Ekstrak Etanol Daun Mimba (Azadirachta Indica A. Juss) Terhadap Fungsi Hati Dan Ginjal Tikus

{0}}

pengantar

Perkembangan obat-obatan dari bahan alam menjadi perhatian dunia saat ini. produk alam memiliki struktur kimia yang unik, menghasilkan keragaman aktivitas biologis, dan memiliki sifat mirip obat [1]. plus e praktek pengobatan menggunakan bahan alam terjadi sejak zaman prasejarah dalam mencegah dan mengobati berbagai penyakit. Produk alam menawarkan banyak keuntungan dalam hal efisiensi dan selektivitas target molekul sehingga dapat digunakan berulang kali untuk memasok kebutuhan obat-obatan yang mendesak secara efektif [2]. Produk alam mengandung senyawa aktif dengan implantasi [8, 9], antihiperglikemik, antiulcer, antijamur, antibakteri, antiinflamasi, imunomodulator, antimutagenik, antikanker, antimalaria, antivirus, antioksidan [10-12], antifertilitas [13, 14], dan kontrasepsi [9, 11]. Berbagai bagian tanaman mimba telah berhasil diisolasi, mengandung lebih dari 140 senyawa kimia [10], dan telah digunakan sebagai obat herbal selama ribuan tahun [14]. Mimba mengandung berbagai senyawa primer termasuk turunan lemak, karbohidrat, dan protein serta senyawa sekunder seperti flavonoid, steroid, saponin, terpenoid, alkaloid, glikosida, dan tanin. Tanaman Mimba diminati di seluruh dunia karena khasiatnya tanpa menunjukkan efek samping. plus e penggunaan tanaman mimba secara tradisional cukup aman, dan lebih dari 75 persen pengobatan tradisional menggunakan ekstrak daun mimba. ditambah e riwayat penggunaannya, dari laporan yang ada, tidak menunjukkan adanya efek samping dari daun mimba. Namun, evaluasi keamanan yang komprehensif dari penggunaan formulasi daun mimba belum pernah dilakukan [11].

CISTANCHE AKAN MENINGKATKAN FUNGSI GINJAL/GINjal

Studi sebelumnya melaporkan bahwa ekstrak daun mimba memiliki efek toksik pada hati danginjal [4, 11]; Namun, laporan lain menunjukkan bahwa ekstrak daun mimba dapat melindungi hati danginjaldari kerusakan [16-18]. Di Kabupaten Aceh Besar, Provinsi Aceh, Indonesia, masyarakat setempat telah menggunakan daun mimba sebagai sayuran dan digunakan untuk mencegah kehamilan tanpa mengetahui efek sampingnya. plus e keamanan daun mimba sampai saat ini masih belum jelas. Sampai saat ini, sepengetahuan kami, masih terbatas penelitian yang mengevaluasi efek ekstrak etanol daun mimba pada hati danfungsi ginjal. Dalam penelitian ini, tujuannya adalah untuk menyelidiki pengaruh pemberian ekstrak etanol daun mimba pada hati danfungsi ginjalmelalui pemeriksaan konsentrasi AST, ALT, urea, dan kreatinin dan histopatologi hati danginjalpada tikus jantan.

Kata kunci:Fungsi ginjal; Jaringan Ginjal; gagal ginjal; Penyakit ginjal; ginjal

Bahan dan metode

Koleksi Sampel Daun Mimba.Daun mimba dikumpulkan dari Desa Kajhu, Kabupaten Aceh Besar, Provinsi Aceh, Indonesia, pada September 2019. Identifikasi daun mimba dilakukan di Bogoriense Herbarium, Pusat Penelitian Biologi, Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI), Bogor, Indonesia (1454). /IPH.1.01/If.07/VII/2019), dan diindikasikan sebagai Azadirachta indica A. Juss.Persiapan Ekstrak Etanol Daun Mimba.Daun mimba segar dikumpulkan, dicuci, dikeringkan, dan dihaluskan untuk menghasilkan bubuk kasar. Selanjutnya serbuk kasar dimaserasi dengan etanol 70 persen selama 7 hari. ditambah en, filtrat diuapkan dengan menggunakan rotary evaporator pada 50 derajat untuk menghasilkan ekstrak kental.Eksperimen Hewan.Hewan coba adalah 24 ekor tikus Wistar jantan dengan bobot badan 150–25{0 g. Tikus diaklimatisasi selama 7 hari dan dibagi secara acak menjadi empat kelompok (T0, T1, T2, dan T3) karena masing-masing kelompok berisi 6 ekor tikus. T0 adalah kelompok kontrol tanpa perlakuan dan T1, T2, dan T3 adalah kelompok perlakuan yang

memberikan ekstrak etanol daun mimba masing-masing dengan bobot 100, 200, dan 300 mg/kg berat badan. ekstrak diberikan secara oral menggunakan tabung lambung selama 48 hari, dan sampel darah diambil pada hari ke-49 untuk menentukan konsentrasi AST, ALT, urea, dan kreatinin, kemudian hati danginjaljaringan dikumpulkan untuk mengevaluasi histopatologi. Selama penelitian, tikus diberi pakan standar dan air ad libitum.

Analisis Biokimia.Sampel darah (2-3 ml) diambil dari jantung menggunakan jarum suntik steril. plus en, darah dipindahkan ke tabung Eppendorf dan dibiarkan pada suhu kamar (30 derajat) selama 10 menit. Darah disentrifugasi selama 10 menit dengan kecepatan 3000 rpm. ditambah e serum dipisahkan dan disimpan dalam lemari es (0 20 derajat ). Selanjutnya AST, ALT, ureum, dan kreatinin darah diperiksa menggunakan chemistry analyzer (Rayto RT-1904C). ditambah e prosedur penentuan konsentrasi AST, ALT, urea dan kreatinin dilakukan sesuai dengan protokol pabrik.

Pemeriksaan Histopatologi. The hati danginjaltikus difiksasi dalam larutan formalin buffer 10 persen netral selama 24 jam, didehidrasi dalam seri alkohol, dan dibersihkan dalam larutan xylol diikuti dengan penanaman pada blok parafin. Jaringan yang tertanam dalam blok parafin dipotong menggunakan mikrotom putar setebal 4 m, dipasang pada slide kaca, diwarnai dengan hematoxylin dan eosin, dan diperiksa di bawah mikroskop cahaya pada perbesaran 10 × 10.Analisis statistik.Analisis data menggunakan analisis varians (one-way ANOVA) dilanjutkan dengan uji posthoc Duncan menggunakan SPSS 24. Nilai p<0.05 was="" considered="" statistically="">

CISTANCHE AKAN MENINGKATKAN NYERI GINJAL / GINJAL

Hasil dan Diskusi

6e Konsentrasi AST dan ALT. ditambah e konsentrasi AST T0, T1, T2, dan T3 adalah 290.9 ± 202,5 U/L, 277,2 ± 167,2 U/L, 421,3 ± 2{ {28}}1,5 U/L, dan 366,3 ± 276,9 U/L, masing-masing. ditambah konsentrasi AST pada kelompok T2 dan T3 cenderung meningkat dibandingkan dengan T{{30}} (kelompok kontrol). Namun, konsentrasi AST pada kelompok T1, T2, dan T3 tidak menunjukkan perbedaan yang signifikan dari kelompok T0 (p > 0,05). ditambah e konsentrasi ALT T0, T1, T2, dan T3 masing-masing adalah 108,6 ± 23,1 U/ L, 116,3 ± 51,9 U/L, 105,9 ± 15,2 U/L, dan 95,9 ± 36,2 U/L. plus e konsentrasi ALT pada kelompok T2 dan T3 cenderung menurun dibandingkan dengan T0 (kelompok kontrol).

Namun, konsentrasi ALT pada kelompok T1, T2, dan T3 tidak menunjukkan perbedaan yang signifikan dari kelompok T0 (p > 0.05) (Tabel 1). Enzim AST merupakan salah satu penanda yang digunakan untuk menilai adanya kerusakan hati. plus adalah enzim yang berperan dalam proses glukoneogenesis untuk mengkatalisis pengubahan gugus amino asam aspartat menjadi asam ketoglutarat untuk menghasilkan asam oksaloasetat. Enzim AST ditemukan dalam isoenzim sitosol dan mitokondria hati, otot rangka, otot jantung,ginjal,otak, pankreas, paru-paru, leukosit, dan sel darah merah. Namun, enzim AST ini kurang sensitif dan spesifik untuk menilai kerusakan hati [19]. Meskipun tidak terdapat perbedaan yang bermakna konsentrasi AST pada kelompok perlakuan (T1, T2, dan T3) dibandingkan dengan kelompok kontrol (T0 namun konsentrasi AST cenderung meningkat pada kelompok T2 dan T3 dibandingkan dengan T2 dan T3. 0 (grup kontrol). ditambah e peningkatan mungkin terlambat karena senyawa aktif ekstrak daun mimba seperti flavonoid, tanin, saponin, alkaloid, dan steroid, tetapi senyawa aktif ekstrak etanol daun mimba tidak diidentifikasi untuk meningkatkan AST. Peningkatan enzim AST belum tentu diikuti dengan kerusakan hati karena enzim ini tidak hanya spesifik di hati tetapi juga di jaringan tubuh lainnya.

Penelitian ini juga menemukan enzim ALT cenderung menurun pada kelompok perlakuan (T1, T2, dan T3) dibandingkan dengan kelompok kontrol (T0), namun penurunan enzim ALT tidak signifikan secara statistik. Enzim ALT merupakan prediktor kerusakan hati yang lebih baik daripada enzim AST karena enzim sitosol ini ditemukan dalam konsentrasi tertinggi di hati dan lebih spesifik dalam menilai kerusakan fungsi hati [20]. plus adalah enzim yang berperan dalam glukoneogenesis dengan mengkatalisis transfer gugus amino dari alanin ke asam ketoglutarat untuk menghasilkan asam piruvat [19]. ALT terdiri dari 496 asam amino dan ditemukan di sitosol hepatosit. Aktivitas enzim ALT di hati sekitar 3000 kali aktivitas serum, sehingga pada kasus kerusakan atau kematian hepatoseluler, ALT yang dilepaskan dari sel-sel hati yang rusak akan meningkatkan aktivitas terukur enzim ALT dalam serum.

CISTANCHE AKAN MENINGKATKAN GINJAL / RENAL DIALYSIS

Muhammad dkk. [22] menemukan bahwa ekstrak etanol daun mimba menyebabkan penurunan enzim AST dan ALT tikus. Ekstrak etanol daun mimba tidak memiliki efek samping pada hati, bahkan berfungsi sebagai pelindung hati. Studi yang dilakukan oleh Haque et al. [23] juga menemukan bahwa ekstrak daun mimba tidak menyebabkan perubahan aktivitas serum normal enzim AST dan ALT pada tikus jantan. Bhagra dkk. [24] melaporkan bahwa pemberian ekstrak daun mimba 500 mg/kg berat badan pada tikus yang diinduksi parasetamol menurunkan kerusakan hati, seperti yang ditunjukkan oleh konsentrasi AST dan ALT normal dan pengamatan histopatologi. Hasil penelitian yang dilakukan oleh Dkhil et al. [17] menunjukkan efek perlindungan dari ekstrak metanol daun mimba dengan dosis 500 mg/kg berat badan ke hati pada tikus yang diinduksi cisplatin. Mallick dkk. [25] melaporkan bahwa ekstrak metanol daun mimba tidak memiliki efek toksik pada hati tikus bahkan pada dosis tinggi. Kandungan antioksidan ekstrak daun mimba memberikan efek hepatoprotektif. Penelitian yang dilakukan oleh Hartono dan Prabowo [26] menemukan bahwa pemberian ekstrak etanol daun mimba pada tikus dengan diinduksi parasetamol dosis tinggi selama sepuluh hari juga dapat menurunkan aktivitas enzim ALT pada hewan percobaan. Penurunan enzim ALT ini disebabkan adanya senyawa aktif ekstrak daun mimba yang berfungsi sebagai hepatoprotektor dengan menghambat kerusakan oksidatif hati. Antioksidan dapat mengurangi pembentukan radikal bebas dengan cara direct scavenging yaitu mengurangi pembentukan reactive oxygen species (ROS) yang memiliki efek toksik pada membran fosfolipid dan menyebabkan spektrum kerusakan sel yang luas. Antioksidan dapat mengurangi stres oksidatif pada sel hati, dan aktivitas enzim ALT dalam darah akan menurun.

Konsentrasi Urea dan Kreatinin.Konsentrasi urea T{{{0}}, T1, T2, dan T3 adalah 51,1 ± 7,0 mg/dl, 55,6 ± 8,5 mg/dl, 44,5 ± 5,4 mg/dl, dan 48,4 ± 3,4 mg/dl, masing-masing. Konsentrasi urea pada kelompok T1, T2, dan T3 menunjukkan perbedaan bermakna dari kelompok T0 (p < 0.{{30}}5).="" konsentrasi="" kreatinin="" t0,="" t1,="" t2,="" dan="" t3="" adalah="" 0.22="" ±="" 0.{{40}}4="" mg/dl,="" {{44="" }}.24="" ±="" 0.03="" mg/dl,="" 0,21="" ±="" 0,03="" mg/dl,="" dan="" 0,25="" ±="" 0,03="" mg/dl.="" konsentrasi="" kreatinin="" pada="" kelompok="" t1,="" t2,="" dan="" t3="" tidak="" berbeda="" nyata="" dengan="" kelompok="" t0="" (p=""> 0,05) (Gambar 1). Ituginjalmemiliki peran penting dalam ekskresi produk limbah dan racun seperti urea, kreatinin, dan asam urat; itu juga memiliki fungsi dalam pengaturan volume cairan ekstraseluler, osmolalitas, konsentrasi elektrolit, dan produksi hormon. ditambah e unit fungsional dariginjaladalah nefron yang terdiri dari glomerulus, tubulus proksimal, tubulus distal, dan duktus pengumpul. Hasil plus e menunjukkan bahwa terdapat perbedaan yang bermakna konsentrasi ureum pada kelompok perlakuan (T1, T2, dan T3) dibandingkan dengan kelompok kontrol (T0), dan penurunan konsentrasi ureum pada kelompok T2 dan T3 dibandingkan ke T0 (grup kontrol). Urea adalah senyawa yang mengandung nitrogen yang terbentuk di hati sebagai produk akhir dari metabolisme protein dan siklus urea. Sekitar 85 persen area diekskresikan melaluiginjal, dan sisanya diekskresikan melalui saluran pencernaan. Urea serum meningkat pada kondisi pembersihan ginjal seperti pada akut dan kronisgagal ginjal. Urea juga dapat meningkat pada kondisi lain seperti perdarahan saluran cerna bagian atas, dehidrasi, proses katabolik, dan diet tinggi protein.Pada penelitian ini terjadi penurunan konsentrasi urea pada kelompok perlakuan dibandingkan dengan kelompok kontrol. menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun mimba tidak mempengaruhifungsi ginjaldari tikus jantan. Menurut Guyton dan Hall [28], total urea dalam darah ditentukan oleh protein makanan dan kemampuanginjaluntuk mengeluarkan ureum. Jika ginjal rusak, urea akan menumpuk di dalam darah. Peningkatan urea dalam plasma diindikasikangagal ginjaldalam menjalankan fungsi filtrasinya. ditambah e kondisigagal ginjal, yang ditandai dengan kadar urea plasma yang sangat tinggi, dikenal sebagai uremia.

Urea adalah produk akhir nitrogen yang berasal dari katabolisme protein dan asam amino, diproduksi oleh hati, dan didistribusikan ke semua cairan intraseluler dan ekstraseluler. Dalamginjal, urea disaring keluar dari darah oleh glomeruli dan sebagian direabsorbsi oleh air. Peningkatan urea merupakan indikator bahwa laju filtrasi glomerulus buruk. Peningkatan konsentrasi urea dikaitkan denganpenyakit ginjalatau kegagalan, obstruksi saluran kemih olehginjalbatu, gagal jantung kongestif, dehidrasi, demam, syok, dan perdarahan pada saluran pencernaan.Penelitian ini juga menemukan bahwa tidak terdapat perbedaan yang bermakna pada konsentrasi kreatinin pada kelompok perlakuan (T1, T2, dan T3) dibandingkan dengan kelompok kontrol (T0). menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun mimba tidak menyebabkan kerusakan pada tikusginjal.Kreatinin umumnya digunakan sebagai ukuranfungsi ginjal. Konsentrasi kreatinin tidak hanya dipengaruhi oleh produk massa otot tetapi juga dipengaruhi oleh fungsi otot, komposisi otot, aktivitas, pola makan, dan status kesehatan. Peningkatan konsentrasi kreatinin juga ditemukan pada distrofi otot, anemia, leukemia, dan hipertiroidisme [29]. Kreatinin adalah penanda yang paling umum digunakan untuk menilaifungsi ginjal.konsentrasi kreatinin memberikan indikator kerja glomerulus. Kreatinin adalah produk sampingan dari kreatin fosfat di otot dan diproduksi dengan kecepatan konstan oleh tubuh. Untuk sebagian besar, kreatinin dibersihkan dari darah seluruhnya olehginjal. Peningkatan kreatinin menunjukkan penurunan pembersihan olehginjal. Serum kreatinin adalah penilaian yang lebih akurat darifungsi ginjaldaripada urea [27].

Monim dkk. [16] menemukan bahwa pemberian ekstrak daun mimba dengan dosis 500 mg/kg berat badan selama lima hari pada tikus tidak menyebabkan perubahan konsentrasi ureum dan kreatinin pada tikus. Kepala dkk. [30] juga menemukan bahwa tikus yang diberi ekstrak daun mimba dengan dosis 500 mg/kg berat badan selama 14 hari menyebabkan penurunan konsentrasi ureum dan kreatinin pada tikus yang diinduksi cisplatin selamakerusakan ginjal. Ekstrak etanol daun mimba bertindak sebagai nefroproteksi dalamkerusakan ginjal.Penelitian yang dilakukan oleh Somsak et al. [18] menemukan bahwa ekstrak air daun mimba pada dosis 1000 dan 2000 mg/kg berat badan tidak memiliki efek toksik pada tikus. Ekstrak daun mimba dapat digunakan sebagai kandidat untuk nefroproteksi terhadap kerusakan padaginjal.

Histopatologi Hati dan Ginjal.Pengamatan histopatologi hati pada kelompok kontrol (Gambar 2(a) dan kelompok perlakuan pada dosis 100 mg/kg (Gambar 2(b)), 200 mg/kg (Gambar 2(c)), dan 300 mg/kg (Gambar 2(d)) menunjukkan bahwa hati, vena sentral, dan sel hepatosit tampak normal (Gambar 2)ginjalpengamatan histopatologi pada kelompok kontrol (Gambar 3(a)) dan kelompok perlakuan pada dosis 100 mg/kg (Gambar 3(b)), 200 mg/kg (Gambar 3(c)), dan 300 mg/kg ( Gambar 3(d)) menunjukkan gambaran normal dari glomerulus dan tubulus proksimal dan distal. ditambah tidak ada perubahan histologis padaginjal(Gambar 3).

hati danginjalmerupakan organ yang mempunyai peranan penting dalam metabolisme dan ekskresi obat atau zat lain. Pada penelitian menunjukkan bahwa pemberian ekstrak etanol daun mimba pada dosis 100, 200, dan 300 mg/kg tidak menyebabkan kelainan dan kerusakan pada hati tikus. plus hati pada tikus yang diobati menunjukkan struktur umum hati yang normal dan tampilan normal dari vena sentral dan sel hepatosit. plus e histopatologi hati mengikuti hasil analisis enzim AST dan ALT yang menunjukkan bahwa tidak ada perbedaan yang signifikan antara kelompok kontrol dan perlakuan. Meskipun terdapat peningkatan enzim AST pada kelompok 200 dan 300 mg/kg dibandingkan dengan kelompok kontrol, namun gambaran histopatologi hati tampak normal. Enzim AST tidak spesifik untuk kerusakan hati. AST ditemukan terutama di sel darah merah, otot jantung dan rangka, danginjal. AST kurang sensitif terhadap hati dibandingkan ALT [19].

ItuginjalPengamatan histopatologi setelah pemberian ekstrak etanol daun mimba dengan dosis 100, 200, dan 300 mg/kg menunjukkan tidak ada perbedaan dibandingkan dengan kontrol. Ituginjalpada tikus yang dirawat menunjukkan keadaan umum yang normalstruktur dariginjaldan penampilan normal dari glomerulus dan tubulus. Temuan ini didukung oleh analisis ureum dan kreatinin dalam darah tikus yang menunjukkan tidak ada perbedaan bermakna antara kelompok kontrol dan perlakuan. Urea dan kreatinin adalah parameter biokimia yang merupakan indikator utamafungsi ginjal. Namun, kreatinin adalah penilaian yang lebih akurat darifungsi ginjaldaripada urea [27]. Hal ini sejalan dengan beberapa laporan sebelumnya bahwa ekstrak daun mimba memiliki potensi efek hepatoprotektif dan nefroprotektif [31]. Kusuma dkk. [32] menemukan bahwa ekstrak etanol daun mimba tidak mempengaruhi diameter hepatosit, diameter lobulus hati, dan berat hati pada tikus. Sebaliknya, studi Katsayal et al. [33] menemukan bahwa pemberian ekstrak metanol daun mimba pada dosis 500, 1000, dan 2000 mg/kg menyebabkan kelainan pada hati dan ginjal tikus yang diobati dibandingkan dengan kontrol. Perbedaan hasil ini kemungkinan disebabkan oleh perbedaan dosis ekstrak daun mimba. Ituhasil penelitian ini menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun mimba dari Kajhu tidak menyebabkan kerusakan pada hati danginjaldari tikus jantan. Kelebihannya adalah karena adanya senyawa aktif dari ekstrak etanol daun mimba yang bersifat antioksidan. Penelitian sebelumnya menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun mimba dari Kajhu mengandung flavonoid, alkaloid, tanin, saponin, dan steroid [34]. Ditambah lagi senyawa aktif yang berperan sebagai antioksidan adalah flavonoid. ditambah ekstrak etanol daun mimba memiliki aktivitas antioksidan yang kuat [35]. ditambah kami, ekstrak etanol daun mimba dari Kajhu aman untuk hati dan ginjal tikus jantan.

CISTANCHE AKAN MENINGKATKAN GAGAL GINJAL/GINJAL

Kesimpulan

Ekstrak etanol daun mimba tidak menyebabkan kerusakan pada hati danginjaltikus jantan yang ditunjukkan dengan analisis kadar AST, enzim ALT, ureum, dan kreatinin serta pemeriksaan histopatologi hati danginjal. Namun, penyelidikan lebih lanjut diperlukan untuk evaluasi keamanan yang komprehensif dari ekstrak daun mimba pada berbagai dosis untuk mendapatkan gambaran yang jelas tentang keamanan daun mimba untuk pengobatan.