Kemajuan dalam Dermatologi Menggunakan Inovasi DNA Aptamer "Aptamin C": Pencegahan Stres Oksidatif Dan Maksimalisasi Efek Vitamin C Melalui Antioksidasi

Mar 20, 2022

{0}}/ WhatsApp: 008618081934791


Sooho Choi PhD1|Jeongmin Han Ph.D. Kandidat2|Ji Hyun Kim MS Kandidat1|A-Ru Kim Ph.D. Kandidat3|Sang-Heon Kim Ph.D. Kandidat3|Weontae Lee Ph.D., profesor2|Moon-Young Yoon Ph.D., profesor3|Gyuyoup Kim PhD1|Yoon-Seong Kim Ph.D., profesor1

Abstrak

Latar belakang:Vitamin C(juga dikenal sebagai asam L-askorbat) memainkan peran penting dalam pengurangan spesies oksigen reaktif (ROS) dan regenerasi sel dengan melindungi sel dari stres oksidatif. Meskipun vitamin C banyak digunakan di pasar kosmetik dan terapi, ada banyak bukti bahwa vitamin C mudah mengalamioksidasimelalui udara, pH, suhu, dan sinar UV selama penyimpanan. Kekurangan vitamin C ini menurunkan potensinya sebagai antioksidan dan mengurangi umur simpan produk yang mengandung vitamin C sebagai bahannya. Untuk mengatasi kekurangan vitamin C, kami telah mengembangkan Aptamin C, aptamer DNA inovatif yang memaksimalkan khasiat antioksidan vitamin C dengan mengikat bentuk tereduksi vitamin C dan menundanyaoksidasi.

Metode:Pengikatan Aptamin C dengan vitamin C ditentukan dengan menggunakan analisis ITC. Eksperimen ITC dilakukan dengan 0.2 mmol/Lvitamin Cyang disuntikkan 25 kali dalam 2 L alikuot ke dalam sel sampel 1,8 mL yang mengandung Aptamin C pada konsentrasi 0.02 mmol/L. Data dipasang ke isoterm pengikatan satu situs menggunakan program asal untuk ITC v.5.0.

Hasil:Untuk menyelidiki efek Aptamin C danvitamin Ckompleks pada kulit manusia, baik uji in vitro maupun uji klinis. Kami mengamati bahwa kompleks Aptamin C dan vitamin C secara signifikan efektif dalam perbaikan kerutan, efek pemutihan, dan peningkatan hidrasi. Dalam uji klinis, subjek yang diobati dengan kompleks menunjukkan peningkatan dramatis dalam iritasi kulit dan gatal-gatal. Tidak ada reaksi merugikan yang ditunjukkan oleh kompleks Aptamin C dalam pengujian.

Kesimpulan:Secara keseluruhan, hasil ini menunjukkan bahwa Aptamin C, senyawa baru yang inovatif, berpotensi disajikan sebagai bahan kosmetik utama untuk berbagai kondisi kulit.

KATA KUNCIantioksidan, Aptamin C (Vitamin C mengikat Aptamer),oksidasi, stres oksidatif,vitamin C(asam L-askorbat)

flavonoid---anti-oxidation

cistanchememiliki kemampuan antioksidan yang kuat

1|PENGANTAR

Spesies oksigen reaktif (ROS) adalah spesies kimia reaktif yang mengandung oksigen, yang memainkan peran penting dalam pensinyalan sel dan homeostasis.1-3 Ini tidak hanya mencakup efek positif seperti induksi gen pertahanan inang dan mobilisasi sistem transpor ion tetapi juga juga berperan dalam apoptosis (kematian sel terprogram).4,5 Tingkat ROS dapat ditingkatkan oleh stres lingkungan, yang menyebabkan kerusakan pada struktur sel.3 Fenomena ini disebut "stres oksidatif." Stres oksidatif adalah salah satu penyebab utama berbagai penyakit termasuk penyakit neurodegeneratif, penyakit Lou Gehrig, autisme, multiple sclerosis, dan penyakit kulit.6-15 Selanjutnya, stres oksidatif memiliki pengaruh langsung pada proses penuaan kulit16; protein, lipid, dan DNA secara sensitif bereaksi terhadap stres oksidatif yang disebabkan oleh ROS.17 Antioksidan sangat efektif dalam perlindungan kulit karena mereka bereaksi langsung terhadap ROS yang mencegahnya mencapai molekul target biologis.18,19 Antioksidan sepertivitamin C, vitamin E, koenzim Q10, dan senyawa polifenol melindungi kulit dari kerusakan yang disebabkan oleh ROS. Antioksidan dengan demikian membantu mencegah dan mengobati berbagai penyakit kulit dan memperlambat proses penuaan kulit.20 Penggunaan vitamin C dalam industri terutama karena sifat antioksidannya, yang merupakan hasil darivitamin C's kemampuan untuk menetralkan radikal oksigen bebas, melalui proses yang disebut radikal scavenging.21,22 Namun, karena sifat antioksidan yang sama, molekul itu sendiri secara inheren rentan terhadap degradasi melaluioksidasi. Untuk mengatasi masalah ini, kami mengembangkan Aptamin C, aptamer DNA yang secara khusus mengikat vitamin C dan menghambat oksidasi vitamin C. Aptamers adalah oligonukleotida berbasis DNA atau RNA untai tunggal yang mampu secara selektif mengikat berbagai molekul. Aptamer umumnya diidentifikasi dengan metode seleksi in vitro yang disebut sebagai Evolusi Sistematis Ligan dengan pengayaan eksponensial atau "SELEX." Kami mengidentifikasi bahwa Aptamin C menghambatoksidasivitamin C dari beberapa agen pengoksidasi dan mempertahankan aktivitas antioksidan selama penyimpanan jangka panjang. Untuk mengkonfirmasi penilaian keamanan Aptamin C, percobaan dilakukan pada tingkat sel dan langsung diterapkan pada manusia dan tidak ada toksisitas yang diamati. Penyakit kulit seperti dermatitis atopik, psoriasis, dan jerawat terkait dengan respons imun dan ROSVitamin Cmemiliki kemampuan untuk menghilangkan ROS dan memiliki efek anti-inflamasi.24 Aptamin C mencegahoksidasivitamin c dan memaksimalkan kemanjurannya melalui pelepasan lambat. Oleh karena itu, kami mengharapkan bahwa Aptamin C-vitamin C kompleks akan menunjukkan efek sinergis.

2|BAHAN DAN METODE

2.1|Skrining Aptamer terhadap vitamin C dengan pengurangan graphene-oxide

Metode ini dilakukan dengan memodifikasi metode penelitian sebelumnya.25 Kandidat ssDNA yang dapat mengikat secara spesifik padavitamin Cdikembangkan dari perpustakaan ssDNA acak yang terdiri dari sekitar 1X1018 urutan yang berbeda. Untuk perpustakaan ssDNA, kami menggunakan urutan yang dibuat khusus dengan ukuran 60mer dan berisi 30 urutan nukleotida yang dihasilkan secara acak dan situs primer untuk amplifikasi (5′-ATGCGGATCCCGCGC-(N)30-GCGCGAAGCTTCGGC-3′). Kami melakukan total lima putaran sambil mengubah kondisi eksperimental untuk memilih urutan yang lebih spesifik. Volume total untuk reaksi adalah 200 L. Sekitar 20 L buffer pengikat 10× (10× PBS ditambahkan 10 mmol/L MgCl2), 80 L rGO (5 mg/mL, diencerkan dalam air), dan 200 pikomol perpustakaan ssDNA (20 L stok 100 mol/L ) ditambahkan dan dimasukkan dH2O ke 200 L. Reaksi berlangsung selama 30 menit untuk mengikat perpustakaan ssDNA ke rGO, dan kemudian, campuran disentrifugasi pada 20 000 g selama 20 menit untuk menghilangkan supernatan. Pelet rGO dicuci 1 kali dengan 200 L buffer pengikat yang konsentrasinya sama dengan kondisi pengikatan target setiap putaran. Untuk mengelusi kandidat, 200 nanomolvitamin Cdiencerkan dalam 200 L buffer pengikat ditambahkan ke pelet rGO, dan langkah elusi dilakukan selama 1 jam. SsDNA yang terelusi dibagi dengan sentrifugasi yang dilakukan pada 20 000 g selama 20 menit dan diamplifikasi. Kami melakukan pengendapan EtOH untuk menghilangkan pengotor kecuali ssDNA sebelum amplifikasi. Kami melakukan PCR asimetris untuk mendapatkan ssDNA yang diperkuat. Rasio forwarding primer terhadap reverse primer PCR asimetris adalah 10:1. Kami melakukan elektroforesis pada gel agarosa 2,5 persen untuk mengkonfirmasi produk PCR dengan beberapa mikroliter. PCR asimetris tidak dapat hanya menghasilkan ssDNA. Jadi, kami melakukan metode crush and merendam untuk mengisolasi kandidat ssDNA. Untuk metodenya, kami melakukan elektroforesis pada gel asli poliakrilamida 12 persen dan menodai gel dengan etidium bromida (EtBr). Untuk memisahkan DNA untai ganda (dsDNA) dan ssDNA, bagian gel yang diwarnai dengan ssDNA dipotong, dihaluskan, dan diekstraksi dengan buffer penghancur dan rendam (500 mmol/L NH4OAc, 0,1 persen SDS, 0,1 mmol/L EDTA) semalam. Gel bubuk dipisahkan dengan sentrifugasi. Supernatan yang mengandung ssDNA dipekatkan dan dimurnikan dengan melakukan pengendapan EtOH. SsDNA kering dikumpulkan dengan dH2O steril dan ini digunakan untuk putaran berikutnya sebagai perpustakaan.

bahan alamicistanche amazon

2.2|Percobaan kalorimetri titrasi isotermal (ITC)

Percobaan kalorimetri titrasi isotermal dilakukan dengan menggunakan sistem VP-ITC (MicroCal Inc Northampton) pada 25 derajat dalam buffer salin fosfat yang terdiri dari 1 mmol/L magnesium klorida (pH 7,4). Sebelum setiap percobaan titrasi, Aptamin C 2 mL danvitamin C600 L sampel dihilangkan gasnya selama 30 menit di bawah vakum, tanpa diaduk, pada suhu beberapa derajat di bawah suhu percobaan. Kami menyiapkan 0,2 mmol/L vitamin C yang disuntikkan 25 kali dalam 2 L alikuot ke dalam sel sampel 1,8 mL yang mengandung Aptamin C pada konsentrasi 0,02 mmol/L. Data dipasang ke isoterm pengikatan satu situs menggunakan program asal untuk ITC v.5.0 (MicroCal Inc).

2.3|Uji mikroplat berbasis fluoresensi untuk oksidasi vitamin C

Oksidasidarivitamin Cdiukur dengan mendeteksi produk teroksidasi dehydroascorbate (DHA) menggunakan versi modifikasi dari metode yang dijelaskan oleh Vislisel et al.7 Dalam metode ini, DHA dideteksi melalui reaksi dengan o-phenylenediamine (OPDA) untuk membentuk produk kondensasi fluoresen 3-( dihidroksietil)furo[3,4-b] quinoxaline-1-one. Pengujian dilakukan sebagai berikut pada pelat 384-sumur hitam (Greiner Bio-One). Aptamers pertama-tama dilarutkan dalam saline buffer fosfat, pH 7,2, yang mengandung 1mM MgCl2, pada konsentrasi 200 mol/L kemudian dilipat dengan pemanasan hingga 95 derajat dan dibiarkan dingin perlahan hingga suhu kamar selama 15 menit. Aptamer yang terlipat kemudian diencerkan 1:1 (v:v) ke dalam larutan 5 mmol/L yang baru disiapkan.vitamin Cdalam buffer uji [50 mmol/L natrium asetat, 1 persen (b/v) BSA, 0,05 persen (v/v) Tween 20, 1mM MgCl2 (Sigma, semua komponen) disesuaikan dengan pH 5,5], dan campuran diinkubasi selama 30 menit pada suhu kamar, untuk memungkinkan aptamers untuk mengikat sebelum penambahan oksidator. Oksidator kemudian ditambahkan ke larutan vitamin C/aptamer pada konsentrasi (EM) H2O2 (Sigma). Pengoksidasi diencerkan sebelumnya ke konsentrasi kerjanya dalam buffer uji. Sampel kemudian diinkubasi pada suhu kamar selama 10 menit sebelum penambahan OPDA (Sigma) pada konsentrasi 5,5 mmol/L dalam buffer uji. Segera setelah penambahan OPDA, fluoresensi sampel pada 425 nm ditentukan menggunakan pembaca pelat SpectraMax® i3X (Perangkat Molekuler) dengan eksitasi pada 345 nm, selama 45 menit dengan pengukuran dilakukan setiap 60 detik. Semua sampel dan bejana yang mengandung reagen dibungkus dengan foil untuk melindunginya dari cahaya selama semua inkubasi yang dilakukan untuk uji fluoresensi.

2.4|Pengukuran reduksi vitamin C menggunakan DCPIP (2,6-Dichlorophenolindophenol)

Untuk menentukan penguranganvitamin C, kami melakukan percobaan menggunakan reaksi DCPIP. Vitamin C bereaksi dengan DCPIP, mengubah warna dari biru menjadi tidak berwarna. Vitamin C yang disiapkan diperlakukan dengan 5 persen Aptamin CTM, dan vitamin C yang tidak diberi perlakuan diinkubasi pada suhu kamar selama 8 minggu. Sampel diukur setelah 2, 4, dan 8 minggu. Sekitar 2 mL DCPIP ditambahkan ke labu kerucut menggunakan pipet, dan vitamin C pertama yang tidak diberi perlakuan ditambahkan sampai larutan menjadi tidak berwarna. Jumlahvitamin Cditambahkan diukur dan diulangi dengan sampel lain. Tingkat pengurangan masing-masing sampel dihitung menurut data ini.

2.5|Studi in vitro tentang efek anti-kerut pada fibroblas dermal manusia

Untuk mengevaluasi viabilitas sel pada fibroblas dermal manusia, sel diperlakukan dengan konsentrasi akhir Aptamin C yang berbeda denganvitamin C(Aptamin C ug plus vitamin C ug/mL) {{0}}.01 plus 0.5 ug/mL, 0,1 plus 5 ug/mL, 0,5 plus 25 ug /mL, 1 ditambah 50 ug/mL, dan 2 ditambah 100 ug/mL. Dan kemudian, sel diperlakukan pada konsentrasi Aptamin C dengan vitamin C untuk mendeteksi kolagen intraseluler, kolagenase intraseluler (MMP-1), dan aktivitas elastase.

Fibroblas kulit manusia (HDF) dipilih berdasarkan "Pedoman untuk evaluasi kemanjuran kosmetik fungsional (ΙI)" dari MFDS. HDF dibiakkan dalam campuran DMEM/F12 3:1 glukosa tinggi yang dilengkapi dengan 10 persen FBS dan 1 persen Antibiotik-Antimycotic dalam atmosfer CO2 5 persen yang dilembabkan pada 37˚C.

HDF (5 × 104 sel / sumur) diunggulkan ke dalam pelat 24 sumur dan diinkubasi selama 24 jam dan diperlakukan dengan berbagai konsentrasi Aptamin C denganvitamin Cdan diinkubasi selama 24 jam. Setelah 24 jam, supernatan dikumpulkan, dan jumlah prokolagen yang dibebaskan ke dalam media diukur pada 450 nm menggunakan Procollagen Type IC-Peptide (PIP) ELISA Kit. Tingkat produksi kolagen dikalibrasi dengan kandungan protein total dan dibandingkan dengan TGF-1 sebagai kontrol positif. Media tanpa bahan uji digunakan sebagai kontrol pelarut.

HDF (5 × 104 sel / sumur) diunggulkan ke dalam pelat 24 sumur dan diinkubasi selama 24 jam dan diperlakukan dengan berbagai konsentrasi Aptamin C denganvitamin Cdan diinkubasi selama 48 jam. Setelah 48 jam, aktivitas kolagenase diukur pada 450 nm menggunakan MMP-1 Human ELISA Kit. Aktivitas MMP-1 dinilai dengan kandungan protein total dan dibandingkan dengan TGF-1 sebagai kontrol positif. Media tanpa bahan uji digunakan sebagai kontrol pelarut.

Semua data dinyatakan sebagai mean ± standar deviasi dan berasal dari 3 percobaan independen. Analisis statistik dilakukan dengan uji-t sampel independen menggunakan program perangkat lunak SPSS® (IBM) pada tingkat signifikansi P <>

2.6|Pengukuran kerutan kulit dengan sistem analisis gambar 3D

Dua puluh dua subjek perempuan (usia rata-rata: 50,05 ± 2,94 tahun) berpartisipasi dalam penelitian ini. Kerutan kulit kaki gagak dievaluasi oleh sistem analisis gambar 3D pada awal, 4 dan 8 minggu. Hidrasi kulit dievaluasi dengan metode kapasitansi, dan TEWL dengan metode difusi air permukaan kulit dan elastisitas kulit dengan metode suction dievaluasi pada awal, 2, 4, dan 8 minggu setelah perawatan. Juga, kuesioner diri tentang kemanjuran diisi oleh subyek pada 2 dan 4 dan 8 minggu, dan kegunaan diisi oleh subyek pada 8 minggu setelah pengobatan. Semua data yang diperoleh dianalisis secara statistik dengan software SPSS®. Parameter kerutan pada kaki gagak dievaluasi menggunakan PRIMOS® Premium (GFMesstechnik GmbH). Sistem ini memungkinkan analisis kuantitatif dari kekasaran, kedalaman, luas, dan volume kerut yang menonjol pada kulit. Gambar dianalisis di area yang sama dalam hal parameter kerutan kulit (1, Rata-rata kedalaman kerutan; 2, Rata-rata kedalaman kerutan terbesar; 3, Kedalaman maksimal kerutan terbesar; 4, Total area kerutan; 5, Total volume kerutan; 6 , Faktor bentuk total kerutan; 7, Panjang total kerutan; 8, Ra; 9, Ry; dan 10, Rz) pada awal, 4 dan 8 minggu setelah perawatan dengan Primos 5.8 E ver. Perangkat lunak.

3|HASIL

3.1|Pendekatan yang ketat untuk persiapan buffer diperlukan untuk berhasil melakukan rGO-SELEX dengan target yang tidak stabil

Pustaka ssDNA, yang terikat ke rGO melalui interaksi susun -π antara cincin aromatik permukaan graphene dan basa DNA 26,27 dan ssDNA tidak terikat pada rGO, dipisahkan dan dihilangkan dengan sentrifugasi. ssDNA yang teradsorpsi pada permukaan rGO dielusi melalui perlakuan dengan senyawa target. Menurut laporan literatur, konformasi aptamer berubah setelah mengikat dengan target dan dengan melemahkan interaksi ‐πsusun dengan rGO.28-31 Proses ini diulang selama lima putaran. Setiap putaran berikutnya dilanjutkan dengan kondisi buffer yang lebih keras dan waktu elusi yang lebih pendek. Kinerja ini memungkinkan kami untuk mempertahankan ssDNA dengan spesifisitas yang lebih baik untuk senyawa target.

Data NGS dari perpustakaan yang diperkaya yang dihasilkan oleh proses rGO-SELEX menghasilkan 404071 urutan. Kami memilih 119 urutan dari data ini, mengurutkannya menjadi 11 kelompok berdasarkan kesamaan struktur, dan memilih urutan perwakilan untuk kandidat aptamer (Gambar 1A).

 Selection of aptamers  capable of binding vitamin C. A, The  general scheme of the SELEX method  using DNA. B, Representative image  of each aptamer group

3.2|Aptamin C memilih

Struktur sekunder kandidat Aptamin C diprediksi dengan menggunakan perangkat lunak bebas M-Fold.32,33 Kandidat dikelompokkan berdasarkan posisi, panjang, bentuk, dan jumlah batang dan lingkaran dari struktur potensial tertinggi (Gambar 1B). DHA, oksida darivitamin C, dideteksi melalui reaksinya dengan o-phenylenediamine (OPDA) yang berperan sebagai indikator.34 Jika aptamer mengikat dan mencegahoksidasi, untuk vitamin C dan mencegah oksidasi itu, sinyal fluoresensi dari 3-(dihidroksietil)-furo-[3,4-b] quinoxaline-1-one, produk kondensasi vitamin C dan OPDA, akan lebih rendah daripada vitamin C. kontrol tanpa-aptamer. Plot masing-masing kandidat aptamer dicampur dengan vitamin C dan oksidator, dengan kontrol positif,vitamin Cditambah oksidator dan urutan pengacakan dicampur dengan vitamin C dan oksidator (Gambar 1C). Lima aptamers, Aptamin Cb, Cc, Cf, Cg, dan Ck, terbukti memiliki efek antioksidan.

Inhibition of vitamin C oxidation by Aptamin C. A, Isothermal calorimetry

3.3|Penghambatan oksidasi vitamin C oleh Aptamin C

Aptamin C memiliki afinitas pengikatan yang tinggi untukvitamin C. Pengikatan Aptamin C dengan vitamin C ditentukan dengan menggunakan analisis ITC. Dari isoterm pengikatan, entalpi (ΔH), entropi (ΔS), dan stoikiometri (n) dari reaksi pengikatan dapat diperoleh. Ikatan eksotermik Aptamin Cb terdeteksi dari pengukuran ITC, dan entalpi (ΔH) dihitung sebagai 302,5 ± 3,788, entropi (ΔS) dihitung sebagai 18,9, stoikiometri(n) dihitung sebagai 56,7 ± {{21 }}.426, dan konstanta disosiasi (Kd) dihitung sebagai 2,13uM untuk vitamin C. Pengikatan eksotermik Aptamin Cf terdeteksi dari pengukuran ITC, dan entalpi (ΔH) dihitung sebagai 279,2 ± 2,992, entropi (ΔS) dihitung sebagai 18,4, stoikiometri(n) dihitung sebagai 167 ± 1,15, dan konstanta disosiasi (Kd) dihitung sebagai 0.89uM untuk vitamin C. Pengikatan eksotermik Aptamin Ck terdeteksi dari pengukuran ITC, dan entalpi (ΔH ) dihitung sebagai 250.4 ± 3,742, entropi (ΔS) dihitung sebagai 19,8, stoikiometri (n) dihitung sebagai 82,2 ± 0,732, dan konstanta disosiasi (Kd) dihitung sebagai 0,90 mol/L untuk vitamin C (Gambar 2A). Pengukuran ITC mengungkapkan bahwa perubahan entropi pada asosiasi dengan Aptamin C adalah kekuatan pendorong utama untukvitamin C. Untuk mencegahoksidasivitamin C dalam keadaan cair, semua larutan disiapkan dengan air deionisasi yang diolah dengan nitrogen. Fluoresensi diekspresikan dan dianalisis secara kuantitatif ketika OPDA (o-phenylenediamine) terikat pada DHA yang dihasilkan olehoksidasivitamin C. Derajat oksidasi vitamin C menurut konsentrasi Aptamin C (125, 250, 500, dan 1000 nmol/L) dibandingkan dan dikonfirmasi dengan uji OPDA. Hasilnya menunjukkan bahwavitamin Ckonversi menjadi asam dehidroaskorbat lebih lambat ketika konsentrasi Aptamin C lebih tinggi. (Gambar 2B). Data ini membuktikan bahwa Aptamin C adalah penghambat oksidasi vitamin C yang bergantung pada dosis.

Kami melakukan eksperimen untuk menentukan apakah Aptamin C dapat mencegahoksidasivitamin C dalam jangka waktu yang lama. Aptamin C diobati bersamavitamin C, dan vitamin C yang tidak diberi perlakuan disinari cahaya dan didiamkan pada suhu kamar selama 8 minggu. Akibatnya, ketika vitamin C yang tidak diobati dibiarkan begitu saja, tingkat pengurangannya menurun hingga kurang dari setengahnya dalam 2 minggu, dan hampir semuanya teroksidasi setelah 4 minggu. Dengan adanya Aptamin C, vitamin C berkurang menjadi sekitar setengahnya sebanyak 8 minggu (Gambar 2C). Ini menunjukkan bahwa Aptamin C mencegah oksidasi vitamin C dalam jangka waktu yang lama.

cistanche whitening effect on skin to anti-oxidation

binaraga cistanche


3.4|Analisis aktivitas kolagenase intraseluler (MMP-1) dan kolagen

Pada analisis aktivitas kolagenase, produksi matriks metalloproteinase-1 (MMP-1) berkurang secara signifikan dengan cara yang bergantung pada dosis, dengan 7,06 persen , 9,29 persen , dan 31,81 persen pada konsentrasi {{1{ {12}}}}.01 ditambah 0.5 ug/mL, 0.1 ditambah 5 ug/mL, dan 0.5 ditambah 25 ug/ mL, masing-masing (Gambar 3A). Pada analisis sintesis kolagen, procollagen type carboxy-terminal peptide (PIP) meningkat secara signifikan dengan cara yang bergantung pada dosis, dengan 25,{{20}} persen peningkatan pada 0,01 ditambah 0,5 ug/mL , 41,99 persen pada 0,1 ditambah 5 ug/mL, dan 71,18 persen pada 0,5 ditambah 25 ug/mL (Gambar 3B).

Figure 3+Figure 4

3.5|Sebuah studi klinis tentang efek perbaikan kerut kulit pada kulit manusia

Analisis statistik parameter kerutan dilakukan oleh sistem analisis gambar 3D, untuk mengevaluasi efek perbaikan kerutan kulit dari produk uji pada kulit manusia. Dibandingkan dengan kelompok kontrol, parameter “Rata-rata kedalaman kerutan” menurun 4,77 persen pada 4 minggu dan 4,25 persen pada 8 minggu, parameter “Rata-rata kedalaman kerutan terbesar” menurun 3,37 persen pada 4 minggu dan 4,53 persen pada 8 minggu,” Parameter max. depth terbesar kerutan" menurun 4,36 persen pada 4 minggu dan 7,19 persen pada 8 minggu, parameter "Total panjang kerutan" menurun 1,61 persen pada 4 minggu dan 2,67 persen pada 8 minggu, parameter "Ra" menurun 4,22 persen pada 4 minggu dan 3,90 persen pada 8 minggu, parameter "Ry" menurun 2,66 persen pada 4 minggu dan 7,11 persen pada 8 minggu, parameter "Rz" menurun 3,69 persen pada 4 minggu dan 6,22 persen pada 8 minggu, penurunan 3,69 persen -7,11 persen (Gambar 4).

4|KESIMPULAN

Vitamin Cadalah molekul yang penting secara komersial namun tidak stabil, sehingga meningkatkan stabilitasnya menarik bagi berbagai sektor pasar. Pekerjaan kami menunjukkan bahwa Aptamin C, aptamers DNA, berpotensi memperpanjang masa simpan dan meningkatkan potensi produk tersebut dengan menundavitamin C oksidasidalam sebuah solusi. Kami menunjukkan kemanjuran klinis kompleks Aptamin C dalam perbaikan kerutan dan hidrasi kulit. Aptamin C kompleks juga bisa membantu meringankan kulit yang kasar.

improve skin whitening22

meningkatkan pemutihan kulit


Anda Mungkin Juga Menyukai