BAGIAN : Analog Epoxyeicosatrienoic Acid Target Ginjal, EET-F01, Mengurangi Peradangan, Stres Oksidatif, dan Nefrotoksisitas Terinduksi Cisplatin

Kontak:{0}}/ WhatsApp: 008618081934791

John D. Imig, Md Abdul Hye Khan & dkk.

1. Perkenalan

Penyakit ginjal pada pasien dan penderita kanker telah muncul sebagai masalah kesehatan utama dan terus meningkat tajam [1-3]. Terapi kanker yang lebih baru telah meningkatkan angka kesembuhan dan waktu kelangsungan hidup, tetapi kelainan cairan dan elektrolit terkait terapi dan cedera ginjal akut yang berkembang menjadi penyakit ginjal kronis adalah gejala sisa yang umum [3-5]. Obat antikanker, vascular endothelial growth factor receptor tyrosine kinase inhibitors (VEGFRI), dan turunan platinum juga dapat menyebabkan cedera ginjal parah yang secara signifikan membahayakan penggunaan yang efektif dan aman [3–5]. Ada kebutuhan klinis yang signifikan untuk terapi baru untuk secara efektif mengobati dan menghentikan penyakit ginjal pada pasien kanker. Masalah kesehatan ini telah menyebabkan perkembangan, evolusi, dan munculnya subspesialisasi, Nefrologi Onco [5]. Perawatan saat ini hanya memperlambat hilangnya fungsi ginjal atau tidak bermanfaat sama sekali [2,5,6]. Pendekatan baru sangat dibutuhkan. Penelitian berkelanjutan kami sedang menyerang arena kanker yang sedang berkembang ini dan kami berfokus pada pengembangan analog asam epoksieikosatrienoat (EET) untuk melindungi ginjal dari toksisitas terkait terapi kanker.

tablet bioflavonoiddancistancheuntukfungsi ginjal

Analog EET didasarkan pada bagian farmakoforik dari EET dan dirancang dengan peningkatan kelarutan dan ketahanan terhadap auto-oksidasi dan metabolisme oleh soluble epoxide hydrolase (sEH) [7,8]. Studi sebelumnya telah menunjukkan bahwa analog EET sintetis adalah pelindung ginjal dalam beberapa kondisi patologis seperti hipertensi, yang diinduksi obatnefrotoksisitas, dan lupus nefritis [9-13]. Analog EET mengurangi kerusakan ginjal pada keadaan penyakit ini melalui aktivitas vasodilator, diuretik, anti-inflamasi, anti-oksidatif, dan anti-apoptosis[10-13]. Studi-studi ini dengan jelas menunjukkan bahwa pendekatan berbasis EET memerangi kerusakan ginjal dalam situasi patologis dengan etiologi yang berbeda. Baru-baru ini, upaya telah dilakukan untuk mengembangkan analog EET yang memiliki sifat unik untuk menargetkan ginjal. Bentuk baru dari analog EET yang ditargetkan pada ginjal dirancang dan disintesis dengan mengkonjugasikan farmakofor EET dengan asam folat (EET-F01). Dalam penelitian ini, kami menyelidiki kemampuanEET-F01untuk menargetkan ginjal bila dibandingkan dengan analog EET, EET-A. EET-FO1 dan EET-A dibandingkan karena kemampuannya untuk mengurangi cedera ginjal akibat cisplatin. Terakhir, penelitian ini lebih lanjut menggambarkan tindakan anti-inflamasi dan anti-oksidatif pelindung ginjal dariEET-F01.

manfaat cistancheuntukginjal

2. Hasil

2.1. EET-F01Menargetkan Jaringan Ginjal

Struktur kimia untuk EET-A dan EET-FO1 disajikan pada Gambar 1. Kemurnian untuk EET-A danEET-F01 was >95 persen seperti yang ditentukan oleh NMR. Dalam penelitian hewan akut, dosis yang sama berdasarkan berat EET-A danEET-F01diberikan secara intravena selama 6 jam diikuti dengan pengumpulan plasma dan jaringan ginjal. Kami mendemonstrasikan 5-kali lipat tingkat plasmaEET-F01dibandingkan dengan EET-A setelah 6-h pemberian terus menerus (Gambar 1). Menariknya, kami juga menunjukkan bahwa setelah 6- jam pemberian terus menerus, kandungan ginjal EET-A hampir tidak terdeteksi dibandingkan denganEET-F01kandungan dalam ginjal (Gambar 1). Data ini menunjukkan bahwaEET-F01menargetkan ginjal.

Gambar 1. Perbandingan plasma dan ginjal EET-F01 dan EET-A setelah pemberian iv selama 6 jam.Panel atas: Struktur kimia untuk EET-A danEET-F01. Panel kiri: Konsentrasi plasma EET-FO1 dan EET-A. Panel kanan: Tingkat ginjalEET-F01dan EET-A. Data dinyatakan sebagai mean±SEM, n=3/grup.

2.2. EET-F01Melindungi dari CisplatinNefrotoksisitas

Dalam serangkaian percobaan terpisah, kelompok tikus diberi perlakuan sebelumnya denganEET-F01dan EET-A selama dua hari sebelum induksi nefropati cisplatin dan kemudian diobati lebih lanjut dengan senyawa uji selama 5 hari lagi. Tindakan perlindungan ginjal dariEET-F01dan EET-A ditentukan dari kadar BUN, kandungan NAG urin, dan kadar KIM-1 urin.EET-F01sama efektifnya dengan EET-A dalam menurunkan BUN, NAG, KIM-1, dan cedera histologis ginjal lima hari setelah induksi cisplatinnefrotoksisitas(Gambar 2). Selanjutnya, pemeriksaan histologis dilakukan untuk menilai lebih lanjut nefrotoksisitas cisplatin. Pemberian cisplatin mengakibatkan cedera tubular yang dimanifestasikan oleh vakuolasi dan deskuamasi sel epitel ginjal bersama dengan pembentukan cor protein intra-tubular yang parah di daerah kortikal dan meduler ginjal. EET-A danEET-F01pengobatan melindungi ginjal dari cisplatinnefrotoksisitaspada tikus (Gambar 2).EET-F01efektif pada 20 mg/kg/hari dan pada 10-kali lipat dosis lebih rendah dari 2 mg/kg/hari meskipun berat molekulnya hampir 2x lebih besar karena folat dibandingkan dengan EET-A. Data ini dengan jelas menunjukkan bahwaEET-F01menargetkan ginjal dan memfasilitasi dosis yang lebih rendah, namun tetap manjur. Dengan demikian, kami telah mengembangkan analog EET bertarget ginjal,EET-F01, yang menunjukkan potensi yang sangat baik sebagai terapi untuk penyakit ginjal.

manfaat cistanche deserticola

Gambar 2. Cedera ginjal yang disebabkan oleh cisplatin dikurangi dengan pengobatan EET-F01 dan EET-A.Panel kiri: nitrogen urea darah (BUN), Panel tengah: N-asetil urin- -(D)-glukosaminidase (NAG), Panel kanan: molekul cedera ginjal-1 (KIM-1) pada tikus yang diberikan cisplatin yang diobati dengan kendaraan, EET-FO1, atau EET-A. Panel bawah: Fotomikrograf representatif dari Pewarnaan Periodic acid-Schiff (PAS) yang menggambarkan vakuolasi dan deskuamasi sel epitel ginjal bersama dengan pembentukan cor tubular cast protein intra-tubular yang parah di bagian ginjal dari kelompok eksperimen yang berbeda.*p<0.05 vs.="" control-vehicle="" group;t=""><0.05 vs.="" cisplatin-vehicle="" group.data="" expressed="" as="" mean="" ±sem,="" n="">

2.3. EET-F01 dan EET-A Mengurangi Peradangan Ginjal dan Stres Oksidasi di CisplatinNefrotoksisitas

Tingkat ekspresi mRNA IL-6 dan TNFo ginjal mengungkapkan peningkatan 4 hingga 5-kali lipat pada cisplatin yang diinduksinefrotoksisitas. EET-F01dan pengobatan EET-A mengurangi gen inflamasi ginjal IL-6 dan TNF sebesar 30-50 persen pada cisplatinnefrotoksisitas(Gambar 3). Peningkatan ekspresi ginjal dari gen penanda oksidatif NADPH oksidase subunit p47phox, p67phox, gp91phox, dan NOX4 diamati pada tikus yang diberikan cisplatin. Tingkat TBARS jaringan ginjal meningkat selama induksi cisplatinnefrotoksisitas. Peningkatan stres oksidatif yang diinduksi cisplatin ini dilemahkan60-100 persen olehEET-F01dan pengobatan EET-A (Gambar 4 dan 5). Data ini menunjukkan bahwa target ginjalEET-F01sama efektifnya dengan EET-A dalam mengurangi peradangan dan stres oksidatif pada cisplatinnefrotoksisitas.

Gambar 3. Peradangan ginjal pada nefrotoksisitas cisplatin dikurangi dengan pengobatan EET-F01 dan EET-A.Analisis RT-PCR untuk ekspresi mRNA IL-6(panel kiri) dan TNF (panel kanan).*p<0.05 vs.="" control-vehicle="" group;=""><0.05 vs.="" cisplatin-vehicle="" group.="" data="" expressed="" as="" mean±sem,="" n="">

2.4. EET-A Tidak Meningkatkan Pertumbuhan Tumor

Penggunaan analog EET mungkin mempromosikan metastasis kanker bila diberikan untuk jangka waktu yang lama [14,15]. Meskipun pendekatan terapeutik saat ini akan memberikan analog EET untuk waktu yang singkat untuk mencegah induksi cisplatinnefrotoksisitas, kami mengevaluasi efek jangka panjang dari EET-A pada pertumbuhan tumor dari garis sel kanker payudara manusia, MBA-MB-231, pada tikus athymic. Volume dan berat tumor meningkat pada tingkat yang sama pada tikus kendaraan atau tikus yang diobati dengan EET-A selama periode tiga minggu (Gambar 6). Evaluasi histologis tumor gagal menunjukkan perubahan apa pun pada hiperplasia seluler atau proliferasi pada tikus yang diobati dengan EET-A. Data ini menunjukkan bahwa EET-A tidak meningkatkan pertumbuhan tumor.

Gambar 4. Stres oksidatif ginjal pada nefrotoksisitas cisplatin dikurangi dengan pengobatan EET-F01 dan EET-A.Analisis RT-PCR untuk ekspresi mRNA dari (a)p47phox, (b)p67phox, (c)gp91phox, (d) NOX4.*p<0.05 vs.control-vehicle=""><0.05 vs.="" cisplatin-vehicle="" group.="" data="" expressed="" as="" mean="" ±="" sem,="" n="">	Gambar 5. Zat reaktif asam tiobarbiturat ginjal (TBARS) pada nefrotoksisitas cisplatin dikurangi dengan pengobatan EET-F01 dan EET-A.*p<0.05 vs.control-vehicle=""><0.05 vs.="" cisplatin-vehicle="" group.="" data="" expressed="" as="" mean="" ±="" sem,="" n="">

Gambar 6. Pertumbuhan tumor dari garis sel kanker payudara manusia, MBA-MB-231, pada tikus athymic tidak diubah oleh pengobatan EET-A.Panel kiri: volume tumor, Panel kanan: berat tumor pada tikus yang mengandung tumor MBA-MB-231 yang diobati dengan kendaraan (kontrol) atau EET-A. Panel bawah: Fotomikrograf representatif dari Pewarnaan Periodic acid-Schiff (PAS) yang menggambarkan hiperplasia dan proliferasi tumor serupa pada tumor payudara manusia. Data dinyatakan sebagai mean± SEM, n=5 tikus dan n=10 tumor/kelompok.

KLIK DI SINI UNTUK BAGIAN

cistanche di hindi