SLC37A2, Molekul Terkait Fosfor yang Meningkat pada Sel Otot Polos di Aorta yang Terkalsifikasi Ⅱ

Hasil

Cari kandidat molekul dikalsifikasi yang diinduksi fosfatAoSMC.Untuk mencari molekul yang ekspresinya meningkat pada AoSMC terkalsifikasi, analisis microarray DNA sekitar 26,000 gen dilakukan menggunakan AoSMC terkalsifikasi dan mRNA AoSMC nonkalsifikasi. Gambar 1 menunjukkan Peta Panas dari berbagai gen yang diekspresikan antara AoSMC yang tidak dikultur dengan 2,6 mM dan yang dikultur dengan 2,6 mM P selama 12 hari. Sebanyak 3.066 gen meningkat lebih dari dua kali lipat pada AoSMC yang dikultur vs yang tidak dikultur. Gen dengan peningkatan ekspresi adalah molekul yang terkait dengan pembentukan osteoblas seperti osteopontin, periostin osteoblast-special factor (POSTN), Wnt3, interleukin-6 (IL-6), danfaktor pertumbuhan fibroblas23 (FGF23) serta beberapa molekul dalam superfamili SLC (Tabel 1). Di antara molekul-molekul ini, kami fokus pada SLC37A2 dimana mRNA meningkat sekitar 3,1 kali pada AoSMC yang dikultur dengan 2,6 mM P selama 12 hari dibandingkan dengan AoSMC yang tidak dikultur dengan 2,6 mM P. SLC37A2 telah dilaporkan terkait dengan regulasi P, tetapi fungsi detailnya tidak diketahui efeknya. peradangan pada ekspresi SLC37A2.Kalsifikasi pembuluh darahtelah dilaporkan dipicu oleh peradangan jadi kami memeriksa apakah mRNA SLC37A2 dipengaruhi oleh respons inflamasi. Pada 24 jam setelah pengobatan LPS, IL-6 meningkat secara signifikan dibandingkan dengan AoSMC yang tidak diobati dengan LPS (Gbr. 2A). Hasil ini juga terlihat 72 jam setelah pengobatan LPS. Tidak ada perbedaan yang signifikan antar kelompok dalam ekspresi SLC37A2mRNA (Gambar 2B).

KLIK DI SINI UNTUK MENDAPATKAN EKSTRAK CISTANCHE ORGANIK ALAMI DENGAN 25% ECHINACOSIDE DAN 9% ACTEOSIDE UNTUK FUNGSI GINJAL

Layanan Pendukung Wecistanche-Ekspor cistanche terbesar di Cina:

Surel:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Telp:+86 15292862950

Belanja Untuk Detail Spesifikasi Lebih Lanjut:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-toko

Ekspresi SLC37A2 dalam AoSMC terkalsifikasi yang diinduksi fosfat. Untuk menentukan apakah SLC37A2 terlibat dalam kalsifikasi, kami memeriksa ekspresi mRNA SLC37A2 pada AoSMC non-kalsifikasi dan kalsifikasi (Gbr.3). Kalsifikasi diamati pada AoSMC yang dikultur dengan 2,6 mM P selama 6 hari, dan kalsifikasi lebih lanjut diamati pada AoSMC yang dikultur dengan 2,6 mM P selama 12 hari (Gbr. 3A). Runx2 mRNA meningkat secara signifikan pada AoSMC yang terkalsifikasi dibandingkan dengan AoSMC yang tidak terkalsifikasi (Gbr. 3B). SLC37A2 mRNA secara signifikan mulai meningkat pada hari ke 3 pada AoSMC yang terkalsifikasi, dan pada hari ke 9, AoSMC yang terkalsifikasi meningkat secara signifikan sekitar dua kali lipat dibandingkan dengan AoSMC yang tidak terkalsifikasi (Gbr. 3B). .3C). Ekspresi protein SLC37A2 meningkat secara signifikan sekitar dua kali lipat pada hari ke 6 pada AoSMC yang terkalsifikasi dibandingkan dengan AoSMC yang tidak terkalsifikasi (Gbr. 3D).

Ekspresi SLC37A2 pada tikus model CKD.

Untuk mengungkap apakah SLC37A2 terlibat dalam kalsifikasi vaskular in vivo, kami memeriksa ekspresi mRNA SLC37A2 pada pembuluh darah tikus CKD yang diinduksi adenin. Tikus CKD yang diinduksi adenin dibuat sesuai dengan protokol yang ditunjukkan pada Gambar. 4A. Tabel 2 menunjukkan data berat badan dan biokimia pada hari kurban. Berat badan dariCKD yang diinduksi adenintikus secara signifikan lebih rendah dibandingkan dengan tikus non-CKD. Dibandingkan dengan kelompok non-CKD, kelompok CKD memiliki kadar P dan Cr plasma yang lebih tinggi, Calevel plasma yang lebih rendah, dan ekskresi P, Ca, dan Cr urin selama 24-jam. Lebih lanjut, hasil ini lebih menonjol pada kelompok CKD-HP, seperti yang terlihat pada penelitian sebelumnya.37,39) Dengan demikian, fungsi ginjal menurun pada kelompok CKD, khususnya pada kelompok CKD-HP. Kami memeriksa ekspresi mRNA di pembuluh aorta tikus CKD (Gbr. 4). Meskipun tidak ada perbedaan signifikan dalam ekspresi Runx2 mRNA, sebuah faktor transkripsi yang bergerak pada awal mekanisme kalsifikasi vaskular, ekspresi mRNA osteopontin antar kelompok (Gambar 4B) meningkat secara signifikan pada kelompok CKD-HP dibandingkan dengan kelompok non- kelompok CKD danGrup CKD-LP(Gambar 4C). Ekspresi mRNA SLC37A2 juga meningkat secara signifikan pada kelompok CK D-HP dibandingkan dengan kelompok non-CKD dan kelompok CKD-LP (Gambar 4D). Karena terdapat perbedaan individu yang besar pada tikus-tikus ini, kami memeriksa korelasi antara osteopontin dan mRNA SLC37A2 dan menemukan korelasi yang signifikan antara molekul-molekul ini (Gbr. 4E). Pemeriksaan histologis aorta torakoabdominal menunjukkan kalsifikasi medial hanya pada aorta kelompok CKD-HP (Gambar 5A). Untuk memeriksa situs ekspresi SLC37A2 pada aorta, kami melakukan immunostaining pada aorta CKD-HPrats. SLC37A2 sangat diekspresikan di area dimanakalsifikasi pembuluh darahterjadi (Gbr. 5B).

Gambar 1. Peta Panas gen yang diekspresikan secara berbeda antara AoSMC yang tidak dikultur dengan 2,6 mM P dan AoSMC yang dikultur dengan 2,6 mM P. Merah mewakili gen dengan tingkat sinyal tinggi, dan hijau mewakili gen dengan tingkat sinyal rendah. sel otot polos aorta AOSMC. Lihat gambarnya di versi online.

Diskusi

Kami menyelidiki kandidat molekul terkait P yang terlibat dalam kalsifikasi pembuluh darah. Hasil kami menunjukkan bahwa SLC37A2 adalah salah satu molekul yang meningkatkalsifikasi pembuluh darahsecara in vitro dan in vivo.

Keluarga SLC37 termasuk dalam superfamili SLC dan mencakup protein: SLC37A 1-440) Keluarga SLC37 mengandung protein transmembran pada membran retikulum endoplasma dan memiliki urutan homolog dengan antiporter organofosfatfosfat bakteri.(41) SLC37A4 lebih dikenal sebagaiglukosa6-pengangkut fosfat.(2-44 Namun, hanya ada sedikit laporan tentang SLC37A2, dan detail tentang fungsinya tidak sepenuhnya dipahami. SLC37A2, juga dikenal sebagai SPX2, banyak diekspresikan dalam makrofag murine, limpa, timus, dan jaringan adiposa putih (WAT ) model tikus yang gemuk secara genetis dan sel mirip osteoklas yang berasal dari sel Raw264.7.(45.6) Protein SLC37A2 mengangkut pertukaran glukosa-6-fosfat/fosfatdan pertukaran fosfat/fosfat.(4) Baru-baru ini, laporan telah menunjukkan hubungan antara SLC37A2 dengan penyakit hewan.(47-49) Penyebab cacat SLC37A2osteopati kraniomandibular(CMO), penyakit tulang proliferatif yang sembuh sendiri, pada ras terrier. (47) Pada sapi perah, mutasi homozigot SLC37A2 bertanggung jawab atas kematian embrio. (8.9) Selain itu. SLC37A2 telah dianggap sebagai target gen target vitamin D. (jadi) Potensi gen target reseptor progesteron fosfor-Ser294 dalam perkembangan kanker payudara juga telah dipertimbangkan (1) Telah dilaporkan bahwa peradangan dapat menyebabkan dan memperburuk kalsifikasi pembuluh darah. (2s26) Selanjutnya. SLC37A2 banyak diekspresikan dalam makrofag dan WAT yang dipengaruhi oleh infiltrasi makrofag. (s) Oleh karena itu. kami menganggap bahwa SLC37A2 mungkin merupakan molekul yang diekspresikan selama peradangan. Namun, temuan kami menunjukkan tidak ada peningkatan ekspresi SLC37A2 pada AoSMC yang terkena respon inflamasi, molekul ini tampaknya tidak terpengaruh langsung oleh stimulasi inflamasi. SLC37A2 mungkin terlibat dalam kalsifikasi pembuluh darah melalui mekanisme selain peradangan.

Telah dilaporkan bahwa SLC37A2 bertindak sebagai P-linkedAnti-Porter. (41) Selain itu, SLC37A2 dilaporkan menjadi gen target untuk vitamin D, dan gen SLC37A2 mengandung situs pengikatan reseptor vitamin utama (ss2) Perubahan yang berkorelasi secara sistematis pada ekspresi gen SLC37A2 dan bentuk vitamin D yang bersirkulasi. telah terlihat pada sel mononuklear darah tepi manusia. (50)Reseptor vitamin D berikatan dengan 1a, 25-dihidroksi vitamin D, yang merupakan metabolit vitamin D, dan mengatur ekspresi gen. lo, 25dihidroksivitamin D, berfungsi dalam penyerapan Ca dan P di usus, mobilisasi Ca di tulang, dan reabsorpsi Kain di ginjal. (3) Terdapat laporan bahwa pada tikus model CKD yang diinduksi adenin, serum la, 25-dihidroksi vitamin D, secara signifikan lebih tinggi pada tikus dengan asupan makanan tinggi, dengan kalsifikasi vaskular lanjut, dibandingkan dengan tikus dengan asupan makanan rendah -p asupan diet.39) SLC37A2 mungkin terkait dengan regulasi P melalui vitamin D. Penelitian lebih lanjut diperlukan untuk memperjelas bahwa vitamin D mempengaruhi ekspresi SLC37A2 in vitro dan Vivo.

Mekanisme kalsifikasi pembuluh darah telah terbukti mirip dengan mekanisme pembentukan tulang. Defisiensi SLC37A2 yang disebabkan oleh CMO secara klinis sebanding dengan hiperostosis kortikal infantil pada manusia, yang juga dikenal sebagai penyakit Caffey.7 Selain itu terdapat laporan bahwa SLC37A2 diekspresikan dalam sumsum tulang dan osteoklas.o Hytone dkk.(7 berhipotesis bahwa disfungsi sel SLC37A2 akan menyebabkan ketidakseimbangan fungsi pembentukan tulang osteoblastik dan osteoklastik, sehingga mengakibatkan hiperostosis.

Runx2 adalah faktor transkripsi penting untuk kalsifikasi vaskular. Dilaporkan juga bahwa Runx2 adalah faktor transkripsi diferensiasi osteoblas yang diekspresikan dalam pengembangan sel epitel payudara. (s435) Runx2 tampaknya diperlukan untuk regulasi gen target progesteron fosfor-Ser294, yang berhubungan dengan perkembangan kanker payudara. SLC37A2 dianggap sebagai kandidat gen target reseptor progesteron fosfor-Ser294. (s1)Oleh karena itu, Runx2 dianggap dapat mengatur SLC37A2Dalam penelitian ini, ekspresi mRNA SLC37A2 di aorta tikus CkD berkorelasi dengan mRNA osteopontin, yang menargetkan gen Runx2.