Mekanisme Molekuler Gedunin Anti-Melanogenik Berasal Dari Pohon Mimba
Mar 28, 2022
Kontak: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:{0}}
Hwang-Ju Jeon 1, Kyeongnam Kim 1, Chaeeun Kim 2, Myoung-Jin Kim 1, Tae-Oh Kim 3,4,5,† and Sung-Eun Lee 1,2,*,†
Abstrak:Melanogenesis mewakili serangkaian proses yang menghasilkan melanin, pigmen pelindung kulit (terhadap sinar ultraviolet), dan menentukan warna kulit manusia. Bahan kimia yang mengurangi produksi melanin selalu diminati di pasar kosmetik karena kepentingan perawatan kulit, seperti pemutihan. Mekanisme utama untuk menghambat produksi melanin adalah penghambatan tirosinase (TYR), enzim kunci untuk melanogenesis. Di sini, kami mengevaluasi asli (Ged), limonoid representatif, untuk tindakan anti-melanogenesisnya. Produksi melanin in vitro dirangsang oleh alpha-melanocyte-stimulating hormone (-MSH) dalam sel melanoma tikus B16F10. Ged mengurangi produksi melanin yang dirangsang -MSH, menghambat aktivitas TYR dan jumlah protein. Kami mengkonfirmasi hasil ini in vivo ina model ikan zebra untuk melanogenesis. Tidak ada tanda-tanda toksisitas dan malformasi embrio ikan zebra selama pengembangan di semua konsentrasi yang diberi perlakuan. Ged mengurangi jumlah titik pigmen embrio ikan zebra yang dihasilkan dan kandungan melanin embrio. Konsentrasi Ged yang sangat aktif (100 M) jauh lebih rendah daripada kontrol positif, asam kojic (8 mM). Oleh karena itu, Ged bisa menjadi kandidat yang menarik untuk reagen anti-melanogenesis.
Kata kunci: MITF; faktor transkripsi terkait mikroftalmia; TYR; tirosinase; DQ; dopakuinon;TRP-1; protein terkait tirosinase 1; TRP-2; protein terkait tirosinase 2; MC1R; reseptor melanokortin 1; -MSH; -hormon perangsang melanosit; ACTH; hormon adrenokortikotropik; ASP; protein sinyal agouti; kamp; siklik adenosin monofosfat; CREB; elemen respons cAMP
1. Perkenalan
Melanin disintesis dalam melanosom, organel mirip lisosom dari melanosit. Dalam melanosom, melanin diproduksi dalam dua pigmen, eumelanin, dan pheomelanin, masing-masing mewakili coklat-hitam dan merah-kuning [1]. Sintesis pigmen melanin ini dimulai dari prekursor, L-tirosin, dengan reaksi oksidasi L-tirosin menjadi senyawa yang disebut dopaquinone (DQ), dan L-DOPA [2]. Pada tahap oksidasi ini, tirosinase (TYR) bertindak sebagai enzim pembatas laju dari keseluruhan jalur biosintesis melanin [2,3]. TRP-1dan TRP-2, terkait erat dengan protein melanogenesis, mengkatalisis jalur biosintesis eumelanin dan menstabilkan serta menginduksi aktivitas TYR [1]. Proses produksi pigmen melanin (disebut melanogenesis) terjadi di melanosom melanosit, tempat sintesis dan penyimpanan formelanin [4]. Dalam jalur pensinyalan melanogenesis, reseptor melanocortin1 (MC1R) adalah anggota reseptor berpasangan G-protein. MCIR adalah titik awal untuk pensinyalan melanogenesis dan diaktifkan oleh agonis MC1R seperti -melanocyte-stimulatinghormone (-MSH), adrenocorticotropic hormone (ACTH), dan agouti signaling protein (ASP) [1,2]. Aktivasi jalur pensinyalan -MSH-MC1R meningkatkan konsentrasi adenosinemonofosfat (cAMP) siklik dan memfosforilasi elemen respons cAMP (CREB). CREB terfosforilasi menginduksi tingkat protein faktor transkripsi terkait mikroftalmia (MITF), faktor transkripsi yang mengatur gen terkait sintesis melanin, TYR, protein terkait tirosinase-1 (TRP-1), dan protein terkait tirosinase -2 (TRP-2)dengan mengikat kotak-M dari gen-gen ini [1,5,6]. Di antara lima reseptor melanokortin, MC1R memiliki melanosit paling banyak. Ini terutama mengatur produksi eumelanin (pigmen hitam-coklat) dengan mengaktifkan MC1R ketika agonis reseptor ini, seperti a-MSH dan ACTH, dialihkan ke reseptor ini [2,4,7].
Meskipun ada perbedaan antara mamalia dan ikan, ikan zebra memiliki ekstrak MC5R dan MC3R, yang tidak dimiliki ikan buntal [7], dan jalur sinyal ini masih ada pada ikan zebra dan bekerja persis seperti pada melanosit mamalia [7]. Selain itu, jumlah penelitian tentang penghambatan pembentukan pigmen melanin telah meningkat karena keuntungan penelitiannya, seperti perkembangan yang cepat pada embrio tahap awal dan kemudahan pengamatan [8-11]. Dalam fenomena ini, banyak penelitian sebelumnya telah menemukan bahwa penghambatan jalur pensinyalan ini mengurangi produksi melanin dan menemukan beberapa penghambat, termasuk bisabolol-Angelone, 4-hidroksi-3-metoksi sinamaldehida, dan difenil-metilen-hidrazin karbo tiamin [12 –14].
Gedunin (Ged), penghambat protein kejut panas 90 yang terkenal, adalah limonoid, ditemukan dalam genera tanaman Meliaceae. Limonoid ini banyak terdapat terutama pada epikarp buah muda pohon Mimba India (Azadirachta indica) dan memiliki aktivitas biologis yang beragam, antara lain sebagai antikanker, antimalaria, antiinflamasi, antidiabetes, antialergi, insektisida, herbisida, dan antijamur. Tidak ada laporan tentang mekanisme efek anti-melanogenik dari Ged.
Sebagai calon obat atau agen kosmetik untuk mengobati penyakit yang berhubungan dengan melanin atau perubahan warna kulit, Ged mungkin memiliki kelebihan karena sifat tanaman yang aman dan alami [19]. Efek anti-melanogenik Ged dievaluasi secara in vitro dan in vivo menggunakan sel melanoma tikus B16F10 dan embrio ikan zebra, masing-masing, untuk menemukan kandidat agen kapur sirih yang tepat, salah satu bagian terbesar dari pasar kosmetik komersial. Secara bersamaan, melalui ikan zebra, toksisitas akut tes juga dilakukan untuk menunjukkan bagaimanaGed mungkin mempengaruhi hewan.
2. Bahan dan Metode
2.1. Bahan Kimia dan Reagen
Ged dibeli dari Microsource Discovery Systems, Inc. (Gayloardville, CT, USA). Stimulator melanogenesis, -MSH, senyawa anti-melanogenik, dan asam kojic dibeli dari Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA). Semua reagen lainnya lebih tinggi dari kelas biologi molekuler.
2.2. Budaya sel
Garis sel melanoma-karsinoma tikus, B16F10, diperoleh dari American TypeCulture Collection (ATCC, Manassas, VA, USA) dan dikultur dengan 10 persen serum janin sapi (v/v), dan penisilin yang dipasok Dulbecco-modified Eagle's media (GE Healthcare, Chicago,IL, USA) pada atmosfer yang dilembabkan dengan 5 persen CO2. Sel dikultur sampai konfluen mencapai 80 persen dan dibagi tiga kali seminggu dengan perbandingan 1:8. Sel diamati setiap 12 jam, dan perubahan morfologi diperiksa. Jumlah bagian sel yang digunakan dijaga tetap kecil.
2.3. Uji Viabilitas Sel
Untuk mengevaluasi efek proliferatif Ged pada garis sel melanoma tikus B16F10, uji MTS dilakukan sesuai dengan protokol yang dilaporkan sebelumnya [20] menggunakan CellTiter96 Aqueous One Solution Cell Proliferation Assay kit (Promega, Madison, WI, USA). Secara singkat, 1 × 103 sel diunggulkan di setiap sumur pelat sumur 96-dan diinkubasi selama 24 jam untuk pemulihan. Setelah inkubasi, Ged diberi perlakuan dengan berbagai konsentrasi: 0, 3.12, 6.25,12.5 25, 50, dan 75 M. Setelah 48 jam, 20 L larutan uji MTS ditambahkan ke setiap sumur yang mengandung 100-µL media dengan Ged dan tanpa Ged. Setelah inkubasi tambahan selama 4 jam, absorbansi diukur pada 490 nm menggunakan spektrofotometer Multiskan GO (ThermoScientific, Waltham, MA, USA). Data absorbansi dinormalisasi dengan kontrol dan direpresentasikan sebagai persentase rasio penghambatan.
2.4. Penentuan Kandungan Melanin
Kandungan melanin ekstraseluler dan intraseluler ditentukan mengikuti metode modifikasi yang dilaporkan sebelumnya [21]. -MSH (200 nM) sel melanoma pra-perawatan diinkubasi selama 72 jam dengan dan tanpa asam kojic (200 M) dan Ged (25 dan 50 M). Setelah inkubasi, media kultur bebas fenol-merah dikumpulkan, dan sel-sel kultur dipanen dengan buffer lisis RIPA. Sel dipanen disentrifugasi pada 4 C, 13,000 rpm selama 15 menit dan pelet dilarutkan dalam 1 M NaOH, 10 persen larutan DMSO pada 95 C selama 2 jam. Absorbansi media yang dikumpulkan dan melanin terlarut diukur pada 470 nm menggunakan spektrofotometer. Semua sampel dinormalisasi dengan konsentrasi protein yang ditentukan mengikuti metode BCA.
2.5. Uji Aktivitas Tirosinase Intraseluler
Aktivitas tirosinase seluler ditentukan dengan mengukur laju oksidasi L-dihydroxyphenylalanine (L-DOPA) seperti yang dilaporkan sebelumnya, dengan sedikit modifikasi [22]. Sel melanoma tikus B16F10 diberi perlakuan awal dengan 200 nM -MSH selama 1 jam diikuti dengan pengobatan dengan 200 M asam kojic, dengan dan tanpa Ged (25 dan 50 M), dan diinkubasi selama 72 jam. Setelah inkubasi, sel dipanen dengan buffer lisis yang mengandung proteinaseinhibitor, dan sampel disentrifugasi pada 13,000× g, 4 C selama 15 menit. Supernatan dipindahkan ke tabung baru. Masing-masing sampel (20 L) dan 80 L 40 mM L-DOPA dicampur dalam cawan sumur 96-dan diinkubasi pada suhu 37 C selama 2 jam. Absorbansi pada 475 nm oleh L-DOPA teroksidasi ditentukan dengan menggunakan pembaca lempeng mikro. Nilai absorbansi dinormalisasi dengan konsentrasi protein masing-masing sampel.
Manfaat ekstrak Cistanche: menghambat ekspresi tirosinase.
2.6. Isolasi RNA dan qRT-PCR
Isolasi RNA total dan qRT-PCR dilakukan sesuai dengan metode yang dijelaskan sebelumnya oleh [18]. Total RNA secara singkat diekstraksi dari setiap sampel menggunakan reagen Trizol (Ambion, Austin, TX, USA). Konsentrasi RNA total yang diekstraksi ditentukan dengan absorbansi pada 260 nm, dan kualitas RNA total diperiksa dengan rasio absorbansi 260:280 dan 260:230 nm menggunakan pembaca microplate Multiskan GO (Thermo Scientific). TotalRNA (5 g) disintesis menjadi cDNA dengan kit sintesis cDNA untai pertama Maxima (Thermo Scientific) dan cDNA yang disintesis. Tingkat ekspresi mRNA Mitf, Tyr, Trp-1, dan Trp-2 ditentukan menggunakan Luna Universal qPCR Master Mix (New England Biolabs, Ipswich, MA, USA) dan instrumen PCR QuantStudio 3 Real-Time ( Applied Biosystems, Foster City, CA, USA) sesuai dengan protokol instruktur. Tingkat ekspresi gen dinormalisasi dengan gliseraldehida 3-fosfat dehidrogenase (GAPDH).
2.7. Analisis Imunoblot
Analisis imunoblot dilakukan sesuai dengan metode yang dijelaskan sebelumnya [23]. Protein sel B16f10 dikumpulkan menggunakan buffer lisis Ceti (Translab, Daejeon, Korea), dan konsentrasi ditentukan dengan kit uji protein Pierce BCA (Thermo Scientific). Jumlah protein yang sama (30 g) dari setiap sampel dimasukkan ke dalam gel natriumdodesil sulfat-poliakrilamida dan dielektroforesis. Setelah pemisahan, protein dipindahkan ke membran nitroselulosa, dan membran diblokir dalam 10 persen larutan susu nonfatskim selama 2 jam. Membran yang diblokir diinkubasi dengan antibodi primer semalaman pada suhu 4 C, diikuti dengan inkubasi lain dengan antibodi sekunder pada suhu 26 C selama 2 jam. Antibodi primer dan sekunder diencerkan dalam rasio 1:1000 dan 1:3000, masing-masing. Terakhir, membran blot didokumentasikan menggunakan ChemiDoc (Bio-Rad, Hercules, CA, USA) dengan reagen ECL (SuperSignal, Thermo Scientific). Antibodi primer dan sekunder dibeli dari Santa Cruz Biotechnology (Dallas, TX, USA).
2.8. Tes Embrio Ikan Zebra
Wild-type zebrafish were thankfully obtained from Professor Tae-Lin Huh, the School of Life Science and Biotechnology, Kyungpook National University, Daegu, Republic of Korea. The strain was kept for more than eight generations in a laboratory condition of 26 ◦C ± 1 ◦C, and a day-to-night ratio of 8:16. General fish care and breeding conditions, as previously described, were followed [24]. Ten groups of zebrafish were mated to obtain embryos with a mating ratio (male: female, 1:2), and among obtained embryos, healthy embryos had >Tingkat pembuahan 80 persen dan dipilih dan digunakan untuk percobaan. Dua belas embrio sehat di setiap kelompok perlakuan ditempatkan di setiap sumur dari 96-pelat sumur dengan dan tanpa Ged (25, 50, 75, dan 100 M) dan asam kojic (8 mM) dalam media E3 pada tahap perisai. 24 jam pasca fertilisasi (h/pf), embrio mengalami dekorionasi, dan kelainan diperiksa setiap 24 jam sampai 72 jam/pf. Fenotipe embrio difoto dalam tampilan lateral dan punggung untuk membandingkan perbedaan antara kelompok menggunakan mikroskop tegak BX53 dengan DP80CCD (Olympus Life Science Solutions, Waltham, MA, USA). Setelah difoto, embrio dihomogenisasi dengan Ceti lysis buffer (TransLab), dan dilakukan penentuan konsentrasi melanin yang sama dengan penentuan kadar melanin sel B16F10.
2.9. Analisis statistik
Semua analisis statistik yang disajikan dalam penelitian ini dilakukan menggunakan GraphPad Prismv.8.0 (GraphPad Software, San Diego, CA, USA). ANOVA satu arah dengan uji Tukey digunakan untuk beberapa perbandingan. Semua data direpresentasikan sebagai mean ± standar deviasi. Perbedaan signifikan dianggap signifikan secara statistik pada p <>
3. Hasil
3.1. Efek Sitotoksik Piperlongumine dalam Sel B16F10
Sebelum menyelidiki efek anti-melanogenik dari Ged, kami melakukan uji viabilitas di lini sel B16F10 untuk menetapkan kisaran dosis dalam penelitian ini. Dalam rentang konsentrasi dari 3,12 hingga 50 M, sel tidak menunjukkan efek penghambatan pada pertumbuhan, dan proliferasi relatifnya adalah dari 91,0 persen menjadi 118,7 persen (Gambar 1). Sebaliknya, meskipun ada signifikansi nostatistik, kelompok yang diberi 75 M pertumbuhannya sedikit terhambat (89,3 persen; Gambar 1). Oleh karena itu, konsentrasi tertinggi diatur ke 50 M dalam eksperimen garis sel yang tersisa.
Gambar 1. Sitotoksisitas gedunin (Ged) pada sel B16F10
3.2. Gedunin Menghambat Produksi Melanin dan Aktivitas Tirosinase Intraseluler pada Sel Melanoma Tikus B16F10
Kami mengevaluasi efek anti-melanogenik Ged dalam sel melanoma tikus B16F10. Agonis MC1R, -MSH, secara efektif menginduksi produksi melanin intraseluler dan ekstraseluler (Gambar 2a-c). Warna media yang dikumpulkan gelap dengan -MSH (Gambar 2a). Warnanya memudar dengan penambahan Ged, dan efeknya tergantung dosis (Gambar 2a). Dalam hasil kandungan melanin total, -MSH meningkatkan produksi melanin dalam melanosit sekitar tujuh kali lipat lebih tinggi dari kelompok kontrol dan merangsang penurunan melanin dengan menambahkan asam kojic, kontrol positif yang terkenal dalam melanogenesis (Gambar 2d). Ged juga mempersingkat produksi melanin pemicu rangsangan dalam melanosit pada semua konsentrasi yang diuji dalam penelitian ini (Gambar 2d). Selain itu, dalam uji aktivitas tirosinase, Ged menunjukkan efek penghambatan yang kuat pada enzim pembatas laju, tirosinase, dalam melanogenesis (Gambar 2e). Aktivitas relatif tirosinase dalam kelompok perlakuan 50 M Ged menurun masing-masing sebesar 20 persen dan 12,24 persen dibandingkan dengan kontrol dan kelompok yang distimulasi a-MSH.
Gambar 2. Efek anti-melanogenik asli (Ged) pada produksi melanin yang dirangsang alpha-melanocyte-stimulating hormone (-MSH) dalam sel B16F10.
3.3. Gedunin Mengurangi Ekspresi Gen Terkait Melanogenesis yang Diinduksi -MSH
-MSH (200nM) menginduksi tingkat mRNA Mitf; faktor transkripsi melanogenesis; dan gen target Tyr, Trp-1, dan Trp-2 (Gambar 3). Perlakuan Ged mengurangi tingkat mRNA semua gen dengan cara yang bergantung pada dosis pada konsentrasi 25 dan 50 M (Gambar 3). Dibandingkan dengan kontrol positif, asam kojic (200 M), Ged lebih efektif dalam mereduksi mRNA tingkat gen terkait melanogenesis dalam sel B16F10. Selanjutnya, tingkat Mitfand Tyr menurun masing-masing 0,10- dan 0,26-kali lipat lebih rendah daripada sel yang diinduksi -MSH, pada konsentrasi 50 M (Gambar 3a,b). Tingkat mRNA yang diatur ke bawah dari gen ini menurunkan tingkat Tyr dan mengurangi jumlah produksi TYR melanin lebih sedikit daripada kelompok kontrol.
Gambar 3. Pengaruh pengurangan pada gen terkait melanogenesis.
3.4. Gedunin Mengurangi TYR dan TYR-1 Jumlah
TYR memainkan peran penting dalam melanogenesis, dan tingkat protein enzim ini mempengaruhi melanogenesis secara langsung. Kami mencoba mengkonfirmasi perubahan jumlah protein, TYR, yang disebabkan oleh penurunan level mRNA melalui analisis imunoblot. TYR terasa menurun dibandingkan dengan kontrol, dan -MSH diperlakukan tergantung dosis (Gambar 4a). Selain itu, TRP-1, faktor transkripsi penting TYR, sedikit berkurang (Gambar 4a). Hasilnya lebih jelas ketika setiap pita protein dinormalisasi oleh protein penjaga rumah, GAPDH (Gambar 4b,c).
Gambar 4. Western blotting dari alpha-melanocyte-stimulating hormone (-MSH) menginduksi sel B16F10 dengan pengobatan asli.
3.5. Toksisitas Gedunin terhadap Ikan Zebra pada Perkembangan Tahap Awal
Evaluasi toksikologi Ged pada pengembangan tahap awal ikan zebra dilakukan sebelum mengevaluasi uji anti-melanogenik Ged in vivo. Abnormalitas morfologi embrio ikan zebra tidak diamati pada konsentrasi Ged yang diberi perlakuan (Gambar 5a). Konsentrasi Ged, 25, 50, 75, dan 100 M yang diuji, tingkat kelangsungan hidup kelompok yang diberi perlakuan Ged tidak memiliki perbedaan yang signifikan pada 72 jam periode perlakuan kimia (Gambar 5b).
Gambar 5. Toksisitas asli (Ged) pada tahap awal pengembangan ikan zebra.
3.6. Gedunin Mengurangi Kandungan Melanin dalam Embrio Ikan Zebra
Karena Ged tidak memiliki toksisitas perkembangan pada embrio ikan zebra, kami memeriksa efek anti-melanogenik pada serangkaian konsentrasi Ged, 25, 50, 75, dan 100 M. Dalam pengamatan optik, kami memeriksa titik-titik pigmen ikan zebra; tampak samping atas embrio ikan zebra ditunjukkan pada Gambar 5a. Asam kojic memiliki efek penghambatan pada produksi pigmen embrio ikan zebra. Embrio ikan zebra yang diberi perlakuan Ged juga memiliki lebih sedikit titik pigmen di kepala (Gambar 6a). Selain itu, kandungan melanin total yang diekstraksi dari seluruh tubuh embrio ikan zebra menurun setelah paparan Ged selama 72 jam pada kelompok asam kojic, kontrol apositif, dan perlakuan Ged (Gambar 6b, c)
Gambar 6. Pengaruh asli pada produksi melanin in vivo.
4. Diskusi
Dalam penelitian ini, sifat penghambatan Ged terhadap produksi melanin dievaluasi. Berdasarkan temuan kami, kemampuan penghambatan Ged kira-kira 11 kali lipat lebih tinggi daripada asam kojic (Gambar 2), dan konsentrasi Ged ( 50 M) lebih rendah dari asam kojic (200 M), kontrol positif. Itu dicocokkan dengan aktivitas tirosinase intraseluler yang melemah, enzim yang mengubah L-Dopa menjadi DQ, prekursor utama eumelanin dan pheomelanin. Penurunan aktivitas Tyr memerlukan perlambatan seluruh proses produksi melanin dan kekurangan kedua produk akhir, eumelanin dan pheomelanin [1–3]. Transkrip dan level TYR diatur oleh serangkaian faktor transkripsi: Mitf, Trp-1, dan Trp-2 [1,2]. Pengurangan jumlah protein dan level mRNA berarti mengaktifkan MC1R melalui sumbu pensinyalan -MSH–MC1R–PKA–CREB oleh -MSH diturunkan regulasinya dengan perlakuan Ged pada konsentrasi 25 dan 50 M, tergantung dosis pada PCR kuantitatif dan Western blotting. Seperti dijelaskan sebelumnya, penurunan jumlah MITF menyebabkan kekurangan Tyr, Trp-1, dan Trp-2 melalui lebih sedikit pengikatan ke wilayah promotor gen ini [25-27]. Mengurangi faktor transkripsi ini menyebabkan TYR ke tingkat yang lebih rendah dan menghambat produksi pigmen melanin dalam sel B16F10. Selain itu, hasil saat ini menunjukkan efek penghambatan TYR dari Ged, titik kritis lain dari produksi melanin dalam melanosit. Ged juga menunjukkan efek penghambatan pada produksi pigmen selama pengembangan tahap awal ikan zebra dalam model in vitro dan in vivo. Hasil kami menunjukkan bahwa pengobatan dengan Ged selama 72 jam secara nyata mengurangi pigmentasi embrio ikan zebra. Total kandungan melanin dan tingkat mRNA dari gen terkait berkurang dengan adanya Ged, dan kecenderungan hasil ini sangat mendukung sifat anti-melanogenesis in vitro dari Ged.
Selain itu, kemampuan penghambatan Ged jauh lebih kuat daripada asam kojic, salah satu senyawa yang paling umum dikenal sebagai reagen pemutih dalam industri kosmetik [6,28]. Konsentrasi di mana Ged bertindak relatif lebih rendah daripada asam kojic. Selain itu, laporan sebelumnya menunjukkan bahwa reagen pemutih umum lainnya, arbutin, memiliki efek anti melanogenik yang serupa dengan asam kojic [2]. Oleh karena itu, Ged harus dipertimbangkan sebagai reagen pemutih pengganti arbutin atau asam kojic yang saat ini digunakan, dan sebagai obat anti-melanoma sehubungan dengan sifat-sifatnya yang menjanjikan.
Sifat anti-melanogenik dari Ged telah disarankan sebelumnya [29,30], tetapi penelitian ini tidak berfokus pada mekanisme spesifik efek, dan mereka hanya mengamati perubahan efek sitotoksik dan jumlah produksi melanin secara in vitro, sedangkan aktivitas anti-proliferatif dan efek penghambatan pada Ekspresi HSP 90 telah disorot [31-33]. Kemungkinan Ged sebagai agen anti-melanogenetik telah dilaporkan; namun, penelitian ini tidak berfokus pada mekanisme spesifik dari efek tersebut, dan mereka hanya mengamati perubahan efek sitotoksik dan jumlah produksi melanin secara in vitro. Kami mencoba menentukan mekanisme tingkat seluler dengan mengonfirmasi tingkat mRNA dan jumlah protein gen terkait produksi melanin. Bersama dengan laporan sebelumnya, penelitian ini menunjukkan perspektif baru Gedas sebagai komponen bahan kosmetik untuk dua manfaat, antikanker dan anti-melanogenesis yang luar biasa, yang dapat diterapkan pada melanoma yang diinduksi UV dan akumulasi pigmen, terutama, pada saat yang sama.
bubuk ekstrak cistanche: membersihkan radikal bebas
5. Kesimpulan
Kesimpulannya, semua hasil ini menunjukkan senyawa baru, Ged, dapat digunakan sebagai reagen adepigmentasi untuk biosintesis melanin, yang memendekkan protein hilir TYR, TRP-1, dan TRP-2 dengan jumlah yang berkurang dibandingkan dengan master protein regulasi, MITF, baik dalam sistem in vitro dan in vivo model ikan zebra.
tablet cistanche