Penelitian Intervensi Phenylethyl Alcohol Glycosidesin Cistanche Pada Hewan Model Perimenopause Syndrome Ⅲ

Eksperimen 2

Efek dariGlikosida feniletanol Cistanchepada tikusperimenopausemodel Bahan dan metode

Bahan percobaan

1.1 Hewan percobaan

Tikus tingkat SPF, spesies Kunming, betina, 20-25g, disediakan oleh Institut Produk Biologi Wuhan. Nomor sertifikat: 42000400000611; Nomor sertifikat laboratorium SYXK (Yu) 2010-001. 1.2 Obat percobaan

Cistanche deserticola feniletanol glikosida dibuat sesuai dengan metode Percobaan 1, dan kandungannya mencapai 66,47%. Kapsul Gengnian'an, bahan: Rehmannia glutinosa, Rehmannia glutinosa, Alisma, Ophiopogon japonicus, Scrophulariaceae, kulit pohon peony, Poria cocos, mutiara, curculigo, Schisandra chinensis, magnetit, Polygonum multiflorum vine, Uncaria, gandum terapung, polygonum multiflorum . Fungsi dan Indikasi: Memelihara yin dan menundukkan yang, menghilangkan masalah dan menenangkan pikiran. Digunakan untuk hot flashes menopause dan berkeringat, pusing, tinitus, mudah tersinggung dan susah tidur. Spesifikasi: 0.3g per kapsul. Penggunaan dan dosis: Oral, 3 kapsul sekaligus, 3 kali sehari. Produsen: Shanxi Tianxing Pharmaceutical Co., Ltd. Nomor batch produksi: 121104. Nomor persetujuan: Persetujuan Obat Nasional No. Z14021848.

Isoflavon kedelai dan kapsul lunak vitamin E, daftar bahan: bubuk isoflavon kedelai, vitamin E, minyak bunga matahari, gelatin, gliserin, air, tartrazin, titanium dioksida. Bahan dan kandungan ikonik: Setiap 100g mengandung 55,2 mg isoflavon kedelai (dihitung sebagai genistein) dan 608,5 mg vitamin E. Fungsi kesehatan: Meningkatkan kepadatan tulang. Petunjuk dan Dosis: Minum 1 kapsul 2 kali sehari dengan air hangat. Spesifikasi: 500mg×100 kapsul. Produsen: Weihai Ziguang Biotechnology Development Co., Ltd. Nomor batch produksi: 13070302. Nomor persetujuan: Kesehatan Pangan Nasional G20080032.

Hasil 1 Pengaruh aktivitas otonom pada model perimenopause tikus

Hasil uji aktivitas otonom mencit pada masing-masing kelompok eksperimen ditunjukkan pada Tabel 2 dan Gambar 2.

1.3 Reagen percobaan

Natrium karboksimetil selulosa, Tianjin Hengxing Chemical Reagent Manufacturing Co., Ltd., nomor batch: 20120418; natrium penisilin untuk injeksi, North China Pharmaceutical Co., Ltd., spesifikasi: 4 juta unit, nomor batch produksi: c1206807; larutan formaldehida (tingkat analitik), Yantai City Shuangshuang Chemical Co., Ltd., nomor batch produksi: 20130902; injeksi natrium klorida 0,9%, Chenxin Pharmaceutical Co., Ltd.; spesifikasi: 250ml, nomor batch produksi: 1301265303;

Kloral hidrat, Institut Penelitian Kimia Halus Tianjin Guangfu, nomor batch 20120827; kit deteksi ELISA mouse E2, Perusahaan Litbang, nomor batch: 20131001A; kit deteksi ELISA mouse T, Perusahaan Litbang, nomor batch: 20131001A; kit uji deteksi ELISA LH mouse, Perusahaan Litbang, nomor batch: 20131001A;

Kit deteksi ELISA FSH Mouse, Perusahaan Litbang, nomor batch: 20131001A. 1.4 Instrumen percobaan

Skala elektronik, Shanghai Minqiao Medical Instrument Co., Ltd., model: JY601; timbangan analitik elektronik, Perusahaan Ohaus (Shanghai), model: AR1140/C; centrifuge desktop berkecepatan tinggi, Pabrik Instrumen Ilmiah Anting Shanghai, model: TGL-168; Pemandian air termostatik listrik, Shanghai Yiheng Scientific Instrument Co., Ltd., model: HWS12; Penguji aktivitas otonom tikus, Chengdu Taimeng Technology Co., Ltd., model: ZZ-6; Pengukur penghindaran gelap tikus, Chengdu Taimeng Technology Co., Ltd., model: BA-200; centrifuge berpendingin berkecepatan tinggi, HKUST Innovation Co., Ltd. Cabang Zhongjia, model: KDC-160HR; pipet yang dapat disesuaikan, Shanghai Leibo Analytical Instrument Co., Ltd.;

Pembaca pelat mikro, Perusahaan BIO-RAD Amerika, model: 680;

Mikroskop listrik, perusahaan OLYMPUS Jepang, model: BX61

BERAPA LAMA YANG DIPERLUKAN UNTUK CISTANCHE BEKERJA?

2 Metode eksperimental

2.1 Pemodelan dan Pemberian Obat

Metode pemodelan: Ambil 100 tikus Kunming betina dengan berat 23-25g, pilih 12 tikus secara acak sebagai kelompok kosong, dan lakukan operasi palsu, lalu tikus sisanya digunakan untuk membuat model menopause . Setelah ditimbang, tikus dibius dengan injeksi intraperitoneal 10% kloral hidrat (0,03ml/10g) dan difiksasi pada posisi perut. Kemudian rambut dipotong dari punggung tikus di bawah tulang rusuk terakhir pada perpotongan garis midaxillary dan sekitar 1 cm dari luar tulang belakang, kemudian didesinfeksi dan dipotong. Kulit dan otot punggung dibuka sekitar 0.5-1cm, dan massa lemak putih mengkilat terlihat di bidang sayatan, dan ovarium tertanam di dalamnya. Gunakan pinset kecil untuk memegang perlahan massa lemak dan menariknya keluar dari sayatan, pisahkan massa lemak, dan Anda akan melihat sekelompok ovarium tipis, tidak beraturan, berwarna kuning-merah. Saat memotong, ikat terlebih dahulu saluran tuba (termasuk lemak) di bawah ovarium dengan benang tipis, lalu angkat ovariumnya. Setelah operasi, tanduk rahim dimasukkan kembali ke dalam rongga perut, otot dan kulit dijahit, dan kedua ovarium diangkat dengan cara yang sama. Setelah operasi, hewan dipelihara dengan hati-hati dan penisilin 200,000 u/kg (masing-masing 0,1 mL) disuntikkan secara intramuskular untuk mencegah infeksi, sekali sehari selama 3 hari berturut-turut. Pemeriksaan apusan vagina dilakukan pada masing-masing tikus 5 hari setelah operasi, sehari sekali selama 5 hari berturut-turut untuk mengetahui apakah ovarium telah diangkat seluruhnya. Tikus yang menunjukkan reaksi estrus pada apusan dibuang, dan 72 ekor tikus yang dikebiri sempurna dibagi secara acak dan merata menjadi 6 kelompok untuk tujuan percobaan, yaitu kelompok model,Kelompok kapsul Gengniang'an, kelompok kapsul lunak isoflavon kedelai, dan kelompok besar. , dosis sedang dan kecilGlikosida feniletanol Cistanchekelompok. Metode persiapan: {{0}}.5% CMC Metode persiapan: Timbang 4g natrium karboksimetil selulosa dan campur dengan air suling untuk membuat 800ml. Dosis kelompok glikosida feniletanol Cistanche dosis besar, sedang dan kecil masing-masing adalah 20{{30}}mg/kg, 100mg/kg dan 50mg/kg (volume pemberian 0,1ml/ 10 gram). Metode persiapan: Timbang masing-masing 2000mg, 1000mg, dan 500mg Cistanche phenylethanoid glikosida, larutkan dengan sedikit CMC 0,5%, lalu sesuaikan volume menjadi 100ml, aduk rata, dan selesai. Kapsul Gengniangan (675mg/kg, dicampur dengan air suling hingga 67,5 mg/ml, 0,1ml/10g, setara dengan 15 kali dosis klinis); Cara pembuatan: Ambil 9 Kapsul Gengnianan, mula-mula gunakan sedikit CMC Dissolve 0,5%, kemudian sesuaikan volumenya menjadi 40ml, dan aduk rata hingga diperoleh dosis Suspensi Kapsul Gengnianan (675mg/kg). Kapsul lunak vitamin E isoflavon kedelai (250mg/kg, gunakan air suling untuk menyiapkan 25mg/ml, 0,1ml/10g, setara dengan 15 kali dosis klinis); Cara pembuatannya: ambil 2 kapsul isoflavon kedelai, pertama gunakan sedikit 0,5% CMC larut, kemudian sesuaikan volumenya menjadi 40ml, dan aduk rata hingga diperoleh dosis suspensi kapsul isoflavon kedelai (250mg/kg).

Cara penyimpanan: dinginkan, tetap hangat saat digunakan.

Cara pemberian: Hewan pada masing-masing kelompok diberi obat yang sesuai pada hari ke 10 setelah operasi. Kelompok kapsul Gengnian'an diberikan suspensi kapsul Gengniang'an 675 mg·kg-1 per oral, dan kelompok kapsul lunak isoflavon kedelai diberikan oral 250 mg·kg-1 suspensi kapsul lunak isoflavon kedelai, dan besar, sedang danCistanche benzena dosis kecildikelola. Kelompok etanol glikosida diberikan secara oral dosis besar, sedang dan kecil Cistanche phenylethanoid glikosida 200mg·kg-1, 10mg·kg-1, 50mg·kg{ {5}}, masing-masing 0,1ml/10g. Kelompok blanko dan kelompok model diberi larutan CMC 0,5% dengan volume yang sama satu kali sehari selama 21 hari berturut-turut.

Kit deteksi ELISA FSH Mouse, Perusahaan Litbang, nomor batch: 20131001A. 1.4 Instrumen percobaan

Skala elektronik, Shanghai Minqiao Medical Instrument Co., Ltd., model: JY601; timbangan analitik elektronik, Perusahaan Ohaus (Shanghai), model: AR1140/C; centrifuge desktop berkecepatan tinggi, Pabrik Instrumen Ilmiah Anting Shanghai, model: TGL-168 ; Pemandian air termostatik listrik, Shanghai Yiheng Scientific Instrument Co., Ltd., model: HWS12; Penguji aktivitas otonom tikus, Chengdu Taimeng Technology Co., Ltd., model: ZZ-6; Pengukur penghindaran gelap tikus, Chengdu Taimeng Technology Co., Ltd., model: BA-200; centrifuge berpendingin berkecepatan tinggi, HKUST Innovation Co., Ltd. Cabang Zhongjia, model: KDC-160HR; pipet yang dapat disesuaikan, Shanghai Leibo Analytical Instrument Co., Ltd.;

Pembaca pelat mikro, Perusahaan BIO-RAD Amerika, model: 680;

Mikroskop listrik, perusahaan OLYMPUS Jepang, model: BX61

2 Metode eksperimental

2.1 Pemodelan dan pemberian obat

Metode pemodelan: Ambil 100 tikus Kunming betina dengan berat 23-25g, pilih 12 tikus secara acak sebagai kelompok kosong, dan lakukan operasi palsu, lalu tikus sisanya digunakan untuk membuat model menopause . Setelah ditimbang, tikus dibius dengan injeksi intraperitoneal 10% kloral hidrat (0,03ml/10g) dan difiksasi pada posisi perut. Kemudian rambut dipotong dari punggung tikus di bawah tulang rusuk terakhir pada perpotongan garis midaxillary dan sekitar 1 cm dari luar tulang belakang, kemudian didesinfeksi dan dipotong. Kulit dan otot punggung dibuka sekitar 0.5-1cm, dan massa lemak putih mengkilat terlihat di bidang sayatan, dan ovarium tertanam di dalamnya. Gunakan pinset kecil untuk memegang perlahan massa lemak dan menariknya keluar dari sayatan, pisahkan massa lemak, dan Anda akan melihat sekelompok ovarium tipis, tidak beraturan, berwarna kuning-merah. Saat memotong, ikat terlebih dahulu saluran tuba (termasuk lemak) di bawah ovarium dengan benang tipis, lalu angkat ovariumnya. Setelah operasi, tanduk rahim dimasukkan kembali ke dalam rongga perut, otot dan kulit dijahit, dan kedua ovarium diangkat dengan cara yang sama. Setelah operasi, hewan dipelihara dengan hati-hati dan penisilin 200,000 u/kg (masing-masing 0,1 mL) disuntikkan secara intramuskular untuk mencegah infeksi, sekali sehari selama 3 hari berturut-turut. Pemeriksaan apusan vagina dilakukan pada masing-masing tikus 5 hari setelah operasi, sehari sekali selama 5 hari berturut-turut untuk mengetahui apakah ovarium telah diangkat seluruhnya. Tikus yang menunjukkan reaksi estrus pada apusan dibuang, dan 72 ekor tikus yang dikebiri sempurna dibagi secara acak dan merata menjadi 6 kelompok untuk percobaan, yaitu kelompok model, kelompok kapsul Gengniang'an, kelompok kapsul lunak isoflavon kedelai, dan kelompok besar. , dosis sedang dan kecilGlikosida feniletanol Cistanchekelompok. Metode persiapan: 0.5% CMC Metode persiapan: Timbang 4g natrium karboksimetil selulosa dan campur dengan air suling hingga menjadi 800ml. Dosisnya besar, dosis sedang dan dosis kecilGlikosida feniletanol Cistanchekelompok masing-masing adalah 200mg/kg, 10{{20}}mg/kg dan 50mg/kg (volume pemberian 0,1ml/10g). Metode persiapan: Timbang masing-masing 2000mg, 1000mg, dan 500mg Cistanche phenylethanoid glikosida, larutkan dengan sedikit CMC 0,5%, lalu sesuaikan volume menjadi 100ml, aduk rata, dan selesai. Kapsul Gengniangan (675mg/kg, dicampur dengan air suling hingga 67,5 mg/ml, 0,1ml/10g, setara dengan 15 kali dosis klinis); Cara pembuatan: Ambil 9 Kapsul Gengnianan, mula-mula gunakan sedikit CMC Dissolve 0,5%, kemudian sesuaikan volumenya menjadi 40ml, dan aduk rata hingga diperoleh dosis Suspensi Kapsul Gengnianan (675mg/kg). Kapsul lunak vitamin E isoflavon kedelai (250mg/kg, gunakan air suling untuk menyiapkan 25mg/ml, 0,1ml/10g, setara dengan 15 kali dosis klinis); Cara pembuatannya: ambil 2 kapsul isoflavon kedelai, pertama gunakan sedikit 0,5% CMC larut, kemudian sesuaikan volumenya menjadi 40ml, dan aduk rata hingga diperoleh dosis suspensi kapsul isoflavon kedelai (250mg/kg).

Cara penyimpanan: dinginkan, tetap hangat saat digunakan.

Metode pemberian: Hewan di setiap kelompok diberi obat yang sesuai pada hari ke-1 setelah operasi. Kelompok kapsul Gengnian'an diberikan oral suspensi kapsul Gengniang'an 675 mg·kg-1, dan kelompok kapsul lunak isoflavon kedelai diberikan oral 250 mg·kg-1 isoflavon kedelai suspensi kapsul lunak, dan Cistanche benzene dosis besar, sedang dan kecil diberikan. Kelompok etanol glikosida diberikan secara oral dosis besar, sedang dan kecil Cistanche phenylethanoid glikosida 200mg·kg-1, 10mg·kg-1, 50mg·kg-1, 0,1ml/10g. Kelompok blanko dan kelompok model diberi larutan CMC 0,5% dengan volume yang sama satu kali sehari selama 21 hari berturut-turut.

2.2 Item observasi dan metode deteksi

Jumlah aktivitas spontan mencit tiap kelompok dalam waktu 5 menit diukur pada hari ke-18 pemberian. Latensi tikus yang pertama kali memasuki kamar gelap dan jumlah sengatan listrik yang diterima dalam waktu 5 menit setelah memasuki kamar gelap diukur pada hari ke 19 hingga 20 pemberian. 2 jam setelah pemberian dosis terakhir (12 jam tanpa makanan atau air), mencit ditimbang, dikeluarkan bola matanya, diambil darahnya, dipisahkan serumnya, dan diukur kandungan E2, T, LH, dan FSH dalam serum. diukur; tikus kemudian dikorbankan dengan cara dislokasi serviks dan dibedah. , membuang jaringan timus, limpa, dan rahim, menimbang berat basahnya dan menghitung indeks organ (indeks organ=berat basah organ mg/berat tikus g), lalu membuang kelenjar pituitari; timus, limpa, rahim, dan kelenjar hipofisis difiksasi dalam larutan formalin 10%, ditanam dalam parafin, dibelah, diwarnai dengan HE, dan perubahan morfologi jaringan masing-masing kelompok diamati di bawah mikroskop cahaya.

2.2.1 Uji jumlah kegiatan mandiri

Tikus tiap kelompok dimasukkan ke dalam alat aktivitas volunter, terlebih dahulu diadaptasikan dengan lingkungan selama 1 menit, kemudian diukur jumlah aktivitas volunter dalam waktu 5 menit.

2.2.2 Tes penghindaran gelap

Masukkan tikus masing-masing kelompok ke dalam kotak tes dengan ekor menghadap lubang kecil di kamar gelap, dan lakukan pelatihan. Setelah 24 jam, periode latensi tikus yang pertama kali memasuki kamar gelap dan jumlah sengatan listrik yang diterima dalam waktu 5 menit setelah memasuki kamar gelap diukur kembali.

2.2.3 Metode penentuan kit

Dapatkan spesimen serum: Gunakan tabung reaksi yang bebas pirogen dan endotoksin. Hindari rangsangan sel apa pun selama operasi. Setelah mengumpulkan darah, sentrifugasi dengan kecepatan 3000 rpm selama 10 menit untuk memisahkan serum dan sel darah merah dengan cepat dan hati-hati. Metode pengujian kit deteksi ELISA estradiol tikus (E2): Keluarkan strip yang diperlukan dari kantong aluminium foil yang telah diseimbangkan pada suhu kamar selama 20 menit, dan segel sisa strip ke dalam kantong yang dapat ditutup sendiri, dan kembalikan ke suhu 4 derajat . Siapkan sumur standar dan sumur sampel, dan tambahkan 50 μL standar dengan konsentrasi berbeda ke dalam setiap sumur standar. Pertama, tambahkan 10 μL sampel yang akan diuji ke dalam sumur sampel, lalu tambahkan 40 μL pengencer sampel (yaitu, sampel diencerkan 5 kali); jangan menambahkannya ke sumur kosong. Kecuali untuk sumur kosong, tambahkan 100 μL antibodi pendeteksi berlabel peroksidase lobak pedas ke setiap sumur dari sumur standar dan sumur sampel, dan tutup sumur reaksi dengan film penyegel. Inkubasi dalam penangas air atau inkubator 37 derajat selama 60 menit. Buang cairannya, keringkan di atas kertas penyerap, isi setiap lubang dengan larutan pencuci, dan diamkan selama 1 menit. Kibaskan cairan pencuci, keringkan di atas kertas penyerap, dan ulangi pencucian piring sebanyak 5 kali. Pertama tambahkan 50 μL masing-masing substrat A dan B ke masing-masing sumur, dan inkubasi pada suhu 37 derajat dalam gelap selama 15 menit. Keluarkan pelat enzim, tambahkan 50 μL stop solution ke setiap sumur, dan dalam waktu 15 menit, ukur nilai serapan (nilai OD) setiap sumur pada panjang gelombang 450 nm. Menurut konsentrasi produk standar dan nilai OD yang sesuai, gambarkan kurva regresi produk standar, dan hitung nilai konsentrasi setiap sampel sesuai dengan persamaan kurva. Konsentrasi akhir adalah konsentrasi terukur sebenarnya dikalikan dengan faktor pengenceran. Diantaranya, konsentrasi produk standar (S0-S5) adalah 0, 4, 8, 16, 32, dan 64 pmol/L. Konsentrasi standar kit deteksi ELISA testosteron tikus (Mouse) (T) (S0-55) adalah 0, 50, 100, 200, 400, dan 800pg/mL;

Konsentrasi standar kit deteksi ELISA hormon luteinizing (LH) tikus (Mouse) (S{{0}}) adalah 0, 0,5, 1, 2, 4, 8mIU/mL;

Konsentrasi standar kit deteksi ELISA hormon perangsang folikel (FSH) tikus (Mouse) (S0-55) adalah 0, 5, 10, 20, 40, dan 80mIU/mL.

2.3 Metode pemrosesan statistik

Untuk analisis data, SPSS17.0 paket statistik medis digunakan untuk pemrosesan data statistik. Data pengukuran dinyatakan sebagai mean ± standar deviasi (-x±s). Analisis varians satu arah digunakan untuk perbandingan antar kelompok. Metode LSD digunakan untuk menguji homogenitas varians. , uji Games-Howell digunakan untuk variansi tidak merata, dan uji Ridit digunakan untuk data nilai.

Gambar 3 Pengaruh glikosida feniletanol Cistanche pada periode laten percobaan penghindaran gelap pada model perimenopause tikus

Gambar 4 Pengaruh glikosida feniletanol Cistanche terhadap jumlah sengatan listrik dalam percobaan penghindaran gelap model tikus perimenopause. Dapat dilihat dari Tabel 3 dan Gambar 3~4 bahwa dibandingkan dengan kelompok kosong, masa inkubasi dan jumlah sengatan listrik tikus pada kelompok model berkurang secara signifikan ( P<0.01), reflecting the decline in memory in the mouse perimenopausal model. Compared with the model group, Gengnianan, soybean isoflavones, and large and medium doses of Cistanche phenylethanoid glycosides could significantly increase the latency of the dark avoidance test in mice, reduce the number of electric shocks (P<0.01), and improve the memory of mice.

3 Efek pada indeks organ pada model perimenopause tikus

Indeks timus, limpa, dan uterus mencit pada masing-masing kelompok eksperimen ditunjukkan pada Tabel 4 dan Gambar 5.

Seperti terlihat pada Tabel 4 dan Gambar 5, dibandingkan dengan kelompok blanko, indeks uterus mencit pada kelompok model secara signifikan lebih rendah (P<0.01), indicating that removal of the ovaries caused uterine atrophy in the perimenopausal model mice, and removal of the ovaries resulted in insufficient estrogen secretion. Causes immune organ atrophy in perimenopausal mice. Compared with the model group, soy isoflavones, Gengnianan, large and medium doses of Cistanche phenylethanol glycoside can significantly improve the thymus, spleen and uterine index (P<0.01), and low dose Cistanche phenylethanol glycoside can significantly improve the perimenopausal model. Mouse uterine index (P<0.05). 4 Effects on serum sex hormone levels in mouse perimenopausal model

Kandungan E2, T, FSH, dan LH dalam serum mencit pada masing-masing kelompok. Lihat Tabel 5~6 dan Gambar 6~9. Terlihat dari Tabel 5~6 dan Gambar 6~9 bahwa dibandingkan dengan kelompok kosong, kadar E2 dan T dalam serum tikus pada kelompok model mengalami penurunan yang signifikan (P<0.01), and the levels of LH and FSH were significantly increased (P<0.01). , indicating that removal of ovaries leads to disorders of sex hormone levels in the serum of perimenopausal model mice and the perimenopausal mouse model was successfully replicated. Compared with the model group, each administration group can significantly reduce the elevated LH level in serum (P<0.01); large and medium doses of Cistanche phenylethanol glycoside, Gengniangan, and soybean isoflavones can significantly increase the levels of perimenopausal mice. E2 and T levels in the serum of the early-stage model (P<0.01) and reduced elevated FSH and LH levels in the serum. Low-dose Cistanche phenylethanol glycoside can significantly increase serum E2 levels and reduce serum FSH levels (P<0.05); low-dose Cistanche phenylethanoid glycoside has a tendency to increase serum T levels.

4 Pengaruh kadar hormon seks serum pada model perimenopause tikus

Kandungan E2, T, FSH, dan LH dalam serum mencit pada masing-masing kelompok. Lihat Tabel 5~6 dan Gambar 6~9.

Terlihat dari Tabel 5~6 dan Gambar 6~9 bahwa dibandingkan dengan kelompok kosong, kadar E2 dan T dalam serum tikus pada kelompok model mengalami penurunan yang signifikan (P<0.01), and the levels of LH and FSH were significantly increased (P< 0.01), indicating that removal of ovaries leads to disorder of sex hormone levels in the serum of perimenopausal model mice, and the perimenopausal mouse model was successfully replicated. Compared with the model group, each administration group can significantly reduce the elevated LH level in serum (P<0.01); large and medium doses of Cistanche deserticola phenylethanol glycoside, Gengniannian, and soybean isoflavones can significantly reduce the level of LH in mice. E2 and T levels in serum of perimenopausal model (P<0.01) and reduced elevated FSH and LH levels in serum. Low-dose Cistanche deserticola phenylethanol glycoside can significantly increase serum E2 levels and reduce serum FSH levels (P<0.05); low-dose Cistanche deserticola phenylethanoid glycoside has a tendency to increase serum T levels. 5. Effects on organ tissue morphology in perimenopausal model mice

Hasil pengamatan patologis dan histologis uterus, timus, limpa, dan kelenjar pituitari mencit pada masing-masing kelompok eksperimen adalah sebagai berikut. Foto patologis ditunjukkan pada Lampiran 1 untuk foto patologis tikus perimenopause.

5.1 Pengaruh morfologi jaringan rahim mencit model perimenopause

Menurut tingkat perubahan yang berbeda pada endometrium, kelenjar, dan miometrium tikus di setiap kelompok percobaan, standar semi-kuantitatif digunakan untuk membagi morfologi jaringan patologis menjadi empat tingkatan. Rahim tikus pada setiap kelompok percobaan diukur. Hasil pengamatan ditunjukkan pada Tabel 7. Tabel 7 Pengaruh Cistanche deserticola phenyletanol glikosida terhadap perubahan patologi uterus pada mencit model perimenopause Unit: saja

"-" Sel epitel, kelenjar, miometrium, dan serosa endometrium semuanya normal; "+" sel epitel dan kelenjar endometrium mengalami atrofi, dan miometrium serta serosa normal; "++" epitel endometrium Sel dan kelenjar mengalami atrofi sebagian, lapisan otot sedikit mengalami atrofi, dan serosa normal; Sel epitel dan kelenjar "+++" mengalami atrofi secara signifikan, dan serosanya normal.

Setelah uji Ridit terlihat dari tabel di atas bahwa dibandingkan dengan kelompok blanko, rahim mencit pada kelompok model menunjukkan lesi jaringan patologis yang signifikan (P<0.01). Compared with the model group, soy isoflavone vitamin E soft capsules, Gengnianan capsules, and high-dose Cistanche deserticola phenylethanol glycoside can significantly improve the uterine pathological tissue lesions of mice (P<0.01), and medium-dose Cistanche deserticola phenylethanol glycoside can Significantly improved uterine pathological tissue lesions in mice (P<0.05). 5.2 Effect on thymus and spleen tissue morphology in mouse perimenopausal model

Gunakan mikrometer untuk mengukur ketebalan bagian korteks timus yang paling tebal dan tersempit setiap mencit pada setiap kelompok eksperimen untuk memperoleh rata-ratanya; gunakan mikrometer untuk menempatkan garis dasar pada bintil limpa, dan ukur kedua ketebalannya dengan arteri sentral sebagai pusatnya. Ketebalan nodul limpa di kedua sisi dihitung dan dirata-rata; hasilnya ditunjukkan pada Tabel 8 dan Gambar 10.

Tabel 8 Pengaruh Cistanche deserticola feniletanol glikosida terhadap perubahan patologis timus dan limpa pada tikus model perimenopause (-x±s)

Seperti dapat dilihat dari Tabel 8 dan Gambar 10, dibandingkan dengan kelompok kosong, ketebalan korteks timus dan volume nodul limpa pada kelompok model berkurang secara signifikan (P<0.01), indicating that the thymus and spleen volumes atrophied after the perimenopausal model was created in mice. Compared with the model group, high-dose Cistanche deserticola phenylethanol glycoside can significantly thicken the thymic cortex (P<0.01), and medium-dose Cistanche deserticola phenylethanoid glycoside can significantly thicken the thymic cortex (P<0.05). Each medication group could significantly increase the volume of splenic nodules. 5.3 Effect on pituitary tissue morphology in mouse perimenopausal model

Bidang pandang pembesaran tinggi mencakup area seluas 10.000μm

2. Ukur jumlah sel basofil dan sel hipofisis anterior pada bingkai mikropersegi panjang. Hasilnya ditunjukkan pada Tabel 9 dan Gambar 11~12.

Dapat dilihat dari Tabel 9 dan Gambar 11-12 bahwa dibandingkan dengan kelompok kosong, jumlah sel basofil dan sel hipofisis anterior pada kelompok model berkurang secara signifikan (P<0.01), indicating that after the perimenopausal model was created in mice, secretion of The cellular source of gonadotropins is reduced. Compared with the model group, each medication group could significantly increase the number of pituitary basophil cells (P<0.01). Except for the low-dose Cistanche deserticola phenylethanol glycoside group, all other medication groups could significantly increase the number of anterior pituitary cells (P<0.01). P<0.01).