Efek Protektif Quercetin Terhadap Kerusakan Epitel Tubular Akibat Stres Oksidatif pada Model Hiperoksaluria Tikus Eksperimental

Untuk informasi lebih lanjut. kontak{0}}

Abstrak: Latar Belakang dan Tujuan: Yang paling umumbatu ginjaladalah batu kalsium dan batu kalsium oksalat (CaOx) adalah jenis batu kalsium yang paling umum. Hiperoksaluria merupakan faktor risiko penting untuk pembentukan batu-batu ini.kuersetinadalah polifenol dengan antioksidan, anti-inflamasi, dan banyak efek fisiologis lainnya. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui efek protektif kuersetin pada nefrolitiasis akibat hiperoksaluria. Bahan dan Metode: Tikus Wistar-Albino jantan dengan berat 250-300 g (n=24) diacak menjadi tiga kelompok: Kontrol (n=8), etilen glikol (EG)(n{{6) }}), dan EG plus quercetin (n=8). Larutan EG-air satu persen diberikan kepada semua tikus kecuali kelompok kontrol sebagai air minum selama lima minggu. Larutan kuersetin-air diberikan kepada kelompok EG plus kuersetin secara oral gavage dengan dosis 10 mg/kg/hari. Malondialdehid (MDA), katalase (CAT), urea, kalsium, dan tingkat oksalat dianalisis dalam sampel darah dan urin. Penilaian histopatologi dan analisis imunohistokimia untukstres oksidatifdanperadanganindikator p38 mitogen-activated protein kinase (p38-MAPK) dan faktor inti kappa B (NF-kB) dilakukan pada jaringan ginjal. Hasil: Tingkat MDA secara signifikan lebih rendah pada kelompok yang diobati dengan quercetin dibandingkan dengan kelompok yang diobati dengan EG (p=0.001). Meskipun tingkat CAT lebih tinggi pada kelompok yang diobati dengan quercetin daripada kelompok yang diberikan EG, mereka tidak berbeda secara signifikan antara kelompok-kelompok ini. Ekspresi p38 MAPK secara signifikan lebih sedikit pada kelompok yang diobati dengan quercetin dibandingkan pada kelompok EG (p<0.004). there="" was="" no="" statistically="" significant="" difference="" between="" the="" quercetin="" and="" eg="" groups="" in="" terms="" of="" nf-kb="" expression.="" conclusions:="" we="" conclude="" that="" hyperoxaluria="" activated="" the="" signaling="" pathways,="" which="" facilitate="" the="" oxidative="" processes="" leading="" to="" oxalate="" stone="" formation="" in="" the="" kidneys.="" our="" findings="" indicated="" that="" quercetin="" reduced="" damage="" due="" to="" hyperoxaluria.="" these="" results="" imply="" that="" quercetin="" can="" be="" considered="" a="" therapeutic="" agent="" for="" decreasing="" oxalate="" stone="" formation,="" especially="" in="" patients="" with="" recurrent="" stones="" due="" to="">

Kata kunci: kalsium oksalat; hiperoksaluria; stres oksidatif; kuersetin

Klik di sini untuk mempelajari lebih banyak produk

1. Perkenalan

Pembentukan batu saluran kemih melibatkan beberapa faktor, antara lain konsentrasi ion penyebab pembentukan batu, pH urin, laju aliran urin, dan anatomi saluran kemih[l]. Sekitar 75 persen dari batu ginjal adalah batu kalsium, dan batu kalsium oksalat (CaOx) adalah batu kalsium yang paling sering ditemui [2,3]. Diketahui bahwa hiperoksaluria merupakan faktor risiko penting untuk pembentukan batu-batu ini. Peningkatan konsentrasi oksalat urin yang dihasilkan menginduksi pembentukan batu melalui ion kalsium dan oksalat untuk membentuk kristal CaOx pada pH fisiologis. Hal ini menunjukkan bahwa kelebihan konsentrasi oksalat merusak sel tubulus ginjal melalui radikal oksigen bebas dan meningkatkan peroksidasi lipid dan proses ini memfasilitasi baik pembentukan kristal CaOx dan perlekatannya pada epitel tubulus ginjal [4,5].

Meskipun perbaikan dalam pengobatan batu ginjal, tingkat kekambuhan 10 persen dalam satu tahun, 35 persen dalam lima tahun, dan 50 persen dalam sepuluh tahun dilaporkan untuk batu kalsium oksalat [6,7]. Tingkat kekambuhan yang tinggi ini telah mengarahkan para peneliti untuk mengeksplorasi metode pencegahan potensial untuk kekambuhan batu CaOx [6-8].

kuersetinadalah flavanol yang ditemukan dalam berbagai makanan, termasuk kacang-kacangan, anggur, biji-bijian, dan beberapa buah dan sayuran [8]. Selain antioksidan kuat, pemulung radikal, dan aktivitas anti-inflamasi, ia juga memiliki aktivitas antibakteri, antivirus, gastroprotektif, dan modulasi kekebalan [8-10].

Peningkatan stres oksidatif ditunjukkan pada pasien dengan batu ginjal [11]. Dengan demikian, risiko nefrolitiasis yang lebih rendah dilaporkan pada pasien dengan tingkat antioksidan tinggi dibandingkan dengan tingkat antioksidan rendah [12]. Ditunjukkan bahwa plak Randall, yang diperkirakan terbentuk karena stres oksidatif, memiliki peran penting dalam kekambuhan batu CaOx [13]. Oleh karena itu, penghambatan pembentukan plak Randall dan stres oksidatif mungkin bermanfaat untuk mencegah kekambuhan batu.

Studi ini menyelidiki kemungkinan efek perlindungan quercetin pada nefrolitiasis dan nefrokalsinosis dengan menentukan dampaknya terhadap stres oksidatif dan peradangan pada model hiperoksaluria tikus.

2. Bahan-bahan dan metode-metode

2.1.Hewan

Tikus Wistar-Albino jantan dengan berat 250-300 g (n =24) digunakan dalam penelitian eksperimental ini, yang dilakukan di Laboratorium Hewan Eksperimental Universitas Süleyman Demirel. Tikus ditempatkan di ruangan dengan suhu 25 ± 1 derajat dengan kelembaban relatif 55 persen. Mereka diberi makan dan minum ad libitum. Penelitian dilakukan setelah mendapat persetujuan dari Komite Peninjauan Etis Eksperimen Hewan Universitas Süleyman Demirel (nomor persetujuan: 33/01). Semua eksperimen dilakukan berdasarkan prinsip-prinsip etika yang dilaporkan dalam European Union Directive 2010/63/EU untuk eksperimen pada hewan.

2.2. Bahan kimia

Etilen glikol (EG) dibeli dari Merck Chemicals (Darmstadt, Jerman), sedangkan quercetin dibeli dari Sigma Chemicals (St. Louis, MO, USA).

2.3. Model Nefrolitiasis yang Diinduksi Hiperoksaluria dan Pemberian Quercetin

Tikus secara acak dibagi menjadi tiga kelompok; kelompok kontrol (n{{{{10}}}}), EG(n =8), dan EG plus quercetin (n =8). Semua tikus kecuali kelompok kontrol diberi larutan EG-water 1 persen sebagai air minum selama lima minggu[14]. Dosis 10 mg/kg/hari larutan quercetin-water diberikan kepada tikus dalam kelompok EG plus quercetin melalui gavage oral. Sampel urin 24 jam dikumpulkan dari hewan pada hari ke 0 sebelum pemberian EG atau quercetin dan pada hari ke 15 dan 30. Tikus dibius pada akhir periode percobaan lima minggu, dan sampel darah dikumpulkan dari cava inferior. pembuluh darah. Kemudian, tikus dikorbankan, dan kedua ginjal dengan cepat dipotong. Ginjal kanan tertanam dalam 10 persen formaldehida buffer netral. Ginjal kiri dicuci dengan larutan natrium klorida dingin 0,9 persen dan disimpan pada suhu -80 sampai homogenisasi.

2.4.Analisis Biokimia

Analisis kadar oksalat plasma dilakukan dengan teknik yang sebelumnya dijelaskan oleh Ladwig et al. [15]. Kadar oksalat urin ditentukan dengan kit enzim Trinity Biotech Oxalate (Trinity Biotech pic, St. Louis, MO, USA). Katalase(CAT) adalah enzim antioksidan [10,16]. Aktivitas katalase diukur dengan metode Aebi [16]. Kadar protein supernatan dianalisis dengan albumin serum sapi menggunakan metode Lowry seperti yang dijelaskan dalam protokol standar [17]. Kadar malondialdehid (MDA) juga dianalisis karena MDA dianggap sebagai biomarker stres oksidatif [9]. Kadar malondialdehid diukur secara spektrofotometri sesuai metode yang diusulkan oleh Ohkawa et al. [18] Deteksi protein dilakukan dengan menggunakan metode yang dijelaskan oleh Lowry et al. [17]. Tingkat kreatinin plasma dan urin diukur dengan kolorimetri sesuai metode Jaffe; konsentrasi urea plasma dianalisis dengan metode kinetik-kolorimetri dan reaksi urease dan glutamat dehidrogenase. Sebaliknya, kadar kalsium urin diukur dengan autoanalyzer melalui Schwarzenbach dan metode kompleks o-Cresolphthalein. Waktu sampel urin dan darah dikumpulkan untuk menghitung klirens kreatinin. Volume urin (V) dinyatakan dalam mL, sedangkan kadar kreatinin serum dan urin dinyatakan dalam mg/dl. Klirens kreatinin dihitung menurut rumus:

Klirens kreatinin (mL/mnt)=U(mg/dL)× V(mL/mnt)/S (mg/dL)[V:Volume urin (mL/mnt), U:Kreatinin urin (mg/ dL), S: Kreatinin serum (mg/dL)]

2.5. Analisis Histopatologi

Ginjal kanan dimasukkan ke dalam 10 persen formaldehida buffer netral (Merck-KGaA, Darmstadt, Jerman). Pemrosesan jaringan dimulai setelah periode fiksasi 24-48 jam.Ginjaljaringan diwarnai dengan hematoxylin dan eosin (H&E) dan diperiksa di bawah mikroskop cahaya. Pemeriksaan histopatologi dilakukan dengan perbesaran 10x, 20x, dan 40x, terutama untuk menilai kongesti pembuluh darah di medula dan glomeruli kortikal, intensitas infiltrasi sel mononuklear, dan ukuran dan bentuk lumina tubulus.

2.6. Analisis Imunohistokimia

Faktor transkripsi nuklir-kB(NF-kB) dan p38 mitogen-activated protein kinase (p38-MAPK) adalah dua jalur sinyal utama pada tingkat protein dalam biosintesis sitokin proinflamasi [19]. Selain itu, oksalat secara selektif mengaktifkan jalur pensinyalan p38-MAPK [20]. Slide dibawa ke dalam wadah inkubasi setelah penyumbatan. Antibodi NF-kB/p65 (Santa Cruz, sc-109) ditambahkan ke bagian pertama, antibodi MAPK/p38 (Santa Cruz, sc-7149) ke bagian kedua, dan antibodi sekunder( Anti-polivalen kambing, Thermo) ditambahkan ke bagian berikutnya untuk tujuan kontrol dan disimpan pada suhu plus 4 derajat semalaman. Kit Pewarnaan ABC (Santa Cruz, sc-2018) digunakan untuk protokol pewarnaan lainnya. Jaringan yang dilapisi lamella menggunakan Entella disimpan dan dikeringkan untuk diperiksa dengan mikroskop cahaya. Bagian-bagian tersebut dinilai sebagai berikut, tergantung pada intensitas pewarnaan dalam mikroskop cahaya, seperti dalam penelitian oleh Liu HS et al. [19]:（一）skor skor negatif）∶ tidak ada pewarnaan;

( plus ) skor (1 skor positif): ringan;

( plus plus )skor (2 skor positif): sedang;

( plus plus plus ) skor (3 skor positif): ada pewarnaan lengkap.

2.7.Statistik

Analisis statistik dilakukan dengan menggunakan perangkat lunak Paket Statistik untuk Ilmu Sosial 11.0 (SPSS 11.0). Nilai diberikan sebagai sarana ± standar deviasi. Distribusi normal variabel diuji dengan uji Kolmogorov-Smirnov sampel tunggal. Sebuah ANOVA satu arah dilakukan dan, jika terbukti signifikan, uji post hoc Duncan digunakan untuk mengevaluasi dan menentukan perbedaan antara kelompok. Nilai p dianggap signifikan ketika berada di bawah<>

3. Hasil

3.1. Hasil Biokimia

Data kelompok studi ditunjukkan pada Tabel 1. Tingkat MDA rata-rata kelompok EG lebih tinggi daripada kelompok kontrol, sedangkan tingkat MDA rata-rata kelompok kuersetin secara signifikan lebih rendah daripada kelompok EG (p= 0.001) . Tidak ada perbedaan yang signifikan secara statistik antara kelompok dalam hal aktivitas CAT. Dalam penelitian kami, kadar MDA dikurangi oleh quercetin, sedangkan aktivitas CAT tidak dipengaruhi oleh quercetin. Kadar oksalat urin secara signifikan lebih tinggi pada kelompok EG dibandingkan kelompok lain (p<0.001). however,="" the="" urinary="" oxalate="" levels="" of="" the="" quercetin="" group="" were="" significantly="" lower="" than="" the="" eg="" group=""><0.001). these="" results="" indicated="" that="" quercetin="" reduced="" the="" urinary="" oxalate="" levels,="" which="" were="" increased="" by="" eg="" administration.="" while="" the="" plasma="" urea="" concentration="" increased="" significantly="" in="" the="" eg="" group="" compared="" to="" in="" the="" control="" group,="" a="" statistically="" significant="" decrease="" was="" observed="" in="" the="" quercetin="" group="" compared="" to="" the="" eg="" group=""><0.05). there="" was="" no="" statistically="" significant="" difference="" between="" the="" groups="" in="" terms="" of="" creatinine="" clearance="" and="" plasma="" oxalate="" levels="" (p="">0.05). Meskipun quercetin menurunkan kadar oksalat plasma, hal ini tidak signifikan secara statistik. Konsentrasi kalsium urin secara signifikan lebih rendah pada kelompok lain dibandingkan kelompok kontrol (p<0.05). however,="" there="" was="" no="" statistically="" significant="" difference="" between="" eg="" and="" quercetin="" groups="" in="" terms="" of="" mean="" urinary="" calcium="" concentrations.="" altogether="" these="" findings="" indicate="" that="" eg="" increased="" urinary="" oxalate="" excretion="" and="" plasma="" urea="" concentration="" and="" decreased="" urinary="" calcium="">

3.2. Hasil Histopatologis

Pemeriksaan histopatologi ginjal tikus kelompok kontrol di bawah mikroskop cahaya mengungkapkan temuan normal (Gambar 1-Kontrol). Temuan, termasuk kemacetan di pembuluh glomerulus, infiltrasi sel mononuklear, dan penyempitan lumen tubulus, terutama di tubulus proksimal, terdeteksi pada kelompok EG (Gambar 1-EG). Temuan histopatologi serupa diamati pada kelompok quercetin, tetapi semuanya lebih ringan (Gambar 1-EG ditambah quercetin). Namun, tidak ada sistem penilaian yang digunakan untuk mengevaluasi apakah perbedaan ini signifikan secara statistik.

3.3. Hasil Imunohistokimia

Dampak quercetin pada p38 mitogen-activated protein kinase (p38-MAPK) dan faktor inti kappa B(NF-kB) diselidiki dengan pewarnaan imunohistokimia pada jaringan ginjal (Gambar 2). Perbandingan kelompok dalam hal p38-MAPK menjelaskan bahwa jaringan ginjal tikus kelompok EG diwarnai secara signifikan lebih intens daripada tikus kelompok kontrol (p<0.001). on="" the="" other="" hand,="" p38-mapkstaining="" was="" significantly="" less="" intense="" in="" the="" quercetin="" group="" than="" in="" the="" eg="" group.="" the="" statistical="" analysis="" revealed="" that="" quercetin="" reduced="" p38-mapk="" activity="" significantly="" compared="" to="" the="" eg="" group=""><>

Perbandingan kelompok mengenai imunostaining NF-kB mengungkapkan bahwa jaringan ginjal tikus dalam kelompok EG diwarnai secara signifikan lebih intens daripada tikus pada kelompok kontrol (hal.<0.001). there="" was="" no="" statistically="" significant="" difference="" between="" the="" other="" groups="" in="" terms="" of="" the="" intensity="" of="" nf-kb="" staining.="" altogether,="" these="" findings="" pointed="" out="" that="" eginduced="" the="" p38-mapk="" and="" nf-kb="" activities="" in="" renal="" tissues.="" additionally,="" quercetin="" significantly="" reduced="" p38-mapk="" activity="" while="" it="" had="" no="" significant="" effect="" on="" nf-kb="" activity.="" the="" relevant="" data="" are="" displayed="" in="" table="">

4. Diskusi

Meskipun kemajuan dalam metode invasif minimal untuk mengobati nefrolitiasis, batu sisa yang tinggi dan tingkat kekambuhan masih merupakan masalah berat bagi pasien dan ahli urologi [21]. Oleh karena itu, diperlukan strategi pengobatan medis yang efektif.

Mekanisme pasti pembentukan batu belum diidentifikasi; namun, diketahui bahwa sekitar 80 persen batu ginjal mengandung CaOx dan salah satu penyebab tersering batu CaOx adalah hiperoksaluria [1,22]. Oksalat adalah produk sampingan dari metabolisme normal, dieliminasi dari tubuh dalam kondisi normal [20]. Pada hiperoksaluria. kelebihan oksalat urin bergabung dengan kalsium pada pH fisiologis dan membentuk kristal CaOx, terakumulasi di ginjal. Kristal CaOx terbukti merusak sel epitel tubulus ginjal dan menyebabkan penyakit batu ginjal [14,20]. Oleh karena itu, model tikus hiperoksaluria banyak digunakan untuk meniru pembentukan batu ginjal pada manusia. Dalam studi ini, EG digunakan sebagai agen penginduksi hiperoksaluria, seperti halnya dalam penelitian kami [14,20].

Dilaporkan bahwa konsentrasi oksalat dalam urin meningkat dalam dua hari, hiperoksaluria berkembang dalam tiga hari, kristaluria CaOx berkembang dalam dua minggu, dan nefrolitiasis CaOx diamati dalam {{0}} minggu ketika 0.{{2} } persen EG diberikan untuk menginduksi hiperoksaluria [14,22]. Pada akhir proses ini, faktor urin lainnya dan klirens kreatinin tetap dalam batas normal, sementara pH urin dan ekskresi sitrat berkurang secara signifikan [14,22]. Dalam penelitian kami, kami menginduksi hiperoksaluria dengan memberikan 1 persen EG, yang kemudian menyebabkan kerusakan sel pada sel tubulus.

Pada hiperoksaluria, akumulasi kristal CaOx di lumina duktus kolektor papila ginjal dan endapan seperti batu yang dihasilkan menyebabkan obstruksi, yang membuka jalan bagi kerusakan ginjal. Sebagai hasil dari proses ini, kadar produk limbah nitrogen dalam darah, seperti asam urat, nitrogen urea darah, dan kreatinin, dapat meningkat [22,23]. Dalam penelitian kami, disfungsi ginjal ditunjukkan oleh peningkatan kadar urea serum yang nyata pada hewan yang diobati dengan EG. Namun, pengobatan quercetin secara signifikan mengurangi kadar urea serum.

Quercetin adalah molekul dengan antioksidan kuat dan efek anti-inflamasi [24]. Hal ini ditemukan dalam sayuran, buah-buahan, teh, dan berbagai jenis makanan. Selain menjadi pemulung kuat spesies oksigen reaktif (ROS), quercetin meningkatkan kapasitas antioksidan plasma total [25,26]. Dilaporkan dalam beberapa penelitian bahwa flavonoid mengurangi stres oksidatif dalam sel tubulus ginjal, mencegah akumulasi kristal CaOx, dan mengurangi peroksidasi lipid yang disebabkan oleh oksalat dalam kultur sel [27,28].

Telah diterima secara luas bahwa stres oksidatif memainkan peran penting dalam pembentukan batu ginjal [12,22]. Kristal CaOx terakumulasi dalam jaringan ginjal yang mengarah ke sintesis beberapa makromolekul yang memulai proses inflamasi dan fibrogenik. Spesies oksigen reaktif kemungkinan besar terlibat dalam berbagai peristiwa pensinyalan selama periode ini [14]. Dalam studi kultur sel epitel hewan dan ginjal, pembentukan radikal bebas ditunjukkan sebagai respons terhadap hiperoksaluria dan pembentukan kristal CaOx [20,22]. Karena lipid adalah biomolekul paling sensitif dalam membran sel terhadap radikal bebas, peroksidasi lipid terjadi di membran sel [27,28]. Peroksidasi lipid adalah peristiwa utama kerusakan sel karena mengganggu struktur membran dan selanjutnya menyebabkan kerusakan sel. MDA merupakan indikator peroksidasi lipid; itu juga menunjukkan bahwa ROS diproduksi berlebihan [22,29]. Oleh karena itu digunakan dalam evaluasi peroksidasi lipid. Diketahui bahwa kerusakan akibat deposisi CaOxcrystal dan pembentukan ROS dapat dicegah atau dikurangi dengan antioksidan endogen seperti superoxide dismutase (SOD), CAT, dan glutathione peroxidase (GSH-Px) [20,22,29]. Dalam penelitian ini, kadar MDA ditemukan meningkat pada model hewan percobaan nefrolitiasis hiperoksalurat, yang berhasil dibuat dengan pemberian etilen glikol. Penelitian kami juga menunjukkan bahwa quercetin mengurangi efek peningkatan stres oksidatif dari hiperoksaluria, seperti yang ditunjukkan oleh parameter biokimia dan histopatologi.

Diketahui bahwa ROS mengaktifkan molekul sinyal seperti protein kinase C (PKC), c-Jun N-terminal kinase (JNK), dan p38-MAPK [21]. Aktivasi molekul sinyal ini menyebabkan induksi faktor transkripsi NF-kB dan protein aktif-1(AP-1). Sebagai hasil dari peristiwa ini, ekspresi protein seperti monosit chemoattractant protein-1 (MCP-1), osteopontin (OPN), fibronektin, dan transforming growth factor-beta 1 (TGF{{11} })meningkatkan [20]. Protein ini memfasilitasi adhesi kristal CaOx dan proses inflamasi yang relevan [20]. Peerapen dkk. melaporkan bahwa jalur pensinyalan p38-MAPK memediasi gangguan dari hubungan erat antara sel-sel epitel [30]. Mereka juga menunjukkan bahwa ekspresi protein yang terlibat dalam jalur pensinyalan p38-MAPK meningkat selama pembentukan batu kalsium oksalat. Juga ditunjukkan bahwa oksalat secara selektif mengaktifkan jalur pensinyalan p38-MAPK, yang memiliki peran penting dalam nefrotoksisitas oksalat dalam sel epitel ginjal manusia [31]. Shiyong Qi dkk. membuktikan bahwa kristal CaOx menginduksi peningkatan molekul adhesi di sel epitel tubulus proksimal, dan proses ini dimediasi oleh jalur pensinyalan p38-MAPK [31]. Penelitian kami menunjukkan bahwa oksalat menginduksi aktivasi p38-MAPK dan NF-kB. Selain itu, kami menunjukkan bahwa quercetin secara signifikan mengurangi aktivitas p38-MAPK. Berdasarkan informasi tersebut, dapat disarankan bahwa quercetin dapat mencegah kekambuhan batu CaOx.

Penelitian ini memiliki beberapa keterbatasan. Yang pertama adalah bahwa tidak ada kelompok kontrol yang diberikan kuersetin saja. Oleh karena itu, efek kuersetin yang diberikan secara oral pada produksi dan penyerapan oksalat usus belum dievaluasi dengan jelas. Kedua, efek quercetin pada penyerapan etilen glikol juga tidak dievaluasi. Akibatnya, penelitian lebih lanjut diperlukan untuk memperjelas mekanisme kerja quercetin pada hiperoksaluria.

5. Kesimpulan

Kami menyimpulkan bahwa quercetin menghambat proses inflamasi dan oksidatif yang dipicu oleh hiperoksaluria pada jaringan ginjal. Karena proses ini mengarah pada pembentukan batu CaOx, quercetin dapat dipertimbangkan dalam perawatan medis pencegahan batu CaOx berulang. Namun demikian, penelitian eksperimental dan klinis lebih lanjut diperlukan untuk memvalidasi temuan kami.

Referensi

1. Gambaro, G.; Vezzoli, G.; Casari, G.; Rampoldi, L.; D'Angelo, A.; Borghi, L. Genetika hiperkalsiuria dan kalsium nefrolitiasis: Dari bentuk monogenik yang langka hingga bentuk poligenik yang umum. Saya. J. Ginjal Dis. 2004, 44, 963–986. [CrossRef]

2. Coe, FL; Taman, JH; Asplin, JH Patogenesis dan pengobatan batu ginjal. N. Inggris. J. Med. 1992, 327, 1141-1152. [CrossRef] [PubMed]

3. Khan, SR; Mutiara, MS; Robertson, WG; Gambaro, G.; Kanal, BK; Doizi, S.; Traxer, O.; Tiselius, HG Batu ginjal. Nat. Pdt. Dis. Primer 2016, 2, 16008. [CrossRef]

4. Matahari, XY; Xu, M.; Ouyang, JM Pengaruh Bentuk Kristal dan Agregasi Kalsium Oksalat Monohidrat Terhadap Toksisitas Seluler Pada Sel Epitel Ginjal. ACS Omega 2017, 2, 6039–6052. [CrossRef] [PubMed]

5. Jonassen, JA; Kohjimoto, Y.; Scheid, CR; Schmidt, M. Oksalat toksisitas dalam sel ginjal. Url. Res. 2005, 33, 329–339. [CrossRef] [PubMed]

6. Hess, B.; Ryall, RL; Kavanagh, JP; Khan, SR; Kok, DJ; Rodgers, AL; Tiselius, HG Metode untuk mengukur kristalisasi dalam penelitian urolitiasis: Mengapa, bagaimana dan kapan? eur. Url. 2001, 40, 220–230. [CrossRef]

7. Menon, M.; Koul, H. Tinjauan klinis 32: Nefrolitiasis kalsium oksalat. J.klin. Endokrinol. Meta 1992, 74, 703–707. [CrossRef]

8. Anand David, AV; Arulmoli, R.; Parasuraman, S. Sekilas Tentang Pentingnya Biologis Quercetin: Sebuah Flavonoid Bioaktif. Farmakogni. Wahyu 2016, 10, 84–89. [PubMed]

9. Abdelhalim, MAK; Moussa, SAA; Qaid, HAY Peran protektif quercetin dan arginine pada nanopartikel emas menginduksi hepatotoksisitas pada tikus. Int. J. Nanomed. 2018, 13, 2821–2825. [CrossRef] [PubMed]

10. Yarahmadi, A.; Zal, F.; Bolouki, A. Efek pelindung quercetin pada stres oksidatif yang diinduksi nikotin dalam 'sel HepG2'. racun. mekanisme Metode 2017, 27, 609–614. [CrossRef]