Studi Proteomik Kuantitatif Mengungkap Jalur Fibrinogen pada Penyakit Hati Polikistik Ⅲ

4. Diskusi

Penyakit hati polikistik(PLD) umumnya merupakan manifestasi ekstrarenal yang berhubungan dengan autosomal dominanpenyakit ginjal polikistik(ADPKD). PLD ditandai dengan pelebaran progresif saluran empedu dan perkembangan beberapa kista, yang menempati setidaknya setengah volume parenkim hati. Beberapa strategi terapi saat ini didasarkan pada prosedur bedah dan farmakologis untuk memperbaiki gejala penyakit. Oleh karena itu, pengobatan PLD sejauh ini tidak efektif, dan satu-satunya pilihan kuratif adalah transplantasi hati.45]. Hal ini terutama karena mekanisme molekuler intrinsik utama dari sistogenesis masih belum diketahui. Pendekatan utama difokuskan pada jalur pensinyalan cAMP dan analog somatostatin, dan beberapa target baru (misalnya,histon deasetilase 6,Cdc25A fosfatase, PPAR-, dan matriks metaloprotease) telah dievaluasi dalam studi praklinis, namun perlu diuji secara klinis [8]. Jadi, minat yang muncul dalam memahami jalur molekuler dan mengembangkan strategi terapi baru semakin meningkat.2,8]. Tujuan dari penelitian SWATH-MS saat ini dan yang baru ditandai dengan perubahan proteomik pada hati polikistik dan untuk memberikan wawasan baru dan target terapi untuk PLD.

Klik cistanche herba untuk penyakit ginjal

Dalam penelitian sebelumnya, kami telah mengidentifikasi dalam model ortologis ADPKD (Pkd1cond/cond; Tam-Cre) sebuah jendela perkembangan untuk sistogenesis ginjal, menunjukkan bahwa waktu kejadian sekunder dapat mempengaruhi tingkat keparahan penyakit ginjal kistik. Dengan menggunakan strategi yang sama, kami menyelidiki apakah periode perkembangan ginjal ini berhubungan dengan periode perkembangan hati yang serupa. Menariknya, kami mengamati bahwa fenotip hati kistik tidak mengikuti waktu yang sama, menunjukkan bahwa ginjal dan hati mungkin memiliki mekanisme berbeda dalam menjalani sistogenesis. Penelitian lebih lanjut harus difokuskan pada mengidentifikasi mekanisme penyakit yang umum dan berbeda pada kedua organ dan mengidentifikasi jendela perkembangan hati yang tidak diketahui untuk sistogenesis. Untuk analisis lebih lanjut, kami menggunakan pendekatan proteomik kuantitatif generasi berikutnya SWATH-MS untuk melakukan analisis proteom diferensial penyakit hati kistik pada fenotip PLD ringan dan lebih parah dalam jendela perkembangan ginjal yang sama. Data kami menunjukkan bahwa pada stadium lanjut perkembangan penyakit, jumlah jalur yang dideregulasi meningkat, mungkin karena efek sekunder dari penyakit tersebut. Dengan cara yang sama, hasil ini memperkuat gagasan bahwa pertumbuhan kista terjadi dalam dua tahap besar: inisiasi kista dan perkembangan kista [46]. Menariknya, kedua analisis proteom dari status kistik ringan (kelompok p14) dan berat (kelompok p12) mengidentifikasi kompleks protein fibrinolisis yang berhubungan langsung dengan penyakit kistik hati. Pada tahap penyakit yang lebih ringan, kami mengidentifikasi ANXA2 sebagai salah satu protein yang menarik untuk divalidasi sebagai target terapi potensial untuk PLD. ANXA2 adalah protein pengikat membran yang diatur kalsium yang diproduksi oleh berbagai jenis sel, termasuk sel epitel, dendritik, trofoblas, dan tumor, serta monosit dan makrofag. Peran utamanya adalah untuk mempertahankan aktivitas proteolitik permukaan sel, tetapi juga memenuhi berbagai fungsi intraseluler, termasuk eksositosis, endositosis, perbaikan membran [47] dan pemeliharaan sambungan antar sel yang melekat [48]. Berbagai fungsinya berkontribusi terhadap fibrinolisis, pengaturan peradangan dan aktivasi sistem kekebalan tubuh, serta cedera dan perbaikan jaringan; akibatnya, disfungsi ANXA2 telah terlibat dalam berbagai penyakit pada manusia, misalnya, remodeling matriks ekstraseluler dan fibrosis hati [49,50], yang merupakan ciri umum dalam perkembangan penyakit PLD [8]. Menariknya, pada penyakit hati stadium parah, analisis proteom kami menemukan sejumlah protein berbeda yang terkait dengan kompleks fibrinogen. Selama cedera jaringan dan pembuluh darah, fibrinogen diubah secara enzimatis oleh trombin menjadi fibrin, dan selama fibrinolisis, fibrin didegradasi oleh enzim utama plasmin (bentuk aktif plasminogen). Fibrinogen berhubungan dengan MAPK [51,52] dan integrin [53], dua jalur yang telah terbukti efektif sebagai terapi potensial untuk ADPKD dalam studi praklinis [54,55]. Bahkan model hewan yang salah satu fibrinogennya diekspresikan secara berlebihan (FIBA) telah terbukti menderita penyakit kistik [56]. Selain itu, peningkatan aktivitas kelompok fibrinogen pada PLD menawarkan perspektif baru untuk mengobati penyakit ini dibandingkan dengan obat eksperimental saat ini [57]. Akibatnya, penurunan kelompok ini dapat mendukung mekanisme kerja obat baru yang mana protein keluarga fibrinogen akan menjadi target terapeutik. Contoh yang lebih baik adalah blokade ERR (estrogen-related receptor), sebuah reseptor nuklir yatim piatu [58,59], yang memodulasi kadar fibrinogen dalam keadaan hipofibrinogenemia yang disebabkan oleh obesitas, diabetes mellitus tipe 2, cedera hati, dan alkohol yang disebabkan oleh pola makan. stres oksidatif yang diinduksi [60,61]. Secara khusus, agonis terbalik, seperti GSK5182 (CAS: 877387-37-6) [60–66] dan DN200434 [67,68], akan menawarkan tindakan bermanfaat melalui penurunan kadar fibrinogen.

Singkatnya, kami mengidentifikasi beberapa target dan jalur baru yang terlibat dalam fisiopatologi PLD dengan teknologi proteomik SWATH-MS kuantitatif. Kami menekankan peluang terapi baru yang disajikan oleh fibrinogen dan fibrinolisis (dan protein terkait lainnya yang teridentifikasi), terutama karena fakta bahwa semua validasi dengan perbedaan signifikan yang dilakukan terkait dengan kompleks fibrinogen. Namun demikian, ada potensi untuk mengkonfirmasi hal ini dalam studi praklinis di masa depan serta studi yang lebih fungsional untuk mengkarakterisasi peran sebenarnya dari kandidat target kami di PLD. Kesimpulannya, penelitian ini telah menciptakan mekanisme dan peluang baru untuk penelitian fisiopatologi PLD di masa depan, yang mengarah pada kemungkinan pendekatan terapi baru untuk penyakit ini.

5. Ringkasan

Kami melaporkan studi kuantitatif proteomik baru berdasarkan teknologi SWATH-MS yang membandingkan proteom hati tipe liar dan polikistik. Beberapa jalur dan target baru telah diidentifikasi, memperluas pengetahuan tentang mekanisme molekuler di bidang PLD dan menyoroti kompleks fibrinogen sebagai target terapi baru.

Bahan Pelengkap: Informasi pendukung berikut dapat diunduh di: https://www.mdpi.com/article/10.3390/biomedicines10020290/s1, Gambar S1: Analisis spektrometri massa DDA kualitatif pada berbagai kelompok penelitian, Gambar S2: TAS (Total Area Sums) plot normalisasi kelompok p14, Gambar S3: Plot normalisasi TAS (Total Area Sums) kelompok p12, Gambar S4: Gambar heatmap analisis klaster protein tanpa pengawasan dengan perbedaan signifikan menurut analisis SWATH-MS, Gambar S5: Tanpa pengawasan analisis klaster peta panas dari semua protein yang terdeteksi oleh SWATH-MS, Gambar S6: PCA tanpa pengawasan dari data SWATH-MS, Gambar S7: Pengayaan GO dan analisis jalur protein yang diatur secara signifikan dalam sistogenesis hepatik masing-masing menurut String dan Reactome, Gambar S8: Penuh peta interaksi protein-protein menurut String, Gambar S9: Plot kotak data SWATH-MS proteomik kuantitatif dari target yang dipilih untuk validasi, Tabel S1: ID Sampel yang dianalisis, distribusi di setiap kelompok dan pengumpulan sampel untuk perolehan rangkaian senapan untuk membangun perpustakaan spektral, Tabel S2: Daftar urutan primer yang digunakan untuk analisis RT-qPCR, Tabel

Kontribusi Penulis:Konseptualisasi, MAG-G. dan AC; metodologi, AC, MV-G., LN-G., AM-V., MdPC-V. dan SBB; analisis formal, AC; sumber daya: MAG-G. dan SBB; kurasi data, AC; penulisan—persiapan draf asli, AC; penulisan—review dan penyuntingan, MAG-G., SBB dan LN-G.; visualisasi, MAG-G. dan AC; pengawasan, MAG-G.; administrasi proyek, MAG-G.; akuisisi pendanaan, MAG-G. Semua penulis telah membaca dan menyetujui versi naskah yang diterbitkan.

Pendanaan: Penelitian ini didanai oleh Instituto de Salud Carlos III dengan dana FIS/FEDER PI15/01467 dan PI18/00378 (kepada MAG-G.) dan oleh penghargaan Xunta de Galicia IN607B 2016/020 (kepada MAG-G.). Dukungan gaji diberikan oleh fellowship predoctoral Xunta de Galicia 2016 kepada AC dan fellowship predoctoral Xunta de Galicia 2017 kepada MV-G.

Referensi

1. Cnossen, WR; Drenth, JPH Penyakit hati polikistik: Gambaran patogenesis, manifestasi klinis dan penatalaksanaan. Yatim Piatu J. Langka Dis. 2014, 9, 1–13. [Ref Silang] [PubMed]

2. Santos-Laso, A.; Izquierdo-Sánchez, L.; Lee-Law, PY; Perugorria, MJ; Marzioni, M.; Marin, JJG; Bujanda, L.; Banales, JM Kemajuan Baru dalam Penyakit Hati Polikistik. Semin. Dis Hati. 2017, 37, 45–55. [Ref Silang] [PubMed]

3. Suwabe, T.; Shukoor, S.; Bendahara, AM; Killian, JM; Raja, BF; Edwards, M.; Senum, SR; Madsen, CD; Chebib, FT; Hogan, MC; dkk. Epidemiologi penyakit ginjal polikistik autosomal dominan di daerah Olmsted. Klinik. Selai. sosial. Nefrol. 2020, 15, 69–79. [Ref Silang] [PubMed]

4. Cordido, A.; Besada-Cerecedo, L.; García-González, MA Dasar Genetik dan Seluler dari Penyakit Ginjal Polikistik Autosomal Dominan—Pertama bagi Dokter. Depan. dokter anak. 2017, 5, 279. [Referensi Silang] [PubMed]

5. Bergmann, C.; Guay-Woodford, LM; Harris, PC; Horie, S.; Peters, DJM; Torres, VE Penyakit ginjal polikistik. Nat. Pendeta Dis. Formal. 2018, 4, 1–24. [Referensi Silang]

6. Cordido, A.; Vizoso-Gonzalez, M.; Garcia-Gonzalez, MA Patofisiologi Molekuler Penyakit Ginjal Polikistik Resesif Autosomal. Int. J.Mol. Sains. 2021, 22, 6523. [Referensi Silang]

7. Van Aerts, RMM; van de Laarschot, LFM; Banales, JM; Drenth, JPH Penatalaksanaan klinis penyakit hati polikistik. J.Hepatol. 2018, 68, 827–837. [Referensi Silang]

8. Perugorria, MJ; Masyuk, TV; Marin, JJ; Marzioni, M.; Bujanda, L.; Larusso, NF; Banales, JM Penyakit hati polikistik: Wawasan tingkat lanjut tentang mekanisme molekuler. Nat. Pendeta Gastroenterol. hepatol. 2014, 11, 750–761. [Referensi Silang]

9. Banales, JM; Masyuk, TV; Gradilon, SA; Masyuk, AI; Madinah, JF; LaRusso, NF Efektor cAMP Epac dan protein kinase a (PKA) terlibat dalam sistogenesis hati pada model hewan penyakit ginjal polikistik resesif autosomal (ARPKD). Hepatologi 2009, 49, 160–174. [Referensi Silang]

Layanan Pendukung Wecistanche-Ekspor cistanche terbesar di Cina:

Surel:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Telp:+86 15292862950

Belanja Untuk Detail Spesifikasi Lebih Lanjut:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop

DAPATKAN EKSTRAK CISTANCHE ORGANIK ALAMI DENGAN 25% ECHINACOSIDE DAN 9% ACTEOSIDE UNTUK INFEKSI GINJAL