Studi komparatif uji batas mikroba dan kriteria potongan -potongan rebusan TCM di antara Amerika Serikat Pharmacopeia, Farmakope Eropa, Pharmacopeia Jepang dan Pharmacopeia Cina ⅱ

2 inspeksi bakteri kontrol

Inspeksi bakteri kontrol adalah item penting dalam inspeksiObat -obatan Herbal Cina. Item inspeksi bakteri kontrol yang biasa diatur dalam empat farmakope termasuk bakteri gram negatif yang tahan empedu, Escherichia coli dan Salmonella [10-13]. Perbandingan metode inspeksi mereka ditunjukkan pada Tabel 2. Harus ditunjukkan bahwa USP43 mengklasifikasikan bakteri gram negatif yang tahan empedu dalam inspeksi jumlah mikroba "2 0 21". Selain itu, metode inspeksi Staphylococcus aureus ditambahkan ke USP43 dan JP17; USP43 juga melengkapi metode inspeksi Clostridium dan merupakan yang pertama untuk mengusulkan konsep penilaian risiko mikroba yang tidak dapat diterima. Selain itu, USP43 hanya memperkenalkan prinsip uji kesesuaian medium kultur dalam metode inspeksi bakteri kontrol obat -obatan herbal Cina, dan tidak mengklarifikasi metode operasi spesifik, juga tidak memerlukan pelaksanaan uji kesesuaian metode; Sementara EP10.0, JP17 dan CHP2020 semuanya memberikan pengantar yang relatif terperinci untuk uji kesesuaian medium kultur dan uji kesesuaian metode.

Ekstrak ramuan obat Cina Lable yang digunakan di pasar AS

 

2.1 bakteri gram negatif yang tahan empedu

Dalam pretreatment, tidak seperti farmakope lainnya yang menggunakan media TSB sebagai pengencer, USP43 menambahkan pH 7,2 PBS sebagai pengencer. Meskipun persyaratan untuk waktu pemulihan sampel sedikit berbeda di setiap pharmacopoeia, mereka semua membutuhkan pemulihan setidaknya 2 jam. Pada tahap pengayaan bakteri, EP1 0. 0 menggunakan 4 konsentrasi inokulasi sampel uji {{9}. Bakteri gram negatif yang tahan empedu yang dapat dideteksi dengan metode ini mencapai 1 × 104 CFU/g (atau CFU/mL).
Dibandingkan dengan metode pharmacopoeias lain menggunakan 3 konsentrasi inokulasi sampel uji 0. 1, 0. 0 1, dan 0. 001 g (atau ml), batas deteksi dari metode EP10.0 meningkat dengan 1 urutan. Metode yang digunakan dalam pemisahan selektif dari berbagai farmakope konsisten, dan media VRBGA digunakan untuk mengidentifikasi koloni yang mencurigakan, tetapi suhu kultur dan waktu kultur sedikit berbeda.

 

Daftar Spesifikasi Cistanche

 

2.2 Escherichia

EP1 0. 0 dan JP17 masing -masing menetapkan metode uji kualitatif dan kuantitatif untuk Escherichia coli, sedangkan USP43 dan CHP2 0 2 0 hanya menetapkan metode uji kualitatif. Dalam metode uji kualitatif, prinsip deteksi masing -masing farmakope konsisten. Solusi uji diperkaya dengan media TSB, diinokulasi ke dalam medium kaldu MacConkey, dan kemudian dipisahkan dengan media selektif. Di antara mereka, USP43 menggunakan media agar MacConkey untuk pemisahan dan kultur selama 18 hingga 24 jam, dan media OMB dapat digunakan untuk identifikasi Escherichia coli; Tiga farmakopoeias lainnya memerlukan penggunaan media agar MacConkey untuk pemisahan dan kultur selama 18 hingga 72 jam, dan bakteri target ditentukan dengan metode identifikasi yang tepat. JP17 juga dapat menggunakan medium agar kromogenik Escherichia coli alih -alih medium agar MacConkey untuk memisahkan dan kultur sampel. Dalam metode uji kuantitatif, keduanya EP1 0. 0 dan JP17 Gunakan metode MPN dengan tiga konsentrasi inokulasi sampel uji 0,1, 0,01, dan 0,001 g (atau ML) untuk memeriksa Escherichia coli dalam sampel, memberikan lebih banyak opsi metode untuk inspeksi bakteri kontrol.

 

2.3 Salmonella

Dalam hal volume pengambilan sampel, kecuali untuk Ep1 0. 0, yang membutuhkan 25 g (atau 25 ml) sampel untuk dikultur dalam 225 ml solusi air pepton yang disangga, atau 1 {farmakop. Pada tahap pengayaan bakteri selektif, USP43, EP1 0. 0 dan CHP2020 semuanya menggunakan medium RV di {30-35 derajat, sedangkan JP17 meningkatkan suhu kultur ke (42 ± 0,5) derajat untuk meningkatkan selektivitas. Pada tahap pemisahan, metode USP43 dapat memilih satu atau lebih medium BGA, XLD atau He; EP10.0 dan CHP2020 hanya memerlukan penggunaan media XLD, dan JP17 juga dapat menggunakan medium agar kromogenik salmonella. Dalam identifikasi mikroorganisme yang mencurigakan, USP43 menyaring bakteri target melalui uji besi tiga gula; EP10.0 dan JP17 menggunakan metode yang tepat untuk menilai; CHP2020 mengintegrasikan dua metode identifikasi di atas, yang lebih fleksibel dan masuk akal.

 

2.4 Bakteri kontrol lainnya

JP17 dan USP43 keduanya menentukan metode pengujian untuk Staphylococcus aureus, sedangkan EP1 0. 0 dan CHP2020 tidak menentukan item ini. JP17 menetapkan bahwa setelah sampel uji dikultur dalam medium TSB, perlu ditransfer ke media TSB yang mengandung 7,5% natrium klorida untuk kultur ulang untuk menghambat bakteri latar belakang; USP43 hanya menggunakan media TSB untuk pengayaan bakteri tunggal. Saat memisahkan media kultur selektif, JP17 dan USP43 menggunakan media VJ Medium dan BP selain media MS. Saat mengidentifikasi koloni yang mencurigakan, USP43 menggunakan uji koagulase plasma, sedangkan JP17 dapat menggunakan metode yang sesuai untuk identifikasi. Selain itu, USP43 juga menyediakan metode deteksi Clostridium, yang sama dengan metode inspeksi mikrobiologis untuk produk non-steril di bawah USP43 "62".

Laboratorium Uji Tes HPLC Ramuan Tiongkok

 

3 standar batas mikrobiologis

3.1 EP1 0. 0

EP1 0. 0 "5.1.8" Membagi potongan obat herbal Cina dan ekstraknya menjadi tiga kategori: sampel untuk pengolahan air mendidih (a), sampel yang diobati dengan proses lain (b), dan sampel yang tidak dapat memenuhi persyaratan B setelah proses lain (c) [10].
Untuk sampel Kelas A, standar batas untuk jumlah TAMC adalah 1 × 107 CFU/G (atau CFU/mL), dan standar batas untuk jumlah TYMC adalah 1 × 105 CFU/G (atau CFU/mL); Pada saat yang sama, hasil jumlah maksimum yang dapat diterima ditetapkan berdasarkan ini, dinyatakan sebagai faktor 5. Standar yang paling ketat untuk item penghitungan produk adalah produk Kelas B, yang standar batas untuk jumlah TAMC adalah 1 × 104 CFU/G (atau CFU/mL) dan jumlah TYMC adalah 1 × 102 CFU/G (atau CFU/mL). Kecuali untuk sampel Kelas A, yang tidak perlu diperiksa untuk bakteri gram negatif yang tahan empedu, sampel kelas B dan kelas C harus diperiksa untuk TAMC, jumlah TYMC dan bakteri gram negatif yang tahan empedu, Escherichia coli dan Salmonella [10], lihat Tabel 3 untuk detail.

 

3.2 JP17

JP17 "G4" membagi potongan obat herbal Cina dan ekstraknya menjadi dua kategori: sampel yang diobati dengan air mendidih (kelas I) dan sampel yang digunakan langsung tanpa melalui proses ekstraksi (kelas II) [11]. Sebagai perbandingan, produk kelas I di JP17 setara dengan produk kelas A di EP1 0. 0, dan kelas II dalam JP17 mirip dengan kelas C di EP1 0. 0. Namun, JP17 tidak menentukan standar batas untuk produk Kelas B di EP10.0, lihat Tabel 3 untuk detailnya.

 

3.3 USP43

Dibandingkan dengan klasifikasi potongan-potongan rebusan dalam EP1 0. 0 dan JP17, USP43 telah membuat klasifikasi produk yang lebih rinci yang mengandung obat Cina (obat tanaman) dalam standar batas mikroba "2023" untuk nutrisi non-steril dan suplemen makanan. Ada 7 kategori, termasuk tanaman kering atau tanah, ekstrak tanaman tanah, dll., Seperti yang ditunjukkan pada Tabel 4. Di antaranya, persyaratan untuk sampel tanaman kering atau tanah adalah jumlah TAMC kurang dari atau sama dengan 1 × 105 CFU/g (atau CFU/mL yang tidak harus dilakukan. Persyaratan ini lebih tinggi dari persyaratan EP10.0 dan JP17 untuk produk dari klasifikasi yang sama.

 

3.4 CHP2020

Berdasarkan edisi 2 0 15, CHP2020 "aturan umum 1108" merevisi standar batas mikroba untuk obat -obatan herbal Cina secara lisan dan direndam langsung, dan menambahkan ketentuan untuk TAMC, jumlah TYMC dan Escherichia coli. Kecuali untuk persyaratan jumlah TYMC 1 × 103 CFU/G, sisanya sama dengan standar batas mikroba untuk sampel Kelas C dalam EP10.0 (lihat Tabel 3). Namun, CHP2020 masih belum menetapkan standar batas terpadu untuk inspeksi bakteri kontrol ekstrak obat herbal Cina. Dapat dilihat bahwa persyaratan CHP2020 untuk batas mikroba obat -obatan herbal Cina, apakah itu klasifikasi obat -obatan Cina yang perlu mengontrol mikroorganisme atau standar batas mikroba, tidak selengkap tiga farmakope lainnya.

 

4 Diskusi

2 0 15 edisi farmakope Cina telah memasukkan beberapa standar batas mikroba untuk irisan obat herbal Cina, yang telah memainkan peran positif dalam memandu produsen obat Cina untuk memperhatikan kontaminasi mikroba dan membakukan pemrosesan irisan obat herbal Cina [15]. Namun, tingkat produksi keseluruhan dan kondisi teknis irisan obat herbal Cina di negara saya jauh di belakang negara -negara maju. Kontaminasi mikroba masih umum dalam produk, dan patogen bersyarat mungkin ada [16-18]. Meskipun sebagian besar irisan obat herbal Tiongkok perlu diproses dengan rebusan dan proses lain sebelum digunakan, masih ada risiko potensial dalam proses pengobatan, dan mikroorganisme patogenik residual masih dapat menyebabkan kerusakan pada pasien [{{3}, 8, {{5}]. Saat ini, meskipun CHP2020 telah merevisi "standar batas mikroba untuk ekstrak obat herbal Cina dan irisan obat herbal Cina", dibandingkan dengan USP43, EP10.0 dan JP17, peraturan CHP2020 tentang klasifikasi sampel, item inspeksi dan standar batas perlu ditingkatkan lebih lanjut.

Obat -obatan herbal Cina adalah produk olahan utama dan jenis obat khusus. Penerapan metode inspeksi mereka adalah tautan penting dalam proses pengaturan standar [14]. Kontaminasi latar belakang obat -obatan herbal Cina tinggi, yang sangat mengganggu inspeksi bakteri kontrol dan memiliki risiko deteksi yang terlewat [17]. Ada perbedaan besar dalam pengayaan bakteri dan efek pemisahan dari berbagai metode inspeksi. Mengambil inspeksi Staphylococcus aureus di JP17 sebagai contoh, penggunaan media TSB yang mengandung 7,5% natrium klorida untuk pengayaan bakteri dapat membantu menghambat pertumbuhan mikroorganisme latar belakang dalam sampel dan meningkatkan tingkat deteksi bakteri target. USP43 dan JP17 juga menambahkan penggunaan berbagai media kultur kolorimetri, yang juga merupakan metode yang efektif untuk membedakan bakteri target. Selain itu, keempat farmakope memungkinkan penggunaan metode inspeksi mikroba alternatif, seperti metode elektrokimia, metode inspeksi gas, metode chemiluminescence, dll. Di antaranya, teknologi deteksi berdasarkan pada biologi molekuler telah menunjukkan keunggulan dan memvantil oleh pemedaran herologi yang tinggi dalam bidang -bidang yang dapat diputar dalam bidang -bidang yang dapat diputar dalam bidang -bidang yang dapat diputar di bidang mikrobi, dan inspirasi mikrobi yang tinggi dalam bidang -bidang yang dapat diputar di bidang mikrobi, dan inspirasi mikrobi yang tinggi dalam bidang -bidang yang dapat diputar dengan spesifisitas mikrobi, dan inspirasi mikrobi. bakteri kontrol dalam obat -obatan herbal [19-20]. Dalam hal standar batas, USP43 memiliki klasifikasi obat -obatan Cina yang paling rinci dan persyaratan yang relatif ketat untuk standar batas mikroba dari irisan obat Cina. Meskipun USP43 tidak menentukan jenis mikroorganisme yang tidak dapat diterima, ia mengharuskan produsen untuk secara aktif mengevaluasi mikroorganisme yang tidak dapat diterima yang mungkin ada dalam produk, terutama untuk mengendalikan mikroorganisme yang dapat menyebabkan efek buruk pada produk dan menyebabkan bahaya keselamatan [12]. Konsep penilaian risiko dan manajemen risiko ini layak dipelajari dan dirujuk di negara saya. Singkatnya, penelitian ini membandingkan dan menganalisis metode enumerasi mikroba, metode inspeksi bakteri kontrol dan standar batas mikroba yang terkait dari irisan obat Cina di empat farmakope. Menurut status kontaminasi mikroba saat ini dan pengendalian irisan obat Cina, perlu untuk lebih meningkatkan inspeksi mikroba dan membatasi standar produk-produk yang berhubungan dengan obat-obatan Tiongkok di farmakopoeia, terus mengumpulkan dan mengatur data beban mikroba dasar, dan secara wajar memandu produsen obat Cina untuk memperkuat pengendalian kontaminasi mikroba dan manajemen, dan akhirnya memastikan keamanan obat. Direkomendasikan bahwa menurut status kontaminasi mikroba saat ini dan kontrol irisan obat Cina, metode inspeksi mikroba dan membatasi standar produk-produk yang berhubungan dengan obat Cina di farmakopoeia harus secara bertahap ditingkatkan, dan tingkat batas mikroba dari produk yang sesuai harus disempurnakan secara wajar.

 

Referensi

[1] Ceko E, Kneifel W, Kopp B. Status mikrobiologis
obat herbal obat yang tersedia secara komersial-studi skrining [J]. Planta Medica, 2001, 67 (3): 263-269.
[2] Enayatifard R, Asgarirad H, Sani Bk. Kualitas mikroba dari beberapa bentuk dosis padat herbal [J]. Afrika J.
Biotechnol, 2010, 9 (11): 1701-1705.
[3] Kipas Yiling, Li Qiongqiong, Fang Rui, dkk. Studi tentang kontaminasi mikroba dari 10 jenis obat -obatan herbal Cina di Shanghai [J]. Pengobatan Herbal Cina, 2015, 46 (13): 1908-1913.
[4] Le Wei, Ding Anwei, Qiu Rongli. Tinjauan penelitian tentang jalur infeksi mikroba dan metode kontrol bahan obat Cina [J]. Jiangsu Journal of Tradition Chinese Medicine, 2010, 42 (2): 80-81.
[5] Yan Dan, Yuan Xing, Jie Dashuai, dkk. Status penelitian dan pemikiran tentang sterilisasi obat -obatan herbal Cina [J]. Chines Herbal Medicine, 2016, 47 (8): 1425-1429.
[6] Duan Jinlian, Li Yue, Zhang Lumei, dkk. Kontaminasi mikroba bahan obat Cina untuk suntikan obat Cina [J]. Jurnal Yunnan University of Tradition Chinese Medicine, 2019, 42 (4): 1-8.
[7] Komite Farmakope Nasional. Pharmacopoeia dari Republik Rakyat Tiongkok. Bagian IV [s]. Edisi 2015. Beijing: China Medical Science and Technology Press, 2015.
[8] Liu Peng, Xu Huayu, Te Yuxiang, dkk. Investigasi dan pemikiran tentang batas mikroba obat -obatan herbal Cina [J]. Jurnal Tiongkok obat Cina Tradisional, 2002, 27 (8): 628-629.
[9] Jia Qian. Refleksi tentang modernisasi dan internasionalisasi pengobatan Tiongkok [J]. Jurnal Tiongkok Informasi Kedokteran Cina Tradisional, 2003, 10 (6): 1-4.
[1 0] Komisi Pharmacopoeia Eropa. Farmakope Eropa [s]. 10.0 Edisi. Strasbourg. Direktorat Eropa untuk Obat Kualitas, 2019: 68-97.
[11] Farmasi dan Badan Perangkat Medis Jepang.
Farmakope Jepang [S]. Edisi ke -17. Tokyo: Kementerian Kesehatan, Buruh dan Kesejahteraan, 2016: 138-147.
[12] Konvensi Farmakope AS. Usp 43- nf38 [s/ol].
(2019-10-04) [2020-06-29]. https://www.uspnf.com/notices/usp-nf-final-print-edition.
[13] Komite Pharmacopoeia China. Pharmacopoeia dari Republik Rakyat Tiongkok. Bagian IV [S]. 2020
edisi. Beijing: China Medical Science and Technology Press, 2020: 171-177.
[14] Peng Aina, Huang Jianghong, Yue Zhaoxia. Menjelajahi langkah -langkah efektif untuk meningkatkan kualitas obat -obatan herbal Cina dan inspeksi irisan obat herbal Cina [J]. Inner Mongolia Journal of Traditional Chinese Medicine, 2016, 35 (11): 108, 117.
[15] Wang Jie, Qiao Xiyao, Lin Fei, dkk. Status saat ini dari obat herbal Cina mengiris pengembangan dan masalah dan analisis dalam manajemen kualitas [J]. Jurnal Tiongkok Kedokteran Cina Tradisional, 2014, 39 (22): 4475-4478.
[16] Deng Yan, Wang Yake, Han Xiaoyu, dkk. Studi tentang toleransi garam empedu dari berbagai varietas obat -obatan herbal Cina akar

Kontaminasi bakteri gram negatif [J]. Jurnal Tiongkok Kedokteran Tiongkok Tradisional, 2017, 42 (21):
4135-4141