Rezim Vaksinasi Chlamydia Trachomatis multi-komponen Prime-boost Menginduksi Respons Antibodi Dan Sel T Dan Mempercepat Pembersihan Infeksi pada Model Primata Non-manusia

Merupakan prioritas internasional untuk mengembangkan vaksin terhadap penyakit menular seksualInfeksi Chlamydia trachomatisuntuk memerangi penyebaran infeksi global yang berkelanjutan. Ituimunisasi optimalstrategi masih harus sepenuhnya dijelaskan. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengevaluasistrategi imunisasidalam model primata bukan manusia (NHP). Kera Cynomolgus (Macaqua fascicularis) diimunisasi mengikuti multi-komponen yang berbedaimunisasi prime-boostjadwal dan selanjutnya ditantang dengan C. trachomatis SvD di saluran kelamin bagian bawah. Antigen imunisasi termasuk antigen protein rekombinan CTH522 yang diajukan dengan CAF01 atau aluminium hidroksida, antigen DNA MOMP, dan antigen vektor MOMP (HuAd5 MOMP dan MVA MOMP).

Klik Disini Untuk Mendapatkan Herbal Cistanche Untuk MencegahInfeksi Chlamydia trachomatis

Semua konstruksi antigen sangat imunogenik yang meningkatkan respons IgG spesifik C. trachomatis sistemik yang signifikan. Secara khusus, kelompok yang divaksinasi protein CTH522 meningkatkan IgG spesifik yang cepat dan kuat dalam serum. Pemetaan epitop sel B spesifik dalam MOMP menunjukkan bahwa semua kelompok yang divaksinasi, epitop yang dikenali di dekat atau di dalam domain variabel (VD) MOMP, dengan respons VD4 yang konsisten pada semua hewan. Selanjutnya, serum dari semua kelompok yang divaksinasi secara in vitro dapat menetralkan SvD, SvE, dan SvF. Respons antibodi tercermin pada mukosa vagina dan okular, yang menunjukkan tingkat IgG yang dapat dideteksi. Vaksin juga menginduksi respons yang dimediasi sel spesifik C. trachomatis, seperti yang ditunjukkan oleh stimulasi in vitro dan pewarnaan sitokin intraseluler sel mononuklear darah perifer (PBMC). Secara umum, kelompok yang divaksinasi protein (CTH522) membentuk respons sel T CD4 multifungsi, sedangkan kelompok yang divaksinasi DNA dan Vektor juga membentuk respons sel T CD8. Mengikuti tantangan vagina dengan C. trachomatis SvD, beberapa kelompok yang divaksinasi menunjukkanpercepatan pembersihan infeksi, tetapi terutama kelompok DNA, dikuatkan dengan CAF01 adjuvanted CTH522 untuk mencapai aseimbang CD4/CD8Respons sel T dikombinasikan denganRespons IgG, menunjukkanpercepatan pembersihan infeksi.

KATA KUNCI vaksin, infeksi,imunologi, bakteri, limfosit CD4/CD8,Chlamydia trachomatis

Perkenalan

Infeksi Chlamydia trachomatis genital setiap tahun menyebabkan sekitar 131 juta kasus baru di seluruh dunia (1) dan merupakan masalah kesehatan global utama dengan berpotensi menginduksikomplikasi parahseperti panggulpenyakit radang, kehamilan ektopik, Daninfertilitas(2, 3). Antibiotik masih menawarkan pengobatan infeksi C. trachomatis yang efektif. Namun, karena infeksi tidak menunjukkan gejala pada 75 persen kasus,sebagian besar infeksi tidak diobati, dan transmisi tidak terputus (3). Secara umum disepakati bahwa senjata yang paling efektif melawan penyebaran infeksi Chlamydia yang berkelanjutan adalah vaksin profilaksis (4).

Meskipun telah dilakukan penelitian selama beberapa tahun, vaksin belum ada di pasaran. Hal ini sebagian disebabkan oleh gaya hidup bifasik yang kompleks dari C. trachomatis. Siklus hidup bifasik unik C. trachomatis, dengan tahap intraseluler dan ekstraseluler, menantang sistem kekebalan tubuh. Dipercaya bahwa imunitas protektif harus terdiri dari respon imun yang diperantarai sel (CMI), selain antibodi spesifik serotipe (5-13). Selain itu, menghasilkan kekebalan mukosa pada saluran genital menimbulkan tantangan tambahan untuk vaksin.

Dalam penelitian ini, kami menguji berbagai strategi vaksin dalam model infeksi klamidia NHP. Strategi tersebut bertujuan untuk menginduksi antibodi, sel T CD4, dan/atau tanggapan sel T CD8. Selain itu, beberapa vaksin ditujukan untuk menghasilkan respons mukosa. Antigen yang dipilih untuk penelitian ini didasarkan pada Major Outer Membrane Protein. Pertama, konsensus Antigen MOMP (Con E) berdasarkan sekitar 1500 urutan E ompA serovar dihasilkan untuk memberikan cakupan epitop yang tinggi terhadap strain C. trachomatis yang paling lazim (14). Kedua, protein fusi sintetik, CTH522, digunakan. CTH522 adalah rekombinan, versi rekayasa dari MOMP, yang terdiri dari pengulangan imun heterolog dari daerah VD4 dari empat serovar Ct genital (D, E, F, dan G) (11). Strategi di balik protein fusi rekombinan adalah menginduksi respons yang diperkuat terhadap epitop pelindung dan menginduksi perlindungan lintas-serovar (11).

Fitur kunci lain dari percobaan saat ini adalah penilaian paralel CTH522 dalam dua sistem adjuvant yang sangat berbeda (AlOH dan CAF01), dikombinasikan dengan penguat intranasal. Kombinasi ini telah diuji pada tikus dan babi mini di mana ia terbukti sangat imunogenik dengan menginduksi titer tinggi dari antibodi penawar, sel T CD4 plus penghasil IFN-g, dan mempercepat pembersihan infeksi C. trachomatis genital (11-13 , 15). Selain itu, perbandingan ini mencerminkan uji klinis pertama pada manusia baru-baru ini di mana kedua formulasi terbukti imunogenik, dan di mana CAF01 lebih unggul dalam menginduksi antibodi serum penawar dan respons imun yang dimediasi sel Th1 (16). Untuk menginduksi respons imun seluler yang kuat, dan khususnya respons sel T CD8 yang digabungkan dengan respons sel T CD4, sebagian hewan ditingkatkan dengan imunogen CT522/CAF01 setelah dipancing dengan vektor Adeno pAL1112 (HuAd5-MOMP), sebuah Vektor cacar MVA, atau DNA plasmid pcDNA3.1 yang mengantarkan antigen MOMP Con E (14, 17). Ketiga vektor telah terbukti imunogenik dalam NHP, dan baru-baru ini ditunjukkan bahwa strategi imunisasi menggabungkan ketiga vaksin ini dan vaksinasi penguat akhir dengan respons imun superior yang diinduksi oleh antigen protein adjuvan dan secara konsisten meningkatkan pembersihan C. trachomatis intravaginal pada C. trachomatis tikus. model infeksi trachomatis (14).

Dalam penelitian ini, kami menunjukkan bahwa kombinasi yang berbeda dari strategi imunisasi multi-komponen dengan vaksin protein, vaksin DNA, dan vaksin vektor virus rekombinan dalam model primata bukan manusia (NHP), menghasilkan respons imun yang berbeda. Selain itu, kami mengamati bahwa rejimen yang menggunakan DNA priming dan protein (CTH522/ CAF01) mempercepat pembersihan bakteri setelah tantangan genital dengan Chlamydia trachomatis.

Hasil

Semua rezim vaksinasi terbukti aman dan menginduksi respons antibodi sistemik yang signifikan

Sebanyak 30 kera cynomolgus divaksinasi mengikuti rezim vaksinasi penambah utama yang berbeda termasuk vaksin protein, DNA, dan vektor dan rute administrasi yang berbeda, seperti yang ditunjukkan pada Gambar 1 dan Gambar Tambahan 6-10). Semua hewan tetap sehat selama penelitian dan tidak mengembangkan efek samping yang terukur terhadap imunisasi. Selain itu, kami mengamati tidak ada fluktuasi yang signifikan pada berat atau suhu hewan (Gambar Tambahan 1, 2).

Pada titik waktu tertentu setelah imunisasi, serum dikumpulkan dan kadar IgG spesifik CTH522 dalam serum dievaluasi dengan ELISA. Semua 5 kelompok yang divaksinasi membentuk respon serum CTH522 IgG yang signifikan (Gambar 2). Namun, kinetikanya sedikit berbeda pada 5 kelompok yang divaksinasi. Semua hewan dalam kelompok CTH522/AlOH plus IN, CTH522/CAF01, dan CTH522/CAF01 plus IN meningkatkan titer IgG yang signifikan setelah hanya 1 imunisasi intramuskular (IM), dan titer IgG tetap signifikan hingga titik pengambilan sampel terakhir (Gambar 2A- C). Tingkat serum IgG meningkat sedikit lebih lambat pada kelompok DNA plus CTH522 dan vektor plus CTH522, di mana semua hewan masing-masing serokonversi pada minggu ke-8 dan minggu ke-4 (Gambar 2D, E).

Kelompok CTH522/AlOH plus IN, CTH522/CAF01 plus IN, dan CTH522/CAF01 secara signifikan meningkatkan IgG serum setelah vaksin penguat IM ke-3 pada minggu ke-16 (Gambar 2A C). Kelompok DNA plus CTH522 dan vektor plus CTH522 meningkatkan kadar IgG serum secara signifikan setelah penguat IM protein/CTH522/ CAF01 pada minggu ke-20 (Gambar 2D, E). Tidak ada perbedaan signifikan yang terlihat pada respon antibodi serum setelah tiga kali vaksinasi IM dengan CTH522 yang diformulasikan dengan adjuvan CAF01 atau AlOH (Gambar 2A, B), dan imunisasi penguat non-adjuvan intranasal (IN) pada CTH522/AlOH plus IN dan Kelompok CTH522/CAF01 plus IN tidak menginduksi peningkatan titer antibodi IgG serum yang signifikan (Gambar 2A, B).

Kinetika respon IgG serum mencerminkan kinetika/ kadar dalam cairan vagina, menunjukkan bahwa antibodi yang terdeteksi pada permukaan vagina kemungkinan besar berasal dari sirkulasi. Demikian pula, kadar IgG okular juga mengikuti kadar IgG serum dan, seperti yang diamati dalam serum, menunjukkan bahwa penguat IM pada kelompok DNA / vektor meningkatkan titer IgG okular (Gambar Tambahan 3).

Respon antibodi serum diarahkan terhadap domain variabel 1, 3, dan 4 dalam urutan MOMP

Penjelasan lebih lanjut tentang pengenalan epitop spesifik oleh antibodi serum, mengikuti rezim vaksinasi yang berbeda, selanjutnya dievaluasi. Serum dianalisis pada minggu ke 24, yaitu setelah pemberian vaksin penguat intranasal pada kelompok 1 dan 2, dan setelah pemberian vaksin penguat IM pada kelompok DNA dan vektor (kelompok 4 dan 5). Analisis ini dilakukan dengan susunan peptida yang mencakup CTH522, yang terdiri dari 15 mer peptida dengan 14 asam amino yang tumpang tindih.

GAMBAR 1 Desain studi. Gambar menunjukkan kelompok, vaksin dan rute pemberian (intramuskular, IM, atau intranasal, IN) yang digunakan

GAMBAR 2 (A – F) Respons antibodi IgG serum CTH522. Kera Cynomolgus diimunisasi mengikuti rezim penambah utama yang berbeda (n=5 per kelompok) dan serum dikumpulkan setiap minggu kedua. Antibodi IgG CTH522 spesifik dalam serum dievaluasi dengan ELISA dan dinyatakan di sini sebagai titer pada skala log10. Panah abu-abu menunjukkan vaksinasi. Setiap baris mewakili satu hewan. Signifikansi statistik ditunjukkan dengan tanda bintang *p < 0.05 dan **p < 0.01.

Secara umum, peptida yang dikenali terletak di dekat dan di dalam domain variabel (VDs 1,3,4) dari MOMP. Grup CTH522/AlOH bahkan menunjukkan beberapa pengenalan wilayah VD2. Semua hewan membentuk respons yang kuat terhadap wilayah VD4 yang berisi epitop VD4 penetral yang dilestarikan (11). Kelompok DNA menunjukkan pengenalan tersempit dalam VD (Gambar 3), sedangkan kelompok vektor menunjukkan pola pengenalan yang sedikit lebih luas. Kelompok CTH522/CAF01 dan CTH522/AlOH menunjukkan pengenalan paling luas, terutama terhadap SvF dan SvG.

Antibodi serum mampu menetralkan SvD, SvE, SvF secara in vitro

Untuk mengevaluasi kapasitas antibodi yang diinduksi vaksin untuk menghambat infeksi oleh C. trachomatis dari sel targetnya, dilakukan uji netralisasi in vitro. Dengan menggunakan pengujian ini, kami menguji netralisasi SvD, SvE, dan SvF. Serum dari minggu ke 24 digunakan untuk pengujian, dan serum dari kelompok naif digunakan sebagai kontrol. Kelima kelompok yang divaksinasi menunjukkan kapasitas untuk menetralkan ketiga serovar (Gambar 4). Terhadap SvD kelompok CTH522/AlOH plus IN menunjukkan titer netralisasi 50 persen tertinggi, sedangkan terhadap SvE kelompok DNA/CTH522, diikuti oleh kelompok CTH522/AlOH plus IN, menunjukkan titer penetralisasi tertinggi. Meskipun semua kelompok mampu menetralkan SvF, titer netralisasi 50 persen sedikit lebih rendah untuk semua kelompok terhadap serovar ini, dibandingkan dengan SvD dan SvE. Kelompok vektor plus CTH522 menunjukkan titer netralisasi 50 persen terendah dari semua kelompok yang divaksinasi.

Rezim vaksinasi yang berbeda menginduksi profil sel-T yang berbeda

Untuk mengevaluasi respons sel T yang diinduksi vaksinasi, PBMC dikumpulkan selama masa studi dan cryopreserved. PBMC dari minggu 0/baseline dan minggu 22 distimulasi ulang dengan pool peptida (MOMP) dan dievaluasi untuk sitokin intraseluler dengan pewarnaan sitokin intraseluler (ICS) dan sesama sitometri. PBMC diwarnai untuk penanda sel berikut: CD3, CD4, CD8, CD154, CD137, dan sitokin: IFN-g, IL-2, TNF-a, IL-22, IL{{14} }A. Strategi gating ditunjukkan pada Gambar Tambahan 4, 5. Stimulasi PBMC dengan kumpulan peptida MOMP menginduksi respons yang signifikan. Persentase CD154 plus CD4 plus sel T spesifik antigen yang mengekspresikan kombinasi IL2, IFN-g, dan TNF-a meningkat 2 minggu setelah imunisasi terakhir (W22) pada semua kelompok yang divaksinasi (Gambar 5). Sebagian besar sel T ini multifungsi dalam arti bahwa mereka mengekspresikan beberapa sitokin. Persentase sel T CD137 plus CD8 spesifik antigen yang memproduksi sitokin hanya meningkat pada DNA dan Grup Vektor (W22), (Gambar 6, menunjukkan multifungsi CD137 plus CD8 plus sel T). Di dalam

GAMBAR 3 Pemetaan epitop serum pada minggu ke-24. Kera Cynomolgus diimunisasi mengikuti rezim penambah utama yang berbeda (n=5 per kelompok) dan serum dikumpulkan pada minggu ke-24. Tanggapan IgG susunan peptida terhadap CTH522 15mer yang tumpang tindih peptida disajikan sebagai sinyal median untuk setiap kelompok dengan peptida VD1 (oranye), VD2 (hijau), VD3 (biru) dan VD4 dari SvD, E, F dan G (merah) disorot dalam warna.

GAMBAR 4 Netralisasi serum In Vitro C. trachomatis SvD, SvE, dan SvF. Kera Cynomolgus diimunisasi mengikuti rezim penambah utama yang berbeda (n=5 per kelompok) dan serum dikumpulkan setelah menyelesaikan jadwal imunisasi (minggu 24). C. trachomatis SvD, SvE, dan SvF diinkubasi dengan serum dari masing-masing hewan dan kapasitas antibodi serum untuk menghambat infeksi dievaluasi dengan menginkubasi campuran antibodi-bakteri ke dalam sel HaK dan pewarnaan untuk inklusi. Garis hitam menunjukkan SvD, garis abu-abu menunjukkan SvE dan garis putus-putus berwarna abu-abu gelap menunjukkan SvF. Garis merah putus-putus menunjukkan masing-masing titer netralisasi 50 persen timbal balik serovar.

GAMBAR 5 Respons sel T CD4. Analisis multifungsi minggu ke-22. Produksi sitokin oleh CD4 plus sel T diuji oleh ICS. Respons multifungsi setelah stimulasi dengan kumpulan peptida yang tumpang tindih dari MOMP terwakili. Ukuran setiap pai sebanding dengan persentase sel CD154 plus CD4 plus T yang mengekspresikan setidaknya satu sitokin, termasuk IFN-g, TNF-a, dan IL-2, dan proporsi sel yang mengekspresikan IFN-g dan /atau sitokin TNF-a dan/atau IL-2 ditampilkan di setiap pai.

Pembersihan dipercepat yang diinduksi vaksinasi dari infeksi C. trachomatis SvD vagina

Untuk mengevaluasi kemanjuran perlindungan dari tanggapan kekebalan yang diinduksi oleh vaksin, hewan ditantang dengan infeksi vagina dengan 5x107 IFU C. trachomatis SvD. Setelah inokulasi, muatan klamidia vagina ditentukan dengan deteksi PCR dari DNA klamidia pada apusan vagina (Gambar 7). Infeksi dibasmi pada semua hewan pada minggu ke-5 di grup DNA plus CTH522/CAF01 dan grup Vector plus CTH522, di minggu ke-6 di grup CAF01/CTH522 dan di minggu ke-8 di grup CTH522/Alum plus DALAM kelompok (Gambar 7). Pada kelompok kontrol, pada minggu ke-8, 80 persen hewan telah sembuh dari infeksi dan 1 hewan tetap positif PCR pada minggu ke-9. Penguat IN pada kelompok CTH522/CAF01 plus IN tidak meningkatkan perlindungan (Gambar 7). Tes Log-rank (Mantel-Cox), membandingkan semua kelompok menunjukkan nilai P sebesar 0,0994, dan dengan membandingkan masing-masing kelompok secara individual dengan kelompok kontrol, hanya kelompok DNA-CTH522 yang menunjukkan nilai P di bawah 0,05 (P nilai=0.0257).

Diskusi

Penelitian ini dirancang untuk menginduksi imunitas seluler (CD4 dan CD8) dikombinasikan dengan imunitas humoral dan untuk menyesuaikan fenotipe imunitas adaptif dengan vaksin Chlamydia berbasis MOMP. Kami mengevaluasi imunogenisitas dan kemanjuran perlindungan dari strategi imunisasi multi-komponen gabungan dengan vaksin protein (CTH522, Con E), vaksin DNA dan vektor virus rekombinan (MVA MOMP), dan vaksin berbasis vektor adeno, pada primata non-manusia ( model NHP).

Data menunjukkan bahwa semua rezim imunisasi bersifat imunogenik dan menginduksi respon seluler dan humoral yang terdiri dari antibodi penawar (Angka 2-4). Vaksin protein CTH522 yang diformulasikan dengan CAF01 atau AlOH menunjukkan induksi cepat IgG spesifik antigen sistemik (Gambar 2). Kami tidak mengamati adanya perbedaan yang signifikan antara respon yang diinduksi oleh vaksin adjuvant AlOH dan CAF01, yang sesuai dengan respon yang diamati pada manusia dengan adjuvant ini (16). Rezim vaksinasi DNA dan vektor juga menginduksi titer yang signifikan dari antibodi sistemik spesifik antigen, yang secara nyata meningkat setelah imunisasi penguat protein (Gambar 2). Sesuai dengan hasil kami, penelitian sebelumnya pada tikus juga menunjukkan bahwa rezim vaksinasi protein menginduksi tingkat antibodi spesifik antigen yang lebih tinggi dibandingkan dengan DNA dan antigen vaksin vektor dan juga secara efisien meningkatkan titer untuk kelompok ini (15).

MOMP berisi empat VD yang terpapar pada permukaan bentuk Ct yang menular Daerah ini merupakan target utama imunitas yang bergantung pada antibodi, baik melalui antibodi penawar maupun imunitas yang dimediasi reseptor Fc (18). Studi sebelumnya telah menunjukkan bahwa transfer adopsi serum penetral yang diinduksi vaksin secara nyata mengurangi pelepasan bakteri awal setelah infeksi C. trachomatis (6, 11, 19-21). Dengan demikian, antibodi tampaknya berperan dalam menetralkan/mengontrol inokulum awal, mungkin bekerja sama dengan imunitas seluler. Dengan pemetaan epitop sel B yang terperinci, kami menemukan pengenalan wilayah VD 1, 3, 4 di semua kelompok vaksin. Grup DNA dan vektor juga mengenali wilayah VD1, 3 dan 4. Namun, kelompok ini menunjukkan pengenalan yang sedikit lebih sempit dalam VD ini dibandingkan dengan kelompok CAF01 dan AlOH, mungkin mencerminkan bahwa antigen Con E pada kelompok vektor tidak mengandung wilayah VD4 dari SvF dan G (Gambar 3). Pengakuan wilayah VD4 berkorelasi dengan kemampuan semua strategi vaksin untuk menginduksi antibodi penawar terhadap SvD, SvE, dan SvF.

Imunisasi parenteral dengan CTH522 pada CAF01 dan AlOH menginduksi tingkat antibodi mukosa (IgG) yang signifikan pada saluran genital dan mata serta tingkat yang berkorelasi dengan titer serum (Gambar Tambahan 3, minggu 18). Vaksin DNA dan vektor saja tidak menginduksi IgG mukosa, yang mencerminkan titer serum yang lebih rendah dibandingkan dengan protein saja. Namun, setelah penguat IM CTH522/CAF01, kelompok ini mengalami peningkatan serum Ab yang signifikan. tingkat dan IgG vagina dan okular, setara dengan protein saja (Gambar Tambahan 3, minggu 18). Penilaian paralel CTH522 dalam sistem ajuvan priming yang berbeda (AlOH dan CAF01) diikuti dengan dua kali peningkatan intranasal dengan antigen tidak memiliki efek peningkatan pada tingkat antibodi mukosa (Gambar Tambahan 3, minggu 22). Dengan demikian, kadar IgG serum secara keseluruhan tercermin pada mukosa untuk semua kelompok. Percobaan fase-I manusia baru-baru ini juga mengevaluasi penilaian paralel CTH522 dalam AlOH dan CAF01, diikuti dengan dua kali peningkatan intranasal. Di sini titer IgG mukosa juga berkorelasi baik dengan konsentrasi IgG serum (16). Namun, berbeda dengan temuan dalam model NHP, uji coba pada manusia menunjukkan efek peningkatan IN pada kelompok CAF01, menghasilkan peningkatan kadar IgG dan IgA. Sayangnya, evaluasi IgA tidak dimungkinkan dalam penelitian ini, karena bahan yang terbatas dan sinyal positif palsu yang dihasilkan dari reaksi silang antibodi sekunder yang digunakan dalam pengujian. Kedua studi menggunakan perangkat VaxINator, yang dirancang untuk menyemprotkan obat hidung untuk penyerapan mukosa. Namun, rongga hidung manusia jauh lebih luas daripada di NHP dan dapat berspekulasi bahwa hal ini dapat mempengaruhi pemerataan distribusi dan penyerapan antigen.

Beberapa penelitian pada manusia dan hewan pengerat telah menunjukkan pentingnya imunitas sel T Th1 dan sitokin efektor IFN-g (8, 22-27). Sebaliknya, sedikit yang diketahui tentang peran protektif sel T CD8 (28-33). Semua kelompok vaksin menginduksi sel T CD4, tetapi hanya kelompok DNA dan Vektor yang menunjukkan tanggapan sel T CD8 (Gambar 6 dan 7). Berdasarkan sitokin yang diukur, sel T CD8 terdiri dari sejumlah subset yang terbatas dibandingkan dengan sel T CD4, yang dapat dibagi menjadi 6 subset atau lebih, yang sebagian besar menghasilkan beberapa sitokin (Gambar 7). Sel T CD4 menunjukkan lebih banyak subset pengekspresi IL-2-daripada sel T CD8, yang terutama mencakup hanya satu subset pengekspresi IL-2-, yang mengekspresikan IL-2 bersama dengan IFN-g dan TNF- a (Gambar 6). Sel T CD8 didominasi oleh populasi besar yang hanya memproduksi IFN-g, sedangkan subset sel T CD8 dominan lainnya menghasilkan IFN-g dan TNF-a. Pola sitokin di antara sel T CD4 dan sel T CD8 ini tidak berbeda dengan apa yang telah diamati pada tikus, ketika menguji strategi vaksin yang mampu menginduksi sel T CD4 dan CD8 (34).

Strategi serupa yang melibatkan vaksinasi DNA diikuti dengan peningkatan dengan kompleks penstimulasi imun (ISCOM) dari protein MOMP (35) menginduksi perlindungan yang kuat terhadap infeksi paru-paru Chlamydia muridarum. Dalam penelitian tersebut, DNA MOMP (atau MOMP/ISCOMS) menginduksi perlindungan yang jauh lebih sedikit (35). Studi lain menunjukkan bahwa vaksinasi tikus dengan plasmid DNA MOMP, tanpa vaksin subunit, gagal melindungi terhadap tantangan genital C. trachomatis (36), menunjukkan bahwa strategi DNA mendapat manfaat dari suplementasi dengan vaksin subunit yang menginduksi sel T CD4 dan antibodi. . Perlu dicatat bahwa vaksin DNA telah menunjukkan profil imunogenisitas yang relatif rendah dalam uji klinis pada manusia, yang mungkin harus dibahas dalam penelitian selanjutnya (37).

Meskipun dosis infeksi Ct yang digunakan dalam penelitian ini lebih tinggi daripada dosis yang dialami oleh infeksi alami pada manusia, namun dipilih untuk memastikan bahwa semua hewan terinfeksi, yang penting mengingat jumlah hewan yang kecil di setiap kelompok. Dosis tersebut sejalan dengan dosis yang digunakan pada penelitian sebelumnya, yaitu berkisar antara 106 hingga 108 (38, 39). Menurunkan dosis dalam model kami menyebabkan peningkatan variasi terkait pengambilan infeksi (data tidak ditampilkan). Dosis rendah yang diberikan berulang kali juga telah digunakan (40, 41). Namun, ini bukan protokol yang optimal ketika tujuannya adalah untuk menguji efisiensi perlindungan vaksin, terutama jika kekebalan alami memediasi perlindungan sebelum protokol infeksi diselesaikan. Dapat berspekulasi bahwa penggunaan dosis tinggi mungkin memerlukan respon imun yang mengandung semua lengan sistem kekebalan, seperti sel T CD4 spesifik antigen, sel T CD8 serta antibodi penawar, untuk dapat mengurangi bakteri. tingkat. Itu juga akan menjelaskan mengapa antibodi penetral yang diinduksi pada semua kelompok tidak mengarah pada perlindungan yang signifikan pada semua kelompok [walaupun kami melihat kecenderungan perlindungan dini pada sebagian besar kelompok, di mana antibodi dianggap berperan (Gambar 7)] . Saat ini kami sedang mencoba mengembangkan model yang lebih relevan secara fisik.

Secara keseluruhan, data kami menunjukkan bahwa antigen CTH522 yang diformulasikan dalam adjuvant CAF01 atau AlOH dapat menginduksi sel T multifungsi dan antibodi penawar dalam NHP. Selain itu, hasil kami menunjukkan bahwa strategi vaksin heterolog yang terdiri dari vaksin DNA dan vaksin subunit CTH522/CAF01 merupakan strategi vaksin yang menjanjikan untuk induksi respon imun multifaset dengan tingkat tinggi Abs penetral yang dikombinasikan dengan respon sel T CD4 dan CD8 yang kuat. secara signifikan dapat mempercepat pembersihan infeksi C. trachomatis.

Tanya lebih lanjut:

Email:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tel: plus 86 15292862950

Toko Wecistanche

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop