Deteksi Respon Imun Humoral Dan Seluler Terhadap Vaksin Anti‑SARS‑CoV‑2 BNT162b2 pada Wanita Menyusui dan Individu yang Naif dan Sebelumnya Terinfeksi

Studi ini mengeksplorasi respons humoral dan seluler terhadap vaksin mRNA anti-SARS-CoV-2 BNT162b2 pada wanita menyusui dan individu yang naif dan seropositif dalam enam bulan pertama setelah vaksinasi. Enam puluh satu sukarelawan yang divaksinasi dengan dua dosis vaksin mRNA BNT162b2 terdaftar dalam penelitian ini. ELISA yang dikembangkan sendiri digunakan untuk kuantifikasi antibodi spesifik SARS-CoV-2 RBD. Ekspresi penanda permukaan sel dan analisis IFN intraseluler dilakukan dengan flow cytometry. Konsentrasi IFN-, IL-6, dan TNF ditentukan dengan ELISA. Peningkatan signifikan pada tingkat antibodi IgG anti-RBD diamati 14 hari setelah dosis vaksin pertama (hal< 0.0001) in serum and milk. The expression of CD28 on CD4+ T cells was significantly higher compared to baseline (p< 0.05). There was a significant increase (p≤ 0.05) in the B cell lymphocyte subset after revaccination and an increased percentage of CD80+ B cells. The expression of IFN-γ in peripheral blood lymphocytes, CD3+ T cells, and serum was significantly increased (p< 0.05). No significant difference in immune response was observed between breastfeeding women and other study participants. The anti-SARS CoV-2 BNT162b2 mRNA vaccine induced measurable and durable immune response in breastfeeding women and naïve and previously infected individuals. 

manfaat cistanche untuk pria-memperkuat sistem kekebalan tubuh

Klik di sini untuk melihat produk Cistanche Meningkatkan Imunitas

【Minta lebih lanjut】 Email:cindy.xue@wecistanche.com / Aplikasi WhatsApp: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

1. Perkenalan 

Penyebaran virus SARS-CoV-2 secara global setelah kasus khusus pertama didaftarkan pada tanggal 31 Desember 2019, di Wuhan, Tiongkok, menyebabkan pandemi Penyakit Virus Corona-19 (COVID{{) di seluruh dunia 5}}), dengan sekitar 648 juta kasus dan 6,6 juta kematian hingga 18 Desember 20221. Kematian akibat COVID-19 telah dikaitkan dengan produksi sitokin proinflamasi yang berlebihan seperti IL-6, TNF-, dan IL-1, yang disebut "badai sitokin", yang dapat menyebabkan sindrom gangguan pernapasan akut dan kerusakan jaringan luas yang mengakibatkan kegagalan multi-organ2. Namun, kemajuan pesat dalam diagnosis, pengobatan, dan pengenalan vaksinasi diperkirakan akan berkontribusi pada penurunan jumlah orang yang terinfeksi, kebutuhan rawat inap, dan pada akhirnya penurunan angka kematian. Di Serbia, kasus pertama yang terdaftar secara resmi terjadi pada tanggal 6 Maret 2020, dan vaksinasi dimulai pada tanggal 24 Desember 2020. Saat ini, terdapat empat vaksin yang tersedia untuk masyarakat umum, Vero Cell–Inactivated (Sinopharm), Vaxzevria (ChAdOx{{ 22}}S [rekombinan], AstraZeneca), Sputnik V (Gam-COVID-Vac, Gamaleya), dan Comirnaty (BNT162b2, BioNTech–Pfizer). Selain produksi antibodi spesifik, respons imun yang efektif terhadap SARS-CoV-2 memerlukan aktivasi imunitas seluler. Komponen imunitas seluler, termasuk sel T CD4+ pembantu dan CD8+ sitotoksik, sel pembunuh alami (NK), dan sel B, dalam beberapa jam dan hari pertama setelah terpapar virus ini diperkirakan akan rusak. mengurangi gejala penyakit, mencegah perkembangan penyakit, rawat inap, dan kematian. Sel T-helper (T) yang teraktivasi secara tidak langsung dapat membunuh sel yang terinfeksi, dan mendukung fungsi sel B dan respons antibodi, dengan memproduksi interferon- (IFN- )3,4. Fenotip T1 telah terbukti dikaitkan dengan tingkat keparahan penyakit COVID-19 yang lebih rendah5, sehingga strategi pengembangan vaksin COVID-19 juga harus mempertimbangkan kemungkinan aktivasi sel T untuk produksi IFN. Imunitas seluler terhadap SARS-CoV-2 dilaporkan dapat terdeteksi hingga 6 bulan pasca infeksi pada lebih dari 90% individu6. Oleh karena itu, vaksinasi diharapkan dapat meningkatkan imunitas seluler yang terukur dan berkontribusi dalam upaya melawan pandemi. Hasil baru menunjukkan bahwa selain mengaktifkan sel B di pusat germinal7, vaksin mRNA anti-SARS-CoV-2 harus menghasilkan respons sel T CD4+ dan CD8+ spesifik protein lonjakan8. Meskipun titer antibodi biasanya berkorelasi dengan kemanjuran vaksin, sel B dan T penting dalam perlindungan terhadap paparan berulang terhadap antigen virus. Sel B dan T memori ini diharapkan dihasilkan oleh vaksin mRNA SARS-CoV-2 dan harus berperan dalam mengendalikan replikasi virus, serta membatasi penyebaran virus9. Meskipun tidak ada efek samping parah yang dilaporkan, respons spesifik terhadap vaksinasi anti-SARS-CoV-2 pada wanita hamil dan menyusui serta bayi yang ibunya menerima vaksin selama menyusui masih dalam evaluasi dan masih menjadi topik kontroversial10,11. Penelitian ini bertujuan untuk pertama kalinya mengeksplorasi respons humoral dan seluler bulanan terhadap vaksin mRNA anti-SARS-CoV-2 BNT162b2 pada wanita menyusui dan pada individu yang naif dan seropositif, dalam enam bulan pertama setelah vaksinasi di Serbia, dan tindak lanjut keselamatan jangka panjang yang dilaporkan sendiri selama dua tahun.

Bahan dan metode

Desain studi dan pengumpulan serta pemrosesan sampel.

Sebanyak 61 sukarelawan (45 SARS-CoV-2 naif, 16 SARS-CoV-2 pulih menurut laporan yang dikonfirmasi PCR) terdaftar dalam penelitian ini dan dipantau pada periode Januari hingga 2 November{ {11}}21. Rata-rata waktu antara infeksi alami dan vaksinasi pada individu yang sebelumnya terinfeksi adalah 3,18±0,98 bulan, dengan kisaran 2–5 bulan. Semua peserta berusia di atas 18 tahun dan tidak menunjukkan tanda-tanda infeksi saluran pernafasan pada saat vaksinasi. Sebagian besar peserta adalah petugas kesehatan dari Institut Onkologi dan Radiologi Serbia (44; 72%). Peserta divaksinasi dengan dua dosis vaksin mRNA BNT162b2 (selisih 3 minggu). Semua pengambilan darah dilakukan di pusat kesehatan yang disetujui dengan protokol dan observasi yang ketat. Empat partisipan merupakan ibu menyusui yang secara sukarela mencocokkan sampel darah dan susu. Sampel dikumpulkan pada 6-titik waktu: titik 1—pravaksinasi (baseline), titik 2–14 hari pasca imunisasi dasar, titik 3–1 bulan pasca imunisasi dasar, titik 4–2 bulan pasca imunisasi dasar, poin 5–3 bulan pasca imunisasi primer, dan poin 6–6 bulan pasca imunisasi primer. 10-20 mL darah tepi diambil sampelnya untuk setiap titik waktu, serta 1 mL susu untuk 4 wanita menyusui yang berpartisipasi. Serum diperoleh dari darah tepi dengan sentrifugasi segera setelah pengambilan darah dan disimpan pada suhu -20 derajat. Sel mononuklear darah tepi (PBMC) diisolasi dari darah yang diheparinisasi menggunakan gradien kepadatan Lymphoprep (Nypacon, Oslo, Norwegia), disentrifugasi pada 500 g selama 40 menit, dan dicuci tiga kali dalam media kultur (CM) RPMI 1640 (Sigma, St. Louis , MO) ditambah dengan 10% serum janin anak sapi (FCS) (Sigma, St. Louis, MO). Setelah dicuci, PBMC segera digunakan untuk analisis imunofenotipe. Penelitian ini disetujui oleh Komite Etika Institut Onkologi dan Radiologi Serbia (No. 899–01 tanggal 01.04.2021.), dan semua peserta menandatangani persetujuan. Semua peserta diwawancarai oleh staf medis yang berpengalaman. Tindak lanjut efek samping pasca vaksinasi yang dilaporkan sendiri dalam jangka panjang dilakukan selama dua tahun setelah dosis vaksin pertama.

cistanche tubulosa-meningkatkan sistem kekebalan tubuh

Deteksi dan kuantifikasi antibodi spesifik RBD SARS‑CoV‑2.

Ekspresi RBD protein lonjakan SARS-CoV-2 (NCBI: YP_009724390, AA319-541) dilakukan dalam garis sel HEK-293 T mengikuti prosedur yang diterbitkan sebelumnya12 . Protein rekombinan dimurnikan hingga homogenitas, dan hasil yang diperoleh adalah 5{{20}}0 mg per L kultur sel. Secara singkat, protein RBD rekombinan digunakan untuk melapisi pelat sumur 96-bagian bawah lemak (Thermo Scientific NUNC-MaxiSorp, USA) pada konsentrasi akhir 10 ug/mL (50 μL/sumur) dalam buffer pelapis (15 mM Na2CO3/35 mM NaHCO3, pH 9,5) pada 4 derajat semalaman. Pelat dicuci dengan TBS yang mengandung 0,05% Tween 20 (TBST) dan diblokir dengan 1% BSA dalam TBST selama 2 jam pada suhu 37 derajat. Serum encer diinkubasi pada suhu 37 derajat selama 1 jam dalam TBST yang mengandung 0,1% BSA, dan kemudian pelat dicuci dengan TBST. Untuk penentuan IgG spesifik total, antibodi terkonjugasi anti-Manusia-IgG-AP kambing (Novus Biologicals, USA) diencerkan 1/1000 dalam larutan pemblokiran dan ditambahkan ke dalam sumur. Setelah inkubasi selama 1 jam pada suhu 37 derajat, pelat dicuci 5 kali dengan TBST dan dikembangkan dengan 4-Nitrofenil fosfat selama 1 jam pada suhu 37 derajat. Absorbansi diukur pada 450 nm (A450).

Analisis aliran sitometri.

Imunofenotipe permukaan sel sel mononuklear darah tepi (PBMC) diidentifikasi menggunakan kombinasi antibodi monoklonal berlabel langsung (mAbs) berikut: CD3FITC/CD28PE/CD4PerCP, CD80PE/CD19PerCP, CD80PE/CD14PerCP (Becton Dickinson, San Jose, USA). Sampel disiapkan seperti yang dijelaskan sebelumnya menggunakan 1 × 105 PBMC yang baru diisolasi dalam 100 μL RPMI 1640 ditambah dengan 10% Fetal Calf Serum (FCS, Sigma), diinkubasi selama 30 menit pada suhu 4 derajat dengan 20 μL kombinasi mAb yang sesuai, dicuci dua kali dengan saline buffer fosfat (PBS) sedingin es, dan difiksasi dengan paraformaldehyde 1% sebelum analisis FACS. Ekspresi penanda permukaan diukur pada sitometer aliran FACSCalibur (Becton – Dickinson, San Jose, USA). Sebanyak 10,000–50,000 peristiwa yang terverifikasi sebagai limfosit darah perifer (PBL) dan monosit, berdasarkan karakteristik fisiknya, karakteristik hamburan ke depan (FSC), dan karakteristik hamburan samping (SSC) ), dikumpulkan per sampel dan dianalisis menggunakan perangkat lunak CellQUEST. Subset sel dinyatakan sebagai persentase dalam darah tepi.

Analisis IFN‑ intraseluler.

Untuk pewarnaan IFN 1× intraseluler, 106 PBMC diinkubasi dengan Phorbol 12-myristate 13-asetat (PMA) (50 ng/mL) ditambah ionomisin (500 ng/mL) selama 4 jam pada suhu 37 derajat dan dengan Brefeldin A (10 ug/mL) selama 3 jam terakhir, seperti dijelaskan sebelumnya14. Sel pertama kali diwarnai untuk antigen permukaan dengan antibodi CD3 PerCP, difiksasi dan setelah permeabilisasi dengan larutan permeabilisasi BD FACS 2 (BD Biosciences) diwarnai untuk anti-IFN-PE (Becton Dickinson). IFN intraseluler dinyatakan sebagai persentase dalam PBL, serta limfosit T CD3.

ELISA.

Konsentrasi IFN-, IL-6, dan TNF dalam serum peserta yang diteliti ditentukan dengan kit ELISA komersial yang tidak dilapisi, sesuai dengan instruksi pabrik (Invitrogen). Konsentrasi sitokin ditentukan pada poin 1 (sebelum vaksinasi), poin 3 (1 bulan pasca imunisasi primer), dan poin 4 (2 bulan pasca imunisasi primer). Secara singkat, pelat ELISA dilapisi dengan antibodi penangkap yang sesuai dalam buffer pelapis dan diinkubasi semalaman pada suhu 4 derajat. Pertama, pelat dicuci dan diblokir dengan Pengencer ELISA/ELISAASPOT. Setelah inkubasi 1 jam, pelat dicuci, dan sampel serum serta standar ditambahkan ke dalam sumur. Setelah inkubasi, pencucian, dan aspirasi, sesuai dengan instruksi pabrik, larutan antibodi pendeteksi ditambahkan ke setiap sumur. Selanjutnya, pelat dicuci dan disedot; larutan avidin-HRP ditambahkan ke dalam sumur dan diinkubasi selama 30 menit. Selanjutnya, pelat dicuci, dan larutan TMB (3,3′,5,5′-Tetramethylbenzidine) ditambahkan ke setiap sumur. Pelat diinkubasi selama 15 menit pada suhu kamar, dan reaksi enzimatik dihentikan dengan menambahkan larutan penghenti. Absorbansi diukur pada 450/520 nm menggunakan pembaca pelat Multiskan EX Termo Labsystems15. Analisis statistik. Hasilnya /disajikan sebagai nilai individual dengan standard error of the mean (SEM). Perbedaan antara nilai dibandingkan dengan menggunakan uji t tidak berpasangan dan uji peringkat bertanda Wilcoxon dan hasilnya dianggap signifikan secara statistik jika p<0.05. The analysis was performed using GraphPad Prism 9.0 (GraphPad, La Jolla, CA, USA).

cistanche tubulosa-meningkatkan sistem kekebalan tubuh

Hasil

3.1 Peserta penelitian dan pengolahan serum/susu.

Karakteristik peserta penelitian disajikan pada Tabel 1. Dari 61 relawan yang menerima vaksin mRNA anti-SARS-CoV-2 BNT162b2, sebanyak 344 sampel serum dikumpulkan pada 6 titik waktu, dimulai dari baseline pra-vaksinasi hingga 6 bulan setelah titik vaksinasi pertama. Sebagian besar peserta penelitian (97%) melaporkan reaksi merugikan lokal terhadap vaksinasi dalam bentuk nyeri ringan pada lengan/bahu dan kelelahan, yang berlangsung selama 1-2 hari. Hanya tiga peserta yang terlambat menerima dosis vaksin kedua, dua karena efek buruk pada vaksinasi primer (ruam kulit, alergi), dan satu karena ditemukan kehamilan setelah dosis pertama. Tidak ada infeksi yang dilaporkan antara kedua dosis vaksin tersebut. Setelah enam bulan pemantauan, hanya 3 (5%) peserta yang terinfeksi SARS-CoV-2, dan tidak terdeteksi adanya penyakit serius yang memerlukan rawat inap. Tujuh peserta hamil setelah vaksinasi, satu orang hamil dalam waktu 2 minggu setelah dosis pertama, satu orang hamil dalam waktu 4 bulan setelah dosis pertama, dan 5 orang dalam waktu 12 bulan setelah dosis pertama. Tindak lanjut yang dilaporkan sendiri dalam jangka panjang menunjukkan tidak ada efek samping terkait vaksinasi hingga dua tahun setelah dosis pertama, pada wanita menyusui atau peserta penelitian lainnya.

Kuantifikasi antibodi spesifik RBD SARS‑CoV‑2 dalam serum dan susu peserta penelitian.

Menganalisis kadar antibodi IgG anti-RBD pasca vaksinasi dalam serum, peningkatan signifikan pada kadar IgG anti-RBD diamati bahkan 14 hari setelah dosis vaksin pertama pada seluruh kelompok yang dianalisis dibandingkan dengan kadar IgG sebelum vaksinasi (17,47±51,49 AU /mL vs. 7828,28±24.157,29 AU/mL, hal<0.0001) (Fig. 1a). Te serum levels of anti-RBD IgG continued to rise to 2 months post-vaccination, when a decrease was detected, which lasted up to 6 months, steadily. The levels of anti-RBD IgG antibodies were compared at each time point between naïve and previously infected individuals (Fig. 1b-c), and it was determined that the difference was statistically significant at baseline (point 1), as previously infected individuals had a higher level of antibodies before vaccination (7.23±0.77 AU/mL vs. 54.47±101.40 AU/mL, p<0.01). The difference was statistically significant also in points 2 (3979.48±3277.27 AU/mL vs. 22,581.99±49,570.63 AU/mL, p<0.05), 5 (2369.16±1934.31 AU/ mL vs. 6366.83±6875.85 AU/mL, p<0.01), and 6 (461.96±375.41 AU/mL vs. 766.04±317.35 AU/mL, p<0.05). The decline in antibody levels had the same dynamics in both groups but remained at higher levels in previously infected individuals for up to 6 months. No other analyzed parameters were correlated with a significantly different level of antibodies in serum (age, gender, smoking status). When comparing levels of anti-RBD IgG antibodies in other participants and breastfeeding women (Fig. 1d-e), no significant differences in serum antibody levels were observed in any of the comparisons. Anti-RBD IgG antibodies were also detected in the milk of 4 breastfeeding women (Fig. 1f). In lower levels, they presented with the same dynamics of rising and decline as detected in the serum. Comparing the levels of anti-RBD IgG antibodies in milk at each time point to baseline, (Fig. 1f), it was determined that the difference was statistically significant at points 2 (6.57±0.77 AU/mL vs. 152.13±35.83 AU/ mL, p<0.01) and 6 (6.57±0.77 AU/mL vs. 117.31±25.64 AU/mL, p<0.01).

Tabel 1. Karakteristik peserta penelitian.

Gambar 1. Tingkat antibodi IgG anti-RBD serum pada (a) seluruh kelompok yang dianalisis, (b naif, c) individu yang sebelumnya terinfeksi, (d) seluruh kelompok tanpa perempuan menyusui, (e) perempuan menyusui, dan (f) pada kelompok susu wanita menyusui. Hasilnya disajikan sebagai nilai individual dengan kesalahan standar rata-rata (SEM) dari tiga ulangan independen. Perbedaan antara nilai-nilai dibandingkan dengan menggunakan uji-t tidak berpasangan dan hasilnya dianggap signifikan secara statistik jika p<0.05. * p<0.05; **p<0.01; *** p<0.0001.

Analisis aliran sitometri dan IFN intraseluler.

Data yang diperoleh dari beberapa analisis sitometri menunjukkan bahwa ekspresi CD28 pada sel T CD4+ darah tepi 2 bulan setelah dosis vaksin kedua secara signifikan lebih tinggi dibandingkan dengan nilai sebelum vaksinasi (42,84±5,37% vs. 37,75 ±5,96%, hal<0.05, Wilcoxon signed-rank test) (Fig. 2a). Tere was a signifcant increase (p≤0.05, Wilcoxon signed rank test) in the prevalence of B cell lymphocyte subset (CD19+) from 6.87±1.17% to 8.73±1.54%, two months afer revaccination, as well as an increased percentage of CD80+ B cells from 1.72±0.28% to 1.99±0.28% (Fig. 2b). Furthermore, fve weeks afer revaccination, a signifcant (p≤0.05, Wilcoxon signed rank test) increase in the percentage of CD14+CD80+ cells from 1.15±0.38% to 5.87±0.95% was detected in the monocyte gate (Fig. 2c). Te expression of IFN-γ in PBLs, as well as in CD3+ T cells was signifcantly (p < 0.05, Wilcoxon signed rank test) increased at 1 week afer the second vaccine dose (1.84 ± 0.13% in PBL and 1.32 ± 0.10% in CD3+ T cells) compared to pre-vaccination baseline values (0.88 ± 0.13% in PBL and 0.72 ± 0.12% in CD3+ T cells) (Fig. 3a). Furthermore, serum levels of IFN-γ were signifcantly increased in all participants from the initial value of 16.69±0.29 pg/mL to 17.72±0.41 pg/mL (p<0.05, Wilcoxon signed rank test) (Fig. 3b), as well as in naive from 16.55±1.77 pg/mL to 17.26±2.53 pg/mL and in a group and previously infected individuals, from 15.93±2.01 pg/mL to 19.90±4.32 pg/mL at 1 week afer revaccination (Fig. 3c). Tere was no signifcant (p>0.05, Wilcoxon menandatangani uji peringkat) perbedaan kadar serum IL-6 dan TNF- 1 minggu dan lima minggu setelah dosis vaksin kedua dibandingkan dengan nilai sebelum vaksinasi secara keseluruhan kelompok, serta pada individu yang naif atau sebelumnya terinfeksi (Gambar Tambahan 1a – d).

Diskusi

Wabah infeksi pernafasan SARS-CoV-2 menimbulkan dampak negatif yang besar pada berbagai aspek kehidupan sehari-hari, termasuk masalah sosial, pendidikan, dan kesehatan yang tidak terkait langsung dengan penyakit COVID-19 itu sendiri16–18 . Pendekatan vaksinasi global diperlukan untuk melengkapi langkah-langkah menjaga jarak dalam memerangi penyakit ini, dan banyak penelitian yang mengeksplorasi efisiensi dan efektivitas berbagai jenis vaksin yang didistribusikan ke seluruh dunia pada tahun 2021. Di Serbia, saat ini hanya tersedia laporan sementara mengenai kekebalan humoral 2 dan 3 bulan setelah vaksinasi19 ,20 dan sesuai dengan data yang dilaporkan dalam penelitian ini. Dalam kohort kami yang dianalisis hingga 6 bulan setelah vaksinasi, tingkat serokonversi 100% terdeteksi setelah dosis vaksin pertama. Hanya 5% peserta yang harus menerima dosis vaksin kedua dengan penundaan. Tidak ada laporan infeksi SARS-CoV-2 antara dua dosis vaksin. Hingga enam bulan pemantauan, hanya 5% peserta yang tertular, tanpa perlu rawat inap. Titer antibodi IgG anti-RBD SARS-CoV-2 secara signifikan lebih tinggi dibandingkan dengan awal bahkan setelah dosis vaksin pertama, yang berkontribusi pada anggapan bahwa penggunaan vaksin mRNA BNT162b2 adalah pendekatan yang efisien untuk respons humoral yang cepat terhadap vaksin asli. strain virus. Kadar IgG serum terus meningkat hingga 2 bulan pasca vaksinasi ketika penurunan yang stabil terdeteksi hingga periode analisis 6 bulan. Individu yang sebelumnya terinfeksi ditemukan memiliki titer IgG yang lebih tinggi dibandingkan dengan individu yang naif hingga usia 6 bulan, yang merupakan satu-satunya faktor yang berkontribusi terhadap tingkat antibodi yang berbeda. Antibodi IgG anti-RBD juga terdeteksi dalam susu wanita menyusui pada penelitian kami dan beberapa penelitian sebelumnya21, dengan dinamika titer yang sesuai seperti pada serum. Laporan serupa telah dipublikasikan untuk antibodi IgA setelah infeksi alami22. Karena terbatasnya data yang tersedia saat ini mengenai risiko dan manfaat vaksinasi bagi ibu menyusui, hasil ini cukup menjanjikan mengingat kemungkinan adanya imunisasi pasif pada bayi yang diberi ASI, bahkan setelah 6 bulan setelah ibu menerima vaksinasi. Tidak ada perbedaan signifikan dalam tingkat antibodi serum yang teramati antara individu yang naif atau pernah terinfeksi dan wanita menyusui, hal ini memperkuat pengamatan bahwa respons terhadap vaksin anti-SARS-CoV-2 tidak dipengaruhi oleh laktasi. Rekomendasi saat ini menyatakan bahwa vaksinasi harus dipertimbangkan untuk semua individu berusia 6 bulan ke atas, termasuk mereka yang sedang hamil atau mencoba untuk hamil saat ini atau di masa depan dan menyusui, terlepas dari status infeksi COVID-19 mereka sebelumnya23. Penelitian kami menambah beban bukti24 yang menunjukkan bahwa tidak ada dampak buruk langsung terhadap perempuan menyusui yang menerima vaksin anti-SARS-CoV-2 atau bayi mereka yang disusui. Selain itu, tujuh peserta penelitian hamil setelah vaksinasi, satu orang hamil dalam waktu 2 minggu setelah dosis pertama, satu orang hamil dalam waktu 4 bulan setelah dosis pertama, dan 5 orang dalam waktu 12 bulan setelah dosis pertama. Wawancara lanjutan jangka panjang yang dilakukan baru-baru ini terhadap peserta penelitian mengonfirmasi bahwa tidak ada dampak buruk yang tidak terduga terhadap wanita menyusui atau bayi yang disusui, atau peserta lainnya, dua tahun setelah menerima vaksin anti-SARS-CoV-2.

Gambar 2. Persentase (a) CD3+CD28+ dan CD4+CD28+ limfosit T, (b) CD19+ dan CD{{6 }}CD80+ Limfosit B, (c) CD14+CD80+ monosit dalam darah tepi. Hasilnya disajikan sebagai nilai individual dengan mean±standard error of the mean (SEM). Perbedaan antara nilai-nilai dibandingkan dengan menggunakan uji Wilcoxon Signed-Rank dan hasilnya dianggap signifikan secara statistik jika p<0.05. * p<0.05.

Munculnya varian baru yang menjadi perhatian serta adanya laporan penurunan cepat tingkat antibodi anti-SARS CoV-2 setelah infeksi alami dan vaksinasi25 telah meningkatkan ketidakpastian mengenai peran komponen imunitas seluler. Beberapa penelitian yang mengeksplorasi respon imunologi individu yang divaksinasi di Serbia hanya melaporkan imunitas humoral19,20. Pada penelitian ini, peningkatan ekspresi reseptor kostimulasi CD28 pada sel T CD4+ dan CD80 pada sel B terdeteksi 2 bulan setelah pemberian dosis vaksin kedua. Selain itu, ekspresi CD80 pada monosit meningkat 1-bulan setelah vaksinasi lengkap.

Proliferasi dan diferensiasi sel T menjadi sel efektor atau memori memerlukan presentasi antigen, ko-stimulasi, dan sitokin. Ko-stimulator sel T dengan pertahanan terbaik adalah pasangan molekul, B7-1 (CD80) dan B7-2 (CD86). Mereka biasanya diekspresikan pada sel penyaji antigen (APC) seperti sel dendritik, sel B, makrofag, monosit, dan sel T. Ekspresinya pada monosit juga penting untuk mengaktifkan limfosit dan imunitas adaptif26. Dua reseptor utama yang terdapat pada permukaan limfosit T yang mengikat CD80 dan CD86 adalah CD28, dan protein terkait limfosit T sitotoksik 4 (CTLA-4). Mengikat CD28 mengaktifkan limfosit dan akibatnya meningkatkan respon imun27. Hasil yang diperoleh dalam penelitian ini menunjukkan bahwa sel T CD4+ diaktifkan oleh epitop turunan antigen S yang terdapat pada sel B teraktivasi dan monosit 2 bulan setelah dosis kedua vaksin. Berbagai data menunjukkan bahwa sel T CD4 sebagian besar teraktivasi setelah vaksin mRNA28,29, sementara dalam beberapa penelitian, sel T CD4 dan CD8 dilaporkan sama-sama muncul dan teraktivasi30. Tan dkk. baru-baru ini mengamati bahwa dalam 3 bulan setelah vaksinasi, jumlah rata-rata sel T spesifik Spike setara dengan jumlah yang terdeteksi pada pasien dalam masa pemulihan pada waktu yang sama setelah infeksi SARS-CoV-231. Selain itu, komponen imunitas adaptif (baik pada orang yang pernah terinfeksi maupun divaksinasi) tampaknya diatur secara independen6,32,33 dan terdapat kurangnya korelasi antara produksi antibodi antivirus dan frekuensi sel T. Selain itu, vaksin mRNA saat ini menimbulkan respons imun yang terbatas pada protein Spike. Namun, potensi peran protektif sel T spesifik untuk protein struktural dan nonstruktural lainnya juga harus dievaluasi34. Gagasan bahwa vaksin poliantigenik dapat memberikan kontrol yang lebih besar terhadap varian virus dibandingkan vaksin monoantigenik, seperti vaksin berbasis protein Spike, mungkin memiliki dasar pemikiran yang masuk akal35,36.

Gambar 3. (a) Ekspresi IFN- pada semua limfosit darah tepi CD3+ T. Tingkat IFN- serum pada (b) seluruh kelompok yang dianalisis, (c) individu yang naif dan sebelumnya terinfeksi. Hasilnya disajikan sebagai nilai individual dengan standard error of the mean (SEM). Perbedaan antara nilai-nilai dibandingkan dengan menggunakan uji Wilcoxon Signed-Rank dan hasilnya dianggap signifikan secara statistik jika p<0.05. * p<0.05.

Dalam penelitian ini peningkatan kadar IFN- terdeteksi di semua limfosit dan sel T CD3+ 7 hari setelah vaksinasi lengkap. Selain itu, peningkatan kadar IFN- dalam serum semua individu yang divaksinasi juga diamati, baik pada individu yang naif SARS-CoV-2 dan individu yang sebelumnya terinfeksi 7 hari setelah vaksinasi penuh. Dengan demikian, vaksin berbasis mRNA menginduksi sel T spesifik Spike yang menghasilkan IFN- secara melimpah. IFN- adalah sitokin utama dengan sifat antivirus dan telah terbukti menghambat replikasi SARS-CoV-28. Pemunculan IFN- yang cepat oleh vaksin BNT162b2 yang ditunjukkan dalam penelitian ini menunjukkan respons imun sel T yang baik terhadap virus SARS-CoV-2. Reaksi imunologis yang dipicu oleh SARS-CoV-2 juga mencakup produksi berbagai sitokin proinflamasi, terutama IL-6 dan TNF- dan perubahan kadarnya mungkin terkait dengan prognosis penyakit. Kasus COVID yang parah dan fatal-19 dilaporkan terjadi pada individu dengan tingkat sitokin yang meningkat37. Namun, dalam penelitian ini, tidak ada perbedaan signifikan dalam kadar IL-6 dan TNF- serum yang terdeteksi 7 hari dan hingga 1 bulan setelah vaksinasi penuh, yang mungkin disebabkan oleh karakteristik kohort tertentu dan waktu pengambilan sampel.

Data ini mewakili laporan pertama yang diterbitkan mengenai imunitas tahan lama dengan mempertimbangkan komponen humoral dan seluler, yang berfokus pada wanita menyusui. Hal ini mungkin sangat berguna untuk meta-analisis di masa depan terhadap subkelompok populasi ini dan subkelompok populasi sensitif lainnya, karena data dari wilayah Balkan mengenai populasi Slavia biasanya hilang dari upaya multinasional yang lebih besar.

cistanche tubulosa-meningkatkan sistem kekebalan tubuh

Kesimpulan

Vaksin mRNA anti-SARS-CoV-2 BNT162b2 menginduksi respons humoral dan seluler yang terukur dan tahan lama pada wanita menyusui dan individu yang naif dan pernah terinfeksi dalam enam bulan pertama setelah vaksinasi di Serbia. Tidak ada laporan dampak buruk serius terhadap vaksinasi, dan hanya 5% peserta yang terinfeksi SARS-CoV-2 dalam enam bulan pertama setelah vaksinasi, tanpa perlu rawat inap. Tidak ada laporan dampak buruk yang tidak terduga terhadap wanita menyusui atau bayi mereka yang disusui dua tahun setelah menerima vaksin anti-SARS-CoV-2. Studi lapangan berikutnya harus berfokus pada penelitian vaksin dan strategi pengembangan yang dapat mengendalikan COVID-19 dan potensi pandemi serupa dalam pengendalian yang lebih cepat dan jangka panjang. Upaya juga perlu dilakukan untuk memberikan pedoman berbasis pengetahuan, mengatasi misinformasi dengan tepat terutama seputar subpopulasi sensitif seperti perempuan menyusui, memfasilitasi akses terhadap vaksin pada saat dibutuhkan, dan memperkuat kepercayaan umum terhadap sains.

manfaat cistanche-memperkuat sistem kekebalan tubuh

Referensi

1. Dasbor Virus Corona (COVID-19) Organisasi Kesehatan Dunia WHO. https://covid19.who.int/ (2022).

2. Hojyo, S. dkk. Bagaimana COVID-19 menyebabkan badai sitokin dengan angka kematian yang tinggi. keburukan. Regen. 40, (2020).

3. van Eeden, C., Khan, L., Osman, MS & Tervaert, JWC Disfungsi sel pembunuh alami dan perannya dalam COVID-19. Int. J.Mol. Sains. 21, 6351 (2020).

4. Sette, A. & Crotty, S. Imunitas adaptif terhadap SARS-CoV-2 dan COVID-19. Sel 184, 861–880 (2021).

5. Chen, G. dkk. Gambaran klinis dan imunologi penyakit virus corona berat dan sedang 2019. J. Clin. Menginvestasikan. 130, 2620–2629 (2020).

6. Dan, JM dkk. Memori imunologis terhadap SARS-CoV-2 dinilai hingga 8 bulan setelah infeksi. Sains 80, 371 (2021).

7. Turner, JS dkk. Vaksin mRNA SARS-CoV-2 menginduksi respons pusat germinal manusia yang persisten. Nat. 596, 109–113 (2021).

8. Pelukis, MM dkk. Induksi cepat sel T CD4+ spesifik antigen dikaitkan dengan imunitas humoral dan seluler yang terkoordinasi terhadap vaksinasi mRNA SARS-CoV-2. Imunitas 54, 2133-2142.e3 (2021).

9. Goel, RR dkk. Vaksinasi mRNA menginduksi memori kekebalan yang tahan lama terhadap SARS-CoV-2 dengan evolusi berkelanjutan menuju varian yang menjadi perhatian. persiapan bioRxiv. Melayani. biologi. https://doi.org/10.1101/2021.08.23.457229, (2021)

10. Muyldermans, J., De Weerdt, L., De Brabandere, L., Maertens, K. & Tommelein, E. Efek vaksinasi covid-19 pada wanita menyusui: Tinjauan literatur sistematis. Depan. imunol. 13 Agustus 1498 (2022).

11. Golan, Y. dkk. Vaksinasi Covid-19 mRNA pada masa menyusui: penilaian efek samping dan antibodi terkait vaksin pada pasangan ibu-bayi. Depan. imunol. 12, 777103 (2021).

12. Arbeitman, CR dkk. Perbandingan struktural dan fungsional domain pengikat reseptor lonjakan SARS-CoV-2-yang diproduksi di sel Pichia pastoris dan mamalia. Sains. Ulangan 10, 21779 (2020).

13. Konjevic, G. dkk. Evaluasi kapasitas fungsional sel NK pasien melanoma dalam model in vitro kontak sel NK dengan garis sel tumor K562 dan femx. J.Membr. biologi. 250, 507–516 (2017).

14. Konjević, G. dkk. Penurunan aktivasi CD161 dan peningkatan ekspresi reseptor penghambat CD158a pada sel NK mendasari gangguan sitotoksisitas sel NK pada pasien multiple myeloma. J.Klin. jalan. https://doi.org/10.1136/jclinpath-2016-203614 (2016).

15. Stanojković, TP dkk. Evaluasi ekspresi sitokin dan sirkulasi subset sel imun sebagai parameter potensial toksisitas radiasi akut pada pasien kanker prostat. Sains. Rep.10, 19002 (2020).

16. Cavic, M. dkk. Menjelajahi dampak pandemi SARS-CoV-2 di dunia nyata pada diagnostik molekuler untuk pasien kanker dan individu berisiko tinggi. Pakar Pdt. Mol. Diagnosis. 21, 101–107 (2021).

17. Hassan, I., Mukaigawara, M., King, L., Fernandes, G. & Sridhar, D. Hindsight adalah tahun 2020? Pelajaran mengenai tata kelola kesehatan global satu tahun setelah pandemi. Nat. medis. 27, 396–400 (2021).

18. Cavic, M., Grahovac, J., Zec, R., Stefanovic, M. & Aleksic, E. Ikhtisar tahun pertama pandemi SARS-CoV-2 di Serbia dan Pirot County. piro. Zb. 46, 1–23 (2021).

19. Lijeskić, O. dkk. Studi kohort prospektif mengenai kinetika antibodi spesifik terhadap infeksi sars-cov-2 dan empat vaksin SARS-CoV-2 yang tersedia di Serbia, dan efektivitas vaksin: Laporan sementara 3-bulan. Vaksin 9, (2021).

20. Petrović, V., Vuković, V., Patić, A., Marković, M. & Ristić, M. Imunogenisitas vaksin BNT162b2, BBIBP-CorV dan Gam-COVID-Vac serta kekebalan setelah SARS-CoV alami{{7 }} infeksi-Studi perbandingan dari Novi Sad. Serbia. PLoS Satu 17, e0263468 (2022).

21. Yeo, KT dkk. Aktivitas penetralisir dan mRNA vaksin SARS-CoV-2 Persistensi dalam serum dan ASI setelah vaksinasi BNT162b2 pada wanita menyusui. Depan. imunol. 12, (2022).

22. Kecepatan, RM dkk. Susu dari wanita yang didiagnosis menderita COVID-19 tidak mengandung RNA SARS-CoV-2 namun memiliki tingkat antibodi IgA spesifik SARS-CoV-2-yang persisten. Depan. imunol. 12, 5566 (2021).

23. Vaksin CDC, C. untuk DC dan P. COVID-19 saat hamil atau menyusui. https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-ncov/vacci nes/recommendations/pregnancy.html (2022).

24. Bethesda (MD), NI CH dan HD Obat-obatan dan database laktasi (LactMed). COVID-19 Vaksin. (2022).

25. Jo, DH dkk. Menurun dengan cepat SARS-CoV-2 Titer antibodi dalam waktu 4 bulan setelah vaksinasi BNT162b2. Vaksin 9, (2021).

26. Carreno, BM & Collins, M. Te Keluarga ligan B7 dan reseptornya: jalur baru untuk kostimulasi dan penghambatan respon imun. Ann. Pendeta Imunol. 20, 29–53 (2002).

27. Esensten, JH, Helou, YA, Chopra, G., Weiss, A. & Bluestone, JA CD28 kostimulasi: Dari mekanisme hingga terapi. Imunitas 44, 973–988 (2016).

28. Geers, D. dkk. Varian SARS-CoV-2 yang menjadi perhatian sebagian lolos dari respons humoral tetapi tidak pada respons sel T pada donor dan penerima vaksin COVID-19 yang sedang dalam masa pemulihan. Sains. imunol. 6, (2021).

29. Tarke, A. dkk. Dampak varian SARS-CoV-2 terhadap total reaktivitas sel CD4 + dan CD8 + T pada individu yang terinfeksi atau divaksinasi. Laporan sel. medis. 2, (2021).

30. Sahin, U. dkk. Vaksin BNT162b2 menginduksi antibodi penetral dan sel T polispesifik pada manusia. Nat. 2021 5957868 595, 572–577 (2021).

31. Tan, AT dkk. Pengukuran cepat sel T lonjakan SARS-CoV-2 dalam darah lengkap dari individu yang divaksinasi dan terinfeksi secara alami. J.Klin. Menginvestasikan. 131, (2021).

32. Chia, WN dkk. Dinamika SARS-CoV-2 menetralkan respons antibodi dan durasi kekebalan: Sebuah studi longitudinal. Te Lancet Mikroba 2, e240–e249 (2021).

33. Reynolds, CJ dkk. Respons antibodi penetralisir dan sel T yang sumbang pada infeksi SARS-CoV-2 tanpa gejala dan ringan. Sains. imunol. 5, (2020).

34. Lopandić, Z. dkk. IgM dan IgG Imunoreaktivitas protein m rekombinan SARS-CoV-2. Int. J.Mol. Sains. 22, (2021).

35. Altmann, DM, Boyton, RJ & Beale, R. Imunitas terhadap varian SARS-CoV-2 yang menjadi perhatian. Sains 371, 1103–1104 (2021).

36. Matchett, KAMI dkk. Canggih: Vaksin nukleokapsid menghasilkan kekebalan pelindung SARS-CoV-2 yang tidak bergantung pada lonjakan. J. Imunol. 207, 376–379 (2021).

37. Costela-Ruiz, VJ, Illescas-Montes, R., Puerta-Puerta, JM, Ruiz, C. & Melguizo-Rodríguez, L. Infeksi SARS-CoV-2: Peran sitokin dalam COVID{{ 7}} penyakit. Faktor Pertumbuhan Sitokin Rev. 54, 62 (2020).