menunjukkan proliferasi, kelangsungan hidup, pematangan, dan ekspresi reseptor pengaktif dan penghambat sel NK dari tikus Ythdf2WT dan Ythdf2ΔNK. Gambar.S4 menunjukkan regulasi ekspresi YTHDF2 melalui pensinyalan IL-15-STAT5 dan ekspresi komponen reseptor IL-15, jalur PI3K–AKT, dan jalur MEK–ERK dalam sel NK dari Ythdf2WT dan Ythdf2ΔNK tikus. Gambar S5 menunjukkan pengujian RNA-seq, m6A-seq, dan RIP-seq lebar transkriptome dalam sel NK. Tabel S1 mencantumkan primer yang digunakan dalam penelitian ini.

Ketersediaan data

Data RNA-seq, m6A-seq, dan RIP-seq disimpan di Pusat Informasi Bioteknologi Nasional (GEO) dengan aksesi no. GSE174027. Sisa data yang mendukung temuan penelitian ini tersedia dari penulis terkait berdasarkan permintaan.

Ucapan Terima Kasih

Pekerjaan ini didukung oleh National Institutes of Health (NS106170, AI129582, CA247550, CA163205, CA223400, CA068458, dan CA210087), Leukemia and Lymphoma Society (1364-19), California Institute for Regenerative Medicine (DISC2COVID{{ 9}}), dan Penghargaan Proyek Luar Biasa dari Aliansi Kanker Payudara 2021. Pekerjaan ini juga didukung sebagian oleh penghargaan USDA (USDA/NIFA 2020-67017-30843).

Kontribusi penulis: S. Ma, J. Yu, dan MA Caligiuri menyusun dan merancang proyek ini. S. Ma, J. Yan, J. Zhang, dan J. Yu melakukan eksperimen dan/atau analisis data. Z. Chen, L.-S.Wang, JC Sun, dan J. Chen menyumbangkan reagen dan dukungan material. S. Ma, J. Yu, J. Chen, dan MA Caligiuri menulis, mengulas, dan/atau merevisi makalah. Semua penulis mendiskusikan hasil dan mengomentari naskah.

Pengungkapan: J. Chen melaporkan "lainnya" dari Genovel BiotechCorp. di luar karya yang diserahkan dan merupakan pendiri ilmiah Genovel Biotech Corp. dan penasihat ilmiah onkologi ras. Tidak ada pengungkapan lain yang dilaporkan.

Referensi

1.Arase, H., ES Mocarski, AE Campbell, AB Hill, dan LL Lanier. 2002. Pengenalan langsung sitomegalovirus dengan mengaktifkan dan menghambat reseptor sel NK. Sains. 296:1323–1326.

2.Ayala, YM, T. Misteli, dan FE Baralle. 2008. TDP-43 mengatur fosforilasi protein retinoblastoma melalui represi ekspresi kinase 6 yang bergantung pada siklin. Proses. Natal. Akademik. Sains. AMERIKA SERIKAT. 105:3785–3789.

3.Barbieri, I., K. Tzelepis, L. Pandolfini, J. Shi, G. Millan-Zambrano, SC Robson, ´D. Aspris, V.Migliori, AJ Bannister, N.Han, dkk. 2017. METTL3 yang terikat promotor mempertahankan leukemia myeloid dengan kontrol terjemahan yang bergantung pada m6A. Alam. 552:126–131.

4.Becknell, B., dan MA Caligiuri. 2005. Interleukin-2, interleukin-15, dan perannya dalam sel pembunuh alami manusia. Adv. imunol. 86:209–239.

5.Bertoli, C., JM Skotheim, dan RA de Bruin. 2013. Pengendalian transkripsi siklus sel selama fase G1 dan S. Nat. Pendeta Mol. Biol Sel. 14:518–528.

6.Bezman, NA, CC Kim, JC Sun, G. Min-Oo, DW Hendricks, Y. Kamimura, JA Best, AW Goldrath, dan LL Lanier. Konsorsium Proyek Genom Imunologi. 2012. Definisi molekuler identitas dan aktivasi sel pembunuh alami. Nat. imunol. 13:1000–1009.

7.Carson, WE, JG Giri, MJ Lindemann, ML Linett, M. Ahdieh, R. Paxton, D.Anderson, J. Eisenmann, K. Grabstein, dan MA Caligiuri. 1994. Interleukin (IL) 15 adalah sitokin baru yang mengaktifkan sel pembunuh alami manusia melalui komponen reseptor IL-2. J.Eks. medis. 180:1395–1403.

8.Carson, WE, TA Fehniger, S. Haldar, K. Echert, MJ Lindemann, CF Lai, CM Croce, H. Baumann, dan MA Caligiuri. 1997. Peran potensial interleukin-15 dalam regulasi kelangsungan hidup sel pembunuh alami manusia.J. Klinik. Menginvestasikan. 99:937–943.

9.Chan, CJ, MJ Smyth, dan L. Martinet. 2014. Mekanisme molekuler aktivasi sel pembunuh alami sebagai respons terhadap stres seluler. Kematian Sel Berbeda. 21:5–14.

10.Chen, X., J. Han, J. Chu, L. Zhang, J. Zhang, C. Chen, L. Chen, Y. Wang, H.Wang, L. Yi, dkk. 2016. Terapi kombinasi sel EGFR-CAR NK dan oncolytic herpes simplex virus 1 untuk metastasis otak kanker payudara.Oncotarget. 7:27764–27777.

For more information:1950477648nn@gmail.com