Bagian 2 Phenylethanol Glycoside Liposome Menghambat Aktivasi HSC yang Diinduksi PDGF Melalui Regulasi Jalur Sinyal FAKPI3KAkt
Mar 06, 2022
Kontak: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:{0}}
4. Bahan dan Metode
4.1. Bahan:
CPhGs (glikosida fenilethanoid dari cistanche)dibeli dari Hetian Di Chen Medical Biotechnology Co., Ltd. (Xinjiang, China). Isi dariechinacealebih dari 35 persen, dan acteoside lebih dari 16 persen. Lesitin dibeli dari Shanghai Lanji Technology Co., Ltd. (Shanghai, Cina). 1,2-Dipalmitoil-sn-gliserol-3-fosfokolin (DPPC) dan kolesterol dipasok oleh Avanti Polar Lipid Inc. (Birmingham, AL, USA). Sel stellata hati tikus yang diabadikan disediakan oleh Shanghai Zhongqiaoxinzhou Biotech (Shanghai, Cina). Media Dulbecco yang dimodifikasi Eagle (DMEM) dibeli dari Thermo Fisher Scientific, Inc. (Waltham, MA, USA). Fetal bovine serum (FBS) dibeli dari Gibco Life Technologies (Waltham, MA, USA). Penisilin (100 g/mL) dan streptomisin (100 g/mL) adalah produk dari Thermo Fisher Scientific, Inc. MTT [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl){ {13}},5-diphenyltetrazolium bromide] (5 mg/mL) dibeli dari Sigma (Oakville, ON, Kanada). Aktivitas LDH dinilai dengan menggunakan kit uji LDH dari Beijing Solar Science & Technology Co., Ltd. (Beijing, China). FITC Annexin V Apoptosis Detection Kit I dan propidium iodide (PI)/RNase Staining Buffer semuanya dibeli dari BD Biosciences (San Diego, CA, USA) dan rrPDGF-BB disediakan oleh R&D Systems (Minneapolis, MN, USA). Reagen TRIzol dibeli dari Thermo Fisher Scientific, Inc. Kit Sintesis cDNA Untai Pertama RevertAid adalah produk dari Thermo Fisher Scientific, Inc. (Vilnius, Lithuania). TB Green Premix Ex Taq TM II dibeli dari Takara (Dalian, China). Larutan pirolisis ripa disediakan oleh Thermo Fisher Scientific, Inc. Protease inhibitor phenylmethylsulfonyl fluoride dan campuran Broad-spectrum phosphatase inhibitor dibeli dari Boster Biological Technology Co., Ltd. (Wuhan, Cina). Pita protein divisualisasikan oleh Substrat Western Blotting Pierce™ ECL, yang disediakan oleh Invitrogen (Carlsbad, CA, USA). IgG kambing anti-kelinci yang diberi label enzim horseradish dibeli dari Zhongshan JinQiao Shanghai Co., Ltd. (Shanghai, China). Super Signal West Femto Trial Kit dipasok oleh Thermo Fisher Scientific, Inc. Rabbit anti-p-actin, a-SMA, collagen-1, FAK, PI3K, phospho-PI3K, Akt, dan antibodi phospho-Akt semuanya dibeli dari Beijing Bioss Antibodies Biological Co., Ltd. (Beijing, China). X-3-FAK dan X-3-NC dibeli dari Shanghai GenePharma Co., Ltd. (Shanghai, China). Lipofectamine 2000 disediakan oleh Invitrogen.
4.2. Persiapan Liposom CPhG
Lesitin, DPPC, dan kolesterol (1:2:2, m/m/m) dilarutkan dalam campuran kloroform dan metanol (2:1 v/v), diputar membentuk film pada derajat 49-50 , danCPhGs(glikosida fenilethanoid dari cistanche)(250 g/mL) ditambahkan kemudian. Solusi reaktif diputar dan terhidrasi terus menerus, dan membran fosfolipid dipindahkan ke dalam air untuk membentuk liposom CPG. Proses liposom yang dienkapsulasi diulangi sesuai dengan metode di atas. Untuk mendapatkan liposom yang seragam, liposom yang dienkapsulasi diekstrusi 5 kali dengan membran mikropori 0.45 m dan difiltrasi 18-20 kali dengan membran 0.22 m. Liposom CPG disimpan pada 4 derajat. Distribusi ukuran partikel diukur dengan penganalisis ukuran partikel laser, bentuk partikel diamati dengan mikroskop elektron transmisi, dan pemuatan obat dan efisiensi enkapsulasi ditentukan dengan HPLC.
4.3. Pelepasan In Vitro dari Liposom CPG dan CPhGs(glikosida fenilethanoid dari cistanche)
Profil pelepasan in vitro dari liposom CPG danCPhGs(glikosida fenilethanoid dari cistanche) dilakukan dengan metode membran dialisis. Sebanyak 5 mL masing-masing sampel dipindahkan ke dalam kantong dialisis dengan potongan berat molekul 14,000 Da. Kantong dialisis dicelupkan ke dalam 20{{10 }} mL larutan buffer PBS (pH=6.0) digetarkan pada suhu 37 derajat . Media pelepasan (3 mL) ditarik dan diganti dengan larutan buffer PBS isopiknik (pH=6.0) pada interval waktu yang dijadwalkan (0,5,1, 2, 4, 8,12,16, 24, dan 48 h). Konsentrasi echinacosida dalam liposom CPG danCPhGsdalam media rilis ditentukan oleh
HPLC. Pelepasan kumulatif ( persen ) dari liposom CPG danCPhGs(glikosida fenilethanoid dari cistanche) dihitung dengan menggunakan Persamaan berikut (1):
di mana Cn adalah konsentrasi obat dalam media pelepasan pada titik pengambilan sampel ke-n, V adalah volume media yang dilepaskan, dan W adalah dosis total.
Untuk lebih memahami karakteristik pelepasan vitro dariCPhG(glikosida fenilethanoid dari cistanche) liposom danCPhGs, tiga model berbeda diterapkan agar sesuai dengan data rilis yang diperoleh: (a) model kinetika orde nol, (b) model kinetika orde pertama, dan (c) model Higuchi yang diberikan dalam Persamaan (2)-(4) :
di mana Mt/Mo adalah fraksi kurkumin yang dilepaskan dari sampel pada waktu t, dan k adalah konstanta pelepasan dari model yang berbeda. Koefisien korelasi dihitung untuk menggambarkan tingkat kesesuaian antara model rilis dan data.
4.4. Sitotoksisitas
Untuk HSC, densitas 1 x 105 sel/mL disepuh di 96-piring sumur dan dibiarkan tumbuh semalaman pada suhu 37 derajat dalam inkubator CO2 5 persen. Vitalitas sel diuji pada berbagaiCPhGkonsentrasi liposom (117.79,58.90, 29.45, 14.72, 7.36, 3.68,1.84, 0.92, dan 0.46 g/mL) untuk mendeteksi vitalitas sel uji dan menghitung nilai IC50. Kemudian, sel diinkubasi pada suhu 37 derajat selama 4 jam dengan 20 L MTT (5 mg/mL dalam larutan PBS). Produk MTT-Produk ungu dilarutkan dalam 150 L DMSO, dan Pembaca Absorbansi Spektrum Multiskan (Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA, USA) digunakan untuk mengukur penyerap pada 490 nm. Rumus berikut (Persamaan (5)) digunakan untuk menghitung persentase viabilitas sel:
4.5. Toksisitas Sel dari Liposom CPhG pada HSC
Sel diunggulkan ke dalam 6-piring sumur, dan toksisitas HSC diukur menggunakan Kit deteksi LDH. Sel dilapisi dengan kepadatan 2 x 105 sel/sumur di 6-piring sumur pada 37 derajat dalam inkubator dengan 5 persen CO2. Setelah pertumbuhan semalam, sel diperlakukan denganCPhGliposom (29,45, 14,72, dan 7,36 g/mL). Kontrol kosong (media DEME) dipertahankan secara bersamaan. Setelah 24 jam, sel dikumpulkan dengan tripsin dan sentrifugasi. Setiap kelompok sel diberikan secara ketat sesuai dengan instruksi kit. Tingkat kebocoran LDH dari cairan kultur sel kemudian dihitung.
4.6. Analisis Apoptosis
Sel dikultur ke dalam 6-piring sumur dengan kepadatan 2 x 105 sel/sumur pada 37 derajat dalam inkubator dengan 5 persen CO2. Setelah pertumbuhan semalam, sel diperlakukan denganCPhGliposom (29,45, 14,72, dan 7,36 g/mL), dan kemudian apoptosis HSC diukur menggunakan FITC Annexin V Apoptosis Detection Kit. Konsentrasi didasarkan pada IC50 yang ditentukan dari uji sitotoksisitas. Kontrol kosong (media DEME) dipertahankan secara bersamaan. Setelah 24 jam, sel-sel dikumpulkan dengan tripsin dan sentrifugasi dan dicuci dengan PBS dan disuspensikan dalam buffer pengikat 500 L. Kemudian, sel diwarnai dengan 5 L Annexin V-FITC dan 5 L PE. Sel diinkubasi pada suhu kamar selama 30 menit dalam gelap, dan tingkat apoptosis diukur menggunakan FACSCalibur Cytometer (Becton Dickinson, San Jose, CA, US).
4.7. Analisis Penangkapan Siklus Sel
HSC (2 X 105 sel/2 mL/sumur) dirawat selama 24 jam denganCPhGliposom pada 29,45, 14,72, dan 7,36 ^g/mL dalam pelat sumur 6-. Kontrol kosong (media DEME) dipertahankan secara bersamaan. Sel-sel dipanen dan dicuci dengan 1 mL PBS dan difiksasi dengan etanol 75 persen semalaman pada suhu 4 derajat. Sel-sel kemudian disentrifugasi dan disuspensikan kembali dalam 500 larutan buffer pewarnaan propidium iodida (PI)/RNase pada 37 derajat selama 30 menit dalam gelap. Akhirnya, sel diukur menggunakan FACSCalibur Cytometer (Becton Dickinson). Proporsi sel dalam fase G0/G1, S, dan G2/M dari siklus sel dianalisis dengan perangkat lunak FACS Diva (Becton Dickinson).
4.8. Efek dariCPhG(glikosida fenilethanoid dari cistanche) Liposom pada Jalur Pensinyalan FAK dan PI3K/Akt yang Dimediasi PDGF
4.8.1. Uji Proliferasi
Garis HSC (1 X 105 sel/mL) disepuh di 96-piring sumur dan dibiarkan tumbuh semalaman pada suhu 37 derajat dalam inkubator CO2 5 persen. Setelah 24 jam kultur sel, sel-sel secara acak dibagi menjadi lima kelompok berikut: Kontrol kosong (dibiakkan dalam DMEM yang hanya mengandung 10 persen FBS), PDGF-BB (dibiakkan dalam DMEM yang mengandung 50 g/L PDGF-BB), sebuahCPhGintervensi liposom (distimulasi dengan media yang mengandung 50 /mL PDGF-BB 24 jam). Kemudian, sel-sel diperlakukan dengan 29,45,14,72, dan 7,36 Rg/mL liposom CPhG. Sel-sel dikultur terus menerus selama 24 jam, 48 jam, dan 72 jam dalam inkubator pada suhu 37 derajat selama 4 jam dengan 20 rL MTT (5 mg/mL dalam larutan PBS). Produk MTT-formazan ungu dilarutkan dalam 150 rL DMSO dan diperkirakan dengan mengukur absorbansi pada 490 nm dalam Multiskan Spectrum Absorbance Reader (Thermo Fisher Scientific, Inc.), dan IC50 dihitung. Sampel rangkap empat dijalankan untuk setiap konsentrasi dalam empat percobaan independen. Rumus berikut (Persamaan (6)) menghitung persentase viabilitas sel:
4.8.2. Reaksi Rantai Polimerase Waktu Nyata Kuantitatif (qRT-PCR)
Sel-sel diunggulkan ke dalam pelat sumur {{0}}dengan kepadatan 1 X 105 sel/mL. Metode pengelompokan ini sama dengan yang sebelumnya. Setelah 24 jam, RNA total diekstraksi dari sel yang dikultur dengan reagen TRIzol. Konsentrasi dan kemurnian RNA diukur pada 260/280 nm menggunakan spektrofotometer ultraviolet sesuai dengan rasio OD260/OD280 standar 1,8-2.0. Reaksi transkripsi terbalik ditranskripsikan secara terbalik dari RNA menggunakan kit Sintesis cDNA RevertAid First Strand. TB Green Premix Ex TaqTM II digunakan untuk mengukur ekspresi gen. qRT-PCR dilakukan menggunakan sistem PCR Real-Time ABI QuantStudio™6 Flex (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA). Urutan primer disintesis oleh Sangon Biotech (Shanghai, Cina) (Tabel 4).
4.8.3. Analisis Western Blot
Protein total yang diekstraksi dari HSC dalam kelompok yang berbeda disiapkan seperti yang dijelaskan sebelumnya. Secara singkat, protein serupa dipisahkan melalui 10 persen elektroforesis gel natrium dodesil sulfat-poliakrilamida (SDS-PAGE) dan kemudian dipindahkan ke membran polivinilidena fluorida (PVDF) (Roche Diagnostics GmbH, Mannheim, Baden-Wuerttemberg, Jerman). Kemudian, membran PVDF diblokir dalam 3 persen BSA dan diinkubasi semalaman pada suhu 4 C dengan antibodi primer. Keesokan harinya, ditambahkan IgG anti-kelinci kambing berlabel HRP (1:25,000; 1 jam). Pita protein divisualisasikan melalui Substrat Western Blotting Pierce™ ECL dan dicitrakan menggunakan Sistem Pencitraan FluorChem E (Protein Simple, San Francisco, CA, USA), yang dinormalisasi dengan -aktin sebagai kontrol internal.
4.8.4. Eksperimen Ekspresi Berlebih FAK
Sel-sel dibagi menjadi kelompok kontrol medium normal, kelompok stimulasi PDGF-BB, kelompok stimulasi PDGF-BB plus X-3-FAK, kelompok stimulasi PDGF-BB plus X-3-NC, PDGF -Stimulasi BB plus X-3-FAK plusCPhGkelompok liposom, dan stimulasi rrPDGF-BB plus X-3-NC plusCPhGkelompok liposom. Garis HSC (1 × 105 sel/mL) disepuh di 6-piring sumur dan dibiarkan tumbuh semalaman pada suhu 37 C dalam inkubator CO2 5 persen. Pada hari berikutnya, sel PDGF-BB (dikultur dalam DMEM yang mengandung 50 g/L PDGF-BB) ditambahkan dan dikultur. Pada hari ketiga, pEX-3-FAK dan X-3-NC diencerkan dalam medium bebas antibiotik, dicampur rata dengan lipofectamine 2000, dan didiamkan pada suhu 37 C selama 20 menit, sebelum ditambahkan ke setiap sumur sel pada suhu 37 C. Setelah diinkubasi selama 5 jam, medium yang mengandung 10 persen serum diganti selama 48 jam, dan pada hari kelima, medium diganti dengan liposom CPhG konsentrasi 29,45 g/mL selama 24 jam. Kemudian, masing-masing sumur dikoleksi pada hari kedua, ketiga, kelima, dan keenam, dan dideteksi ekspresi protein gen FAK, PI3K, Akt, p-PI3K, dan p-Akt.
4.9. Analisis statistik
Data dinyatakan sebagai mean ± standar deviasi (SD). Perangkat lunak SPSS 16.0 (IBM, New York, NY, USA) digunakan untuk analisis statistik. Signifikansi perbedaan dihitung dengan uji ANOVA satu arah dan dilanjutkan dengan uji LSD. Persamaan disolusi obat dipasang oleh Origin 8.5 (OriginLab, Northampton, MA, USA).
5. Kesimpulan
Kesimpulannya, hasil kami menunjukkan bahwaCPhG(glikosida fenilethanoid dari cistanche) liposom secara signifikan menghambat aktivasi HSC, secara nyata melemahkan perkembangan fibrosis hati dengan meningkatkan apoptosis dan mengatur siklus sel dalam HSC. Menghambat aktivasi jalur pensinyalan FAK/PI3K/Akt mungkin merupakan mekanisme yang mendasariCPhGliposom melindungi terhadap penyakit hati kronis yang terkait dengan fibrosis. Temuan ini memberikan wawasan baru tentang mekanisme formulasi obat baru ini sebagai kandidat antifibrogenik untuk pengobatan fibrosis hati di masa depan. Namun, mekanisme yang mendasarinya lebih kompleks daripada yang dijelaskan di sini, dan hasil kami tidak mengecualikan kemungkinan keterlibatan perangkat lain yang disebabkan olehCPhGliposom untuk mengobati fibrosis hati.
Kontribusi Penulis:TL, JZ, S.-PY, LM, dan S.-LZ menyusun dan merancang eksperimen. S.-LZ, S.-PY, TL, JZ, X.-TM, dan X.-YY menganalisis data. S.-LZ dan JZ menulis naskahnya. TL, LM, dan JZ meninjau naskah. Semua penulis membaca dan menyetujui naskah akhir.
Pendanaan:Penelitian ini didanai oleh National Natural Science Foundation of China, dengan nomor hibah 81560628.
Ucapan terima kasih:Pekerjaan ini didukung secara finansial oleh National Natural Science Foundation of China (No. 8156140127). Penulis ingin mengucapkan terima kasih yang tulus kepada Jun Zhao dan Xin Wang atas perbaikan penulisan makalah ini.
Konflik kepentingan:Para penulis melaporkan tidak ada pernyataan yang menarik.
Referensi
1. Zhang, H.; Matahari, D.; Wang, G.; Cui, S.; Lapangan, RA; Li, J.; Zang, Y. Alogliptin meredakan fibrosis hati melalui penekanan sel stellata hati yang diaktifkan. Biokimia. Biofis. Res. Kom. 2019,511, 387-393. [CrossRef]
2. Parola, M.; Pinzani, M. Fibrosis hati: Patofisiologi, target patogenetik, dan masalah klinis. mol. Aspek Med. 2019, 65, 37-55. [CrossRef] [PubMed]
3. Wu, YJ; Wu, YC; Chen, JIKA; Wu, YL; Chuang, CW; Huang, HH; Kuo, SM Efek Reparatif Astaxanthin-Hyaluronan Nanoaggregates terhadap Retrorsine-CCl(4)-Induced Liver Fibrosis and Necrosis. Molekul 2018,23, 726. [CrossRef] [PubMed]
4. Wang, Y.; Matahari, Y.; Zuo, L.; Wang, Y.; Huang, Y. ASICla mempromosikan glukosa tinggi dan aktivasi sel stellata hepatik yang diinduksi PDGF dengan menginduksi autophagy melalui jalur pensinyalan CaMKKp/ERK. racun. Lett. 2019, 300,1-9. [CrossRef] [PubMed]
5. Gupta, G.; Khadem, F.; Uzonna, JE Peran sitokin yang diturunkan dari sel stelata hati (HSC) dalam peradangan hati dan kekebalan. Sitokin 2018. [CrossRef] [PubMed]
6. Fu, C.; Li, J.; Bercita-cita, A.; Xia, L.; Yang, Y; Chen, Q.; Lv, J.; Wang, X.; Li, JCistanche tubulosaglikosida fenilethanoid menginduksi apoptosis pada sel Eca-109 melalui jalur yang bergantung pada mitokondria. Onkol. Lett. 2019,17, 303-313. [CrossRef] [PubMed]
7. Anda, SP; Bu, L.; Zhao, J.; Zhang, SL; Liu, T. Feniletanol Glikosida dariCistanche tubulosaMenekan Aktivasi Sel Stellate Hepatik dan Memblokir Jalur Konduksi Signaling di TGF-beta1/smad sebagai Agen Anti-Hepatic Fibrosis Potensial. Molekul 2016,21.102. [CrossRef] [PubMed]
8. Anda, SP; Zhao, J.; Bu, L.; Tudimat, M.; Zhang, SL; Liu, T. Efek pencegahan glikosida fenilethanoid dariCistanche tubulosapada fibrosis hati yang diinduksi albumin serum sapi pada tikus. DARU J.Pharm. Sci. 2015, 23, 52. [CrossRef] [PubMed]
9. Gao, XL; Wang, M.; Liu, L. Efisiensi perangkap dan penyerapan empat jenis proliposom. J.Xin Jiang Med. Univ. 2007, 8, 787-790.
10. Li, PY; Du, SY; Lu, Y.; Chen, XN Sistem penghantaran obat bio-perekat dan penerapannya dalam pengobatan tradisional Tiongkok. Dagu. J.Materi. Medica 2017, 42, 4687-4693.
11. Li, Y.; Lu, A.; Panjang, M.; Cui, L.; Chen, Z.; Zhu, L. Nitroimidazole derivatif memasukkan liposom untuk pengiriman obat yang dipicu hipoksia dan meningkatkan kemanjuran terapi pada xenograft tumor yang diturunkan dari pasien. Akta Biomater. 2019, 83, 334-348. [CrossRef] [PubMed]
12. Tang, H.-X.; Zhao, T.-W.; Zheng, T.; Sheng, Y.-J.; Zheng, H.-S.; Zhang, Y.-S. Sistem pengiriman obat liposom penargetan hati dan kemajuan penelitiannya pada penyakit hati. Dagu Dunia. J. Intisari. 2016, 24.4238. [CrossRef]
13. Zhou, BH; Tan, PP; Jia, LS; Zhao, WP; Wang, JC; Wang, keterlibatan jalur pensinyalan HW PI3K / AKT dalam apoptosis yang diinduksi fluoride dalam sel C2C12. Chemosphere 2018,199, 297-302. [CrossRef] [PubMed]
14. Jia, Y.; Guan, Q.; Gu, Y.; Du, C. Echinacosida Merangsang Proliferasi Sel dan Mencegah Apoptosis Sel pada Sel MODE-K Epitel Usus dengan Up-Regulation of Transforming Growth Factor-p1 Expression. J. Farmasi. Sci. 2012, 118, 99-108. [CrossRef]
15. Lin, L.-W.; Hsieh, M.-T.; Tsai, F.-H.; Wang, W.-H.; Wu, C.-R. Aktivitas anti-nosiseptif dan anti-inflamasi yang disebabkan olehDeserticola Cistanchepada hewan pengerat. J. Etnofarmaka. 2002, 83, 177-182. [CrossRef]
16. Li, T.-M.; Huang, H.-C.; Su, C.-M.; Ho, T.-Y.; Wu, C.-M.; Chen, W.-C.; Fong, Y.-C.; Tang, C.-H.Deserticola Cistancheekstrak meningkatkan pembentukan tulang di osteoblas. J. Farmasi. farmasi. 2012, 64, 897-907. [CrossRef] [PubMed]
17. Liang, H.; Yu, F.; Tong, Z.; Huang, Z. Efek dariCistanches HerbaEkstrak Berair pada Pengeroposan Tulang pada Tikus Ovariektomi. Int. J. Mol. Sci. 2011, 12, 5060-5069. [CrossRef]
18. Lu, M.-C. Studi tentang efek sedatif dariCistanche deserticola.J. Etnofarmaka. 1998, 59, 161-165. [CrossRef]
19. Cai, R.-L.; Yang, M.-H.; Shi, Y.; Chen, J.; Li, Y.-C.; Qi, aktivitas Y. Antifatigue ekstrak kaya fenilethanoid dariDeserticola Cistanche. fitoterapi. Res. 2010, 24, 313-315. [CrossRef]
20. Geng, X.; Tian, X.; Tu, P.; Pu, X. Efek neuroprotektif echinacosida pada model MPTP tikus penyakit Parkinson. Eur. J. Farmakol. 2007, 564, 66-74. [CrossRef]
21. Morikawa, T.; Pan, Y.; Ninomiya, K.; Imura, K.; Matsuda, H.; Yoshikawa, M.; Yuan, D.; Muraoka, O. aminoglikosida fenilethanoid terasilasi dengan aktivitas hepatoprotektif dari tanaman gurun Cistanche tubulosa1. Bioorg. Med. Kimia 2010, 18, 1882-1890. [CrossRef] [PubMed]
22. Yang, F.-R.; Wen, D.-S.; Fang, B.-W.; Lou, J.-S.; Meng, L. Pencegahan Ekstrak Cistanche salsa pada Fibrosis Hepatik yang Diinduksi Karbon Tetraklorida Pada Tikus. Dagu. Obat Herbal 2013, 5.199—204.
23. Li, M.; Li, Y.; Liu, W.; Li, R.; Qin, C.; Liu, N.; Han, J. Persiapan Cistanche phenylethanoid glikosida proliposomes cair: Dioptimalkan formulasi, karakterisasi, dan prolipo beberapa pil menetes in vitro dan evaluasi in vivo. Eur. J. Farmasi. Sci. 2016, 93, 224-232. [CrossRef] [PubMed]
24. Ergen, C.; Niemietz, PM; Heymann, F.; Bauer, M.; Gremse, F.; Pola, R.; van Bloois, L.; Badai, G.; Kiessling, F.; Trautwein, C.; dkk. Fibrosis hati mempengaruhi sifat penargetan sistem penghantaran obat ke subset makrofag in vivo. Biomaterial 2019, 206, 49-60. [CrossRef] [PubMed]
25. Li, M.; Du, C.; Guo, N.; Teng, Y.; Meng, X.; Matahari, H.; Li, S.; Ya.; Galon, H. Desain komposisi dan aplikasi medis liposom. Eur. J. Med. Kimia 2019,164, 640-653. [CrossRef]
26. Paliwal, S.; Tilak, A.; Sharma, J.; Dave, V.; Sharma, S.; Verma, K.; Tak, K.; Reddy, KR; Sadhu, V. Flurbiprofen-loaded ethanolic liposom partikel untuk aplikasi biomedis. J. Mikrobiol. Metode 2019,161, 18-27. [CrossRef] [PubMed]
27. Sakai-Kato, K.; Yoshida, K.; Izutsu, K.-I. Pengaruh muatan permukaan pada internalisasi seluler liposom yang bergantung pada ukuran. Kimia fisik. Lipid 2019. [CrossRef] [PubMed]
28. Zhu, J.; Wang, T.; Li, H.; Zhang, H.; Zhu, Y.; Omari-Siaw, E.; Matahari, C.; Wei, T.; Deng, W.; Yu, J.; dkk. Liposom penargetan hati yang mengandung lengkuas: Optimalisasi dan kemanjuran hepatoprotektif. J. Pengiriman Obat. Sci. teknologi. 2018, 46, 339-347. [CrossRef]
29. Ezhilarasan, D.; Sokal, E.; Najimi, M. Fibrosis hati: Sudah waktunya untuk pergi dengan target terapi spesifik sel stelata hati. Dis. Pankreas Hepatobilier Int. 2018,17,192-197. [CrossRef]
30. Moehrle, BM; Nattamai, K.; Coklat, A.; Florian, MC; Ryan, M.; Vogel, M.; Bliederhaeuser, C.; Soller, K.; Kelebihan, DR; Abdollahi, A. Mekanisme Spesifik Sel Induk Memastikan Kesetiaan Genom dalam HSC dan setelah Penuaan HSC. Perwakilan Sel 2015,13, 2412-2424. [CrossRef]
31. Brea, R.; Gerak, O.; Frances, D.; Garcia-Monzon, C.; Vargas, J.; Fernandez-Velasco, M.; Bosca, L.; Casado, M.; Martin-Sanz, P; Agra, N. PGE2 menginduksi apoptosis sel stellata hati dan melemahkan fibrosis hati pada tikus dengan menurunkan regulasi miR-23a-5p dan miR-28a-5p. Biokim. Biofis. Acta Biophys. termasuk fotosintesis. 2018,1864, 325-337. [CrossRef] [PubMed]
32. Lauridsen, FKB; Jensen, TL; Rapin, N.; Aslan, D.; Wilhelmson, AS; Pundhir, S.; Rehn, M.; Paulus, F.; Giladi, A.; Haseman, MS; dkk. Perbedaan Status Siklus Sel Mendasari Heterogenitas Transkripsi di Kompartemen HSC. Perwakilan Sel 2018, 24, 766-780. [CrossRef] [PubMed]
33. El-Lakkany, NM; El-Maadawy, WH; Seif El-Din, SH; Hammam, OA; Muhammad, SH; Ezzat, SM; Safar, MM; Saleh, asam S. Rosmarinic melemahkan fibrogenesis hati melalui penekanan aktivasi/proliferasi sel stellata hati dan induksi apoptosis. Pac Asia J. Trop. Med. 2017,10, 444-453. [CrossRef] [PubMed]
34. Chen, XX; Zhang, XY; Ding, YZ; Li, X.; Guan, XM; Li, H.; Cheng, M.; Cui, XD Efek sel progenitor endotel pada proliferasi dan fungsi biologis sel stellata hati di bawah tekanan geser. Dagu. J. Aplikasi Fisiol. 2018, 34, 404-407.
35. Zhang, R.; Lin, XH; Liu, HH; Bu, M.; Chen, J.; Chen, J.; Gan, DM; Cui, JF; Chen, RX Sel-sel stellata hepatik yang diaktifkan mendorong perkembangan karsinoma hepatoseluler residu pasca-panas dari kelangsungan hidup autophagic menjadi proliferasi. Int. J. Hipertermia 2019, 36, 253-263. [CrossRef] [PubMed]
36. Taman, SY; Le, CT; Sung, KY; Choi, DH; Cho, EH Suksinat menginduksi fibrogenesis hati dengan mempromosikan aktivasi, proliferasi, dan migrasi, dan menghambat apoptosis sel stellata hati. Biokimia. Biofis. Res. Kom. 2018, 496, 673-678. [CrossRef] [PubMed]
37. Tsukada, S.; Parsons, CJ; Rippe, RA Mekanisme fibrosis hati. klinik Chim. Akta 2006, 364, 33-60. [CrossRef]
38. Copple, BL; Roth, K. 2.16一Mekanisme Fibrosis Hati. Dalam Toksikologi Komprehensif, 3rd ed.; McQueen, CA, Ed.; Elsevier: Oxford, Inggris, 2018; hal.397^08.
39. Breitkopf, K.; Royen, CV; Sawitza, saya.; Wickert, L.; Floege, J.; Gressner, AM Pola ekspresi PDGF-A, -B, -C dan -D dan reseptor PDGF a dan |3 dalam sel stellate hati tikus (HSC) yang diaktifkan. Sitokin 2005, 31, 349-357. [CrossRef]
