Sel Dendritik Tipe 1 (DC) pada Penyakit Ginjal

untuk informasi lebih lanjut:ali.ma@wecistanche.com

Sel Dendritik Tipe 1 Konvensional (cDC1) pada Penyakit Ginjal Manusia: Korelasi Klinik-Patologis

Titi Chen, Qi Cao & dkk.

ABSTRAK

Latar belakang: Sel dendritik tipe 1(cDC1) adalah bagian dari DC konvensional, yang fungsinya paling dikenal adalah presentasi silang ke sel CD8 plus T. Kami melakukan penelitian ini untuk menyelidiki jumlah dan lokasiSel dendritik tipe 1(cDC1s) di berbagai manusiapenyakit ginjalserta korelasinya dengan gambaran klinikopatologis dan sel T CD8.

Metode: Kami menganalisis 135ginjalsampel biopsi.Penyakit ginjaltermasuk: nekrosis tubular akut (ATN), nefritis interstitial akut (AIN), glomerulonefritis proliferatif (GN) (nefropati IgA, nefritis lupus, GN pauci-imun, penyakit anti-GBM), GN non-proliferatif (penyakit perubahan minimal, nefropati membranosa ), dan nefropati diabetik. Pewarnaan imunofluoresensi tidak langsung digunakan untuk mengukur cDC1s (Sel dendritik tipe 1), CD1ct DC, dan CD8 plus sel T.

Hasil:Sel dendritik tipe 1(cDC1s) jarang ada dalam keadaan normalginjal. Jumlah mereka meningkat secara signifikan pada ATN dan GN proliferatif, secara proporsional jauh lebih banyak daripada CD1ct DC. cDC1s (Sel dendritik tipe 1)terutama ditemukan di interstitium, kecuali pada lupus nephritis, pauci-imun GN, dan penyakit anti-GBM, di mana mereka menonjol di daerah glomeruli dan peri-glomerulus. Jumlah cDC1s (Sel dendritik tipe 1)berkorelasi dengan keparahan penyakit pada ATN, jumlah bulan sabit pada GN pauci-imun, fibrosis interstisial pada nefropati lgA, dan nefritis lupus, serta prognosis pada nefropati IgA. Jumlah sel CD8 plus T juga meningkat secara signifikan dalam kondisi ini dan cDC1 (Sel dendritik tipe 1)jumlah berkorelasi dengan CD8 ditambah jumlah sel T pada lupus nephritis dan GN pauci-imun, dengan banyak dari mereka terlokalisasi erat. Kesimpulan: cDC1 (Sel dendritik tipe 1)jumlah yang berkorelasi dengan berbagai gambaran klinikopatologi dan prognosis yang mencerminkan kemungkinan peran dalam kondisi ini. Hubungan mereka dengan sel CD8 plus T menunjukkan mekanisme gabungan sesuai dengan hasil pada model hewan.

PENGANTAR

Sel dendritik(DC) adalah orkestra pusat kekebalan yang efektif. Sel-sel ini heterogen dan dapat dibagi menjadi himpunan bagian yang berbeda berdasarkan fenotipe dan fungsinya. Sel dendritik dapat secara luas dikategorikan ke dalam plasmacytoid DCs (Sel Dendritik)(pDC) dan DC konvensional (Sel Dendritik)(cDC).cDC terdiri dari dua himpunan bagian utama: cDC1 (Sel dendritik tipe 1)(CD141* DC (Sel Dendritik) pada manusia dan CD103t atau CD8ot DC pada hewan pengerat) dan cDC2(CD1c DC pada manusia dan CD1 lbt DC pada hewan pengerat) (1).cDC1 (Sel dendritik tipe 1)ditemukan pertama kali pada tikus dan kemudian pada manusia dan dicirikan oleh kemampuan superior mereka untuk memfagositosis sel nekrotik melalui reseptor pola molekul terkait kerusakan (DAMP) Clec9A dan untuk melakukan cross-present ke CD8 plus sel T. Sebaliknya, cDC2 adalah aktivator sel T CD4* yang efektif tetapi lebih rendah pada aktivasi sel T CD8t (2).

DC (Sel Dendritik)telah dipelajari pada manusiapenyakit ginjaldan jumlah mereka ditemukan meningkat pada glomerulonefritis(GN)(3, 4). Setelah penemuan cDCl, akumulasi penelitian pada hewan telah menunjukkan bahwa mereka memainkan peran penting dalampenyakit ginjal, seperti pada nefropati adriamycin dan GN bulan sabit, melalui interaksi dengan sel T (5-8). Namun, penelitian semacam itu kurang pada manusiapenyakit ginjal, dengan hanya satu penelitian yang menunjukkan peningkatan jumlah cDC (KonvensionalSel Dendritik)di GN (9). Kami melakukan penelitian ini untuk memberikan analisis subset cDC utama, cDC1 (Sel dendritik tipe 1), dan cDC2, dalam rentang yang luas dari manusiapenyakit ginjaltermasuk penyakit non-glomerular [nekrosis tubular akut (ATN), nefritis interstitial akut (AIN)], GN proliferatif (IgA nephropathy, lupus nephritis, pauci-imun GN, penyakit anti-GBM), GN non-proliferatif (penyakit perubahan minimal ( MCD), nefropati membranosa) dan nefropati diabetik. Kami menemukan cDC secara signifikan berkorelasi dengan fitur patologis termasuk tingkat keparahan ATN, pembentukan bulan sabit pada GN pauci-imun, dan fibrosis interstisial pada GN yang dimediasi imun. Selain itu, konsisten dengan kemampuan khusus mereka untuk mengaktifkan CD8 plus sel T pada hewan. model, kami juga menunjukkan korelasinya dengan sel T CD8t dalam sampel ini. Temuan ini memberikan dorongan untuk mengeksplorasi target terapi baru yang memanipulasi sel-sel ini untuk pengobatanginjalpenyakit.

Klik ke batang Cistanche untuk penyakit ginjal

BAHAN DAN METODE

Pasien dan Sampel Jaringan

Penelitian dilakukan sesuai dengan prinsip-prinsip Deklarasi Helsinki dan telah disetujui oleh Komite Etika Penelitian Manusia dari Distrik Kesehatan Lokal Sydney Barat. Persetujuan pasien yang diinformasikan diperoleh. Kami menganalisis 176 diagnostik bekuginjalbiopsy samples taken from non-pregnant adult patients(>18 tahun) antara 18 Juni 2016 hingga 30* Juni 2017 di Rumah Sakit Westmead, Sydney, Australia.Ginjaljaringan dibekukan dengan cepat dalam OCTcompound (Tissue-Tek Sakura, USA) dan disimpan pada-80 derajat . Empat puluh satu (41) sampel memiliki kualitas jaringan yang buruk dan dikeluarkan dari penelitian. Data dasar pasien termasuk usia, jenis kelamin, perkiraan laju filtrasi glomerulus (eGFR), dan tingkat proteinuria dikumpulkan pada saatginjalbiopsi.eGFR dihitung menggunakan rumus CKD-EPI. Diagnosis dibuat oleh ahli patologi ginjal, berdasarkan cahaya, imunofluoresensi (IF), dan mikroskop elektron serta riwayat klinis.

Berbagai penyakit dianalisis termasuk penyakit non-glomerulus (ATN, AIN), GN proliferatif (IgA nephropathy, lupus nephritis, pauci-imun GN, penyakit anti-GBM), GN non-proliferatif (MCD, membranous nephropathy), dan diabetes. nefropati. Untuk ATN, kami hanya memasukkan kasus non-septik karena ATN septik memiliki patofisiologi yang berbeda. ATN selanjutnya dikategorikan ke dalam penyakit ringan-sedang (didefinisikan sebagai:<50%cortical tubules="" showing="" injury)and="" severe="" disease="" (="">=50 persen tubulus kortikal yang menunjukkan cedera). Nefropati IgA diklasifikasikan menurut skor Oxford MEST (M hiperselularitas mesangial, hiperselularitas endokapiler E, glomerulosklerosis segmental S, atrofi tubulus T/fibrosis interstisial). Kami juga menganalisis korelasi antara cDC1 (Sel dendritik tipe 1) number and prognosis (defined a priori as >20% reduction in eGFR on or before 31t December 2019)in IgA nephropathy by dividing patients into 2 groups according to cDC number with a cut-off point at the upper quartile(>{}). Nefritis lupus selanjutnya diklasifikasikan menjadi 2 kelompok sesuai dengan tingkat fibrosis interstisial (<25%,>=25 persen keterlibatan interstisial kortikal). Pauci-imun GN diklasifikasikan menjadi 2 kelompok menurut persentase glomeruli dengan bulan sabit (<40%,>=40 persen ).

Seperti biasaginjalkontrol, kami menggunakan 5 korteks ginjal normal dari sampel nefrektomi serta 2 donorginjaltidak cocok untuk transplantasi. Untuk nefrektomi tumor, sampel diambil dari kutub yang berlawanan dengan tumor dan setidaknya 5 cm dari margin tumor. Jaringan ini memiliki penampilan makroskopik yang normal. Secara mikroskopis, tidak satupun dari iniginjalsampel memiliki bukti peradangan atau cedera glomerulus atau tubulointerstitial yang signifikan. Kami menggunakan jaringan limpa donor dewasa normal sebagai kontrol positif untuk menguji antibodi.

Pewarnaan imunofluoresensi

Bagian cryostat serial dipotong pada 5μm dan ditempatkan pada slide kaca Superfrost Ultra Plus (Thermo Scientific, USA). Slide disimpan pada derajat -80. Bagian jaringan difiksasi dengan metanol 100 persen pada derajat -20 selama 10 menit dan kemudian dikeringkan dengan udara. Pewarnaan imunofluoresensi tidak langsung dilakukan dengan menggunakan metode berikut: bagian jaringan dicuci di DPBS (Lonza, USA) dan diblokir dengan 2 persen Bovine Serum Albumin (Sigma-Aldrich, USA) selama 15 menit; kemudian mereka diwarnai dengan antibodi primer pada 4 derajat semalam diikuti oleh antibodi sekunder selama 40 menit pada suhu kamar. Tabel 1 adalah daftar antibodi primer dan sekunder yang digunakan dan pengencerannya. Inti diwarnai dengan DAPI (1:250,000, ThermoFisher, USA) sebelum sampel dipasang pada kaca penutup dengan media pemasangan fluoresensi (Dako, USA). Pewarnaan non-spesifik dan reaktivitas silang antara antibodi primer dan sekunder yang berbeda diperiksa dan dikeluarkan.

TABEL 1|Antibodi primer dan sekunder yang digunakan dalam penelitian

cDCls diidentifikasi dengan pewarnaan untuk penanda Clec9A. Pada manusia, ekspresi Clec9A sangat terbatas pada cDCl dalam darah dan jaringan (10, 11). Untuk mengkonfirmasi ini diginjal, kami melakukan pewarnaan ganda Clec9A dan HLA-DRB1 serta Clec9A dan CD1lc dalam kondisi normal dan sakit tertentu. Sebagian besar, jika tidak semua Clec9A tumpang tindih dengan HLA-DRB1 (Gambar Tambahan 1) dan CD1lc (Gambar Tambahan 2).

GAMBAR 1|cDC1 ginjal normal (Sel dendritik tipe 1), cDC2, dan CD8 plus sel T.

DC (Sel Dendritik)jarang hadir dalam keadaan normalginjaldan nomor cDC2 kira-kira 7 kali jumlah cDC1 (Sel dendritik tipe 1). (Bilah=100 mm).

HASIL

Karakteristik Dasar Pasien.Karakteristik dasar pasien dalam kelompok kontrol dan penyakit dirangkum dalam Tabel 2. Sebanyak 135 pasien dilibatkan dalam penelitian ini.ginjalpenyakitdianalisis termasuk penyakit non-glomerulus[ATN (22), AIN (10)], proliferatif GN[gA nefropati (44), lupus nephritis (12), pauci-imun GN(12), penyakit anti-GBM(4)] , GN non-proliferatif [MCD (5), nefropati membran (5)] dan nefropati diabetik (21). Lebih banyak perempuan pada kelompok lupus nephritis dan usia mereka cenderung lebih muda dibandingkan dengan kelompok lainnyaginjalpenyakit, yang konsisten dengan literatur (12). Pasien dengan pauci-imun GN dan penyakit anti-GBM memiliki eGFR terendah. Kadar proteinuria tertinggi pada MCD dan nefropati membranosa.

TABEL 2|Karakteristik dasar.

Jumlah dan Lokasi DC (Sel Dendritik)dalam Pengendalian dan Penyakit.cDCl jarang ada dalam keadaan normalginjal(Gambar 1) dan nomor cDC2 kira-kira 7 kali jumlah cDC1 (Sel dendritik tipe 1).Jumlah cDC1 (Sel dendritik tipe 1)meningkat secara signifikan pada ATN dan GN proliferatif (Gambar 2A), sementara jumlahnya tetap tidak berubah dibandingkan dengan kontrol pada AIN, nefropati membranosa, MCD, dan nefropati diabetik (Gambar Tambahan 3). Jumlah cDC2 juga meningkat secara signifikan pada ATN dan GN proliferatif (Gambar 2B). Ada pengurangan cDC2 (Sel dendritik tipe 2)/cDC1 (Sel dendritik tipe 1)rasio yang menunjukkan cDCl (Sel dendritik tipe 1)meningkat secara proporsional lebih dari cDC2 (Gambar 2C).

GAMBAR 2|Jumlah cDC1 (Sel dendritik tipe 1)dan cDC2, rasio cDC2/cDC1, dan CD8 plus sel T dalam kontrol dan penyakit tertentu.

Nilai-P dihitung untuk setiap penyakit versus kontrol. Kedua cDC1 (Sel dendritik tipe 1)dan cDC2 meningkat secara signifikan pada ATN, IgA, lupus nephritis, GN pauci-imun dan penyakit anti-GBM (A, B)

dengan cDC1 (Sel dendritik tipe 1)meningkat secara proporsional lebih dari cDC2 pada ATN, lupus nephritis, pauci-imun GN, dan penyakit anti-GBM (C).

Sel CD8 plus T meningkat secara signifikan pada ATN, IgA, lupus nephritis, pauci-imun GN, dan penyakit anti-GBM (D).

Kebanyakan cDCl terletak di interstitium, kecuali pada lupus nephritis, pauci-imun GN, dan penyakit anti-GBM dimana mereka juga ditemukan di daerah peri-glomerulus dan intra-glomerulus (Gambar 3A). Selain itu, kami juga menemukan signifikan jumlah sel T CD8t di daerah peri-glomerulus dan intra-glomerulus (Gambar 3A), dan banyak di antaranya terlokalisasi bersama dengan cDCls (Gambar 3B). Di sisi lain, cDC2s jarang ditemukan di daerah intra-glomerulus dan ada co-lokalisasi minimal dengan sel CD8 plus T.

GAMBAR 3|(A) cDC1 (Sel dendritik tipe 1)dan CD8 plus sel T di daerah intra-glomerulus. (B) co-lokalisasi cDC1 dengan CD8 plus sel T. (Bilah=100 mm). * P < 0.05,="" **="" p=""><>

Asosiasi Antara cDC1 (Sel dendritik tipe 1)Dengan Fitur Patologis Klinis dan Sel CD8 plus T Kami menganalisis korelasi antara cDCl (Sel dendritik tipe 1)dan fitur klinikopatologi serta sel CD8 plus T. Ada 22 kasus ATN (penyakit ringan n=12, penyakit berat n=10). Penyakit yang lebih parah dikaitkan dengan jumlah cDC1 . yang lebih tinggi (Sel dendritik tipe 1)(p=0.032), tetapi bukan cDC2(Gambar 4A).cDC1 (Sel dendritik tipe 1)meningkat secara proporsional lebih dari cDC2(cDC2/cDC1 rasio 2.5, p=0.019). Jumlah CD8 plus sel T juga meningkat secara signifikan pada ATN(p=0.005) (Tabel3,Gambar2D). Jumlah cDC1 (Sel dendritik tipe 1)tidak berkorelasi dengan jumlah sel T CD8* pada ATN.

TABEL 3|CD8 ditambah jumlah sel T dan koefisien korelasi antara cDC1 (Sel dendritik tipe 1)dan CD8 ditambah jumlah sel T pada kontrol dan ginjal yang sakit.

Empat puluh empat kasus nefropati IgA dianalisis. Menggunakan skor MEST klasifikasi Oxford (M hiperseluleritas mesangial, hiperseluleritas endokapiler E, glomerulosklerosis segmental S, atrofi tubular T/fibrosis interstisial), jumlah cDC1 yang lebih tinggi (Sel dendritik tipe 1)dikaitkan dengan skor T yang lebih tinggi (p=0.008), tetapi tidak dengan skor MES (Gambar 4B). Ada 7 kasus dengan bulan sabit dan jumlah cCD1 tidak terkait dengan jumlah bulan sabit. JumlahginjalSel T CD8* secara signifikan lebih tinggi pada nefropati IgA daripada kontrol (p<0.001) (table="" 3,="" figure="" 2d).="" there="" was="" no="" correlation="" between=""> (Sel dendritik tipe 1) and CD8+ T cell numbers. Thirty-five(35)patients had follow-up data on or before 31sf December 2019, of whom9experienced>20 persen pengurangan eGFR. Membagi pasien menjadi 2 kelompok menurut cDCl (Sel dendritik tipe 1) number with a cut-off point at the upper quartile(>=15), semakin tinggi cDC1 (Sel dendritik tipe 1)kelompok nomor dikaitkan dengan hasil yang lebih buruk (Gambar 4E).

GAMBAR 4|Korelasi antara cDC1 (Sel dendritik tipe 1), cDC2, dan CD8 ditambah jumlah sel T dan tingkat keparahan penyakit (A–D).

Kurva Kaplan Meier dari kelangsungan hidup nefropati IgA (E). Skor T 0 mengacu pada persentase area yang menunjukkan atrofi tubulus/fibrosis interstisial <=25 persen="">

Skor T 1 mengacu pada persentase area yang menunjukkan atrofi tubulus/fibrosis interstisial 26 - 50 persen, skor T 2 mengacu pada persentase area yang menunjukkan atrofi tubulus/fibrosis interstisial > 50 persen.

Kelangsungan hidup didefinisikan sebagai >20 persen pengurangan eGFR pada atau sebelum 31 Desember 2019. NS, tidak signifikan.

Ada 12 kasus lupus nephritis. Seperti pada nefropati IgA, jumlah cDCl yang lebih tinggi dikaitkan dengan fibrosis yang lebih parah (p=0.020)(Gambar 4C). Selain itu, jumlah sel T CD8 plus juga meningkat secara signifikan (P<0.001) (table="" 3,="" figure="" 2d)="" and="" this="" correlated="" with="" the="" number="" of="" cdcl="" cells="" (r="0.614," p="0.034)" (table="" 3).a="" significant="" number="" of=""> (Sel dendritik tipe 1)dan sel T CD8t ditemukan di peri-glomerulus serta intra-glomerulus yang menunjukkan bahwa mereka mungkin memainkan peran dalam kondisi ini, Kedua, pada penyakit yang dimediasi imun terkait fibrosis interstisial (nefropati IgA dan nefritis lupus), kami menemukan bahwa cDC1 (Sel dendritik tipe 1)Angka tersebut berkorelasi dengan tingkat keparahan fibrosis, serta prognosis pada nefropati IgA, sementara korelasi tersebut tidak ditemukan pada penyakit fibrotik yang dimediasi non-imun (nefropati diabetik). Ketiga, ada korelasi yang kuat antara jumlah cDCl dan pembentukan bulan sabit di GN pauci-imun, dan cDCl hadir dalam jumlah besar di daerah peri-glomerulus dan intra-glomerulus yang menunjukkan kemungkinan peran mereka dalam pembentukan bulan sabit. Keempat, jumlah cDC1 berkorelasi dengan CD8 plus jumlah sel T pada lupus nephritis dan pauci-imun GN, dengan banyak cDCl yang dilokalisasi bersama dengan CD8 plus sel T menunjukkan kemungkinan interaksi mereka. Hal ini sesuai dengan temuan kami pada model hewan dariginjalpenyakityang menunjukkan homolog murine dari cDC1 (Sel dendritik tipe 1)sel secara istimewa mengaktifkan sel T CD8t. Secara keseluruhan, temuan ini menunjukkan bahwa cDCl memainkan peran penting di berbagaiginjalpenyakittermasuk ATN, fibrosis interstisial pada penyakit yang dimediasi kekebalan, dan pembentukan bulan sabit dan bahwa mereka berpotensi bertindak melalui aktivasi sel T CD8t.

cDC1 (Sel dendritik tipe 1)Angka Berkorelasi Dengan Keparahan Penyakit pada ATN. Pada ATN non-septik, untuk pertama kalinya, kami menunjukkan peningkatan jumlah DC yang signifikan (Sel Dendritik), terutama cDCls dibandingkan dengan cDC2s. Yang penting, cDC1 (Sel dendritik tipe 1)jumlah yang berkorelasi dengan tingkat keparahan penyakit. Selain itu, jumlah sel CD8 plus T juga meningkat. ATN biasanya disebabkan oleh cedera iskemia-reperfusi (IRI), nefrotoksin, atau sepsis. Secara tradisional, IRI dan racun menyebabkan peradangan steril, dan kekebalan bawaan, di mana DC dan sel T kurang penting, dianggap memainkan peran dominan. Namun, semakin banyak bukti dari penelitian pada hewan telah menunjukkan baik cDCl dan CD8 plus sel T adalah pemain penting. Studi sebelumnya pada hewan IRI dan nefrotoksisitas cisplatin menemukan jumlah total sel DC dan T meningkat (13-17). Penelitian kami sebelumnya menunjukkan pada nefropati Adriamycin, jumlah cDCl meningkat secara signifikan (5). Di IRI, subset sel dendritik yang teraktivasi menunjukkan peningkatan kapasitas antigen yang hadir secara silang ke sel T CD8t (18). Pada nefropati Adriamycin, kami juga menemukan cDCl menimbulkan respons sel CD8 plus T yang menyebabkan cedera (5). Kurangnya korelasi antara cDC1 (Sel dendritik tipe 1)dan sel T CD8* pada ATN manusia berbeda dengan temuan pada model hewan mungkin mencerminkan jalur cedera non-imunologis yang berbeda pada ATN manusia dibandingkan dengan IRI pada model tikus di mana cDCl memainkan peran penting melalui sel T CD8*. Selain itu, telah ditunjukkan pada hewan pengerat bahwa cDCl direkrut ke dalam jaringan oleh chemoattractant XCLl yang diproduksi oleh sel pembunuh alami (19). Oleh karena itu, mungkin bermanfaat untuk mempelajari ini lebih lanjut diginjalpenyakit.

cDC1 (Sel dendritik tipe 1)Angka Berkorelasi Dengan Immune-Mediated Interstitial Fibrosis. Temuan signifikan kedua dalam penelitian ini adalah bahwa jumlah cDCl berkorelasi dengan tingkat keparahan fibrosis interstisial yang terkait dengan penyakit yang dimediasi imun (nefropati IgA dan nefritis lupus), tetapi tidak pada penyakit fibrotik yang dimediasi non-imun (nefropati diabetik), studi sebelumnya menunjukkan peningkatan jumlah cDCls dan cDC2s pada fibrosis interstisial (9). Kami, untuk pertama kalinya, menunjukkan bahwa ini hanya berlaku pada penyakit yang dimediasi imun dan cDC1 (Sel dendritik tipe 1)jumlah meningkat secara proporsional lebih dari cDC2s. Selain itu, kami juga mendemonstrasikan cDC1 (Sel dendritik tipe 1)jumlah yang berkorelasi dengan prognosis dan jumlah sel T CD8* juga meningkat secara signifikan pada nefropati IgA. Ini didukung oleh penelitian pada hewan yang menunjukkan DC (Sel Dendritik)berkontribusi langsung terhadap fibrosis. Misalnya, amphiregulin yang diturunkan dari DC mempromosikan fibrosis (20). Mungkin juga cDCl berkontribusi terhadap fibrosis melalui sel CD8 plus T, yang diketahui berkontribusi terhadap fibrosis pada organ lain (21-23). Karena fibrosis interstisial terkait dengan perkembangan penyakit kronis,ginjalpenyakit, tidak mengherankan bahwa kami menemukan cDC1 (Sel dendritik tipe 1)menjadi penanda prognostik yang baik pada nefropati IgA. Penelitian lain menunjukkan sel T CD8t berkorelasi dengan prognosis nefropati IgA (24), yang mungkin merupakan hasil dari presentasi silang dari cDCls. Pada lupus nephritis, kami menunjukkan korelasi antara cDC1 (Sel dendritik tipe 1)jumlah dan fibrosis interstisial serta jumlah sel T CD8t. Studi sebelumnya juga menunjukkan peningkatanginjalcDC1 (Sel dendritik tipe 1)jumlah pada lupus nephritis(25), terutama kelas III dan VI lupus nephritis, dengan pengurangan yang sesuai dalam jumlah sirkulasi mereka (26). Kami memperluas temuan ini dengan menunjukkan bahwa mereka juga berkorelasi dengan perubahan kronis. Telah diketahui dengan baik bahwa peradangan interstisial, yang terdiri dari sel T, sel B, sel dendritik, dan makrofag, memiliki peran dominan dalam perkembangan lupus nephritis (27). cDCl dapat berkontribusi pada perkembangan lupus nephritis dalam berbagai cara. Pertama, aktivasi interferon memainkan peran kunci dalam patogenesis lupus nephritis(28-30) dan cDCls adalah produsen utama IFN-入.（31）Kedua, cDC1 (Sel dendritik tipe 1)dapat berkontribusi pada perkembangan lupus nephritis melalui sel T CD8t (32-37) dan temuan kami tentang korelasi antara cDCls dan CD8 plus T lebih lanjut mendukung kemungkinan interaksi mereka. Peran sel CD8 plus T pada lupus nephritis telah ditunjukkan sebelumnya. Sel CD8 plus T mengontrol imunitas autoreaktif dengan melepaskan molekul sitotoksik. Sel CD8 plus T pada lupus nephritis ditemukan memiliki fungsi sitotoksik yang berkurang, yang dapat memicu autoimunitas (38). Selain itu, sel-sel ini juga dapat menghasilkan autoantigen lupus (39). Ada banyak bukti bahwa sel T CD8* di keduaginjal(32,33) dan urin (34-36) berkorelasi dengan aktivitas penyakit dan cedera histologis pada lupus nephritis. Selain itu, kelelahan sel T CD8* ditunjukkan untuk memprediksi prognosis yang baik (37).

cDC1 (Sel dendritik tipe 1)Angka Berkorelasi Dengan Jumlah Bulan Sabit di Pauci-Immune GN. Dalam GN pauci-imun, kami menemukan cDCls dikumpulkan di daerah peri-glomerulus dan intra-glomerulus, dan jumlahnya berkorelasi dengan jumlah bulan sabit dan CD8 plus sel T. Studi sebelumnya menunjukkan bahwa DC (Sel Dendritik)jarang terdapat di dalam glomerulus(3,4,9) atau hanya dalam jumlah yang sangat kecil(40). Sebaliknya, sel T menonjol di daerah interstitium, periglomerulus, dan intraglomerulus({{6} }). Kami menemukan bahwa sel T cDCl dan CD8 * menonjol di daerah peri-glomerulus dan intra-glomerulus dengan banyak di antaranya terlokalisasi bersama. Selain itu, cDC1 (Sel dendritik tipe 1)berkorelasi dengan bulan sabit dan CD8 ditambah nomor sel T. Semua temuan ini menunjukkan peran cDCl dalam pembentukan bulan sabit melalui interaksi dengan sel T CD8*. Peran patogen sel T CD8t dalam GN pauci-imun dan pembentukan bulan sabit telah ditunjukkan pada model hewan (45,46). Konsisten dengan temuan kami pada manusia, pada GN bulan sabit hewan, cDC1 (Sel dendritik tipe 1)dan sel T CD8* ditemukan terutama di daerah periglomerulus (47,48). Telah ditunjukkan bahwa kapsul Bowman menyediakan ceruk imunologis yang dilindungi dengan mencegah akses DC dan sel CD8 plus T sitotoksik ke ruang Bowman dan dengan demikian podosit (45,47). Namun, ketika kapsul Bowman dilanggar, sel-sel inflamasi ini memperoleh akses dan menghancurkan podosit yang mengakibatkan GN progresif cepat (47).

Salah satu keterbatasan dari penelitian ini adalah bahwa teknik pewarnaan IF memungkinkan penggunaan hanya sejumlah penanda. Akan bermanfaat untuk memperluas temuan kami menggunakan teknologi seperti flow cytometry, yang dapat menggabungkan beberapa penanda untuk menganalisis lebih lanjut fenotipe DC ini. (Sel Dendritik)dan profil sitokin dan kemokin yang relevan. Namun, informasi lokasi akan hilang. Teknik lain seperti imunohistokimia multipleks dan Nanostring juga dapat dipertimbangkan dalam studi masa depan untuk memeriksa lebih lanjut sel-sel ini diginjalpenyakit. Selain itu, ketika pewarnaan cDC2 menggunakan CD1c, HLA-DRB1, dan CD1lc, mungkin ada persentase kecil sel B yang mengekspresikan penanda ini juga, yang belum dikesampingkan.

KESIMPULAN

Meskipun cDC1 (Sel dendritik tipe 1)terdiri dari subset kecil DC (Sel Dendritik)di bawah kondisi homeostatik, penelitian ini menunjukkan korelasi yang signifikan antara populasi sel ini dan fitur klinikopatologis pada manusiaginjalpenyakit. Ini mencerminkan kemungkinan pentingnya mereka dalam proses penyakit seperti ATN, pembentukan bulan sabit pada GN proliferatif, dan fibrosis interstisial pada GN yang dimediasi imun. Selain itu, co-lokalisasi dan korelasinya dengan sel T CD8t dapat memberikan penjelasan tentang mekanisme kerjanya, menguatkan data dari model hewan. Temuan ini memberikan dorongan untuk mengeksplorasi target terapi baru yang memanipulasi sel-sel ini untuk pengobatanginjalpenyakit, seperti yang telah kami lakukan dalam penelitian pada hewan (6), dan untuk menyelidiki penggunaannya sebagai penanda prognostik. Studi lebih lanjut pada manusia dan hewan diperlukan untuk menginterogasi peran cDC1s (Sel dendritik tipe 1), mekanisme aksi mereka, dan cara terbaik untuk menargetkan mereka secara terapeutik.

REFERENSI

1. Pakalniskyte D, Schraml BU. Keanekaragaman Spesifik Jaringan dan Fungsi Sel Dendritik Konvensional. Adv Immunol(2017)134:89-135.doi:10.1016/bs.ai.2017.01.003

2. Merad M, Sathe P, Helft J, Miller J, Mortha A. Silsilah Sel Dendritik: Ontogeni dan Fungsi Sel Dendritik dan Subsetnya dalam Keadaan Stabil dan Pengaturan Inflamasi. Annu Rev Immunol (2013)31:563-604.doi:10.1146/annual immunol-020711-074950

3. Segerer S, Heller F, Lindenmeyer MT, Schmid H, Cohen CD, Draganovici D, dkk. Ekspresi Spesifik Kompartemen Penanda Sel Dendritik pada Glomerulonefritis Manusia.GinjalInt (2008)74(1):37-46.doi:10.1038/ki.2008.99

4. Woltman AM,de Fiter JW,Zuidwijk K, Vlug AG,Bajema IM, van der Kooij SW, dkk. Kuantifikasi Subset Sel Dendritik di Jaringan Ginjal Manusia Dalam Kondisi Normal dan Patologis.GinjalInt (2007)71(10):1001-8. doi: 10.1038/sj.ki.5002187

5. Cao Q, Lu J, LiQ, Wang C Wang XM, Lee VW, dkk. Cd103 plus Sel Dendritik Memunculkan Cd8 plus Respons Sel T untuk MempercepatGinjalCederapada Nefropati Adriamycin. J Am Soc Nephrol (2016) 27(5):1344-60.doi: 10.1681/ASN.2015030229

6. Wang R, Chen T, Wang C, Zhang Z, Wang XM, Li Q, dkk. Penghambatan Flt3 MengurangiKronisGinjalPenyakitdengan Menekan CD103 plus Aktivasi Sel T yang Dimediasi Sel Dendritik. Transplantasi Dial Nephrol(2019)34(11):1853-63. DOI: 10.1093/gfy385

7. Evers BD, Engel DR, Bohner AM, Tittel AP, Krause TA, Heuser C, dkk Cd103 plusGinjalSel Dendritik Melindungi Terhadap GN Bulan Sabit dengan Mempertahankan Il-10-Memproduksi Sel T Regulasi. J Am Soc Nephrol (2016)27(11):3368-82. DOI: 10.1681/ASN.2015080873

8. Kitching AR, Ooi JD. Sel Dendritik Ginjal: Jalan Panjang dan Berliku. J Am Soc Nephrol (2018)29(1):4-7.doi: 10.1681/ASN.2017101145

9. Kassianos AJ, Wang X, Sampangi S, Muczynski K, Healy H, Wilkinson R. Peningkatan Rekrutmen Tubulointerstitial dari CD141(hi)CLEC9A( plus )dan CD1c( plus) Manusia Sel Dendritik Myeloid di Fibrosis Ginjal dan BGinjalB. Am J Fisiol Fisiol Ginjal (2013)305(10): F1391-401. doi:10.1152/adrenal.00318.2013

10. Guilliams M, Dutertre CA, Scott CL, McGovern N, Sichien D, Chakaro S, dkk. Analisis Dimensi Tinggi Tanpa Pengawasan Menyelaraskan Sel Dendritik di Seluruh Jaringan dan Spesies. Imunitas (2016)45(3):669-84.doi: 10.1016/j.immuni.2016.08.015

11. Villani AC, Satija R, Reynolds G, Sarkizova S, Shekhar K, Fletcher J, dkk. RNA-seq Sel Tunggal Mengungkapkan Jenis Baru Sel Dendritik Darah Manusia, Monosit, dan Progenitor. Sains(2017)356(6335):4-6. DOI: 10.1126/science.aah4573

12. Almaani S, Meara A, Rovin BH. Update tentang Nefritis Lupus. Clin I Am Soc Nephrol (2017)12(5):825-35.doi: 10.2215/CJIN.05780616

Catatan:di atas bukan daftar referensi lengkap