Pengaruh Ramipril Pada Ginjal, Paru-Paru Dan Jantung ACE2 pada Model Tikus Diabetes

{0}}

ABSTRAKLatar Belakang: Sindrom pernapasan akut parah coronavirus 2 (SARS-CoV-2) bertanggung jawab atas penyakit coronavirus 2019 (COVID-19 saat ini). Organ utama yang terkena infeksi ini adalah paru-paru dan virus menggunakan enzim pengubah angiotensin 2 (ACE2) sebagai reseptor untuk masuk ke sel target. Dalam konteks ini, kontroversi muncul mengenai penggunaan penghambat sistem renin-angiotensin (RAAS), karena obat ini dapat meningkatkan ekspresi ACE2 di beberapa jaringan dan berpotensi meningkatkan risiko infeksi SARS-CoV-2. Hal ini terutama mengkhawatirkan pada pasien diabetes karena diabetes merupakan faktor risiko COVID-19. Metode: 12-tikus diabetes (db/db) berumur seminggu diterapi dengan ramipril atau kontrol kendaraan selama 8 minggu. Tikus db/m nondiabetes dimasukkan sebagai kontrol. Ekspresi dan aktivitas ACE2 dipelajari di paru-paru,ginjaldan hati hewan-hewan ini. Hasil:GinjalAktivitas ACE2 meningkat pada tikus db/db dibandingkan dengan db/m (143,2 persen ± 23 persen vs 100 persen ± 22,3 persen, p=0.004), sedangkan ramipril tidak berpengaruh signifikan. Di paru-paru, tidak ada perbedaan yang ditemukan pada ACE2 ketika membandingkan tikus db/db dengan db/m dan ramipril juga tidak berpengaruh signifikan. Di jantung, diabetes menurunkan aktivitas ACE2 (83 persen ± 16,8 persen , vs 100 persen ± 23,1 persen p=0.02), dan ramipril meningkatkan ACE2 secara signifikan (83 persen ± 16,8 persen vs 98,2 persen ± 15 persen, p=0.04). Kesimpulan: Pada model tikus diabetes tipe 2, ramipril tidak berpengaruh signifikan pada aktivitas ACE2 baikginjalatau di paru-paru. Oleh karena itu, kecil kemungkinan bahwa RAAS blocker atau setidaknya penghambat enzim pengubah angiotensin meningkatkan risiko infeksi SARS-CoV-2 melalui peningkatan ACE2.

Kata kunci:COVID{}; Diabetes; blokade RAAS; Paru-paru; penyakit ginjal; ginjal

CISTANCHE AKAN MENINGKATKAN PENYAKIT GINJAL/GINJAL

pengantarPandemi yang disebabkan oleh sindrom pernafasan akut parah coronavirus 2 (SARS-CoV-2) yang dimulai pada Desember 2019 di Wuhan, Cina, telah menyebabkan krisis sanitasi di seluruh dunia. Paru-paru adalah organ utama yang terkena penyakit virus corona-19 (COVID-19). SARS-CoV-2 menggunakan protein transmembran angiotensin-converting enzyme 2 (ACE2) sebagai salah satu reseptor untuk memasuki sel target (Hoffmann et al., 2020), fitur yang dimiliki oleh SARS-CoV (virus yang menyebabkan epidemi SARS pada tahun 2002) (Li et al., 2003). ACE2 adalah karboksipeptidase yang mengubah angiotensin-I (Ang-I) dan angiotensin-II (Ang-II) menjadi angiotensin-1-9 (Ang-1-9) dan angiotensin-1-7 (Ang{{23 }}), masing-masing. Enzim ini merupakan bagian dari jalur alternatif sistem renin-angiotensin-aldosteron (RAAS). Aktivasinya memiliki efek vasodilator dan mengatur secara negatif lengan klasik RAAS (vasokonstriktor) (Obukhov et al., 2020; Romero et al., 2015). ACE2 diekspresikan secara luas dalam sel tubulus proksimalginjal(Lely et al., 2004). Pada tingkat yang lebih rendah juga diekspresikan di paru-paru (dalam pneumosit tipe 2) (Hamming et al., 2004; Serfozo et al., 2020) dan jantung (dalam kardiomiosit) (Oudit et al., 2009). Wawasan yang diberikan oleh pandemi SARS-CoV pertama pada tahun 2002, mengungkapkan bahwa infeksi SARS-CoV menyebabkan penurunan ekspresi ACE2 di paru-paru. Pada cedera paru-paru akut, defisiensi ACE2 telah dikaitkan dengan peningkatan kerusakan jaringan, yang mungkin dianggap berasal dari aktivasi berlebihan dari lengan vasokonstriktor RAAS (aksis reseptor tipe 1 ACE/Ang-II/Angiotensin-II) (Kuba et al. , 2006). Oleh karena itu, RAAS tampaknya memainkan peran penting dalam tingkat keparahan cedera paru-paru yang terkait dengan infeksi SARS-CoV-2. Selanjutnya, deregulasi RAAS secara klasik terlihat pada diabetes, dan perubahan ekspresi ACE2 telah diidentifikasi padaginjaldan jantung pasien diabetes (Reich et al., 2008). Data meta-analisis telah mengungkapkan bahwa pasien yang terinfeksi SARS-CoV-2 tidak memiliki prevalensi diabetes yang lebih tinggi, meskipun pasien diabetes menunjukkan peningkatan risiko untuk menderita bentuk infeksi SARS-CoV-2 yang parah dan hasil yang lebih buruk (Fadini dkk., 2020). Sekitar 40 persen pasien diabetes tipe 2 adalah hipertensi ("Hipertensi dalam studi diabetes (HDS): I. Prevalensi hipertensi pada pasien diabetes tipe 2 yang baru datang dan hubungannya dengan faktor risiko komplikasi kardiovaskular dan diabetes," 1993) dan oleh karena itu diobati dengan RAAS blocker: angiotensin-converting enzyme inhibitor (ACEis) atau angiotensin-II tipe 1 receptor blocker (ARB). Selain itu, obat ini juga banyak digunakan untuk mengobati hipertensi non-diabetes dan proteinuria pada beberapa penyakitpenyakit ginjal(García-Carro et al., 2019).

Selama gelombang pertama pandemi COVID-19, kontroversi muncul terkait penggunaan RAAS blocker karena beberapa penelitian dalam model eksperimental telah menunjukkan bahwa pengobatan dengan obat ini meningkatkan ekspresi ACE2 di jaringan jantung (Ferrario et al., 2005). ; Ishiyama et al., 2004; Ocaranza et al., 2006) dan dalamginjalpembuluh darah (Soler et al., 2009). Karena bukti praklinis ini, disarankan bahwa pengobatan dengan RAAS blocker dapat meningkatkan kerentanan terhadap infeksi SARS-CoV-2 yang menciptakan paradoks karena peningkatan kadar ACE2 biasanya dianggap sebagai pelindung jaringan (Aleksova et al., 2020 ; Sparks dkk., 2020; Wang dkk., 2020). Terlepas dari hasil penelitian tersebut (Ferrario et al., 2005; Ishiyama et al., 2004; Ocaranza et al., 2006; Soler et al., 2009) tidak ada cukup bukti untuk menegaskan bahwa obat ini mempromosikan ekspresi ACE2 sebagai penulis lain yang menggunakan model eksperimental serupa belum mengamati modulasi ACE2 yang diinduksi oleh RAAS blocker (Burchil et al., 2012; Burrell et al., 2005). Selain itu, efek RAAS blocker pada modulasi ACE2 paru-paru hampir tidak dievaluasi. Dalam laporan baru-baru ini, Wysocki dan kolaborator menggambarkan modulasi ACE2 diginjaldan paru-paru mencit (C57BLKS/J) yang diberi RAAS blocker (telmisatan atau captopril) (Wysocki et al., 2020). Di sini kita mempelajari efek ACEi (ramipril) padaginjal, paru-paru dan jantung ACE2 pada model tikus diabetes tipe 2.

CISTANCHE AKAN MENINGKATKAN INFEKSI GINJAL/GINJAL

2. Bahan-bahan dan metode-metode

2.1.Prosedur hewanTikus diabetes jantan yang kekurangan reseptor leptin berusia delapan minggu (db/db) dan teman seresah heterozigot non-diabetes (db/ plus ) dibeli dari Sungai Charles (BKS.Cg-Dock7m plus / plus Lepr"J.Strain Code: 607 Tikus ditempatkan dalam kelompok 4 per kandang maksimum dengan akses ad libitum ke Chow tikus biasa dan air di bawah siklus 12 jam terang: 12 jam gelap.Setelah 4 minggu (12-tikus berumur minggu) a kelompok db/db (n =7) diobati dengan ramipril (8 mg/kg/hari) yang diencerkan dalam air minum (20 mg/L) selama 8 minggu Kendaraan db/db (n=7 )dan db/m (n=7) digunakan sebagai kontrol. Berat dan glukosa darah dipantau dua mingguan dan tekanan darah sebelum dan sesudah perlakuan (lihat metode tambahan). Setelah masa perlakuan, hewan dikorbankan di bawah natrium pentobarbital anestesi.Mencit kemudian perfusi dengan dingin PBS 1x dan seluruh darah diperoleh dengan tusukan jantung.Sampel darah dikumpulkan dalam tabung dengan gel aktivator pembekuan (41.1378.005, Sarstedt, Jerman) untuk mendapatkan s erum. Setelah itu,ginjal,jantung dan paru-paru dikeluarkan, dibekukan dalam nitrogen cair dan dipertahankan pada -80 derajat C sampai digunakan. Selain itu, sebagian dariginjaldan jantung difiksasi dalam 10 persen formalin dan parafin tertanam untuk analisis histologis. Protokol eksperimental telah disetujui oleh Komite Etik Eksperimen Hewan dari Vall d'Hebron Research Institute (47.18 CEEA). Semua prosedur dilakukan sesuai dengan pedoman Generalitat de Catalunya dalam kerangka Arahan Dewan Eropa untuk perlindungan dan perawatan hewan yang digunakan untuk penelitian dan tujuan ilmiah lainnya (2010/63/EU).

2.2. analisis ACE2Gen ACE2 dan ekspresi protein, serta aktivitas ACE2, dianalisis dalamginjal, ekstrak paru-paru dan jantung. Dalam serum, hanya aktivitas ACE2 yang dinilai. Ekspresi gen ACE2 diukur dengan RT-qPCR dan metode A△Cr diterapkan untuk kuantifikasi relatif menggunakan Hypo-xanthine Phosphoribosyltransferase 1 (HPRT) sebagai gen rumah tangga. Tingkat protein ACE2 dinilai dengan Western blot dan aktivitas ACE2 ditentukan melalui uji enzimatik fluoresen menggunakan substrat fluorogenik yang dipadamkan ACE2-(Mca-Ala-Pro-Lys (Dnp)-OH: Enzo Life-Sciences) seperti yang dijelaskan sebelumnya (Riera et al.2016). Selain itu, diginjaldan di jantung kami mendeteksi ACE2 dengan immunohistochem-istry. Metodologi dirinci dalam metode tambahan.

2.3. Analisis statistikDistribusi normal diperiksa dengan membandingkan data kami dengan distribusi normal yang diprediksi oleh plot kuantil-kuantil (QQ) dan dikonfirmasi dengan uji normalitas (Saphiro-Wilk dan/atau Kolmogorov-Smirnov). Kelompok-kelompok tersebut dibandingkan (db/m vs db/db). dan db/db vs db/db plus Ramipri) dengan uji-t Welch ketika normalitas terpenuhi atau dengan uji Mann-Whitney ketika data mengikuti distribusi non-normal. Data selalu dinyatakan sebagai mean ± standar deviasi (SD). Nilai-p dirinci untuk memperkirakan kepercayaan perbandingan dan signifikansi statistik dipertimbangkan ketika p Kurang dari atau sama dengan 0.05. Semua analisis statistik dan grafik dilakukan dengan GraphPad Prism Versi 8.2.1.

3. Hasil

3.1. Ramipril menurunkan tekanan darah pada tikus db/dbTujuan akhir dari penelitian ini adalah untuk menilai (1) bagaimana konteks diabetes memodulasiginjal, reseptor ACE2(SARS-CoV-2 paru dan jantung untuk menginfeksi sel target), dan (2) apakah pengobatan ACEi dapat mengubah perilaku ACE2 pada diabetes. Untuk tujuan ini,12-tikus diabetes (db/db) berumur seminggu diobati dengan ramipril (8 mg/kg/hari), ACEi, selama 8 minggu. Kendaraan db/db dan tikus non-diabetes (db/m) dimasukkan sebagai kontrol. Seperti yang diharapkan, semua tikus diabetes, baik yang diobati dengan ramipril dan pembawa, menunjukkan hiperglikemia dan peningkatan berat badan pada akhir percobaan dibandingkan tikus todb/m (Tabel 1). Dalam pengaturan eksperimental kami, tikus db/db menggambarkan penurunan tekanan darah sistolik dan diastolik dibandingkan dengan tikus kontrol db/m (lihat Tabel 1). Seperti yang diharapkan, pemberian Ramipril selama 8 minggu secara signifikan menurunkan tekanan darah sistolik bila dibandingkan dengan kelompok db/db dan/atau kelompok db/m (Tabel 1) menunjukkan bahwa pengobatan ramipril efektif.

3.2. ACE2 meningkat di ginjal tikus db/db yang tidak dimodifikasi oleh ramiprilKami mempelajari modulasi ACE2 diginjaldari db/m, kendaraan db/db dan tikus db/db diobati dengan ramipril menggunakan dua pendekatan: (1) ekspresi gen ACE2 dengan qPCR dan (2) uji aktivitas ACE2 menggunakan substrat fluoresen. Tikus pembawa db/db menunjukkan peningkatan ekspresi gen ACE2 ginjal bila dibandingkan dengan db/m(1,011 ± 0.16 vs 1582 ± 0,18, p<0.0001), this="" effect="">

dibalik dengan pemberian ramipril (1,280 ± 0,18, p=0.01) (Gbr. 1, A). Aktivitas ACE2 ginjal (100 persen ± 14,2 persen vs 114 persen ± 31,9 persen , p=0.2) juga cenderung meningkat dalam db/db kendaraan, namun ramipril tidak mengubah aktivitasnya (114 persen ± 31,9 persen vs 109,3 persen ± 18,6 persen ) (Gbr. 1D)). Dalam ekstrak protein yang diperkaya membran, menjadi jelas bahwa hewan db/db telah meningkatkan aktivitas ACE2 dibandingkan dengan db/m (100 persen ± 22,3 persen vs 143,2 persen ± 23,1 persen , p=0.004) dan , sekali lagi, ramipril tidak mengubah aktivitas ACE2 dalamginjalekstrak yang diperkaya membran (Gbr. 2A). Dalamginjalbagian jaringan, ekspresi ACE2 terlokalisasi di brush border sel tubulus dan pewarnaan lebih menonjol pada db/db bila dibandingkan dengan db/m (Gbr. 3). Kami mencatat tidak ada perubahan besar dalam distribusi ACE2 diginjalhewan yang diobati dengan ramipril bila dibandingkan dengan db/db yang tidak diobati (Gbr. 3).

3.3. Ramipril tidak memodifikasi ACE2 paru pada tikus db/db Di paru-paru, kami melakukan pendekatan yang sama seperti padaginjaluntuk mempelajari ACE2. Kami tidak menemukan perbedaan antara db/m dan kendaraan db/db mengenai ekspresi gen ACE2 (Gbr. 1, B) terutama terkait dengan variabilitas tinggi dalam ekspresi mRNA ACE2 (0.97 ± {{6} }.8 vs 1.07 ± 0,71, p=0,63). Kami tidak dapat menemukan perbedaan antara aktivitas paru-paru dan ACE2 (atau dalam ekstrak protein total atau ekstrak yang diperkaya membran) (Gambar 1E dan 2B, dan Gambar Tambahan 1 dan 2, masing-masing). Selanjutnya, di paru-paru db/db, pengobatan ramipril tidak menginduksi perubahan ekspresi dan aktivitas gen ACE2 (Gbr. 1B dan E, Gbr. 2B dan Gambar Tambahan 1 dan 2).

3.4 ACE2 menurun di jantung hari dan ramipril menormalkan kadar ACE2Kami juga menganalisis ACE2 di jantung Dalam jaringan jantung, ACE2 menurun secara signifikan dalam db/db vs db/m yang hadir untuk keduanya, tingkat mRNA (1.01±0.12ws {{8 }}.84±0.16,p=0.05)(Gbr.1C)danaktivitas ACE2 100 persen ±23,1 persen ws 83 persen ±16,8 persen ,p=0.02）（臣g.1F） .Dalam ekstrak yang diperkaya membran, aktivitas ACE2 juga menurun secara signifikan dalam db/db bila dibandingkan dengan db/m (Gbr.2O.Perlakuan Ramipril secara signifikan memulihkan aktivitas ACE2 ke tikus kontrol db/m yang diamati (83 persen ±16,8 persen v 98,2 persen ±15 persen ,p=0.04)(Gbr.1E). Namun, ramipril tidak dapat mengubah ekspresi gen ACE2 di jantung (Gbr,IC), Selanjutnya, kami menilai distribusi ACE2 di jaringan jantung di mana ACE2 pewarnaan menunjukkan distribusi difus dengan peningkatan pewarnaan ACE2 di beberapa area.Kami mencatat bahwa intensitas pewarnaan lebih ringan dalam db/db bila dibandingkan dengan db/m.Ramipril tampaknya mengembalikan intensitas pewarnaan (Hig 3).

3.5 Aktivitas serum ACE2 meningkat dalam db/db dan tidak dimodifikasi oleh ramiprilAkhirnya, kami mengukur aktivitas ACE2 dalam sampel serum dari db/m, db/db dan db/db yang diobati dengan ramipril. Aktivitas serum ACE2 meningkat secara signifikan dalam db/db bila dibandingkan dengan db/m (99,9 persen ± 29,3 persen ws 146 persen ±57,2 persen , p= 0.03) dan ramipril tidak mengurangi efek ini (146 persen). ±57,2 persen vs 128 persen ±55,7 persen ,p= 0.5)(Gbr.4).

4. Diskusi

Pandemi saat ini yang disebabkan oleh SARS-CoV-2 telah menimbulkan kontroversi terkait penggunaan RAAS blocker pada pasien COVID-19. Terlepas dari manfaat yang ditunjukkan dari penggunaan ACEi atau ARB pada pasien kardiovaskular (Fegan et al, 2000; Romero et al., 2015) telah disarankan bahwa obat ini dapat meningkatkan ekspresi ACE2, reseptor untuk SARS-CoV{{ 7}}, dan karenanya meningkatkan risiko dan tingkat keparahan COVID-19 (Aleksova et al,2020; Sparls et al,2020; Wang et al,2020).

Dengan penelitian ini kami bertujuan untuk menjelaskan kontroversi ini dan untuk tujuan ini kami menganalisis ACE2 pada sampel ginjal, paru-paru, jantung, dan serum dari model tikus diabetes (db/db) yang diobati dengan ramipril selama 8 minggu. Kami menggunakan model diabetes untuk menentukan efek blokade RAAS karena lingkungan diabetes merupakan faktor risiko per laut untuk prognosis buruk pada pasien COVID-19 (Fadini et al,2020; Williamson et al,2020). Kami menemukan peningkatan ekspresi dan aktivitas gen ACE2 ginjal dalam ekstrak membran pada tikus db/db (Gbr. 1A dan 2A, masing-masing). Penelitian sebelumnya juga menunjukkan peningkatan ACE2 ginjal tubular pada tikus diabetes db/db (Wysocki et al, 2006; Yeet al, 2004, 2006) serta pada model tikus diabetes lainnya (Riera et al, 2016; Wysocki et al, 2006). ). Ramipril mampu mengembalikan peningkatan ACE2 pada tingkat ekspresi gen, menunjukkan bahwa pemberiannya bersifat protektif terhadap efek buruk diabetes di dalam ginjal. Temuan kami di ginjal kontras dengan hasil yang diterbitkan dalam laporan terbaru dari Wysocki dan kolaborator (Wysocldi et al.2020) ketika mereka menggambarkan blokade RAAS pada tikus C57BLKS/J mempromosikan penurunan ekspresi ACE2 bersama dengan internalisasi protein. Dalam penelitian kami menggunakan model tikus db/db, kami tidak menemukan bahwa ramipril mengurangi aktivitas ACE2 di ginjal (Gbr. 1Dand2A) dan kami tidak mengamati internalisasi protein (Gbr,3). Meski begitu, kami menemukan bahwa pengobatan ramipril menginduksi penurunan ekspresi gen ACE2 dalam db/db(Gbr,1A). Ekspresi gen dan protein mungkin tidak berkorelasi karena perbedaan waktu antara sintesis dan degradasi protein, tetapi hasil yang diperoleh dalam ekspresi gen ACE2 (Fg.1A) menunjukkan bahwa blokade RAAS akan mendorong penurunan ACE2 di ginjal seperti yang disarankan oleh Wysocki dan kolaborator. Wysocldi dkk.2020). Pendekatan kami, tidak seperti studi Wysocki dkk. (Wysocldi et al.2020), meniru pasien diabetes yang biasanya menerima RAAS blocker untuk menunda perkembangan nefropati diabetik (Garcia-Carro et al..2019). Inline, wark terbaru dari Batchu et al. telah dengan jelas menunjukkan pada ginjal dan paru-paru tikus diabetes komorbid (penuaan, diet tinggi lemak, dan diabetes yang diinduksi streptozotocin) bahwa ACE2 diregulasi. namun, blokade RAAS tidak dapat mengubahnya (Batchu et al.2020). Dengan demikian. setidaknya untuk ginjal. hasil kami tidak mendukung gagasan bahwa blokade RAAS akan mendukung ekspresi berlebih ACE2. Pada manusia, dua penelitian independen menjelaskan bahwa gen ACE2 tubular dan ekspresi protein menurun pada penderita diabetes

nefropati dibandingkan dengan individu yang sehat (Mizuiri et al,2008; Reich et al,2008), meskipun penulis lain tidak dapat menemukan perbedaan apapun (Lelyet al.2004). Mengenai efek blokade RAAS pada manusia, ada beberapa bukti bahwa hal itu mempengaruhi ekspresi ACE2 di ginjal (Lely et al, 2004; Reich et al, 2008).

Kami juga menganalisis ACE2 di jaringan paru-paru dan jantung di mana kehadiran ACE2 jauh lebih rendah daripada di ginjal (Gambar Tambahan S1 dan S2). Mengenai paru-paru, kami memperoleh variabilitas antarindividu yang tinggi dalam ekspresi gen ACE2 (Gbr.1) yang mungkin sebagian dijelaskan oleh fakta bahwa ekspresi ACE2 di paru-paru sangat rendah dan terbatas pada pneumosit tipe 2 (Ziegler et al, 2020). Kami memperoleh hasil yang baik ketika ACE2 diperkirakan dengan pengukuran aktivitas enzim. Aktivitas ACE2 paru serupa antara db/m kontrol dan db/db diabetes dan tidak ada perbedaan yang terlihat pada db/db yang diobati dengan ramipril dibandingkan dengan kendaraan db/db (Fgs.IE dan 2B). Meskipun ACE2 di paru-paru belum dipelajari secara luas pada model hewan, telah dilaporkan bahwa tikus NOD dan teman seresah mereka yang non-diabetes memiliki aktivitas ACE2 yang serupa di paru-paru (Roca-Ho et al.2017). Sebaliknya, streptozotocin dan tikus diabetes yang diinduksi diet tinggi lemak menunjukkan peningkatan aktivitas ACE2 paru-paru dibandingkan dengan tikus non-diabetes (Batchu et al., 2020). Mengenai efek blokade RAAS pada ACE2 paru, hasil kami konsisten dengan laporan Wysockiet al dan Batchu et al. karena mereka tidak menemukan perbedaan termasuk aktivitas ACE2 ketika tikus diobati dengan ARB atau ACEi (Batchu et al.2020; Wysocldi et al.2020). Pada manusia, sebuah penelitian pada 1051 pasien mengungkapkan bahwa ekspresi gen ACE2 paru-paru diatur ke bawah oleh pengobatan ACEi jangka panjang sedangkan itu tidak diubah oleh ARB (Milne et al, 2020), meskipun tidak ada data mengenai tingkat atau aktivitas protein ACE2 yang tersedia.

Ekspresi dan aktivitas gen ACE2 jantung secara signifikan menurun pada mic db/db bila dibandingkan dengan db/m (Gbr.1Cand F, masing-masing). Dalam kasus ini, pengobatan dengan ramipril meningkatkan aktivitas ACE2 (Gbr.1F.Hasil ini menunjukkan bahwa dalam model db/db profil diabetes mendorong penurunan ACE2 jantung yang dipulihkan di bawah blokade RAAS. Pada tikus diabetes db/db, penurunan ACE2 jantung tampaknya terjadi seiring waktu seperti yang dilakukan hewan yang lebih muda (berusia 8 minggu). tidak menunjukkan penurunan aktivitas ACE2 di jantung (Ye et al, 2004) Cardiac ACE2 juga menurun pada tikus diabetes yang diinduksi streptozotocin (Qiao et al, 2015; Shin et al.2017) meskipun model tikus diabetes lainnya menunjukkan peningkatan ACE2 jantung jika dibandingkan dengan tandu non-diabetes mereka (Patel et al, 2012; Roca-Ho et al., 2017).Meskipun demikian, percobaan in vitro menunjukkan bahwa glukosa dapat secara langsung menurunkan regulasi ACE2 dalam sel otot polos pembuluh darah jantung (Lavrentyev dan Malik , 2009). Modulasi ACE2 di jantung serta efek blok RAAS kade telah banyak dipelajari pada infark miokard (MI) baik pada model tikus maupun pada manusia. Dalam model tikus MI, Ocaranza dan kolaborator menunjukkan bahwa aktivitas ACE2 jantung menurun pada MI dan blokade RAAS

dengan enalapril membalikkannya (Ocaranz et al, 2006), mirip dengan apa yang terjadi dalam penelitian kami. Namun, penelitian lain yang dilakukan pada model tikus MI yang serupa belum mencapai kesimpulan yang sama (Burrell et al.2005; Ishiyama et al, 2004). Pada manusia, ACE2 tampaknya meningkat di jantung setelah MI (Burrell et al, 2005). dan pada kardiomiopati idiopatik dan iskemik (Goulder et al, 2004). Sepengetahuan kami, efek blokade RAAS pada ekspresi ACE2 jantung belum dipelajari pada manusia. Akhirnya, kami menganalisis aktivitas ACE2 dalam serum. ACE2dapat ditemukan baik di membran sel jaringan sel dan larut (sACE2); yang berasal dari pelepasan ACE2 yang terikat membran oleh domain metalopeptidase ADAM 17 (ADAM17) (Lambert et al, 2005). ACE2 hanya bekerja sebagai reseptor untuk SARS-CoV-2 di tingkat organ tetapi telah disarankan bahwa sACE2 dapat mengurangi kapasitas infeksi virus dengan bertindak sebagai umpan (Balle et al,2020; Monteil et al, 2020; Wysocl et al, 2021), meskipun tingkat darah sACE2 yang rendah hampir tidak akan menghasilkan efek yang menguntungkan ini. Meski begitu, menarik untuk mengetahui apakah kadar ACE2 serum dimodulasi (atau tidak) pada diabetes atau oleh RAAS blocker karena bisa menjadi sinyal variasi dalam jaringan ACE2 Dalam pengertian ini, telah dipostulasikan bahwa ADAM17 dapat memainkan peran penting melawan oleh bersaing untuk pembelahan ACE2 dengan serine-protease Transmembrane Serine Protease 2 (TMPRSS2), suatu protease mendasar untuk internalisasi SARS-CoV-2 (Palau et al.2020). Kami menemukan bahwa serum ACE2 meningkat dalam db/db bila dibandingkan dengan db/m dan ramipril tidak mengembalikan efek ini (Fg,.3). Penelitian lain juga menggambarkan peningkatan ACE2 darah pada model tikus diabetes (Riera et al.2016; Roca-Hoet al,2017;

Wysocki et al.,2013) dan pada pasien diabetes tipe 1 (Soro-Paavonen et al.2012) meskipun efek blokade RAAS belum banyak dipelajari. Dalam hal ini pada manusia, buktinya tidak homogen. Dalam studi Soro-Paavonen dan cols. (Soro-Paavonen et al, 2012), terapi ACEi meningkatkan kadar ACE2 dalam darah pada pasien pria dan wanita dan pengobatan ARB hanya pada wanita. Sebaliknya, dalam pracetak baru-baru ini, sedikit penurunan ACE2 darah dicatat dengan pengobatan ARB tetapi ACEi tidak menyebabkan perubahan (Emilsson et al, 2020).

CISTANCHE AKAN MENINGKATKAN NYERI GINJAL / GINJAL

Karena perbedaan yang disebutkan di atas mengenai modulasi ACE2 di antara model hewan diabetes yang berbeda dan pada manusia, sulit untuk mendapatkan jawaban pasti untuk pertanyaan: "Apakah blokade RAAS menginduksi ekspresi ACE2 yang berlebihan?". Dalam gambaran keseluruhan, memperhatikan data kami, dan bukti dari penulis lain, kesan bahwa konteks diabetes dalam banyak kasus memodifikasi ekspresi ACE2 baik di ginjal dan di jantung (turun atau naik, tergantung pada model atau spesies). ) dan, bahwa blokade RAAS:(1) menurunkan atau tidak mengubah ACE2 ginjal (baik dalam model eksperimental dan tidak manusiawi), (2)tidak mengubah ACE2 paru-paru (walaupun diperlukan lebih banyak bukti di sini), (3)mempromosikan ekspresi ACE2 di jantung (pada kebanyakan model eksperimental) dan (4) memiliki efek variabel pada tingkat ACE2 darah (tergantung pada kohort dan jenis RAAS blocker). Oleh karena itu, premis yang dibuat "Blokade RAAS menginduksi ekspresi berlebih ACE2 dan akibatnya. meningkatkan risiko infeksi SARS-CoV-2" tidak berlaku untuk jantung, ginjal, dan, yang lebih penting, bukan untuk paru-paru. . Meskipun, asumsi ini adalah titik diperdebatkan karena hanya memberikan visi sederhana tentang regulasi ekspresi ACE2 dan tidak memperhitungkan bahwa ACE2 bersifat protektif di sebagian besar konteks (Batlle et al, 2012; Oudit et al, 2010; Zhong et al. , 2010). Telah ditunjukkan bahwa ACE2 bermanfaat dalam model eksperimental cedera paru-paru yang disebabkan oleh virus flu H7N9 (Yang et al, 2015) atau LPS (Ye dan Liu, 2020). Dalam model tikus dengan cedera paru-paru, SARS Infeksi -CoV menurunkan ekspresi ACE2 paru-paru tetapi pengobatan dengan losartan memperbaiki cedera paru-paru dan ekspresi ACE2 meningkat pada saat yang sama (Kuba et al, 2005) menunjukkan bahwa ACE2 bermanfaat untuk mengatasi infeksi virus. Selain itu, konteks inflamasi seperti badai sitokin yang terjadi pada subset pasien corvid-19 (Mehta et al, 2020) juga dapat mengatur ekspresi ACE2 meskipun tidak jelas ke arah mana (de Lang et al., 2006). ; Wet al.2020). Bagaimanapun, upregulation dan downregulation ACE2 berpotensi merugikan selama infeksi SARS-CoV-2 yang menunjukkan bahwa level ACE2 harus berada dalam kisaran keseimbangan (South et al.2020).

Sebagai kesimpulan, di sini kami mendemonstrasikan dalam model tikus diabetes bahwa penghambatan ACE hanya menghasilkan peningkatan regulasi ACE2 di jantung diabetes, di mana ACE2 menurun akibat diabetes. Ini tidak terjadi di ginjal atau di paru-paru memperkuat gagasan bahwa di sebagian besar jaringan blokade RAAS tidak meningkatkan tingkat ekspresi ACE2. Bahkan hasil yang kami peroleh di jantung, dapat didiskusikan apakah pengobatan dengan ARB atau ACEi memberikan risiko nyata untuk peningkatan infeksi COVID-19 dan memperburuk prognosisnya. Blokade RAAS memiliki manfaat kardiovaskular yang jelas (Fegan et al, 2000; Romero et al, 2015), sementara ACE2 tingkat rendah tidak mungkin bermanfaat untuk resolusi COVID-19.