Bagian 2|Formula Herbal Cina, Tonic The Kindney, Meningkatkan Atrofi Otot Melalui Pengaturan Proses Kontrol Kualitas Mitokondria pada 5/6 Tikus Nefrektomi

Dongtao Wang1,3, Jianping Chen2, Xinhui Liu1, Ping Zheng1, Gaofeng Song1, Tiegang Yi1,2 & Shunmin Li1

Atrofi ototmerupakan salah satu komplikasi serius dari penyakit ginjal kronis (CKD). Disregulasi proses kontrol kualitas mitokondria (MQC), termasuk penurunan biogenesis mitokondria, merusak dinamika mitokondria dan menginduksi aktivasi mitofag, memainkan peran penting dalam memediasi pengecilan otot. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh rebusan Jian-Pi-Yi-Shen (JPYS) terhadapatrofi ototpada tikus CKD dan mengeksplorasi mekanisme yang mungkin pada regulasi proses MQC. Tikus nefrektomi 5/6 secara acak dialokasikan ke dalam 2 kelompok: kelompok CKD dan kelompok JPY. Selain itu, tikus palsu yang dioperasikan adalah kelompok palsu. Semua tikus diberi perlakuan selama 6 minggu. Hasil penelitian menunjukkan bahwa pemberian rebusan JPY dapat mencegah penurunan berat badan, pengecilan otot, penurunan ukuran serat otot, degradasi protein otot, dan peningkatan sintesis protein otot. Selain itu, rebusan JPYS meningkatkan kandungan mitokondria dan protein biogenesis serta menurunkan regulasi protein autophagy dan mitofag. Selanjutnya, rebusan JPYS meningkatkan protein fusi mitokondria, sementara menurunkan protein fisi mitokondria. Kesimpulannya, rebusan JPYS meningkatkan konten mitokondria dan biogenesis, mengembalikan keseimbangan antara fisi dan fusi, dan menghambat jalur autophagy-lisosom (mitofag). Secara kolektif, data kami menunjukkan bahwa rebusan JPY bermanfaat untukatrofi ototdi CKD, yang mungkin terkait dengan modulasi proses MQC.

Untuk informasi lebih lanjut silahkan hubungi:{0}}

KLIK DI SINI UNTUK BAGIAN 1

Cistanche tubulosa mencegahginjalpenyakit, klik di sini untuk mendapatkan sampel

Diskusi

Banyak ekstrak kasar dan senyawa aktif terisolasi dari TCM telah diidentifikasi dan menunjukkan kemanjuran yang sangat baik, terutama dalam anti-inflamasi dan perbaikan gangguan metabolisme untuk berbagai jenis penyakit.penyakit ginjal. Atrofi ototadalah komplikasi serius dari pasien CKD, yang ditandai dengan hilangnya protein otot secara progresif. Hasil yang merugikan ini secara substansial mengurangi kualitas hidup dan kelangsungan hidup16, 34. Fitur yang paling penting dariatrofi ototadalah penurunan berat badan yang signifikan dan hilangnya massa otot, menyiratkan kondisi metabolisme terkait CKD yang secara khusus menargetkan otot. Sebagai TCM, rebusan JPY telah muncul sebagai agen terapi potensial untuk mengobatiatrofi ototdan meningkatkan massa otot. Untuk menyelidiki anti-atrofi ototefek rebusan JPYS dan kemungkinan mekanismenya, dalam penelitian ini, tikus CKD yang diinduksi 5/6nefrektomi dilakukan, dan hasilnya menunjukkan bahwa rebusan JPYS sangat mencegah penurunan berat badan, kehilangan massa otot, penurunan ukuran serat otot, dan proteolisis protein otot. , bersama dengan penghambatan UPS dan FoxO3a. Selain itu, rebusan JPYS dapat meningkatkan konten mitokondria dan biogenesis, mengembalikan keseimbangan antara fisi dan fusi, dan memblokir aktivasi autophagy dan mitofagy. Massa otot rangka tergantung pada keseimbangan dinamis antara sintesis dan degradasi protein. Dan kedua proses tersebut saling terkait erat35. Hasil ini menunjukkan bahwa rebusan JPY mampu meningkatkan sintesis protein dan secara bersamaan menghambat pemecahan otot pada tikus CKD. Untuk menyelidiki mekanisme yang mendasari penundaan degradasi protein oleh rebusan JPYS, kami memeriksa jalur degradasi protein.

Peningkatan Atrogin-1 dan MuRF-1 mempromosikan ubiquitinasi dan degradasi protein struktural yang dimediasi proteasome 26 S, yang meningkatkan degradasi protein otot dan dengan demikian berkontribusi pada pengecilan otot dalam penelitian kami sebelumnya36, 37. Protein ubiquitinated dengan cepat terdegradasi oleh proteasome 20S termasuk chymotrypsin dan aktivitas seperti tripsin, yang mengarah pada protein terkonjugasi Ub menjadi peptida kecil38. Dalam penelitian ini, hasil kami menunjukkan bahwa rebusan JPY mencegah peningkatan protein atrogin-1 dan MuRF-1 dan aktivitas seperti chymotrypsin dan tripsin pada otot CKD. Studi sebelumnya mengidentifikasi bahwa pengobatan TCM (Zhimu-Huangbai Herb-Pair) menghambat ekspresi Atrogin-1dan MuRF1 dalam cachexia yang diinduksi kanker pada otot tikus. Temuan ini menunjukkan bahwa rebusan JPY dapat menghambat degradasi protein otot dengan menghambat aktivasi UPS pada tikus CKD.

FoxO3a dapat difosforilasi oleh Akt di beberapa situs, yang berfungsi sebagai perancah dalam sitoplasma, dan diasingkan dalam sitosol, membuat mereka tidak dapat mengikat promotor gen target mereka dalam nukleus untuk mengatur transkripsi mereka39. Sebuah studi sebelumnya menunjukkan bahwa aktivasi FoxO3a di otot menyebabkan peningkatan transkripsi retrogen ini seperti Atrogin-1 dan MuRF1 dan merangsang proteolisis untuk mempengaruhiatrofi otot⁴⁰. Hasil kami menunjukkan bahwa rebusan JPYS secara signifikan meningkatkan tingkat fosforilasi FoxO3a, melemahkan tingkat protein FoxO3a total pada otot tikus CKD. Sebuah studi sebelumnya melaporkan bahwa pengobatan TCM (Zhimu-Huangbai Herb-Pair) mengurangi ekspresi protein FoxO3 total pada otot diabetes26. Dilaporkan bahwa FoxO3a yang aktif secara konstitutif menginduksi transkripsi atrogin-1 danatrofi otot, sedangkan penghambatan aktivasi FoxO3a diblokiratrofi ototin vivo dan in vitro40. Menggabungkan dengan hasil kami menyimpulkan bahwa rebusan JPYS dapat secara efisien mengurangi degradasi protein otot rangka, mungkin melalui penghambatan faktor transkripsi FoxO3a.

Kemampuan dariotot rangkaberadaptasi dengan gangguan seluler sangat bergantung pada biogenesis mitokondria. Baru-baru ini telah ditunjukkan bahwa jumlah mitokondria otot menurun dengan CKD^{41, 42}, yang konsisten dengan hasil kami, dan pengurangannya dihambat oleh rebusan JPY. Langkah-langkah utama dari proses biogenesis mitokondria termasuk peristiwa pensinyalan yang mengarah pada regulasi transkripsi gen nuklir, seperti NRF1, terutama dimediasi oleh PGC-1 43. Hasil kami menunjukkan bahwa protein biogenesis mitokondria tampaknya diatur ke bawah pada otot CKD seperti yang ditunjukkan oleh kandungan PGC-1 yang lebih rendah dan protein target NRF-1, yang dihambat oleh rebusan JPYS. Ekspresi berlebihan PGC-1 di otot rangka meningkatkan kandungan mitokondria dan kapasitas oksidatif melalui modulasinya terhadap sekelompok besar gen yang terlibat dalam metabolisme44, 45. Selain itu, kadar PGC-1a cenderung berkurang dalam kondisi pengecilan otot46 , 47 dan ekspresi berlebih spesifik otot dari PGC-1a telah terbukti melemahkan hilangnya otot ini48. Secara kolektif, data kami menyiratkan bahwa ada kemungkinan bahwa rebusan JPYS mempromosikan ekspresi PGC-1 /NRF1 dan biogenesis mitokondria berikutnya pada otot CKD.

Autophagy/mitophagy adalah mekanisme homeostatik yang sangat dilestarikan yang digunakan untuk degradasi dan daur ulang, melalui mesin lisosom sitoplasma massal, protein berumur panjang, mitokondria, dan organel49. Selektivitas mitofag dikendalikan oleh protein PINK1, Parkin, dan BNIP3L. PINK1 memfosforilasi ubiquitin di Ser65 dari protein membran mitokondria luar (OMM) ubiquitinated dan domain Parkin seperti ubiquitin. Setelah terfosforilasi, Parkin meningkatkan sinyal mitofag dengan menghasilkan lebih banyak rantai ubiquitin pada protein OMM yang dapat menjadi substrat lebih lanjut untuk PINK1. BNIP3L distabilkan pada OMM, berinteraksi dengan LC3II yang diproses, yang dapat mendorong penyerapan mitokondria dalam autofagosom untuk degradasi⁹. Dalam penelitian kami, hasil menunjukkan bahwa penanda autophagic LC3II dan p62, dan penanda mito-phagic PINK1 dan Parkin meningkat secara signifikan pada otot CKD, dan ini dihambat oleh rebusan JPYS. Studi terbaru menunjukkan bahwa autophagy, termasuk mitofag, sering dirangsang dalam beberapa modelatrofi otot, seperti denervasi dan CKD^{37, 50}. Secara kolektif, hasil kami menunjukkan bahwa rebusan JPY meningkatatrofi ototmelalui penghambatan jalur autophagy dan mitofagy.

Mitokondria dilaporkan sebagai organel yang sangat dinamis yang mengalami gerakan konstan melalui fisi dan fusi51. Fusi mitokondria dianggap memungkinkan pertukaran isinya termasuk DNA mitokondria (mtDNA) dan protein, sehingga menjaga kualitas mitokondria dan integritas mtDNA, Fusi mitokondria dianggap mencegah akumulasi komponen yang rusak dan cacat melalui redistribusi konten mereka termasuk DNA mitokondria (mtDNA), lipid, metabolit, dan protein, sedangkan pembelahan mitokondria memungkinkan mitokondria untuk memisahkan mitokondria yang rusak parah dan disfungsional oleh mitofag⁵². Dalam penelitian ini, kami menunjukkan bahwa protein fusi Mfn-2 dan OPA-1 diatur ke bawah pada otot CKD, dan perubahan ini dicegah dengan rebusan JPYS. Mfn2 dan OPA-1 memainkan peran penting dalam menjaga integritas mtDNA, dan down-regulation mereka dapat menginduksi pembelahan mitokondria serta fragmentasi mitokondria dan mitofag53. Sesuai dengan peran dalam fusi mitokondria, fisi telah dikaitkan dengan

penghapusan mitokondria yang rusak parah melalui induksi mitofag. Faktanya, hasil kami menunjukkan bahwa ekspresi Fis-1 dan Drop-1 meningkatkan otot CKD dan ini dicegah dengan rebusan JPY, yang konsisten dengan hasil kami50, 54. Oleh karena itu, hasil penelitian ini menunjukkan bahwa rebusan JPY memodulasi dinamika fusi dan fisi mitokondria dengan meningkatkan ekspresi Mfn2 dan OPA-1, sementara menurunkan ekspresi Fis-1 dan Drop-1.

Kesimpulannya, penelitian ini menunjukkan bahwa pengobatan rebusan JPYS 6-minggu mempertahankan berat badan, mencegah kehilangan massa otot dan penurunan ukuran serat otot, dan degradasi protein otot, bersama dengan penghambatan FoxO3a dan UPS pada tikus CKD. Lebih lanjut, rebusan JPYS melemahkan gangguan proses QMC yang diinduksi CKD, dengan meningkatkan biogenesis mitokondria, memulihkan keseimbangan antara fisi dan fusi, dan menghambat jalur autophagy-lisosom (mitofag). Temuan ini menunjukkan strategi yang menjanjikan bahwa meningkatkan disregulasi proses MQC dapat mencegah dan mengobatiatrofi ototdi CKD.

akteosida dalamcistanchememiliki efek yang baik padaginjal

Bahan dan metode

Komposisi rebusan JPYS.

Bahan tanaman: Astragali Radix (Lot. 150621; akar Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge. var. Mongolic (Bge.) Hsiao), Atractylodis Macrocephalae Rhizoma (Lot. 141230; rimpang Atractylodes macrocephala Koidz.), Dioscoret Rhizoma (Lot. 150615; rimpang Dioscorea di seberang Tunb.), Cistanches Herba (Lot. 150621; herba dariDeserticola CistancheYC Ma), Amomi Fructus Rotundus (Lot. 150617; buah dari Amomum kravanh Pierre ex Gagnep.), Salviae Miltiorrhizae Radix et Rhizoma (Lot. 150626; akar dan rimpang Salvia miltiorrhiza Bge.), Rhei Radix et Rhizoma (Lot. 150104 (Lot. ; akar dan rimpang Rheum palmatum L.), dan Glycyrrhizae Radix et Rhizoma Praeparata cum Melle (Lot. 150615; akar dan rimpang Glycyrrhiza uralensis Fisch.) dibeli dari Shenzhen Huahui Pharmaceutical Co., Ltd (Shenzhen, Cina). Bahan tanaman ini diautentikasi oleh Dr. Jianping Chen berdasarkan karakteristik morfologinya. Spesimen voucher disimpan di Departemen Farmasi, Rumah Sakit Pengobatan Tradisional Cina Shenzhen dengan nomor masing-masing 2010015Z, 2010024ZZ, 2010037Z, 2040056Z, 202086Z, 2010006Z, 2010040Z, dan 2010008ZZ. Jaminan kontrol kualitas untuk semua bahan divalidasi menurut Farmakope China (Komite Farmakope China, 2015). Astragali Radix (30 g), Atractylodis Macrocephalae Rhizoma (10 g), Dioscoreae Rhizoma (30 g),Cistanches Herba(10 g), Amomi Fructus Rotundus (10 g), Salviae Miltiorrhizae Radix et Rhizoma (15 g), Rhei Radix et Rhizoma (10 g), dan Glycyrrhizae Radix et Rhizoma Praeparata cum Melle (6 g) ditimbang dan diekstraksi dalam perebusan. air (1,2 L) dua kali selama 1 jam. Setelah sentrifugasi, supernatan dikeringkan di bawah tekanan tereduksi menjadi bubuk, dan disimpan pada suhu -80 derajat. Sebelum perlakuan, serbuk dilarutkan kembali dengan air Milli-Q dan divorteks pada suhu kamar untuk mendapatkan ekstrak JPY.

Sebelum perlakuan ekstrak ke hewan, ekstrak JPYS distandarisasi secara kimia. Sidik jari HPLC pada 260nm dikembangkan untuk ekstrak JPYSF (Gbr. 8): Standar referensi individu digunakan untuk mengkonfirmasi banyak komponen kimia harus diidentifikasi dari ekstrak dengan analisis HPLC, seperti natrium danshensu,echinacosida, akteosida, kalikosin 7-Ob-glukosida, asam salvianolat B, formononetin dan rhein. Selain itu, persyaratan minimal untuk jumlahechinacosida, asam salvianolic B, dan rhein tidak boleh kurang dari 1.2mg/g, 5.7mg/g, dan 0.2mg/g ekstrak kering. Hasil ekstraksi kurang dari 32,59 ± 1,1 persen (b/b, Mean±SD, n=3). Ekstrak yang digunakan di sini mencapai persyaratan yang disebutkan di atas.

Bentengbisa meringankanpenyakit ginjal

Hewan percobaan.

Protokol eksperimental dan pemberian makan sesuai dengan pedoman Kesehatan Nasional dan disetujui oleh Universitas GuangzhouPengobatan CinaKomite Perawatan dan Penggunaan Hewan Kelembagaan. Tikus Sprague–Dawley jantan dibeli dari Pusat Hewan Laboratorium Medis Guangdong (GDMLAC, Cina), Izin No. SCXK (YUE) 2013-0002 dengan berat 190–220 g. Hewan-hewan tersebut berada di bawah suhu ruangan yang terkendali (20±1 derajat ) dan dengan kelembaban dengan siklus gelap-terang 12/{12-jam, dan harus mengakses air dan makanan secara ad libitum. CKD diinduksi oleh nefrektomi 5/6 dua langkah seperti yang dijelaskan sebelumnya36. Secara singkat, operasi ginjal pertama melibatkan elektrokauter ginjal kiri kecuali untuk area 2-mm di sekitar hilus. Operasi ginjal kedua dilakukan satu minggu kemudian dengan ligasi ganda hilus ginjal dengan jahitan sutra dan eksisi bedah ginjal kanan. Operasi palsu terdiri dari anestesi, sayatan kipas yang memperlihatkan ginjal, dan penutupan dinding perut.

Administrasi obat.

Pada 16 minggu setelah operasi, tingkat Scr dari kelompok nefrektomi 5/6 secara signifikan lebih tinggi daripada kelompok palsu (hal.<0.05). ten,="" the="" 5/6="" nephrectomy="" group="" was="" randomly="" divided="" into="" two="" groups:="" ckd="" group="" (5/6="" nx,="" n="10):" ckd="" rats="" were="" treated="" with="" distilled="" water="" and="" jpys="" group="" (5/6="" nx+jpys="" decoction,="" n="10):" ckd="" rats="" that="" were="" orally="" administrated="" a="" dose="" of="" 10.89="" mg/kg="" of="" jpys="" decoction="" daily.="" the="" sham-operated="" rats="" were="" also="" treated="" with="" distilled="" water.="" te="" drugs="" were="" administered="" for="" 6="" weeks.="" all="" rats="" used="" in="" this="" study="" received="" humane="">

Parameter biokimia.

Setelah 6 minggu pengobatan, tikus dikorbankan dengan natrium pentobarbital dan sampel darah segera diambil. Indeks biokimia serum Scr, BUN, dan ALB dideteksi menggunakan penganalisis biokimia otomatis Roche.

Studi morfologi (HE, pewarnaan SDH). Bagian otot lumpuh melintang (6 mm) diwarnai dengan hematoxylin dan eosin (HE) sesuai dengan standar. Area penampang serat otot (CSA) kemudian diukur dengan cara seperti yang dilaporkan sebelumnya37. Area penampang serat diukur untuk sekitar 100 serat otot yang berdekatan di setiap bagian untuk setiap tikus menggunakan perangkat lunak Image J 1.32j (NIH, Bethesda, MD, USA).

Bagian beku dari otot TA diwarnai dengan suksinat dehidrogenase (SDH, kompleks II dari rantai pernapasan) untuk pengukuran aktivitas SDH dan klasifikasi tipe serat menjadi I (oksidasi lambat), IIa (glikolitik oksidatif cepat), atau IIb (oksidasi cepat). glikolitik) sesuai dengan protokol yang dijelaskan sebelumnya41. Secara singkat, bagian pertama dibiarkan mencapai suhu kamar dan direhidrasi dengan PBS (pH 7,4). Bagian adalah

kemudian diinkubasi dalam larutan yang mengandung nitroblue tetrazolium (1,5mM), natrium suksinat (130mM), fenazin metosulfat (0.2 mM), dan Natrium azida (0.1 mM ) selama 6{{30}} mnt. Penampang melintang kemudian dicuci 3 kali dalam PBS, didehidrasi dalam 75 persen (30 detik), 90 persen (30 detik), dan 100 persen (10 menit) etanol dan ditutup dengan campuran 50 persen (v/v) gliserin dan 2,5 persen (b/v) trietilen diamina dalam 0,01M PBS. Gambar otot ditangkap menggunakan mikroskop (Nikon Eclipse Ti-SR, Jepang) dan didigitalkan sebagai gambar tingkat abu-abu pada perangkat lunak pencitraan NIS-Elements yang dibantu komputer Versi 4.10 (Eclipse Ti-SR, Nikon Corporation, Tokyo, Jepang) . Nilai tingkat abu-abu nol setara dengan 100 persen transmisi cahaya ( persen T), dan nilai 255 setara dengan 0 persen T. Nilai kepadatan optik semua serat otot ditentukan berdasarkan gambar tingkat abu-abu (Scion Image, Scion, Frederick, MD) dan diklasifikasikan menjadi tiga kelompok, I ( persen T: 100–80 persen), IIa ( persen T: 60–40 persen) dan IIb ( persen T: 20–0 persen).

Analisis ultrastruktur (Transmission Electron Microscopy, TEM).

Prosedur rinci TEM untuk otot adalah seperti yang kami laporkan sebelumnya55. Secara singkat, bagian otot TA dalam volume 1mm3 difiksasi dalam 2,5 persen glutaraldehid diikuti oleh pasca-fiksasi dalam asam osmik 1 persen untuk pengujian mikroskop elektron. Perangkat lunak Image J digunakan untuk menganalisis gambar yang dikumpulkan oleh EM (JEM-1400, JEOL Ltd., Tokyo, Jepang) di bawah perbesaran x12,000. Konten mitokondria ditentukan dengan menghitung jumlah dan ukuran (diameter minimum) setiap mitokondria per bidang. Sebanyak 20 bidang per kondisi dianalisis dengan memanfaatkan perangkat lunak Image J56.

Sintesis protein dan degradasi protein.

Sintesis protein dan degradasi protein diukur secara in vitro menggunakan penggabungan 14-C fenilalanin (Phe) dan pelepasan tirosin seperti yang dijelaskan sebelumnya57-59.

Pengukuran aktivitas proteasome.

Aktivitas kimotripsin dan tripsin seperti proteasom 20 S diukur secara in vitro pada otot gastrocnemius seperti yang dijelaskan sebelumnya36.

blotting Barat.

Jaringan otot paha depan yang dibekukan dihomogenisasi dalam buffer lisis seperti yang dilaporkan sebelumnya36. Protein sitosolik dipisahkan pada gel SDS-PAGE 10 persen dan kemudian dipindahkan ke membran PVDF (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA, US). Situs pengikatan nonspesifik membran diblokir pada suhu kamar selama 1 jam dengan 5 persen susu bubuk non-lemak dalam saline buffer Tris dengan tween (TBST) dan kemudian diinkubasi semalaman pada suhu 4 derajat dengan antibodi primer. Setelah dicuci dengan TBST, membran diinkubasi dengan antibodi sekunder selama 1 jam pada suhu kamar dengan pengocokan. Setelah dicuci, pita protein dideteksi dan dianalisis menggunakan Sistem Pencitraan MP ChemiDoc™ (Bio-Rad Laboratories, CA, US). Hasil dinyatakan sebagai kepadatan optik terintegrasi relatif terhadap GAPDH. p-AMPK (1:1000, #2535), p-FoxO3a (1:1000, #13129), SQSTM1/p62 (1:1000, #5114), Mitofusin-2 (1:1000, #9482) , FoxO3a (1:1000, #2497), DRP1 (1:1000, #8570), Cox IV (1:1000, #4844), BNIP3L/Nix (1:1000, #12396) Beclin-1( 1:1000, #3495T) dan antibodi AMPK (1:1000, #5831) berasal dari Cell Signaling Technologies (Danvers, MA, US). LC3 I/II (1:1000, ab58610), Parkin (1:1000, ab77924) dan antibodi PINK1 (1:1000, ab23707) berasal dari Abcam (Cambridge, UK). ATP5B (1:1000, ARP48185_T100) antibodi berasal dari Aviva Systems Biology (San Diego, CA, US). Antibodi MuRF1 (1:1000, GTX110475) berasal dari Gene Tex (San Antonio, TX, US). Fis1 (1:100, sc-98900) dan antibodi NRF-1 (1:100, sc-33771) berasal dari Santa Cruz Biotechnology (CA, US). OPA1 (1:1000, 612606) berasal dari BD Biosciences (San Jose, CA, AS). Atrogin-1 (1:1000, AP2041) berasal dari ECM Biosciences (Versailles, KY, US). PGC-1 (1:2000, NBP1-04676) berasal dari Novus Biological (Colorado, AS). GAPDH (1:1000, 60004-1-Ig) berasal dari Proteintech (Chicago, IL, AS).

Statistik analisis.

Data dianalisis dengan SPSS 16.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Hasil ditampilkan sebagai mean ± SD. Data yang berdistribusi normal dianalisis dengan ANOVA satu arah dilanjutkan dengan uji beda nyata terkecil (LSD), sedangkan data yang tidak berdistribusi normal dianalisis menggunakan uji Games-Howell. Perbedaan dianggap signifikan secara statistik untuk P <>

Bentengdapat meningkatkanfungsi ginjal

References

1. Chen, DQet al. Ekspresi gen dan protein dan metabolomik menunjukkan pensinyalan redoks teraktivasi dan jalur wnt/-catenin berhubungan dengan disfungsi metabolit pada pasien dengan penyakit ginjal kronis.Remelakukanx Biol.12, 505–521, doi:10.1016/j. redoks.2017.03.017 (2017).

2. Chen, Let al. Peran aktivasi sumbu RAS / Wnt / beta-catenin dalam patogenesis cedera podosit dan nefropati tubulointerstitial.Chuem Biol Interact273, 56–72, doi:10.1016/j.cbi.2017.05.025 (2017).

3. Zhao, YYet al. Penyelidikan metabolomik intrarenal penyakit ginjal kronis dan mekanisme TGF-beta1-nya pada tikus yang diinduksi-adenin menggunakan UPLC Q-TOF/HSMS/MS(E).J. Proteome Res. 12, 2692–2703 (2013).

4. Chen, Het al. Wawasan metabolisme tentang pensinyalan redoks teraktivasi dan disfungsi metabolisme lipid dalam perkembangan penyakit ginjal kronis.Redox Biol. 10, 168–178 (2016).

5. Chen, DQet al. Hubungan antara fenotipe dan metabolisme asam lemak pada penyakit ginjal kronis lanjut.Nephrol. Dial. Trsebuahsplsebuaht. doi:10.1093/ndt/gfw415 (2017).

6. Zhao, YY, Liu, J., XL, C., Bai, X. & Lin, RC Studi metabonomik urin pada perubahan biokimia dalam model eksperimental gagal ginjal kronis oleh adenin berdasarkan UPLC Q-TOF/MS.Clin. Chim. Acta 413, 642–649 (2012).

7. Kovesdy, CP & Kalantar-Zadeh, K. Mengapa pemborosan energi protein dikaitkan dengan kematian pada penyakit ginjal kronis?Semitidakrs in nephrology29, 3–14, doi:10.1016/j.semnephrol.2008.10.002 (2009).

8. Wang, XH & Mitch, WE Mekanisme pengecilan otot pada penyakit ginjal kronis.Nature reviews. Nephrology10, 504–516, doi:10.1038/nrneph.2014.112 (2014).

9. Romanello, V. & Sandri, Kontrol Kualitas M. Mitokondria dan Pemeliharaan Massa Otot.Frpadatiers in physiology6, 422, doi:10.3389/fphys.2015.00422 (2015).

10. Tian, ​​T., Chen, H. & Zhao, YY Penggunaan tradisional, fitokimia, farmakologi, toksikologi dan kontrol kualitas Alisma Orientale (Sam.) Julep: ulasan.J Ethnopharmacol158, 373–387, doi:10.1016/j.jep.2014.10.061 (2014).

11. Zhong, Y., Menon, MC, Deng, Y., Chen, Y. & He, JC Kemajuan terbaru dalam pengobatan tradisional Tiongkok untuk penyakit ginjal.Am. J. Kitidak aday Dis.66, 513–522, doi:10.1053/j.ajkd.2015.04.013 (2015).

12. Zhao, YY Penggunaan tradisional, fitokimia, farmakologi, farmakokinetik dan kontrol kualitas kentang goreng Polyporus umbellatus (Pers.): ulasan.J Ethnopharmacol 149, 35–48 (2013).

13. Wang, M.et al. Metabolomik menyoroti bioaktivitas farmakologis dan mekanisme biokimia pengobatan tradisional Tiongkok.Chuem Biol Interact. 273, 133–141, doi:10.1016/j.cbi.2017.06.011 (2017).

14. Zhao, YYet al. Sebuah studi farmako-metabonomi pada penyakit ginjal kronis dan efek terapi ergone oleh UPLC-QTOF/HDMS.PLoS Otidak23, e115467, doi:D - NLM: PMC4275224 EDAT- 2014/12/24 06:00 MHDA- 2016/03/02 06:{{11} } CRDT- 2014/12/24 06:00 PHST- 2014/06/24 [diterima] PHST- 2014/11/23 [diterima] AID {{ 22}}.1371/journal.pone.0115467 [doi] AID - PONE-D-14-23166 [pii] PST - epublish (2014).

15. B Ronaldo, P. & Sandri, M. Mekanisme seluler dan molekuleratrofi otot. Disease msyair pujianls & mechanisms6, 25–39, doi:10.1242/dmm.010389 (2013).

16. Bodine, SCet al. Identifikasi ligase ubiquitin yang diperlukan untuk kerangkaatrofi otot. Science294, 1704–1708, doi:10.1126/ science.1065874 (2001).

17. Gomes, MD, Lecker, SH, Jagoe, RT, Navon, A. & Goldberg, AL Atrogin-1, protein F-box spesifik otot yang sangat diekspresikan selamaatrofi otot. Prosiding dari itu Nasional Akademi dari Ilmu Pengetahuan dari itu Serikat negara bagian dari Amerika 98, 14440–14445, doi:10.1073/pans.251541198 (2001).

18. Youle, RJ & Narendra, DP Mekanisme mitofag.Nature rsetiapiews. Molecular ceII biology12, 9–14, doi:10.1038/nrm3028 (2011).

19. Sanchez, AM, Candau, RB & Bernardi, faktor transkripsi H. FoxO: peran mereka dalam pemeliharaan homeostasis otot rangka.CeIIular dan molecular hidupe sciences: CMLS71, 1657–1671, doi:10.1007/s00018-013-1513-z (2014).

20. Barbieri, E.et al. Efek pleiotropik latihan fisik pada dinamika mitokondria pada otot rangka yang menua.Oxidative medicitidak dan seluler lumur panjang2015, 917085, doi:10.1155/2015/917085 (2015).

21. Cannavino, J., Brocca, L., Sandri, M., Bottinelli, R. & Pellegrino, MA PGC1-alpha over-ekspresi mencegah perubahan metabolisme dan soleusatrofi ototpada tikus yang diturunkan dari belakang.Itu Jourtidakl of fisikiology592, 4575–4589, doi:10.1113/Physiol.2014.275545

22. Lira, VAet al. Oksida nitrat dan AMPK bekerja sama mengatur PGC-1 dalam sel otot rangka.Itu Jourtidakl of physiology588, 3551–3566, doi:10.1113/Physiol.2010.194035 (2010).

23. Zhuang, P.et al. Pembalikan dariototatrophiaoleh pasangan ramuan Zhimu dan Huangbai melalui aktivasi IGF-1/Akt dan sinyal autophagy pada cachexia kanker.Supportive care in csebuahcer: official jourtidakl of tdia Multitidaktipada suatul Associatipada of Supportive Care in Bisacer24, 1189–1198, doi:10.1007/dtk00520-015-2892-5 (2016).

24. Dong, Y.et al. Butiran Bufei Jianpi meningkatkan otot rangka dan disfungsi mitokondria pada tikus dengan penyakit paru obstruktif kronik.BMC complementary dan altertidaktive medicitidak15, 51, doi:10.1186/dtk12906-015-0559-x (2015).

25. Kishida, Y.et al. Go-shajinki-Gan (GJG), obat herbal tradisional Jepang, melindungi terhadap sarkopenia pada tikus yang dipercepat penuaan.Phytomedicine: intertidaktipada suatul jourtidakl of phytotherapy dan phytopharmacology22, 16–22, doi:10.1016/j. rima.2014.11.005 (2015).

26. Zhang, Jet al. Pembalikan dariototatrophiaoleh pasangan ramuan Zhimu-Huangbai melalui jalur sinyal Akt / mTOR / FoxO3 pada tikus diabetes yang diinduksi streptozotocin.PloS padae9, e100918, doi:10.1371/journal.pone.0100918 (2014).

27. Zhang, ZHet al. Lipomik dan metabolomik terintegrasi mengungkapkan efek nefroprotektif dan mekanisme biokimia Rheum Officinale pada gagal ginjal kronis.Sci. Rep.6, 22151, doi:10.1038/srep22151 (2016).

28. Zhao, YYet al. Ergosta-4,6,8(14),22-medan-3-yang diisolasi dari Polyporus umbellatus mencegah cedera ginjal dini pada tikus nefropati yang diinduksi asam aristolochic.J pharm pharmacol63, 1581–1586, doi:10.1111/j.2042-7158.2011.01361.x (2011).

29. Zhao, YYet al. Studi metabonomik berbasis kromatografi cair kinerja ultra tentang efek terapeutik dari lapisan permukaan Poria cocos pada penyakit ginjal kronis yang diinduksi adenin memberikan wawasan baru tentang mekanisme anti-fibrosis.PLoS One8 , e59617, doi:10.1371/journal.pone.0059617 (2013).

30. Zhao, YYet al. Pengaruh Agosta-4,6,8(14),22-tetra-3-satu (satu) pada tikus gagal ginjal kronis yang diinduksi adenin: studi metabonomi serum berdasarkan cairan ultra-kinerja kromatografi/spektrometri massa sensitivitas tinggi digabungkan dengan algoritma MassLynx i-FIT.Clin. Chuim. Acta413, 1438–1445, doi:10.1016/j.cca.2012.06.005 (2012).

31. Zhao, YYet al. Studi metabonomi urin tentang efek perlindungan Agosta-4,6,8(14),22-tetra-3-satu pada gagal ginjal kronis pada tikus menggunakan UPLC Q-TOF/MS dan sebuah novel teknik pengumpulan data UMK.Process Biochem47, 1980–1987, doi:10.1016/j. procbio.2012.07.008 (2012).

32. Zhang, ZHet al. Wawasan metabolisme tentang penyakit ginjal kronis dan efek modulasi rhubarb terhadap fibrosis tubulointerstitial.Sci. Rep., 14472, doi:10.1038/srep14472 (2015).

33. Zhao, YY, P., L., Q., CD, L., FY & Bai, X. Profil metabolik ginjal dari cedera ginjal awal dan efek renoprotektif dari Poria cocos epidermis menggunakan UPLC Q-TOF/HSMS/MSE.J pharm Biomed Atidakl81–82, 202–209, doi:10.1016/j.jpba.2013.03.028 (2013).

34. Singla, R., Gupta, Y. & Kalra, S. Efek muskuloskeletal diabetes mellitus.JPMA. Itu Jourtidakl of tdia Pakistsebuah Medical Associatipada 65, 1024–1027 (2015).

35. Stitt, TNet al. Jalur Te IGF-1/PI3K/Akt mencegah ekspresiototatrophia-diinduksi ligase ubiquitin dengan menghambat faktor transkripsi FOXO.Molecular ceII 14, 395–403 (2004).

36. Wang, DTet al. Suplementasi asam keto berkontribusi pada peningkatan regulasi jalur Wnt7a/Akt/p70S6K dan penurunan regulasi sistem apoptosis dan ubiquitin-proteasome pada otot 5/6 tikus yang dinefrektomi.Itu British jourtidakl of tidaktritipada111, 1536–1548, doi:10.1017/S0007114513004091 (2014).

37. Wang, DT, Yang, YJ, Huang, RH, Zhang, ZH & Lin, X. Myostatin Mengaktifkan Sistem Ubiquitin-Proteasome dan Autophagy-Lisosom Berkontribusi pada Pengecilan Otot pada Penyakit Ginjal Kronis.Oxidative medicine dan ceIIular longsetiapity2015, 684965, doi:10.1155/2015/684965 (2015).

38. Tawa, NE Jr., Odessey, R. & Goldberg, AL Inhibitor dari proteasome mengurangi proteolisis yang dipercepat pada otot rangka tikus yang mengalami atrofi.Te Jourtidakl of clinical investigatipada100, 197–203, doi:10.1172/JCI119513 (1997).

39. Calnan, DR & Brunet, kode A.Te FoxO.Oncogene27, 2276–2288, doi:10.1038/onc.2008.21 (2008).

40. Sandri, M.et al. Faktor transkripsi Foxo menginduksi atrogin ligase ubiquitin yang berhubungan dengan atrofi-1 dan menyebabkan skeletalototatrophia. CeII 117, 399–412 (2004).

41. Tamaki, M.et al. Penyakit ginjal kronis mengurangi mitokondria otot dan daya tahan latihan dan eksaserbasi oleh protein makanan melalui inaktivasi piruvat dehidrogenase.Kitidak aday intertidaktipada suatul85, 1330–1339, doi:10.1038/ki.2013.473 (2014).

42. Yokoi, H. & Yanagita, M. Penurunan volume otot pada penyakit ginjal kronis: peran mitokondria pada otot rangka.Kidnmata intertidaktipada suatul85, 1258-1260, doi:10.1038/ki.2013.539 (2014).

43. Hood, DA Undangan Ulasan: biogenesis mitokondria yang diinduksi aktivitas kontraktil pada otot rangka.Jourtidakl of aplikasilied physiology 90, 1137–1157 (2001).

44. Lin, Jet al. Co-aktivator transkripsional PGC-1 alpha mendorong pembentukan serat otot berkedut lambat.Nature418, 797–801, doi:10.1038/nature00904 (2002).

45. Wu, Z.et al. Mekanisme yang mengendalikan biogenesis dan respirasi mitokondria melalui koaktivator termogenik PGC-1.CeII98, 115–124, doi:10.1016/S0092-8674(00)80611-X (1999).

46. ​​Adhihetty, PJ, O'Leary, MF, Chabi, B., Wicks, KL & Hood, DA Pengaruh denervasi pada apoptosis yang dimediasi mitokondria pada otot rangka.Jourtidakl of aplikasilied physiology102, 1143-1151, doi:10.1152/J Appl Physiol.00768.2006 (2007).

47. Baker, DJ, Betik, AC, Krause, DJ & Hepple, RT Tidak ada penurunan kapasitas oksidatif otot rangka dengan penuaan pada tikus dengan pembatasan kalori jangka panjang: efeknya tidak tergantung pada integritas DNA mitokondria.Itu jourtidakls of gerpadatology. Series A, Biological ilmu pengetahuan dan medis ilmu pengetahuan 61, 675–684 (2006).

48. Zechner, C.et al. Defisiensi otot rangka total PGC-1 memisahkan gangguan mitokondria dari penentuan jenis serat dan sensitivitas insulin.CeII mettentanglism12, 633–642, doi:10.1016/j.cmet.2010.11.008 (2010).

49. Mizushima, N. & Komatsu, M. Autophagy: renovasi sel dan jaringan.CeII147, 728–741, doi:10.1016/j.cell.2011.10.026 (2011).

50. Kang, C., Yeo, D. & Ji, LL Imobilisasi otot mengaktifkan mitofag dan mengganggu dinamika mitokondria pada tikus.Actafisiologi 218, 188–197, doi: 10,1111/apha.12690 (2016).

51. Chan, DC Fusi dan pembelahan mitokondria pada mamalia.Atidakl rsetiapiew of ceII dan developmental biology22, 79–99, doi:10.1146/ annual.cell bio.22.010305.104638 (2006).

52. Benard, G. & Karbowski, M. Mitokondria fusi dan divisi: Peraturan dan peran dalam kelangsungan hidup sel.Semitidakrs in ceII & dmalamlopmental biology 20, 365–374 (2009).

53. Zhao, J.et al. FoxO3 secara terkoordinasi mengaktifkan degradasi protein oleh jalur autophagic/lisosomal dan proteasomal dalam sel otot yang mengalami atrofi.CeII mettentanglism6, 472–483, doi:10.1016/j.cmet.2007.11.004 (2007).

54. Romanello, V.et al. Fisi mitokondria dan remodeling berkontribusi terhadapototatrophia. Te EMBO jourtidakl29, 1774–1785, doi:10.1038/emboj.2010.60 (2010).

55. Matahari, H.et al. Astragaloside IV memperbaiki cedera ginjal pada tikus db / db.Ilmiah reports6, 32545, doi:10.1038/srep32545 (2016).

56. Barreto, R.et al. Cachexia terkait kemoterapi dikaitkan dengan penipisan mitokondria dan aktivasi ERK1/2 dan p38 MAPK.Oncotarget7, 43442–43460, doi:10.18632/oncotarget.9779 (2016)

57. Voltarelli, FA & de Mello, MA Spirulina meningkatkan protein otot rangka pada tikus yang sedang tumbuh.Eurterbuka jourtidakl of tidaktritipada47, 393–400, doi:10.1007/dtk00394-008-0740-9 (2008).

58. Rannels, DE, Kao, R. & Morgan, HE Pengaruh insulin pada pergantian protein di otot jantung.Te Jourtidakl of biological chemistry 250, 1694–1701 (1975).

59. Waalkes, TP & Udenfriend, S. Sebuah metode fluorometrik untuk estimasi tirosin dalam plasma dan jaringan.Te Jourtidakl of ltentangratory dan clinical medicitidak 50, 733–736 (1957).