Potensi Polifenol Peterseli Dan Kapasitas Antioksidannya Untuk Membantu Dalam Pengobatan Depresi Dan Kecemasan: Sebuah Studi Subakut In Vivo

Untuk informasi lebih lanjut. kontak{0}}

Abstrak: Depresi dan kecemasan adalah masalah kesehatan mental utama di semua bagian dunia. Penyakit ini terkait dengan sejumlah faktor risiko, termasuk stres oksidatif. Obat psikotropika yang bersifat kimiawi telah menunjukkan beberapa efek samping yang meningkatkan dampak penyakit tersebut. Menghadapi situasi ini, produk alami tampaknya menjadi alternatif yang menjanjikan. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengevaluasi efek ansiolitik dan antidepresan dari Petroselinum sativumpolifenolin vivo, serta korelasinyaantioksidan sifat in vitro.Ansiolitikaktivitas ekstrak (50 dan 100 mg/kg) dievaluasi menggunakan uji lapang terbuka dan ruang gelap-terang, sedangkan aktivitas antidepresan dievaluasi menggunakan uji renang paksa. Aktivitas antioksidan ekstrak dievaluasi dengan uji radikal bebas 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil(DPPH) dan uji FRAP (kapasitas pereduksi besi). Ekstrak fenolik menunjukkan efek ansiolitik dan antidepresan yang sangat kuat, terutama pada dosis 100 mg/kg, menurunkan perilaku depresi pada tikus (menurunkan waktu imobilitas) dan juga perilaku ansiolitik (kecenderungan untuk ditemukan di pusat dan area yang diterangi). ) lebih baik daripada paroxetine dan bromazepam (obat klasik) seiring dengan hasil tersebut ekstrak juga menunjukkan kapasitas antioksidan yang penting. Hasil awal ini menunjukkan bahwa Petroselinum satioum menunjukkan potensi ansiolitik dan antidepresan untuk digunakan sebagai fitomedicine pelengkap atau independen untuk mengobati depresi dan kecemasan.

Kata kunci: Petroselinum sativum; polifenol; ansiolitik; seperti antidepresan; antioksidan; farmakologi; obat alami; produk alami

1. Perkenalan

Gangguan depresi dan kecemasan telah lama dianggap sebagai masalah kesehatan mental, dan merupakan beban berat bagi masyarakat mana pun di mana stres ada di mana-mana. Organisasi Kesehatan Dunia (WHO) memperkirakan bahwa pada tahun 2030, depresi, sebagai penyakit yang berpotensi fatal, akan menjadi penyebab kecacatan nomor dua di dunia [1]. Menurut perkiraan WHO terbaru, lebih dari 300 juta orang di seluruh dunia menderita depresi, di mana lebih dari 260 juta di antaranya juga mengalami gangguan kecemasan [2].

The Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders (DSM-V) mendefinisikan gangguan depresif berat sebagai bukan hanya kesedihan sesekali atau serangan depresi, melainkan suasana hati yang tertekan atau kehilangan minat atau kesenangan selama setidaknya dua minggu berturut-turut, episode yang sering berulang [3]. WHO juga mendefinisikan depresi sebagai “berbagai gejala psikologis dan biologis, seperti perasaan sedih secara umum, kehilangan kesenangan dan minat, perasaan bersalah, gangguan tidur (insomnia atau mengantuk) dan nafsu makan, perasaan lelah (retardasi psikomotor). ), dan kurang konsentrasi". Dalam kasus yang paling serius, depresi bahkan dapat menyebabkan bunuh diri [4].

Kecemasan, seperti yang didefinisikan oleh WHO, adalah "perasaan akan bahaya yang akan datang yang tidak dapat ditentukan disertai dengan keadaan tidak enak badan, agitasi, ketidakberdayaan, atau bahkan pemusnahan". Hal ini juga dapat digambarkan sebagai keadaan ketakutan antisipatif yang disebabkan oleh bahaya potensial dan tidak pasti, meskipun penyebabnya belum tentu disadari, sebagai lawan dari rasa takut yang muncul dalam menghadapi bahaya nyata. Namun, kedua emosi ini dicirikan oleh respons fisiologis (peningkatan tekanan darah, berkeringat, takikardia, dll.) dan perilaku (peningkatan kewaspadaan dan penghindaran) yang serupa [5].

Depresi dan kecemasan umumnya diobati dengan obat-obatan psikotropika, termasuk antidepresan danansiolitik(obat penenang), seringkali bersifat kimiawi, seperti paroxetine dan benzodiazepin. Namun, penggunaan obat-obatan ini menunjukkan batas-batas tertentu, dan mereka dapat menyebabkan efek samping yang tidak diinginkan. Bromazepam diresepkan untuk pengobatan kecemasan. Namun, konsumsinya disertai dengan sejumlah efek samping negatif, termasuk kantuk, sedasi, dan kehilangan memori [6]. Kesulitan tidur, kehilangan nafsu makan, kantuk, dan disfungsi seksual juga merupakan efek samping khas dari paroxetine, antidepresan dari keluarga serotonin reuptake inhibitor (SSRI) yang digunakan untuk mengelola gangguan depresi mayor [7]. Sebagai hasil dari kemanjuran yang terbatas ini, eksplorasi sarana terapi baru, lebih efektif, dan tidak beracun sangat dihargai.

Tanaman obat dapat menjadi sumber terapi baru, aman, dan efektif yang memadai, terutama karena banyak diketahui menunjukkan efek samping yang lebih sedikit [8]. Beberapa tanaman obat telah diuji pada gangguan di atas, dan mereka menghasilkan hasil yang sangat menyenangkan yang mendorong penelitian lebih lanjut untuk menemukan sifat antidepresan dan ansiolitik tanaman tambahan [9].

Petroselinum satioum Hoffm., umumnya dikenal sebagai "peterseli" ("maadnous" dalam bahasa Arab), adalah anggota dari keluarga Apiaceae. Apium crispum Mill, Apium Petroselinum L., Petroselinum Hortense Hoffm, dan Petroselinum crispum (Pabrik) Fuss. juga sinonim untuk Petroselinum sativum Hoffm.[10. Peterseli, sebagai ramuan kuliner yang berasal dari wilayah Mediterania, telah menjadi ramuan umum secara global di zaman modern [11]. P. sativum memiliki berbagai sifat yang bermanfaat, termasukantioksidan, analgesik, spasmolitik, antidiabetik, imunomodulasi, dan efek gastrointestinal [12]. Berbagai manfaat tersebut dapat dikaitkan dengan komponen inti tanaman, seperti polifenol (apigenin, quercetin, luteolin, dan kaempferol), vitamin, karotenoid, kumarin, dan tanin [13]. Keluarga Apiaceae mencakup beberapa tanaman yang dikenal dengan aktivitas antidepresan dan ansiolitiknya seperti Coriandrum satioum L.[14], Pimpinella anisum L.[15], Carum carvi L.[16] untuk konsentrasi berkisar antara 50 dan 200 mg/kg.

Dalam penelitian ini, potensi aktivitas antidepresan dan ansiolitik dari peterselipolifenoldievaluasi untuk pertama kalinya, bersama denganaktivitas antioksidan, untuk mengetahui ada tidaknya korelasi.

2. Hasil

2.1. Evaluasi Aktivitas Antioksidan

2.1.1.Tes DPPH

Gambar 1 menunjukkan persentase aktivitas antioksidan sebagai fungsi dari berbagai tingkat PSPE dan BHT. Hasil yang diperoleh mengungkapkan bahwa ekstrak dan BHT kami menampilkan aktivitas antiradikal yang bergantung pada konsentrasi. Artinya, persentase penghambatan radikal DPPH meningkat dengan konsentrasi ekstrak fenolik P. sativum dan BHT. BHIT menunjukkan aktivitas tertinggi dibandingkan dengan ekstrak kami. Untuk 0.5 ug/mL, BHT mencapai persentase penghambatan maksimum 90 persen , yang tetap konstan untuk konsentrasi 1 ug/mL. Pada konsentrasi yang sama, ekstrak fenolik menghasilkan daya hambat maksimum sebesar 58 persen

Antioksidan sintetik BHT menunjukkan aktivitas antiradikal yang sangat kuat, dengan IC50 sekitar 0.024 ug/mL, lebih tinggi dari yang tercatat untuk ekstrak fenolik P sativum sekitar 0,184 ug/mL） .

2.1.2.Uji FRAP

Gambar 2 menunjukkan variasi densitas optik (OD) sebagai fungsi dari perbedaan konsentrasi PSPE dan BHT (kontrol positif). Terlihat bahwa persentase reduksi sebanding dengan konsentrasi ekstrak dan BHT. Yang terakhir menunjukkan persentase pengurangan yang lebih tinggi dibandingkan dengan ekstrak.

Untuk membandingkan efisiensi fraksi polifenol P.sativoum(PSPE) dengan BHT, kami menentukan konsentrasi yang mengurangi 50 persen FRAP (IC50).

BHT (The sintetik antioksidan BHT) menunjukkan aktivitas antioksidan yang sangat kuat dengan IC50 sekitar 0.09ug/mL, lebih tinggi dari yang tercatat untuk ekstrak fenolik P. sativum sekitar 0.38 ug/mL .

2.2. Evaluasi Tes Renang Paksa Aktivitas Antidepresan

Variasi waktu henti dalam uji renang paksa selama tiga minggu percobaan ditunjukkan pada Gambar 3. Waktu imobilitas selama pengujian secara signifikan lebih pendek pada tikus yang diberi PSPE (PSPE 50 mg/kg (34 s±3.286), PSPE 100 mg/kg (33,8s± 2,653))dibandingkan dengan kontrol (Paroxetine(100.8s±6.837), Vehicle(176s±6.550).

Hasil ini menunjukkan bahwa efek antidepresan ekstrak fenolik P. sativum lebih besar daripada paroxetine.

2.3. Evaluasi Aktivitas Ansiolitik

2.3.1. Perilaku Cemas di Lapangan Terbuka

Gambar 4 menunjukkan variasi waktu yang dihabiskan di pusat uji lapangan terbuka selama tiga minggu perlakuan ekstrak. Dapat dilihat bahwa tikus yang diberi PSPE (50 dan 100 mg/kg) menghabiskan lebih banyak waktu di area tengah dibandingkan dengan kelompok kontrol. Peningkatan yang signifikan ini tidak hanya sebanding dengan lamanya perlakuan tetapi juga terhadap konsentrasi ekstrak. Nilai optimal diperoleh dengan konsentrasi 100 mg/kg (37,4 s±1,778, dibandingkan dengan 33,4s±1,208 pada dosis 50 mg/kg). Ini menunjukkanansiolitikpengaruh tanaman ini.

Variasi jumlah ubin yang dilewati selama percobaan tiga minggu ditunjukkan pada Gambar 5. Analisis menunjukkan peningkatan yang luar biasa dalam jumlah ubin yang dilalui oleh tikus yang diberi PSPE (50 mg/kg (161,2±5.490),100 mg/ kg (173±10.104))dibandingkan dengan kelompok yang diberi bromazepam 1 mg/kg(115,8±1,393) dan kendaraan (147.4±1.568). Hasil ini menunjukkan efek ansiolitik yang lebih besar dari FPPS bahkan dibandingkan dengan bromazepam pada 1 mg/kg.

2.3.2. Perilaku Cemas di Ruang Terang-Gelap

Gambar 6 menyajikan hasil variasi waktu yang dihabiskan di ruang terang selama masa studi. Hasilnya menunjukkan peningkatan progresif dalam waktu yang dihabiskan di ruang terang dari waktu ke waktu untuk tikus yang diobati dengan PSPE. Peningkatan ini terutama terlihat pada hari ke 21. Dalam pengujian ini, mencit yang diberi bromazepam dan yang diberi PSPE menghabiskan lebih banyak waktu secara signifikan di kompartemen yang diterangi (bromazepam 1 mg/kg (146,8 s ± 1,068), PSPE 50mg/kg (199,6s± 6,838), PSPE 100 mg/kg (213,6s±9,331) dibandingkan dengan tikus kontrol (kendaraan (75.8s±4,352)). Hal ini ditafsirkan sebagai bukti efek ansiolitik ekstrak polifenol P. sativum.

Gambar 7 menunjukkan variasi jumlah transisi antara ruang terang dan gelap selama pengujian ini. Perbedaan yang luar biasa ditemukan selama 21 hari antara tikus yang diobati dengan PSPE (50 mg/kg (16±{{10}}.548), 100 mg/ kg (12,4±0,510)) dan tikus kontrol (kendaraan (10±0,837), bromazepam 1 mg/kg (12±0,949).Hasil ini konsisten dengan hasil waktu yang dihabiskan di ruang yang diterangi, karena kedua parameter ini adalah berbanding terbalik dengan tingkat kecemasan tikus yang ditampilkan.

3. Diskusi

Kami menunjukkan dalam penelitian ini bahwa ekstrak fenolik P. satioum menampilkan aktivitas antioksidan in vitro dan aktivitas ansiolitik dan antidepresan in vivo.

Asam ferulat dan asam sinamat telah ditemukan memiliki efek antidepresan dalam beberapa penelitian [17,18], sementara quercetin dan hidroksitirosol menunjukkan efek ansiolitik yang disetujui [19,20]. Senyawa tersebut bisa berada di balik efek yang diamati.

Efektivitas antioksidan dapat diberikan dalam berbagai bentuk, seperti pemulungan radikal bebas, dekomposisi radikal bebas, dan juga khelasi ion logam [17]. Aktivitas ini dapat dievaluasi dengan uji FRAP dan DPPH, yang terakhir, karena kecepatannya, sering digunakan untuk menyaring molekul yang ada dalam ekstrak tumbuhan [18]. Hasil kami menunjukkan aktivitas antioksidan dalam ekstrak fenolik peterseli. Pekerjaan sebelumnya oleh Hinneburg et al. [21] menunjukkan bahwa ekstrak air peterseli memberikan aktivitas penghambatan yang lemah dari radikal DPPH, dengan IC50 pada urutan 12.0±{{8} }.10 mg/mL (dibandingkan dengan ekstrak polifenol dalam penelitian kami, 0,184 ug/mL). Sebaliknya, efek chelating ekstrak ini lebih efektif dibandingkan dengan ekstrak lain yang digunakan dalam penelitian yang sama.

Studi terbaru juga menemukan hubungan antara gangguan mood dan stres oksidatif [22,23] dan stres psikologis [24,25], sehingga membuka jalan baru untuk mencegah dan/atau mengelola kecemasan dan depresi mengenai potensi penerapan antioksidan. Desrumaux dkk. [26] memperhatikan bahwa defisit vitamin E pada otak tikus meningkatkan tingkat tanda-tanda utama stres oksidatif dan perilaku yang memicu kecemasan. Demikian juga, tikus yang diberi vitamin C baru-baru ini mengungkapkan bahwa senyawa ini memiliki peran antidepresan berdasarkan hasil uji suspensi ekor [27]. Polifenol, termasuk flavonoid dan asam fenolik, terkenal karena efek antioksidannya yang kuat [28,29]. Penggunaan metabolit fitokimia sekunder ini sebagai cara untuk menghindari dan mengelola kecemasan dan depresi mungkin merupakan strategi yang menjanjikan [9]. Sebuah studi yang dilakukan oleh Akinci et al. [30] menunjukkan bahwa peterseli berhasil meminimalkan kerusakan lambung akibat stres ketika dikonsumsi secara oral dengan mendukung sistem pertahanan antioksidan sel, yang tercermin dalam peningkatan kadar glutathione jaringan rata-rata (53,31 ± 9,50) dan aktivitas superoksida dismutase. 15,18 ± 1,05) dan katalase (16,68 ± 2,29).

Eksperimen lapangan terbuka digunakan untuk mengevaluasi kondisi emosional hewan. Hewan yang telah dipisahkan dari kandangnya dan ditempatkan di lingkungan yang berbeda sering menunjukkan kesusahan dan kecemasan dengan menghadirkan perubahan pada semua atau beberapa parameter, seperti penurunan aktivitas rawat jalan, eksplorasi, dan imobilisasi, tetapi peningkatan perawatan. perilaku [31]. Ekstrak P.sativum dengan dosis 100 mg/kg menghasilkan efek ansiolitik yang sangat signifikan, seperti yang ditunjukkan oleh peningkatan signifikan dalam waktu yang dihabiskan di pusat lapangan dan aktivitas rawat jalan total. Peningkatan ini lebih besar dari yang terlihat pada tikus yang diobati dengan bromazepam pada 1 mg/kg.

Eksperimen ruangan terang-gelap juga berguna dalam memprediksi efek ansiolitik obat. Untuk mengukur tingkat kecemasan pada tikus selama tes ini, dua parameter dicatat: (1) Persentase waktu yang lebih rendah yang dihabiskan hewan di ruang gelap terkait dengan tingkat kecemasannya. Dengan kata lain, ketika persentase waktu yang dihabiskan di kompartemen yang terang minimal, kecemasan dianggap tinggi, dan (2) jumlah transisi, yaitu, jumlah bagian antara dua kompartemen, berbanding terbalik dengan tingkat kecemasan. (jumlah transisi yang lebih rendah berarti tingkat kecemasan yang tinggi)[32]. Temuan penelitian ini mengungkapkan ekstrak polifenol P. sativum pada 100 mg/kg menunjukkan efek ansiolitik yang optimal berdasarkan peningkatan waktu hewan yang dihabiskan di ruang terang dan jumlah transisi dibandingkan dengan kontrol selama masa penelitian.

Eksperimen renang paksa dikembangkan pada 1970-an. Ia juga dikenal dengan nama penemunya sebagai uji Porsolt [33]. Temuan kami menunjukkan bahwa waktu imobilitas tikus perlakuan lebih pendek daripada tikus kontrol, menunjukkan efek antidepresan dari ekstrak fenolik P. sativum. Namun, penurunan waktu imobilitas ini mungkin mendukung peningkatan waktu berenang atau waktu mendaki. Perbedaan ini sangat penting dari sudut pandang neurofarmakologis karena secara teoritis, selama berenang paksa, antidepresan yang menghasilkan peningkatan noradrenergik atau dopaminergik yang dominan mengurangi imobilitas dengan meningkatkan waktu eskalasi [34], sedangkan yang mengaktifkan 5HT malah mengurangi imobilitas dengan meningkatkan waktu berenang. [35]. Dalam hal fungsi SSP, mayoritas polifenol berinteraksi langsung dengan sistem neurotransmitter [36]. Studi yang dilakukan pada peterseli menunjukkan dominasi flavonoid 37]. Berbagai macam flavonoid yang ditemukan dalam ekstrak obat tradisional konvensional dilaporkan memiliki efek sedatif/ansiolitik dengan mengikat langsung reseptor GABA A [38].

Sebuah studi yang dilakukan oleh Priprem et al. [39] menunjukkan bahwa polifenol quercetin menunjukkan aktivitas ansiolitik setelah seminggu pemberian berulang pada dosis 300 mg/kg, yang tidak seefektif diazepam, yang menunjukkan efeknya satu jam setelah pemberian pada dosis yang lebih rendah. Pereira dkk. [40] menunjukkan bahwa asam rosmarinic menunjukkan efek ansiolitik pada dosis yang sangat rendah (2 sampai 4 mg/kg). Contoh lain adalah apigenin, yang menunjukkan afinitas selektif dan rendah untuk reseptor benzodiazepin menghasilkan aktivitas ansiolitik dengan hampir tidak ada efek samping [41. Flavonoid juga berperan dalam depresi melalui penghambatan monoamine oksidase dan mengakibatkan peningkatan 5-HT, DA, dan tingkat norepinefrin di area tertentu di otak [42].

Asam amino rangsang, seperti aspartat, glutamat, homosistein, dan sistein, merangsang sel pasca-sinaptik, sedangkan asam amino penghambat, seperti alanin, glisin, GABA, dan taurin, menekan perkembangan sel pasca-sinaptik 43]. Suatu enzim yang disebut aromatik L-asam amino dekarboksilase, juga disebut DOPA dekarboksilase, triptofan dekarboksilase, 5-hidroksitriptofan dekarboksilase, atau AAAD, yang mengkatalisis dekarboksilasi masing-masing L-dopa dan 5-hidroksitriptofan menjadi dopamin dan {{ 7}}hydroxytryptamine mungkin juga berperan. Peterseli dapat menyebabkan ekspresi berlebih dari enzim ini, berkontribusi pada efek antidepresannya. Sebuah penelitian yang dilakukan pada Centella Asiatica, tanaman milik keluarga Apiaceae yang sama, menunjukkan bahwa efek antidepresan dari total triterpen disebabkan oleh peningkatan fungsi sumbu hipotalamus-hipofisis-adrenokortikal dan peningkatan kandungan neurotransmiter monoamina. [44]. Studi-studi ini menunjukkan adanya aktivitas ansiolitik dan antidepresan oleh ekstrak fenolik P. sativum.

4. Bahan dan Metode

4.1. Bahan Tanaman

Petroselinum sativum Hoffm. bagian udara dikumpulkan selama fase pra-pembungaan (musim semi 2018) dari wilayah Tanounate di Maroko Utara (34 derajat 32'9"N 4 derajat 38'24"W). Klasifikasi, identifikasi, dan nama botani tanaman ini diverifikasi oleh ahli botani yang berkualifikasi Pr. Bari Amin. Sampel tanaman disimpan di herbarium Fakultas Ilmu Dhar El Mahrez Fez (spesimen voucher: 18TA5001).

4.2. Ekstraksi

Ekstraksi dilakukan seperti yang dijelaskan oleh Slighoua et al. [11]. Secara singkat, 10 g bagian udara kering serbuk halus P. sativum dicampur dengan metanol (100 mL) dan dimaserasi selama 3 jam pada suhu 50 derajat . Setelah itu, filtrat dipekatkan menggunakan rotary evaporator sampai kering untuk memastikan penguapan pelarut sempurna. Ekstrak yang dihasilkan dilarutkan kembali dalam air suling (200 mL) dan dicuci dengan tiga heksana dan kloroform (200 mL tiga kali) untuk menghilangkan pigmen dan pengotor lainnya. Fase berair akhir diekstraksi dengan etil asetat (200 mL tiga kali). Fasa organik (etil asetat) dipekatkan untuk mendapatkan ekstrak polifenol. Rendemen ekstraksi adalah 10,52 persen.

Kami sebelumnya menerbitkan karya pada ekstrak yang sama yang ditunjukkan dengan menggunakan analisis HPLC-DAD yang terdiri dari polifenol berikut: (1) Asam ferulat, (2) Asam sinamat, (3) Asam galat, (4) Quercetin, (5) Myricetin, (6) Naringenin, (7) Hidroks-tirosol [11].

4.3. Studi Hewan

Dalam penelitian ini, tikus (Swiss albino) disediakan oleh Animal House fakultas ilmu Dhar el Mahraz Fez. Sebelum dimasukkan dalam percobaan, mereka dimasukkan ke dalam kelompok enam di kandang konvensional dan diizinkan periode adaptasi dua minggu dengan akses gratis ke makanan dan air dan suhu terkontrol 22 ± 2 derajat dan di bawah siklus terang / gelap. 12 jam/12 jam.

Eksperimen dilakukan sesuai dengan standar internasional untuk Perlakuan dan Penggunaan Hewan Eksperimen [16] dan Komite Etika Hewan Internal(#09-12/2019/LBEAS).

4.4. Evaluasi Aktivitas Antioksidan

4.4.1.2,2-Uji Difenil-1-pikrilhidrazil (DPPH)

DPPH adalah salah satu senyawa kimia yang paling umum digunakan untuk menilai aktivitas antioksidan senyawa fenolik |45. DPPH memiliki elektron tidak berpasangan pada atom penghubung nitrogen. Prinsip pengujian ini dirangkum dalam kapasitas ekstrak untuk mereduksi radikal bebas DPPH berwarna ungu tua menjadi reduksi berwarna kekuningan yang dapat diukur dengan spektrofotometri [28]. Serangkaian konsentrasi ekstrak disiapkan dalam metanol, 100 L masing-masing ditambahkan ke 750 L larutan metanol DPPH (0,004 persen). Setelah masa inkubasi 30 menit pada 25 derajat, absorbansi diukur pada 517 nm. Untuk kontrol negatif, sampel diganti dengan metanol. Persentase DPPH ditentukan dengan persamaan berikut:

(1)Saya=[(Contoh-Kosong)/Kosong]×100

Dalam persentase aktivitas antiradikal, Sampel adalah absorbansi sampel, dan Blank adalah absorbansi kontrol negatif.

4.4.2. Uji Daya Pengurang Besi (FRAP)

Daya reduksi besi (Fe3 plus ) dalam ekstrak yang dipelajari ditentukan menurut metode yang dijelaskan oleh Mechchate et al. 28】. Secara singkat, 100 L ekstrak pada konsentrasi yang berbeda dicampur dengan 500μL larutan buffer fosfat PBS,0.2 M, pH6.6 dan 500 L larutan 1 persen kalium ferricyanide K, Fe（CN）. Ini diinkubasi dalam penangas air pada 50 derajat selama 20 menit. Kemudian, 500 L larutan 10 persen asam trikloroasetat TCA）, 100 L larutan besi klorida FeCl3 0,1 persen, dan 0,5 mL air suling ditambahkan ke dalam campuran reaksi. Pembacaan absorbansi campuran ini dilakukan pada 700 nm terhadap blanko yang berisi semua reagen media kecuali ekstrak tumbuhan. Hasilnya dinyatakan sebagai konsentrasi efektif 50 persen (EC50), yang mewakili konsentrasi antioksidan yang diperlukan untuk memperoleh absorbansi 0,5. Peningkatan absorbansi sesuai dengan peningkatan daya reduksi dari ekstrak yang diuji.

4.5. Tes Renang Paksa Aktivitas Antidepresan (FST)

Model Porsolt, atau tes renang paksa, adalah tes prediksi aktivitas tipe antidepresan. Tikus secara individu dipaksa untuk berenang dalam wadah berbentuk silinder yang diisi air setinggi 12 cm. Tes berlangsung 6 menit, tetapi hanya 4 menit terakhir tes yang dianalisis. Hewan dianggap tidak bergerak jika mengapung dalam posisi tegak dan hanya melakukan beberapa gerakan untuk menjaga keseimbangannya di dalam air (waktu imobilitas).

Sebanyak empat batch masing-masing lima tikus digunakan untuk tes ini. Semua ekstrak tumbuhan diberikan secara gavage selama 21 hari, dan pengujian dilakukan 1 jam setelah pemberian ekstrak pada 21 hari. Grup A, kontrol negatif, menerima solusi fisiologis sebagai kendaraan. Kelompok B, kelompok kontrol positif, menerima paroxetine pada 11 mg/kg. Kelompok C dan D menerima PSPE pada 50 dan 100 mg/kg, masing-masing.

Satu jam setelah pemberian ekstrak tumbuhan, waktu imobilitas dihitung selama 6 menit. Dua menit pertama memungkinkan tikus untuk beradaptasi dengan stres, dan kemudian, tikus menjadi lelah dan tidak dapat bergerak seiring waktu. Waktu imobilitas dihitung dalam detik, kemudian dibandingkan dengan waktu imobilitas mencit pada kelompok kontrol positif (paroxetine) untuk referensi [33].

4.6. Aktivitas An.xiolitik

4.6.1.Buka Bidang

Uji lapangan terbuka (OF) digunakan untuk memprediksi aktivitas ansiolitik, karena hewan menunjukkan tingkat penghindaran yang tinggi dari area pusat relatif terhadap pinggiran. Ini juga digunakan sebagai tes eksplorasi dan penggerak. Area tersebut terdiri dari empat dinding kayu setinggi 40 cm yang disusun dalam luas 50x50 cm, dibagi menjadi 25 ubin berukuran sama yang ditandai dengan garis hitam.

Sebanyak empat batch masing-masing lima tikus digunakan untuk tes ini. Semua ekstrak tumbuhan diberikan secara gavage selama 21 hari. Selanjutnya dilakukan pengujian 1 jam setelah pemberian ekstrak tumbuhan pada hari ke 1,7,14, dan kelompok A, kontrol negatif, mendapat larutan fisiologis sebagai pembawa Kelompok B, kontrol positif, menerima bromazepam dengan dosis 1 mg/kg. . Kelompok C dan D menerima PSPE pada 50 dan 100 mg/kg, masing-masing.

Setelah 60 menit, tes dilakukan dengan menempatkan setiap tikus di alun-alun pusat untuk menjelajahi arena untuk mengukur aktivitas rawat jalan total tikus (jumlah ubin total yang dilintasi tikus, yaitu jumlah ubin periferal dan jumlah ubin pusat yang dilintasi tikus dengan keempat kakinya) dan waktu yang dihabiskan di tengah lapangan terbuka [3146].

4.6.2. Tes Ruang Terang-Gelap

Tes ruang terang-gelap juga digunakan untuk memprediksi aktivitas ansiolitik, karena memungkinkan evaluasi yang mudah terhadap perilaku hewan terkait kecemasan dengan menganalisis pergerakan hewan di antara dua kompartemen dengan warna dan iluminasi yang berbeda. Hewan yang lebih cemas cenderung menghabiskan lebih sedikit waktu di ruangan yang terang. Kotak kayu terang-gelap dengan dimensi 44 × 21 × 21 cm terdiri dari dua kompartemen hitam dan putih, dihubungkan oleh sebuah lorong (lubang 7 × 7 cm di tengah, memisahkan dua kompartemen dan memungkinkan akses ke satu atau yang lain. dari kompartemen). Kompartemen yang diterangi diterangi oleh lampu.

Sebanyak empat batch masing-masing lima tikus digunakan untuk tes ini. Semua ekstrak tumbuhan diberikan secara gavage selama 21 hari. Pengujian dilakukan 1 jam setelah pemberian ekstrak tumbuhan pada hari ke 1,7,14, dan 21. Kelompok A, kontrol negatif, menerima larutan fisiologis sebagai pembawa. Kelompok B, kontrol positif, menerima bromazepam dengan dosis 1 mg/kg. Kelompok C dan D menerima PSPE pada 50 dan 100 mg/kg, masing-masing.

Setelah 60 menit, tes lima menit dilakukan dengan menempatkan masing-masing tikus menghadap bukaan bergabung dengan kompartemen gelap [47]. Setelah setiap pengujian, kotak dibersihkan dengan alkohol. Parameter yang diukur adalah waktu yang dihabiskan di ruang yang menyala dan jumlah transisi ruang [48].

5. Kesimpulan

Peterseli, ramuan kuliner yang digunakan sehari-hari di seluruh dunia, menyajikan manfaat kesehatan yang sangat besar dan melalui penelitian ini, telah terbukti memiliki aktivitas antidepresan dan ansiolitik yang luar biasa, bahkan lebih baik daripada obat klasik, terutama dengan dosis 100 mg/kg. Dalam mencari obat yang efektif dengan sedikit atau hampir tanpa efek samping, tanaman ini bisa menjadi alternatif yang tepat. Karya ini mendorong konsumsi hariannya serta pengembangannya menjadi obat herbal yang mapan.

Penelitian lebih lanjut diperlukan untuk menyelesaikan pekerjaan ini, termasuk kinerja tes perilaku lain dengan ekstrak yang sama untuk mengkonfirmasi kemanjurannya. Dengan demikian, fraksinasi bio-guided dari ekstrak fenolik P. satioum direncanakan untuk mengidentifikasi komponen kunci yang bertanggung jawab atas aktivitas seperti ansiolitik dan antidepresan yang diamati dan untuk menentukan mekanisme kerjanya yang tepat.

Referensi
1. Friedrich, MJ Depresi Adalah Penyebab Utama Disabilitas Di Seluruh Dunia. JAMA 2017, 317, 1517. [CrossRef] [PubMed]
2. Lim, GY; Tam, WW; Lu, Y.; Hai, CS; Zhang, MW; Ho, RC Prevalensi Depresi di Komunitas dari 30 Negara antara 1994 dan 2014. Sci. Rep. 2018, 8, 2861. [CrossRef]
3. Asosiasi Psikiater Amerika. Manual Diagnostik dan Statistik Gangguan Mental (DSM-5®); Asosiasi Psikiater Amerika: Washington, DC, AS, 2013; ISBN 0-89042-557-4.

4. Dinga, R.; Marquand, AF; Veltman, DJ; Beekman, AT; Schoevers, RA; van Hemert, AM; Penninx, BW; Schmaal, L. Memprediksi Kursus Naturalistik Depresi dari Berbagai Data Klinis, Psikologis, dan Biologis: Pendekatan Pembelajaran Mesin. terjemahan Psikiatri 2018, 8, 1-11. [CrossRef]
5. Daviu, N.; Bruchas, MR; Moghaddam, B.; Sandi, C.; Beyeler, A. Neurobiological Links antara Stres dan Kecemasan. Neurobiol. Stres 2019, 11, 100191. [CrossRef]
6. Sanabria, E.; Cuenca, RE; Esteso, M.Á.; Maldonado, M. Benzodiazepin: Penggunaannya Baik sebagai Obat Esensial atau sebagai Zat Beracun. Toxics 2021, 9, 25. [CrossRef] [PubMed]
7. Kanekar, S.; Sheth, CS; Ombach, HJ; Olson, PR; Bogdanova, OV; Petersen, M.; Renshaw, CE; Sung, Y.-H.; D'Anci, KE; Renshaw, PF Paparan Hipoksia Hipobarik pada Tikus Secara Berbeda Mengubah Khasiat Antidepresan dari Inhibitor Reuptake Serotonin Selektif Fluoxetine, Paroxetine, Escitalopram, dan Sertraline. farmasi. Biokimia. Perilaku 2018, 170, 25–35. [CrossRef]
8. Es-Safifi, I.; Mechchate, H.; Amaghnouje, A.; Jawhari, FZ; Bari, A.; Cerruti, P.; Avella, M.; Andri, A.; Andriy, D. Tanaman Obat yang Digunakan untuk Mengobati Masalah Sistem Pencernaan Akut di Wilayah Fez-Meknes di Maroko: Survei Ethnopharmacological. Etnobotani. Res. aplikasi 2020, 20. [CrossRef]
9. Amaghnouje, A.; Mechchate, H.; Es-Safifi, saya.; Boukhira, S.; Aliqahtani, AS; Noman, OM; Nasr, FA; Conte, R.; Calarco, A.; Bousta, D. Penilaian Subakut dari Toksisitas dan Efek Seperti Antidepresan Origanum Majorana L. Polifenol pada Tikus Albino Swiss. Molekul 2020, 25, 5653. [CrossRef]
10. Agyare, C.; Appiah, T.; Boakye, YD; Apenteng, JA Petroselinum crispum: Sebuah Tinjauan. Med. Sayuran Rempah-rempah Af. 2017, 527–547. [CrossRef]
11. Slighoua, M.; Mahdi, saya.; Di Cristo, F.; Amaghnouje, A.; Grafov, A.; Boucetta, N.; Bari, A.; Bousta, D. Penilaian Aktivitas Estrogen dan Anti-inflamasi In Vivo Ekstrak Hidro-Etanolik dan Fraksi Polifenol Peterseli (Petroselinum sativum Hoffm.). J. Etnofarmaka. 2020, 265, 113290. [CrossRef] [PubMed] 12. Farzaei, MH; Abbasabadi, Z.; Ardekani, MRS; Rahimi, R.; Farzaei, F. Peterseli: Tinjauan Etnofarmakologi, Fitokimia, dan Aktivitas Biologis. J. Tradisi. Dagu. Med. 2013, 33, 815–826. [CrossRef]
13. Chaves, DS; Frattini, FS; Assafim, M.; de Almeida, AP; Zingali, RB; Costa, SS Komposisi Kimia Fenolik Ekstrak Petroselinum Crispum dan Pengaruhnya Terhadap Haemostasis. Nat. Melecut. Kom. 2011, 6, 1934578X1100600709. [CrossRef]
14. Mahendra, P.; Bisht, S. Aktivitas Anti-Kecemasan Coriandru m Sativum Dinilai Menggunakan Model Kecemasan Eksperimental yang Berbeda. India J. Pharmacol. 2011, 43, 574. [CrossRef]
15. Syahamat, Z.; Abbasi-Maleki, S.; Mohammadi Motamed, S. Evaluasi Efek Antidepresan Seperti Ekstrak Berair dan Etanolik Buah Pimpinella Anisum pada Mencit. Avicenna J. Phytomed. 2016, 6, 322–328. [PubMed]
16. Es-Safi, I.; Mechchate, H.; Amaghnouje, A.; Jawhari, FZ; Al Kamaly, OM; Imtara, H.; Grafov, A.; Bari, A.; Bousta, D. Sebuah Wawasan tentang Ansiolitik dan Sifat Seperti Antidepresan dari Carum carvi L. dan Asosiasinya dengan Aktivitas Antioksidannya. Kehidupan 2021, 11, 207. [CrossRef]
17. Zheng, X.; Cheng, Y.; Chen, Y.; Yue, Y.; Li, Y.; Xia, S.; Li, Y.; Deng, H.; Zhang, J.; Cao, Y. Ferulic Acid Meningkatkan Perilaku Seperti Depresi pada Tikus Keturunan yang Tertekan Sebelum Lahir melalui Aktivitas Anti-inflamasi dan HPA Axis. Int. J. Mol. Sci. 2019, 20, 493. [CrossRef]
18. Diniz, LRL; de Souza, MTS; Barboza, JN; de Almeida, RN; de Sousa, DP Potensi Antidepresan Asam Sinamat: Mekanisme Aksi dan Perspektif dalam Pengembangan Obat. Molekul 2019, 24, 4469. [CrossRef]
19. Lee, B.; Yeom, M.; Shim, aku.; Lee, H.; Hah, D.-H. Efek Protektif Quercetin pada Gejala Seperti Kecemasan dan Peradangan Saraf yang Diinduksi oleh Lipopolisakarida pada Tikus. jelas. Komplemen Berbasis. Alternatif Med. 2020, 2020, 4892415. [CrossRef]
20. Karkovic Markovic, A.; Tori, J.; Barbar, M.; Jakobuši´c Brala, C. Hydroxytyrosol, Tyrosol dan Turunannya dan Potensi Efeknya pada Kesehatan Manusia. Molekul 2019, 24, 2001. [CrossRef]
21. Hinneburg, I.; Dorman, HD; Hiltunen, R. Aktivitas Antioksidan Ekstrak Herbal dan Rempah Kuliner Pilihan. Kimia Makanan. 2006, 97, 122–129. [CrossRef]
22. Nunes, CS; Maes, M.; Roomruangwong, C.; Moraes, JB; Bonifacio, KL; Vargas, H O; Barbosa, DS; Anderson, G.; de Melo, LGP; Drozdstoj, S. Menurunkan Kualitas Hidup pada Gangguan Mood Berhubungan dengan Peningkatan Stres Neuro-Oksidatif dan Tingkat Hormon Penstimulasi Tiroid Basal dan Penggunaan Penstabil Mood Antikonvulsan. J. Evaluasi. klinik Praktek. 2018, 24, 869–878. [CrossRef] [PubMed]
23. Bonifácio, KL; Barbosa, DS; Moreira, EG; Coneglian, CF; Vargas, H O; Biarawati, SOV; Moraes, JB; Maes, M. Peningkatan Toksisitas Stres Nitro-Oksidatif sebagai Penentu Utama Peningkatan Tekanan Darah pada Gangguan Mood. J. Mempengaruhi. gangguan. 2021, 278, 226–238. [CrossRef] [PubMed]
24. Eick, SM; Barrett, ES; van 't Erve, TJ; Nguyen, RH; Bush, NR; Milne, G.; Angsa, SH; Ferguson, KK Asosiasi antara Stres Psikologis Prenatal dan Stres Oksidatif selama Kehamilan. anak Perinat. Epidemiol. 2018, 32, 318–326. [CrossRef]
25. McAllister, MJ; Basham, SA; Waldman, HS; Smith, JW; Mettler, JA; Butawan, MB; Bloomer, RJ Efek Stres Psikologis selama Latihan pada Penanda Stres Oksidatif di Muda Sehat, Pria Terlatih. Fisiol. Perilaku 2019, 198, 90–95. [CrossRef] [PubMed]
26. Desrumaux, C.; Risold, P.-Y.; Schroeder, H.; Deckert, V.; Masson, D.; Athias, A.; Laplanche, H.; Le Guern, N.; Blache, D.; Jiang, X.-C. Defisiensi Fosfolipid Transfer Protein (PLTP) Menurunkan Kandungan Vitamin E Otak dan Meningkatkan Kecemasan pada Mencit. FASEB J. 2005, 19, 1–16. [CrossRef]