Komposisi Kimia Cistanche Pengobatan Cina Dan Analisis Komponen Dalam Tubuh Ⅲ

Bab 2 Kajian kualitatif komposisi kimia Cistanche deserticola

Cistanche adalah batang berdaging daun kering bersisikCistanche deserticola YC.MaDan Cistanche tubulosa (Schenk) R.Wight. Ini adalah salah satu obat tradisional Tiongkok yang menutrisi ginjal-yang yang terkenal. Ini memiliki fungsimemberi nutrisi pada ginjal-yang, mengisi esensi dan darah, dan melembabkan Memiliki efek pencahar dan sering digunakan untuk mengobati impotensi, kemandulan, nyeri pinggang dan lutut, kelemahan otot dan tulang, usus kering dan sembelit, dll. Memiliki efek farmakologis seperti anti- demensia, penyakit anti-Parkinson, perlindungan dari iskemia serebral, dan peningkatan kemampuan belajar dan memori. Untuk memperjelas dasar materiilnyaefektivitas Cistanche deserticola, bab ini menggunakan HPLC dan LC-IT-TOF-MS untuk mengkarakterisasi secara komprehensifkomponen kimia Cistanche. Berdasarkan ringkasan sistematis aturan perengkahan berbagai jenis komponen kimia, sifat Cistanche deserticola dianalisis secara sistematis. Komposisi kimia, untuk menyediakan data yang kaya dari sumber yang dapat dipercayapenjelasan mendalamdari khasiat obatCistanche desertikolasecara alami.

buy cistanche

BERAPA LAMA YANG DIPERLUKAN UNTUK CISTANCHE BEKERJA?

Bagian 1 Bahan Percobaan

1.Instrumen

Spektrometer massa cair Shimadzu HPLC-IT-TOF-MS (dilengkapi dengan 2 pompa LC-20ADXR, sampler otomatis SIL-20AC, oven kolom CTO-20AC, detektor UV SPD-M20A, DGU-20Mesin gas dekontaminasi A3R, CBM-20Pengontrol, sumber ion ESI, Shimadzu Company, Jepang), sistem pemurnian air ultra murni Milli-Q (Milipore Company, AS): timbangan analitik elektronik Mettler ME204 ( Perusahaan Mettler Toledo, Swiss).

2. Reagen

Metanol tingkat kromatografi dan tingkat spektrometri massa, asetonitril, dan asam format tingkat spektrometri massa dibeli dari Thermo-Fisher Company (Pittsburgh, PA, USA). Air tersebut adalah air ultra murni Milli-Q yang dibuat di laboratorium (Millipore, Bedford, MA, USA). Reagen lainnya semuanya berkelas analitis.

Salidroside, 6-deoxycatalpol, 8-asam epi-loganic, echinacoside, acteoside, isoside Verbascoside (isoacteoside,) dan pinoresinol- -D-glucopyranoside (pinoresinol- -D-glucopyranoside) keduanya disediakan oleh kelompok penelitian Profesor Tu Pengfei di Laboratorium Kunci Obat Alami dan Biomimetik di Universitas Peking. Sarcoside F (cistanosideF) dibeli dari Chengdu Mansite Biotechnology Co., Ltd., cistanoside A (cistanoside A), 2'-acetylacteoside (2'-acetylacteoside), 2'-acetylpoliumoside (2'-acetylpoliumoside), cistanoside Polyglucoside (poliumoside ), cistanoside E (cistanosideE), isocistanoside E (isocistanosideE), cistanoside C (cistanosideC), isocistanoside C (isocistanosideC) dan cistanoside D (cistanosideD) semuanya dibeli dari Shanghai Shidande Biotechnology Co., Ltd., tubuloside A (tubulosideA) dan tubuloside B (tubulosideB) dibeli dari Chengdu Weikeqi Biotechnology Co., Ltd.

Bagian 2 Konten eksperimental

1. Persiapan sampel

1.1 Persiapan bahan acuan

Timbang secara tepat berbagai zat referensi dalam jumlah yang sesuai pada "Bagian 1 Bahan Eksperimen" di atas dan siapkan larutan stok 10 mM dengan DMSO. Pipet 2 mL setiap larutan stok dengan tepat dan encerkan dengan asetonitril 25% untuk membuat larutan kontrol campuran 2 μM. 1.2 Persiapan larutan uji

Ekstrak air Cistanche deserticola dibuat oleh laboratorium kami, dan sampelnya disimpan di Pusat Penelitian Modernisasi Pengobatan Tradisional Tiongkok, Sekolah Pengobatan Tradisional Tiongkok, Universitas Pengobatan Tiongkok Beijing. Ambil 20 mg bubuk Cistanche deserticola, tambahkan 40 mL air hingga larut, pusaran dan aduk, sentrifugasi dengan kecepatan 10000 rpm selama 10 menit, dan ambil supernatannya. Artinya, diperoleh larutan uji.

3. Kondisi spektrometri massa

Sumber ion elektrospray (ESI), mode pemindaiannya adalah memindai ion positif dan negatif secara bersamaan dan secara otomatis memicu spektrometri massa multi-level. Rentang pemindaian massal MS'~MS' untuk ion positif adalah m/z50~800, dan untuk ion negatif adalah m/z100~1000. Tegangan ruang semprot masing-masing adalah 4,5kV dan -3,5kV: laju aliran gas atomisasi (Nz) adalah 1,5Lmin; tekanan gas pengering adalah 110MPa; tegangan deteksi adalah 1,55 kV; suhu tabung desolventizer melengkung (CDL) dan modul pemanas keduanya 200 derajat. Tekanan ruang tumbukan adalah 1,5e-Pa; tekanan perangkap ion adalah 2,8e-Pa; jumlah pengulangan tahap pertama positif dan negatif adalah 1, dan waktu akumulasi ion adalah 30 ms; jumlah pengulangan tahap kedua positif dan negatif adalah 2, dan waktu akumulasi ion adalah 20ms. ; Energi disosiasi akibat tumbukan (CID) adalah 50%.

Bagian 3 Hasil dan Pembahasan

Pemilihan kolom

Untuk mendapatkan pemisahan kromatografi yang lebih baik, kami menyaring kolom kromatografi secara ekstensif dari produsen dan spesifikasi yang berbeda, seperti kolom kromatografi ACEUltraCore 2.5 SuperC8 (3.0x150mm, 2.5 um, Advance Chromatography Technologies Ltd., Aberdeen, Scotland), Shiseido Capcell Core Ci8 (2,1 mm x 150mm, 2,7μm), kolom Waters Acquity UPLC HSS T3 (2,1 x 100 mm, 1,8 μm, Milford, MA, USA) dan kolom Capcell Core ADME (2.1x150mm, 2.7μm, Shiseido Corporation, Jepang). Melalui perbandingan sistematis, ditemukan bahwa ketika menggunakan kolom kromatografi Capcell Core ADME (2.1x150mm, 2.7μm, Shiseido Co., Ltd., Jepang), setiap sinyal kromatografi dapat dipisahkan dengan lebih baik (Gambar 3-1).

2. Pemilihan kondisi fase cair

Karena komponen kimia utama dariCistanche desertikolaadalah glikosida feniletanol, lignan, iridoid, dan senyawa lainnya, umumnya merespons lebih baik dalam kondisi ion negatif. Untuk mengidentifikasi komponen kimia tingkat rendah dalam ekstrak air Cistanche deserticola, diperkirakan bahwa asam mungkin perlu ditambahkan ke fase gerak untuk meningkatkan kekuatannya. Oleh karena itu, percobaan ini menggunakan air-metanol, air-asetonitril, 0.1% asam format air-metanol dan 0.1% air asam format-asetonitril sebagai sistem fase gerak untuk diselidiki. Ditemukan bahwa 0.1% air asam format-asetonitril memiliki efek pemisahan terbaik, dengan bentuk puncak yang baik dan kapasitas puncak yang besar, sehingga 0.1% air asam format dan asetonitril dipilih sebagai fase gerak. 3. Analisis kualitatif komponen kimia. Gunakan 19 zat referensi yang ada untuk mengeksplorasi aturan fragmentasi spektrometri massa berbagai jenis senyawa di Cistanche deserticola. Bahan acuan campuran adalah kromatogram PDA pada 340 nm pada kolom ADME dan grafik BPC dalam mode ion positif dan negatif. Lihat Gambar 3-1. Kami meninjau literatur yang relevan melalui PubMed, RSC, CNKl, Springer, ScienceDirect, VIP, dan Wanfang, dll., dan membuat database komponen kimia Cistanche deserticola buatan sendiri. Berdasarkan perbandingan aturan fragmentasi spektrometri massa dan waktu retensi senyawa yang diketahui, kami terlebih dahulu mengidentifikasi 45 senyawa di Cistanche deserticola. senyawa, termasuk 31 glikosida feniletanol, 9 iridoid, 3 benzil glikosida, dan 2 lignan, seperti ditunjukkan pada Tabel 3-1.

buy cistanche

Dengan membandingkan waktu kerahasiaan, spektrum MS dan spektrum MS bahan acuan, senyawa 11, 12, 13, 17, 21, 22, 24, 25, 26, 28, 29, 32, 33, 36, 37, 38 secara berurutan diidentifikasi secara akurat sebagai genipin, cistanchein F, cistancheoside E, echinaceaside, chrysantoside, cistanchein A, tuberosin A, larchresinol 4-0- -D glukosida, mullein Glikosida, isocannabinoid glikosida, pinoresin monomethyl ether glikosida, 2'asetil verbascoside, cistanche glikosida C, isocistancoside C, tubesin B, dan cistanche glikosida D.

Eksperimen ini menggunakan teknologi HPLC-IT-TOF-MS untuk menganalisis secara cepat dan akurat secara sistematis komponen kimia kompleks dalam ekstrak air Cistanche deserticola, yang memberikan dasar untuk analisis kualitas Cistanche deserticola yang komprehensif dan penelitian zat farmakologis in vivo.

buy cistanche