Efek Pencegahan Cistanche Salsa Phenylethanoid Glycosides Pada Tikus Dengan Edema Serebral Ketinggian

Kontak: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:{0}}

Abstrak

Tujuan Untuk mengamati efek dan mekanisme glikosida fenilethanoid dari Cistamnche Salsa pada tikus dengan edema serebral dataran tinggi. Metode Glikosida fenilethanoid diberikan sebagai profilaksis untuk menetapkan model tikus dengan edema serebral ketinggian tinggi dengan menggunakan ruang hipobarik dalam lingkungan simulasi ketinggian 5000 m. Perubahan patologis jaringan paru tikus, kadar air, IL-6, TNF-a, MDA, dan aktivitas enzimatik SOD dan GSH-Px pada homogenat paru diukur. Hasil Dibandingkan dengan kelompok kontrol, tikus edema serebral dataran tinggi menunjukkan karakter edema serebral yang luar biasa dan kandungan air yang tinggi di paru-paru. Kandungan IL-6, TNF-a, dan MDA dalam homogenat paru meningkat sedangkan aktivitas enzimatik SOD dan GSH-Px menurun secara signifikan. Glikosida fenilethanoid dapat memperbaiki perubahan patologis pada jaringan paru, menurunkan kandungan air, IL-6, TNF-a, dan MDA, serta meningkatkan aktivitas enzimatik SOD dan GSH-Px pada homogenat paru. Glikosida fenilethanoid dapat mencegah edema serebral ketinggian. yang mekanismenya mungkin terkait dengan anti-inflamasi dan stres anti-oksidasi di jaringan paru-paru.

Kata kunci: Cistanche Salsa; glikosida fenilethanoid; edema serebral ketinggian tinggi

Glikosida fenilethanoid Cistanche

Edema serebral ketinggian tinggi (HACE) umumnya terjadi ketika ketinggian lebih dari 3000m untuk pertama kalinya. Ini adalah penyakit serius yang mengancam jiwa yang disebabkan oleh ketidakmampuan tubuh untuk beradaptasi dengan lingkungan bertekanan rendah dan rendah oksigen. Ini terkait dengan penyakit ketinggian. , Edema paru ketinggian tinggi adalah tiga manifestasi penyakit ketinggian akut. Meskipun ada lebih sedikit penelitian tentang HACE dibandingkan dengan edema paru ketinggian tinggi, penelitian terkait telah menunjukkan bahwa stres oksidatif dan peradangan memainkan peran penting dalam patogenesis HACE (P-3).

Glikosida fenilethanoid Cistanche(glikosida fenilethanoid dari Cistanche Salsa, PhGCs) diekstraksi dari cistanche Cistanche Xinjiang, dan penelitian terkait telah berhasil mengisolasi berbagai glikosida fenilethanoid, terutama termasuk echinacoside dan verbascoside 1. Penelitian tentang efek farmakologis PhGCs selama bertahun-tahun telah menunjukkan bahwa ia memiliki kesamaan efek farmakologis untuk salidroside, bahan aktif penyakit anti-ketinggian. Ini memiliki anti-hipoksia, anti-radiasi, pemulung radikal bebas, dll P-7]. Dalam percobaan ini, jaringan model HACE tikus 91 didirikan di ruang eksperimental buatan lingkungan khusus di wilayah barat laut, dan PhGC diberikan secara preventif untuk mengamati efek pencegahannya pada HACE dan kemungkinan mekanisme aksinya.

Ramuan Cistanche:Glikosida fenilethanoid Cistanche

1 bahan

1.1 Hewan

Hewan percobaan Tikus Wistar, tingkat SPF, setengah jantan dan setengah jantan, berat 180-220g [Pusat Hewan Eksperimen Universitas Kedokteran Xinjiang, nomor lisensi produksi hewan SCXK (baru) 2011-0004, nomor lisensi penggunaan hewan SYXK ( baru) 2011- 0004].

1.2 Aparatur

Kabin eksperimen buatan lingkungan khusus barat laut (Guizhou Fenglei Aviation Ordnance Co., Ltd., DY{{0}}); mikroskop optik (perusahaan Nikon Jepang, E 200); alat pengiris tisu (Perusahaan Mecang Jerman, HM340E); timbangan elektronik (Mettler- Toledo Instrument Co., Ltd., AL204, akurasi; 0,1 mg); pembaca pelat mikro (Bio-RAD, XMark 7M, AS): Spektrofotometer UV (Shanghai Lens Optical Technology Co., Ltd., SpectrumLab 22); pemanas listrik oven pengeringan suhu konstan (Huangshi, Hubei) City Medical Equipment Co., Ltd., SKHG-01).

1.3 Obat uji

PhGCs (Profesor Tu Pengfei dari Universitas Peking, isi: 90,70 persen , disiapkan dengan air suling untuk membuat larutan dengan konsentrasi yang sesuai); Rhodiola Rosea Oral Liquid (Tibet Tibetan Medicine Group Co., Ltd., nomor batch: 120503, spesifikasi: 10 mL); tumor necrosis Factor- (tumor necrosis factor- , TNF- ) kit (nomor batch: ZJAGBZAB01), kit interleukin-6 (interleukin-6, IL-6) (nomor batch: ZIBIBZAB 02) (Shanghai Yikesai Biological Products Co., Ltd. Company); Sodium Pentobarbital (Perusahaan Amresco Amerika, Nomor Lot: 20110612); Paraformaldehyde (Pabrik Reagen Kimia Chengdu Kelon, Nomor Lot: 20110901); Kit Superoksida Dismutase (SOD) (Nomor Lot:20130812), kit malondialdehid (MDA) (nomor batch: 20130812), kit glutathione peroksidase (GSH-Px) (nomor batch: 20130814) (Institut Bioteknologi Nanjing Jiancheng ); Bubuk penyangga fosfat PBS (Fuzhou Maixin Biotechnology Development Co., Ltd., nomor batch: 13061716).

ramuan cistanche

2 metode

2.1 Pengelompokan dan pengobatan

Tikus wistar secara acak dibagi menjadi 6 kelompok: kelompok kontrol normal, kelompok model, kelompok larutan oral Rhodiola Rosea (1,78 mL·kg-'), kelompok dosis rendah PhGCs (75 mg·kg-), kelompok dosis sedang PhGCs (15 0mg ·Kg-'), kelompok dosis tinggi PhGCs (300mg·kg-), 12 tikus di setiap kelompok. Setiap kelompok dibiakkan dalam lingkungan SPF. Kelompok kontrol normal dan kelompok model diberikan secara intragastrik dengan akuades (1,0 mL/100g). Kelompok lain diberikan secara intragastrik sesuai dengan dosis yang sesuai selama 10 hari berturut-turut. Pada hari ke-8, sisanya kecuali kelompok kontrol normal Setiap kelompok disimpan selama 72 jam di kabin eksperimental buatan yang mensimulasikan lingkungan dataran tinggi pada ketinggian 5 000 m. Ketinggian di kabin naik dengan kecepatan konstan 10 m·s-' ke ketinggian 5000 m (tekanan atmosfer 54,1 kPa, tekanan parsial oksigen 11,52 kPa), di mana hewan dengan bebas memasuki air dan makan, dan kabin dibuka selama 0,5 jam setiap 24 jam. Obat, tambahkan pakan dan air minum.

2.2 Penanganan hewan

Tikus pada masing-masing kelompok dibius dengan injeksi intraperitoneal natrium pentobarbital (2 persen, 0.2 mL/100g) segera setelah meninggalkan kabin, darah diambil dari aorta perut, rongga tengkorak dibuka, jaringan otak diambil, dan bagian atas otak kiri diambil dan ditimbang. Paket tersebut digunakan untuk menentukan kadar air, dan bagian bawah otak kiri difiksasi dengan paraformaldehida 4 persen untuk pewarnaan HE. Timbang otak kanan, tambahkan larutan PBS untuk menyiapkan 10 persen homogenat, sentrifus pada 3 000 r·min-' selama 10 menit, alikuot supernatan, dan simpan dalam lemari es pada suhu 80 derajat untuk penentuan TNF- a, IIL-6, SOD, MDA, GSH-Px.

2.3 Pengamatan patologi jaringan otak

Setelah jaringan otak sepenuhnya difiksasi dalam 4 persen paraformaldehyde, dehidrasi, tertanam, diiris, dan diwarnai HE, perubahan patologis diamati di bawah mikroskop optik di bawah perbesaran yang berbeda, dan gambar diambil.

2.4 Penentuan kadar air otak dan penentuan indeks terkait peradangan homogenat jaringan otak dan stres oksidatif

Panggang jaringan otak yang dibungkus kertas timah dalam oven (80 derajat , 72 jam) hingga berat konstan, timbang berat kering, dan hitung kadar air: kadar air=(berat jaringan-berat kering jaringan) / berat jaringan × 100 persen. Gunakan enzym-linked immunoassay kit untuk mengukur kandungan TNF- , IL-6, spektrofotometer UV untuk mengukur MDA, SOD, GSH-Px, langkah-langkah spesifik ikuti petunjuknya.

2.5 Analisis statistik

SPSS 16.0 perangkat lunak digunakan untuk analisis, data pengukuran semua diwakili oleh lebih rendah plus s, data pertama diuji normalitas, sampel independen 1 uji digunakan untuk perbandingan antara kelompok yang sesuai, dan transformasi logaritmik dilakukan untuk kelompok yang tidak sesuai. Tingkat pemeriksaan adalah =0.05.

ekstrak cistanche

3. Hasil

3.1 Pengaruh PhGCs pada perubahan patologis jaringan otak pada tikus HACE

Mengamati irisan patologis jaringan otak tikus pada masing-masing kelompok di bawah mikroskop cahaya menunjukkan bahwa lapisan molekuler, lapisan sel granular luar, lapisan sel lapisan tubuh vertebral, lapisan sel granular bagian dalam, dan struktur lapisan sel multi-baris jaringan otak. dari kelompok kontrol normal jelas, dan tidak ada lesi yang ditemukan. Pada kelompok model, jaringan otak tikus mengalami hiperemia dan edema kapiler, dan edema sel pada lapisan molekuler dan lapisan tubuh vertebral terlihat jelas. PhGCs kelompok dosis rendah tikus jaringan otak lapisan molekul bagian dari vasodilatasi dan kemacetan edema, edema sel ringan, edema kurang dari kelompok model: PhGCs kelompok dosis menengah jaringan otak tikus bagian dari submeningeal vasodilatasi dan kemacetan, kadang-kadang sel edema , edema dibandingkan dengan kelompok model Kelompok itu berkurang secara signifikan; lapisan molekuler dari kelompok dosis tinggi PhGCs tidak memiliki edema yang jelas, dan ada edema perivaskular ringan, yang berkurang secara signifikan dibandingkan dengan kelompok model. Lapisan molekuler jaringan otak tikus pada kelompok Rhodiola Rosea mengalami edema yang tersebar, dan pembuluh darah yang tersebar mengalami edema yang sangat ringan. Edema berkurang secara signifikan dibandingkan dengan kelompok model. Dapat dilihat bahwa jaringan otak tikus pada kelompok model jelas mengalami edema, dan model sudah mapan. PhGCs dan Rhodiola Rosea dapat mengurangi derajat edema otak pada tikus model HACE. Hasilnya ditunjukkan pada Gambar 1.

Gambar 1 Pengamatan histopatologi otak tikus dalam kelompok yang berbeda HE × 400）

3.2 Efek PhGCs pada kadar air otak tikus HACE

Dibandingkan dengan kelompok kontrol normal, kadar air jaringan otak dari kelompok model meningkat, dan perbedaannya signifikan secara statistik (P<0.01), indicating="" that="" the="" model="" was="" established.="" the="" brain="" tissue="" water="" content="" of="" rats="" in="" the="" low,="" medium,="" and="" high="" doses="" of="" phgcs="" and="" the="" rhodiola="" rosea="" group="" was="" lower="" than="" that="" of="" the="" model="" group,="" and="" the="" difference="" was="" statistically="" significant=""><0.01). there="" was="" no="" statistically="" significant="" difference="" in="" tissue="" water="">

3.3 Pengaruh PhGCs pada TNF-a dan IL-6 di jaringan otak tikus HACE

Dibandingkan dengan kelompok kontrol normal, kandungan TNF-a dan IIL-6 dalam homogenat jaringan otak dari kelompok model meningkat secara signifikan (P<0.01). the="" contents="" of="" tnf-α="" and="" iil-6="" in="" the="" brain="" tissue="" homogenate="" of="" phgcs="" low,="" medium,="" and="" high="" dose="" groups="" and="" rhodiola="" rosea="" group="" were="" lower="" than="" those="" of="" the="" model="" group=""><0.05), and="" the="" difference="" was="" statistically="" significant.="" there="" was="" no="" statistically="" significant="" difference="" in="" brain="" tissue="" tnf-a="" and="" iil-6="" levels="" between="" the="" phgcs="" dose="" groups="" and="" the="" rhodiola="" rosea="">

3.4 Pengaruh PhGCs pada stres oksidatif di jaringan otak tikus HACE

Dibandingkan dengan kelompok kontrol normal, aktivitas enzim SOD dan GSH-Px di jaringan otak kelompok model berkurang secara signifikan, dan kandungan MDA meningkat secara signifikan (P<0.01). the="" sod="" and="" gsh-px="" enzyme="" activities="" in="" the="" brain="" tissue="" of="" the="" phgcs="" low,="" medium,="" and="" high="" dose="" groups="" and="" rhodiola="" rosea="" group="" were="" higher="" than="" the="" model="" group,="" and="" the="" mda="" content="" was="" lower="" than="" that="" of="" the="" model="" group.="" the="" difference="" was="" statistically="" significant=""><0.05). there="" was="" no="" significant="" difference="" in="" the="" content="" of="" sod,="" gsh-px,="" and="" mda="" in="" the="" brain="" tissue="" between="" the="" phgcs="" groups="" and="" the="" rhodiola="" rosea="">

suplemen cistanche: meningkatkan kekebalan

4. Diskusi

Dalam beberapa tahun terakhir, penelitian dalam negeri tentang pencegahan dan pengobatan penyakit ketinggian dengan pengobatan tradisional Tiongkok telah mencapai hasil inovatif yang besar, dan obat-obatan tradisional Tiongkok dengan hak kekayaan intelektual independen untuk pencegahan dan pengobatan penyakit ketinggian telah berhasil dikembangkan. Misalnya, Kapsul Rhodiola yang dikembangkan oleh Daerah Militer Tibet telah memperoleh nomor persetujuan obat-obatan kebutuhan khusus militer dan digunakan di pasukan pertahanan perbatasan dataran tinggi sebagai obat khusus untuk pencegahan dan pengobatan penyakit dataran tinggi. Cairan oral Rhodiola Rosea yang diluncurkan oleh perusahaan farmasi lokal Qinghai dan Tibet telah memperoleh nomor persetujuan resmi dari varietas obat Tiongkok nasional dan secara klinis cocok untuk pencegahan dan pengobatan penyakit ketinggian akut dan kronis10. Efek farmakologis dari PhGCs mirip dengan salidroside, jadi kami memilih cairan oral Rhodiola Rosea, yang dijual dan digunakan di pasaran dan memiliki standar obat, sebagai obat kontrol positif.

Sejumlah besar penelitian [1H12 membuktikan bahwa kadar TNF- dan IL-6 pada pasien HACE meningkat, Zhou Qiquan et al. [3 Penelitian telah menunjukkan bahwa TNF- memainkan peran penting dalam mengubah permeabilitas sawar darah-otak. Faktor penting untuk peningkatan permeabilitas penghalang. Sekresi TNF- meningkat selama hipoksemia. Ketika TNF- meningkat secara tidak normal dalam darah, dapat merusak sel-sel endotel vaskular, menyebabkan perubahan morfologi sel endotel vaskular, kerusakan membran sel dan organel, dll, dan TNF-a juga dapat digunakan sebagai sinyal intraseluler apoptosis menginduksi apoptosis. sel endotel vaskular, meningkatkan produksi endotelin (ET-1) dan memperburuk kerusakan dinding pembuluh darah, dan memiliki efek meningkatkan sekresi IIL-614.

Hipoksia dianggap sebagai faktor kunci yang menyebabkan terjadinya penyakit ketinggian akut. Respon stres oksidatif yang diinduksi oleh hipoksia memainkan peran penting dalam hipertensi arteri serebral dan kebocoran vaskular. Radikal bebas lokal terlibat dalam menyebabkan kerusakan pembuluh darah. Kerusakan serebrovaskular dan peningkatan kebocoran cairan dapat menyebabkan edema otak 13i4. Zhou Qiquan dkk. [7 Studi telah menunjukkan bahwa oksigen radikal bebas memainkan peran penting dalam pembentukan HACE dan merupakan faktor penting dalam meningkatkan permeabilitas sawar darah-otak di lingkungan dataran tinggi. Dalam lingkungan hipoksia, radikal bebas dan MDA akan meningkat secara signifikan, sementara fungsi enzim antioksidan diatur ke bawah. Oleh karena itu, rendahnya fungsi enzim antioksidan dan peningkatan kerusakan peroksidasi lipid mungkin memiliki arti penting dalam patogenesis penyakit ketinggian akut. MDA diproduksi oleh pemecahan peroksida asam lemak dan merupakan produk peroksidasi lipid yang paling sering diukur dalam sistem biologis. Enzim antioksidan dalam tubuh termasuk SOD, GSH-Px, dll., yang secara langsung mengais radikal bebas superoksida dan hidrogen peroksida, atau mengubahnya menjadi zat yang kurang aktif untuk memainkan peran defensif. Jadi kami mendeteksi SOD, MDA, GSH-Px di homogenat jaringan otak.

Pada percobaan ini, dibandingkan dengan kelompok kontrol normal, jumlah TNF-a dan IIL-6 dalam homogenat jaringan otak kelompok model HACE meningkat secara signifikan, aktivitas SOD, enzim GSH-Px menurun, dan kandungan MDA meningkat secara signifikan Ini menunjukkan bahwa disfungsi stres oksidatif yang diinduksi hipoksia dan peradangan pada tikus terlibat dalam pembentukan HACE. Pemberian pencegahan PhGCs dapat mengurangi kadar air jaringan otak pada tikus dengan edema serebral, dan secara signifikan meningkatkan perubahan patologis edema jaringan otak, menunjukkan bahwa ia memiliki efek mencegah terjadinya HACE. PhGCs dapat meningkatkan SOD dan GSH-Px pada jaringan otak tikus selama hipoksia. Aktivitas enzim mengurangi kandungan MDA di jaringan otak yang disebabkan oleh hipoksia. Kandungan TNF- dan IL-6 dalam jaringan otak tikus dalam kelompok pemberian pencegahan PhGCs secara signifikan lebih rendah daripada pada kelompok model, menunjukkan bahwa stres anti-oksidatif dan anti-inflamasi kami mungkin merupakan pencegahan dan pengobatan. PhGCs Salah satu mekanisme penyakit ketinggian. Berdasarkan hasil percobaan ini, efek PhGCs pada kelompok dosis menengah sedikit lebih baik daripada dosis tinggi, tetapi perbedaannya tidak signifikan secara statistik. Tidak ada laporan literatur terkait PhGCs adalah penginduksi enzim obat hati, yang dapat mengesampingkan kemungkinan bahwa obat menginduksi peningkatan aktivitas enzim obat hati dan mempercepat metabolisme diri. Diperkirakan bahwa alasan yang mungkin adalah bahwa ketika konsentrasi obat meningkat, konsentrasi obat dalam tubuh melebihi kisaran hubungan dosis-efek. Pada dosis menengah, semua reseptor dalam tubuh terisi dan reseptor jenuh, sehingga efek dosis tinggi tidak terus meningkat, dan obat itu adalah glikosida, yang dapat menghidrolisis gula di perut, dan peningkatan viskositas akan membatasi penyerapan efektif obat ketika konsentrasi terlalu tinggi.

suplemen cistanche: meningkatkan kekebalan

Referensi

[1] John B. West, terjemahan bahasa Inggris dari "nomenklatur, klasifikasi, dan kriteria diagnostik penyakit dataran tinggi di Cina"[J]. Biol Med Altitude Tinggi, 2010, 11(2): 169-172.

[2] Bailey DM, Evans KA, James PE, dkk. Perubahan metabolisme radikal bebas pada penyakit gunung akut: implikasi untuk autoregulasi serebral dinamis dan fungsi sawar darah-otak [J]. J Physiol, 2009, 587(1): 73-85.

[3] Tang YP, Wu P, Su JJ, dkk. Efek aquaporin-4 pada pembentukan edema setelah perdarahan intraserebral [J]. Neurologi Eksperimental, 2010, (223): 485-495.

[4] Cai Hong, Bao Zhong, Jiang Yong, dll. Bahan-bahan yang efektif dalam Cistanche cistanche dari asal yang berbeda Analisis kuantitatif [J]. Pengobatan Herbal Cina, 2007, 38(3): 452-455.

[5] Muhebuli • Abuliz, Mao Xinmin, Rena • Kasmu, dll. PhGCs Aktivitas antioksidan dalam sel HL-60 [J]. Buletin Farmakologi Cina, 2008, 3 (24): 362-364.

[6] Liu Fengxia, Wang Xiaowen, Luo Lan, dkk. PhGCs terhadap peptida -amiloid Efek dan mekanisme pada pembelajaran dan memori model tikus penyakit Alzheimer [J]. Buletin Ilmu Farmakologi Tiongkok, 2006, 22(5): 595-599.

[7] Liu Zhiqin, Chen Tenang, Li Yan, dkk. Efek Cistanche pada hematopoiesis dan efek hematopoietik kemoterapi pada tikus yang mengandung tumor Dampak fungsi kekebalan [J]. Jurnal Pengobatan Tradisional Cina Universitas Beijing, 2010, 33 (11): 758-761.

[8] Xu Yonghua, Zhang Qiong, Cao Jinjun, dll. Buat ruang bertekanan rendah senyawa skala besar untuk memperluas obat Jenis platform eksperimental [J]. Jurnal Pengobatan Perbandingan Cina, 2012, 22(7): 60-63.

[9] Tao Yicun, Shi Wen Hui, Xu Yonghua, dkk. Edema paru ketinggian tinggi di bawah simulasi lingkungan dataran tinggi Pembentukan model tikus [J]. Jurnal Hewan Eksperimental Cina, 2014, 22 (1): 76-78.

[10] Wang Hai. Farmakoterapi untuk penyakit ketinggian kerja [M]. Beijing: Rumah Penerbitan Ilmu Kedokteran Militer, 2010: 131-148.

[11] Chen Yuntian, Hu Ying. Perubahan interleukin plasma-6 pada pasien dengan HACE akut [J]. Jurnal Pengobatan Pencegahan Cina, 2006, 24 (2): 92-94.

[12] Colleen Glyde JL, Andrew WS, Megan JW, dkk. Penyakit gunung akut, peradangan, dan permeabilitas: wawasan baru dari studi biomarker darah [J]. J Appl Physiol, 2011, 111: 392-399.

[13] Zhou QQ, Tan XL, Wang J. Peningkatan permeabilitas sawar darah otak yang disebabkan oleh mediator inflamasi terlibat dalam edema serebral ketinggian tinggi [J]. Sci Res and Essays, 2011, 6 (3): 607-615.

[14] Ohga E, Matsuset. Hubungan antara molekul adhesi dan hipoksia [J]. Nippon Rinsho, 2000, 59 (8): 1587-1591.

[15] Bakonyi T, Radak Z. Ketinggian tinggi dan radikal bebas [J]. J Sports Sci Med, 2004, 3(2): 64-69.

[16] Bailey DM, Evans KA, James PE, dkk. Perubahan metabolisme radikal bebas pada penyakit gunung akut: implikasi untuk autoregulasi serebral dinamis dan fungsi sawar darah-otak [J]. J Physiol, 2009, 587(1): 73-85.

[17] Zhou Qiquan, Wang Jing, Wang Yunli, dkk. Darah-otak di bawah paparan ketinggian tinggi terhadap radikal bebas oksigen Peran perubahan permeabilitas penghalang dan hubungannya dengan HACE [J]. Sirkulasi Mikro China, 2007, 11(3): 149-153.