Niosomal Nanocarriers Untuk Pengiriman Kuersetin Kulit Yang Lebih Baik Dengan Fungsi Anti-Tirosinase Dan Antioksidan

Abstrak:

Penelitian ini bertujuan untuk menyaring flavonoid yang efektif dengan kemampuan memutihkan dan antioksidan yang menjanjikan, dan merancang niosom yang mengandung flavonoid untuk meningkatkan kelarutan, stabilitas, dan penetrasinya. Eksperimen anti-tirosinase in vitro dan 1,1-difenil-2-pikrilhidrazil (DPPH) pemulungan radikal bebas dilakukan untuk menyelidiki kapasitas pemutihan dan antioksidan dari beberapa flavonoid, termasuk quercetin, morin, festin, myricetin, rutin , dan breviskapin.

Konduktivitas, viskositas, dan ukuran partikel formulasi berbasis Span{{0}}RH40-dari vesikel surfaktan nonionik (niosom) dengan rasio massa yang berbeda dipelajari untuk menentukan formulasi yang paling tepat. Niosom bermuatan obat dikarakterisasi untuk ukuran, potensi zeta, morfologi, dan efisiensi penjebakan. Fotostabilitas, kelarutan, perilaku pelepasan, penetrasi obat ex vivo, dan retensi kulit juga dipelajari. Hasil menunjukkan bahwa quercetin memiliki kapasitas memutihkan dan antioksidan yang cukup besar dan Span60-RH40 pada rasio massa 9:11 membentuk niosom bulat atau oval 97,6 ± 3,1 nm dengan kisaran potensial zeta 31,1 ± 0,9 mV, dan obat efisiensi jebakan setinggi 87,3 ± 1,6 persen. Niosom secara luar biasa meningkatkan kelarutan dan fotostabilitas quercetin.

Selain itu, dibandingkan dengan larutan quercetin, quercetin-liposom memiliki keuntungan pelepasan berkelanjutan dan peningkatan penetrasi transdermal, dengan retensi kulit 2,95 kali lebih tinggi daripada larutan quercetin.

Antioksidan adalah zat apa pun yang dapat secara efektif menghambat reaksi oksidasi radikal bebas pada konsentrasi rendah. Mekanisme kerjanya bisa langsung menindak radikal bebas, atau secara tidak langsung mengkonsumsi zat-zat yang mudah menimbulkan radikal bebas untuk mencegah reaksi lebih lanjut. Sementara tubuh manusia pasti menghasilkan radikal bebas, ia juga secara alami menghasilkan zat antioksidan yang melawan radikal bebas untuk menangkal serangan oksidatif radikal bebas pada sel manusia. Studi telah membuktikan bahwa sistem antioksidan tubuh manusia adalah sistem dengan fungsi lengkap dan kompleks yang sebanding dengan sistem kekebalan tubuh. Semakin kuat kapasitas antioksidan tubuh, semakin sehat dan semakin lama umurnya. Dalam penelitian kami, kami menemukan bahwa Cistanche deserticola juga memiliki efek antioksidan. Cistanche deserticola kaya akan polisakarida, flavonoid, alkaloid, glikosida flavonoid, asam flavon, dan komponen lainnya, dan zat ini memiliki efek antioksidan yang kuat. Mereka dapat melawan stres oksidatif dan mengurangi kerusakan sel dengan menangkap radikal bebas, mengurangi reaksi oksidasi, dan meningkatkan aktivitas enzim antioksidan, sehingga berperan sebagai antioksidan.

Klik produk suplemen cistanche deserticola

Kata kunci:

anti-tirosinase; antioksidan; niosom; fotostabilitas; pengiriman transdermal.

1. Perkenalan

Flavonoid didistribusikan secara luas dalam buah-buahan, sayuran, dan herbal, dan memiliki aktivitas biologis yang luas, termasuk antivirus, antiinflamasi, antikanker, antioksidan, dan antitirosinase [1,2]. Baru-baru ini, pencarian inhibitor tirosinase baru yang aman mendapat banyak perhatian di bidang kosmetik, karena beberapa inhibitor terkenal, seperti asam kojic, hidrokuinon, dan kortikosteroid, dapat memicu masalah kesehatan, seperti dermatitis dan iritasi kulit. , okronosis, sitotoksisitas, dan kanker kulit [3]. Karena toksisitasnya yang rendah dan aktivitas antioksidan dan anti-tirosinase yang cukup besar, flavonoid telah menarik minat yang besar sebagai agen pemutih dan antioksidan alami yang potensial untuk digunakan dalam produk perawatan kulit [4-6].

Namun, flavonoid memiliki banyak struktur yang berbeda, termasuk konfigurasi yang berbeda dengan nukleus induk yang sama, tetapi masih belum jelas jenis struktur mana yang memiliki kapasitas anti-tirosinase dan antioksidan yang kuat. Selain itu, sebagian besar flavonoid memiliki kelarutan air dan liposolubility yang buruk, dan lipofilisitas sedang dan berat molekul rendah adalah faktor yang diketahui mendorong penetrasi yang lebih baik. Faktor signifikan lain yang mempengaruhi keefektifan komponen adalah penghalang biologis dari kulit itu sendiri, seperti stratum korneum. Meskipun metode fisikokimia, termasuk iontophoresis, ultrasound, microneedle, sistem injeksi non-jarum, dan peningkat penetrasi, dapat meningkatkan penetrasi bahan aktif melalui stratum korneum, metode ini dapat bersifat invasif, mengiritasi kulit, dan mahal.

Di sisi lain, beberapa sistem penghantaran bahan aktif yang dimediasi oleh pembawa baru telah muncul, termasuk emulsi, misel, vesikel, dan siklodekstrin, untuk meningkatkan kemanjuran bahan yang ada, terutama yang memiliki kelarutan dan bioavailabilitas yang buruk. Vesikel telah menerima lebih banyak perhatian untuk pengiriman transdermal. Di antara vesikel, transfersom adalah liposom yang dapat dideformasi dengan baik dengan peningkatan permeabilitas perkutan dan dapat meningkatkan kelarutan dan stabilitas obat. Transfersom terdiri dari rasio spesifik fosfolipid dan surfaktan, sedangkan fosfolipid mahal dan mudah teroksidasi.

Oleh karena itu, mencari vesikel lain yang stabil dan dapat diganti menjadi objek penelitian yang menarik. Niosom adalah sistem vesikular surfaktan non-ionik, pertama kali dilaporkan pada tahun 1979 ketika diterapkan dalam industri kosmetik [7], tetapi sejak itu telah dipelajari sebagai sistem penghantaran obat dalam farmasi [8-13]. Sifat fisik, teknik preparasi, dan struktur niosom sangat mirip dengan liposom. Namun, niosom juga memiliki kelebihan dalam penghantaran obat transdermal, seperti pelepasan obat yang berkelanjutan, penetrasi yang lebih baik, dan retensi kulit yang lebih tinggi [14], lebih murah untuk disiapkan, dan lebih stabil [15]. Oleh karena itu, niosom dapat diaplikasikan pada industri kosmetik [16-18].

Vesikel surfaktan awal disiapkan menggunakan surfaktan ionik [19-22]. Studi toksisitas komprehensif pada surfaktan menunjukkan bahwa surfaktan kationik adalah yang paling beracun, diikuti oleh surfaktan anionik, sedangkan surfaktan nonionik adalah yang paling tidak beracun. Oleh karena itu, dengan mempertimbangkan keamanan dan aplikasi industri, penggunaan liposom yang terdiri dari surfaktan non-ionik merupakan pilihan yang lebih baik untuk pengiriman transdermal. Karena struktur amphiphilic bilayers, rentang skala Hydrophilic-Lipophilic Balance (HLB) 4 sampai 8 akan lebih mudah untuk membentuk niosom dari [14,23,24].

Oleh karena itu, formulasi surfaktan non-ionik dengan nilai HLB yang berbeda akan memudahkan pembentukan niosom. Span, Tween, dan Brij adalah surfaktan non-ionik umum yang digunakan untuk membuat liposom [15,25-34]. Surfaktan non-ionik dengan rantai hidrokarbon panjang tanpa ikatan rangkap adalah kandidat yang memenuhi syarat karena niosom stabil dengan potensi peningkatan muatan obat dapat terbentuk. Span60, dengan nilai HLB yang rendah, telah banyak digunakan untuk membentuk niosom [15,29,31,33,34]. Surfaktan non-ionik dengan nilai HLB tinggi, seperti Tween20, Tween60, Tween80, Brij35, dan Brij58, tidak mudah membentuk niosom sendiri atau tanpa jumlah kolesterol yang optimal [28,35,36], karena hidrofiliknya yang besar. kepala dan rantai hidrokarbon pendek. Oleh karena itu, mereka hanya mampu membentuk niosom dengan penambahan kolesterol atau bila diformulasikan dengan surfaktan lain [10,27,31,37-39]. Cremophor RH40 sangat hidrofilik dan memiliki toksisitas rendah, dan banyak digunakan dalam formulasi obat oral, tetapi tidak ada laporan yang mengindikasikan penggunaan Cremophor RH40 dalam formulasi liposom.

Dalam penelitian ini, kami menyaring flavonoid dengan efek memutihkan dan antioksidan yang baik dan menyelidiki Span60-RH40, sistem surfaktan non-ionik dengan rasio lipid berbeda untuk membentuk niosom. Niosom bermuatan quercetin dikarakterisasi untuk ukuran vesikel, potensi zeta, efisiensi enkapsulasi, dan mikroskop elektron transmisi (TEM), dan kelarutan serta fotostabilitasnya juga diselidiki. Selain itu, tikus digunakan untuk menyelidiki penetrasi transdermal dari niosom yang mengandung quercetin.

2. Hasil

2.1. Penghambatan Flavonoid Tirosinase

Diketahui bahwa flavonoid memiliki banyak gugus hidroksil (Gambar 1) yang penting untuk aktivitas anti-tirosinase. Dilaporkan bahwa jumlah dan posisi gugus hidroksil serta adanya bagian gula terkait dengan penghambatan tirosinase. Pada Tabel 1, Myricetin tidak menunjukkan aktivitas anti-tirosinase karena mudah membentuk ikatan hidrogen antarmolekul yang kuat yang dapat menghambat khelasi dengan tirosinase. Rutin dan breviscapine tidak menunjukkan aktivitas anti-tirosinase yang menjanjikan, sedangkan quercetin, morin, dan festin menunjukkan aktivitas anti-tirosinase yang jauh lebih banyak daripada arbutin, yang merupakan zat pemutih umum yang digunakan dalam kosmetik.

2.2. Aktivitas Antioksidan Flavonoid

Flavonoids can scavenge free radicals as antioxidants by donating a hydrogen atom. The antioxidant activity of flavonoids is related to the number of hydroxyl groups and their structure. This includes (i) the presence of an ortho-hydroxyl group in the B ring; (ii) the presence of a C2-C3 double bond in the C ring; (iii) or the presence of a C-3 hydroxyl group [40–42]. As shown in Table 2, the 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity of the six compounds is in the following order: quercetin = fest in>myricetin=morin > rutin > BHT ≈ breviscapine. Quercetin dan festin memiliki kapasitas pemulungan radikal yang paling kuat.

2.3. Formulasi Niosom

2.3.1. Konduktivitas Sistem Rentang60-RH40

Transfersom tidak stabil karena terutama terdiri dari fosfolipid yang mudah teroksidasi, menyebabkan kebocoran obat. Niosom diidentifikasi sebagai alternatif untuk transfersom dalam pengiriman transdermal. Meskipun banyak surfaktan nonionik dapat membentuk niosom [15,26,28], surfaktan nonionik dengan rantai hidrokarbon tak jenuh kurang stabil dibandingkan surfaktan nonionik dengan rantai hidrokarbon jenuh [37]. Oleh karena itu, dalam penelitian ini, kami memilih Span60 dan RH40, yang keduanya tidak memiliki ikatan rangkap, untuk membentuk niosom guna meningkatkan stabilitasnya.

Pengukuran konduktivitas dilakukan untuk menentukan perilaku agregasi surfaktan non-ionik dalam larutan air. Konduktivitas Span60-RH40 yang terdispersi dalam air meningkat secara bertahap dari rasio massa 4:16 menjadi 9:11, kemudian mendatar antara rasio massa 9:11 hingga 13:7 dan menurun dari 13:7 menjadi 16 : 4 (Gambar 2a). Dua breakpoint mungkin menunjukkan perubahan dalam struktur mikro agregat. Seperti terlihat pada Gambar 3, pada perbandingan massa 9:11, niosom mulai terbentuk.

2.3.2. Ukuran Rentang60-Sistem RH40

Ukuran partikel adalah indeks penting dari evaluasi partikel nanometer. Mengukur ukuran sistem Span60-RH40 dengan rasio massa surfaktan yang berbeda dapat mencerminkan lebih jauh perubahan struktur mikro agregat dalam sistem. Seperti yang ditunjukkan pada Gambar 2b, awalnya ukuran agregat relatif kecil dan konstan pada perbandingan massa 4:16 sampai 9:11. Selanjutnya, ukuran agregat meningkat pesat pada rasio massa 9:11 hingga 13:7, dan kemudian terus meningkat tajam pada rasio massa 13:7 hingga 16:4, bahkan hingga ~1 µm. Transisi struktural spontan agregat Span60/RH40 selanjutnya dikonfirmasi oleh ukuran agregat yang dikombinasikan dengan konduktivitas dan viskositas.

2.3.3. Viskositas Sistem Rentang60-RH40

Viskositas sistem Span60-RH40 yang ditunjukkan pada Gambar 2c menunjukkan perubahan yang sesuai. Pertama, viskositas sistem Span60-RH40 rendah dan konstan pada perbandingan massa 4:16 sampai 9:11. Kemudian, pada rasio massa 9:11 menjadi 13:7, viskositas berubah secara signifikan, dengan viskositas meningkat dan setelahnya menurun. Konduktivitas dan ukuran yang dibahas di atas juga terjadi sesuai dengan perubahan pada rentang rasio massa Rentang60-RH40 ini. Selanjutnya, pada rasio massa 13:7 sampai 16:4, viskositas meningkat tajam.

2.4. Ukuran, Potensi Zeta, Morfologi, dan Efisiensi Jebakan Quercetin-Niosomes

Quercetin dimuat oleh niosom Span60-RH40 dan kemudian dihomogenkan dengan 1500 bar. Seperti yang ditunjukkan oleh Tabel 3, diameter hidrodinamik niosom kosong dan quercetin-liposom masing-masing adalah 146,4 ± 5,4 nm dan 97,6 ± 3,1 nm.

Potensi Zeta dipelajari untuk memahami muatan permukaan niosom. Potensi zeta niosom kosong dan Quercetin-niosom masing-masing adalah −41.2 ± 0.6 mV dan −31.1 ± 0.9 mV (Tabel 3). Gambar TEM pada Gambar 4b menunjukkan bahwa quercetin-niosom berbentuk bulat atau oval. Efisiensi penjerapan quercetin-liposom adalah 87,3 ± 1,6 persen , yang lebih tinggi dibandingkan kisaran 48,4 persen hingga 78,4 persen pada penelitian sebelumnya [37,43,44]. Peningkatan efisiensi penjebakan obat dapat dikaitkan dengan afinitas antara obat dan lapisan ganda niosom [45].

2.5. Kelarutan Air dan Kesetimbangan Kelarutan Quercetin

Seperti yang ditunjukkan pada Gambar 5, kelarutan quercetin dalam air sangat rendah. Kelarutannya tidak berbeda nyata (P > 0.05) dalam dapar fosfat dengan pH berbeda dibandingkan dengan dalam air. Hasil kesetimbangan kelarutan quercetin menunjukkan bahwa quercetin merupakan komponen yang sangat larut dalam lemak. Seperti yang terlihat pada Gambar 6 dan 7, kesetimbangan kelarutan quercetin tetap stabil pada rasio air/n-oktanol yang berbeda tetapi menurun pada pH 8,0 karena struktur quercetin berubah dalam kondisi basa, menyebabkan peningkatan kelarutan air.

Namun, kelarutan quercetin dalam air yang buruk terbatas pada penerapannya. Berdasarkan Tabel 4, kelarutan quercetin meningkat pada surfaktan yang dibahas di bawah, terutama pada 0.6 persen Tween80 (P < 0.05). Namun, kelarutannya lebih ditingkatkan dengan memasukkannya ke dalam niosom. Quercetin (300 µg/mL) dimuat dalam niosom dan enkapsulasi tinggi Span60-RH40 noisome adalah 87,3 ± 1,6 persen , oleh karena itu, kelarutan quercetin dalam niosom adalah 261,9 ± 4,8 µg/mL, yaitu {{ 17}}kali lipat lebih tinggi daripada di air (P <0,05).

2.6. Fotostabilitas Quercetin-Niosomes

Quercetin memiliki photostability yang buruk dan cepat terdegradasi di bawah paparan sinar matahari atau radiasi UV [46-48], mungkin karena quercetin mengalami fotooksidasi pada radiasi UV [49]. Namun, photostability diperlukan untuk quercetin untuk menunjukkan aktivitasnya. Seperti yang ditunjukkan pada Gambar 8, niosom secara efektif meningkatkan fotostabilitas Quercetin dan tetap pada 88,06 persen setelah 10 hari terpapar pencahayaan yang kuat. Quercetin terlindung dari radiasi UV karena dienkapsulasi dalam lapisan ganda niosom. Molekul 2019, 24, x UNTUK PEER REVIEW 8 dari 18 paparan iluminasi yang kuat. Quercetin terlindung dari radiasi UV karena dienkapsulasi dalam lapisan ganda niosom.

2.7. Perilaku Rilis In Vitro dari Quercetin-Niosomes

Media rilis yang sesuai disaring untuk mempertahankan kondisi sink, oleh karena itu kelarutan quercetin dalam media yang berbeda dinilai. Hasil pada Tabel 5 menunjukkan bahwa quercetin memiliki kelarutan yang lebih tinggi dalam air Tween80 dan kelarutannya meningkat secara bertahap dengan meningkatnya konsentrasi Tween80. Kelarutan quercetin meningkat menjadi 76,07 ± 3,11 µg/mL dalam suasana asam. Oleh karena itu, mempertimbangkan pH kulit manusia, 0,8 persen Tween80 (pH 5,0) dipilih sebagai media pelepasan untuk mempelajari perilaku pelepasan quercetin bebas dan quercetin-niosomes.

Seperti yang terlihat pada Gambar 9, dibandingkan dengan quercetin-niosom, quercetin bebas dilepaskan lebih cepat dalam media pelepasan, menunjukkan bahwa niosom memiliki efek pelepasan berkelanjutan. Pelepasan berkelanjutan mengurangi waktu aplikasi, mengurangi toksisitas, dan mempertahankan konsentrasi obat yang efektif.

2.8. Studi Permeasi Ex Vivo dan Retensi Kulit

Solusi {{0}.6 persen Tween80 digunakan sebagai media pelepasan penetrasi dalam penelitian ini. Dalam studi penetrasi exvivo kami, quercetin tidak dapat ditentukan dalam media pelepasan penetrasi, yang menggambarkan bahwa quercetin tidak menembus dermis dan mencapai media pelepasan, tetapi niosom secara luar biasa meningkatkan retensi kulit quercetin (P <0.{ {20}}5). Seperti yang ditunjukkan pada Tabel 6, retensi kulit quercetin-niosomes (1.92 plus 0.74 ug/cm?), quercetin-niosome-1 persen propanediol (2.34 plus 0.40 ug /cm?), dan quercetin-transfersomes (2.53 plus 0.40 ug/cm-) secara signifikan lebih tinggi dibandingkan dengan Quercetin-propanediol (0.65 plus 0.10 ug/cm2) (P < 0.05).

3. Diskusi

Studi sebelumnya telah menentukan bahwa gugus hidroksil bebas pada posisi C-3 memainkan peran penting dalam penghambatan tirosinase [50-52]. Sebaliknya, 3-O-glikosida dapat menghambat pengikatannya ke situs aktif tirosinase dan mungkin menjadi alasan mengapa rutin tidak menunjukkan aktivitas anti-tirosinase. Sebaliknya, bagian gula yang terletak di posisi C-7 memiliki sedikit efek pada aktivitas anti-tirosinase dan tidak memblokir khelasi dengan tirosinase [51].

Namun, adanya gugus hidroksil tambahan pada posisi C-30 cincin B meningkatkan inhibisi tirosinase [53,54]. Breviscapine tidak menunjukkan aktivitas anti-tirosinase karena tidak memiliki gugus hidroksil C-3 dan gugus hidroksil C-30 yang mungkin memiliki efek pada aktivitas anti-tirosinase daripada adanya 7- O-glikosida. Dalam menganalisis hubungan struktur-aktivitas quercetin dan morin, kami mengamati bahwa nilai IC50 morin adalah sekitar 1/3 dari quercetin dan satu-satunya perbedaan antara struktur quercetin dan morin adalah posisi gugus hidroksil dalam cincin B.

Oleh karena itu, keberadaan gugus o-dihidroksil pada cincin B meningkatkan aktivitas anti-tirosinase. Nilai IC50 festin sekitar 1/20 nilai quercetin dan satu-satunya perbedaan antara struktur quercetin dan festin adalah bahwa festin adalah tidak adanya gugus hidroksil C-5 pada cincin A. Gugus hidroksil pada posisi C-5 juga berperan penting dalam meningkatkan aktivitas penghambatan tirosinase, karena dapat mengkhelat Cu2 plus pada sisi aktif tirosinase dengan karbonil pada posisi C-4 [50 ]. Quercetin memiliki gugus hidroksil bebas, tidak hanya pada posisi C-3 dan C-5 dari cincin C tetapi juga pada posisi C-30 dari cincin B. Dengan demikian, quercetin menunjukkan penghambatan tirosinase yang jauh lebih kuat dibandingkan dengan flavonoid lainnya.

Flavonoid tidak hanya memiliki aktivitas anti-tirosinase yang menjanjikan tetapi juga memiliki aktivitas antioksidan yang kuat. Quercetin memiliki gugus hidroksil C-5 tambahan; namun, baik quercetin maupun fisetin memiliki kapasitas antioksidan yang sama, menunjukkan bahwa gugus hidroksil C-5 berdampak kecil pada pembersihan radikal. Myricetin memiliki lebih banyak gugus hidroksil di cincin B, tetapi tidak menunjukkan aktivitas antioksidan yang lebih kuat daripada quercetin atau fisetin. Ini mungkin karena myricetin dapat membentuk ikatan hidrogen antarmolekul yang kuat dan sumbangan atom hidrogen yang lebih rendah.

Demikian pula, morin menunjukkan kapasitas antioksidan yang lebih rendah daripada quercetin dan festin karena konfigurasi hidroksil cincin B, yang menggambarkan bahwa o-dihidroksil dalam cincin B penting untuk meningkatkan kapasitas pemulungan radikal. Namun, rutin dan breviscapine memiliki kapasitas antioksidan yang jauh lebih rendah karena rutin memiliki glikosida pada posisi C-3 yang menghasilkan halangan sterik. Breviscapine memiliki gugus hidroksil tunggal pada cincin B dan memiliki lebih sedikit gugus hidroksil bebas. Konsekuensinya, hasil dalam makalah ini menunjukkan bahwa konfigurasi hidroksil cincin B signifikan untuk kapasitas antioksidan flavonoid, sedangkan cincin A berdampak kecil pada kapasitas pemulungan radikal. Selain itu, memblokir atau menghilangkan gugus hidroksil pada posisi C-3 dapat mengurangi kapasitas radikal flavonoid.

Span60 dan RH40 tidak mampu melakukan ionisasi. Oleh karena itu, muatan tampaknya berasal dari interaksi antara gugus kepala hidrofilik Span60 dan RH40 yang membentuk ikatan hidrogen [55], ketika agregat bermuatan terbentuk antara Span60 lipofilik dan RH40 hidrofilik.

Oleh karena itu, konduktivitas mungkin disebabkan oleh kombinasi Span60 dan RH40. Konduktivitas awalnya meningkat, mungkin karena penambahan Span60, yang berasosiasi dengan RH40, membentuk misel campuran bermuatan. Meningkatkan Span60 juga meningkatkan jumlah agregat bermuatan dan konduktivitas secara bertahap meningkat. Breakpoint terjadi pada rasio massa 9:11. Perubahan mendadak menunjukkan bahwa struktur mikro agregat dapat berubah dan niosom dapat terbentuk. Konduktivitas kemudian sedikit menurun dan tetap relatif konstan, yang dapat mengindikasikan pembentukan niosom, karena muatan tertutup. Breakpoint lain terjadi pada rasio massa 13:7 dan konduktivitas menurun tajam, namun ukuran agregat meningkat dengan peningkatan Span60, mungkin karena kelompok padat dari pembentukan niosom multilamellar yang lebih besar dan terjadinya endapan putih [56 ,57], menyebabkan penurunan agregat bermuatan bebas.

Transisi struktural spontan agregat Span60-RH40 selanjutnya dikonfirmasi oleh ukuran agregat yang dikombinasikan dengan konduktivitas dan viskositas. Ketika fraksi massa RH40 dominan, ukuran agregat relatif konstan dan kecil. Sistem memiliki viskositas seperti air dan campuran misel dapat terbentuk. Dengan peningkatan fraksi massa Span60, hidrofobisitas sistem meningkat, dan viskositas serta ukuran agregat meningkat. Span60 yang meningkat dapat menginduksi pembentukan niosom. Namun, dengan peningkatan Span60 lebih lanjut, viskositas, dan ukuran juga meningkat tajam karena adanya niosom multilamelar yang lebih besar, yang menyebabkan pembentukan endapan. Pembentukan niosom juga diverifikasi oleh TEM (Gambar 3).

Ketika konsentrasi Span60 rendah, sistem Span60-RH40 memiliki viskositas seperti air dan ukuran agregatnya relatif kecil, menunjukkan pembentukan misel campuran. Dari rasio massa 9:11 menjadi 13:7, viskositas dan kekeruhan sistem meningkat secara bersamaan. Perubahan viskositas yang jelas mungkin terkait dengan transisi misel menjadi noisome yang kaku dan kental, karena surfaktan dikemas rapat dan terbentuk lapisan ganda; pengamatan ini konsisten dengan literatur [57,58]. Antara rasio massa 13:7 dan 16:4, viskositas meningkat secara signifikan, kemungkinan karena keberadaan niosom multilamelar yang lebih besar menyebabkan pembentukan endapan.

Menariknya, quercetin-niosomes memiliki ukuran yang lebih kecil dari niosomes kosong, yang sebelumnya diterbitkan penelitian [43]. Telah diilustrasikan bahwa jika molekul yang menunjukkan afinitas yang baik dengan surfaktan penyusun niosom dimasukkan ke dalam lapisan ganda, itu akan menyebabkan pengurangan ukuran vesikel. Pengamatan ini mungkin disebabkan oleh efek afinitas yang kuat untuk obat dan niosom dalam menyatukan lamella yang berbeda, membuat membran lebih kaku [14]. Nilai absolut potensi zeta untuk quercetin-liposom lebih rendah daripada liposom kosong (Tabel 3). Ini mungkin karena interaksi quercetin dengan kelompok kepala surfaktan yang menetralkan muatan negatif pada permukaan niosom. Pengamatan ini juga dilaporkan sebelumnya; bahwa obat dapat mengurangi muatan permukaan negatif [59].

Kami menentukan bahwa quercetin tidak larut dalam air dan dapar fosfat. Dalam penelitian sebelumnya, untuk mempertahankan kondisi sink obat yang sulit larut dalam media pelepasan penetrasi, kosolven, termasuk alkohol dan surfaktan, sering digunakan [14], oleh karena itu, larutan Tween80 0,6 persen digunakan sebagai media pelepas penetrasi untuk menjaga kondisi sink.

Namun, mengingat khasiatnya, untuk perawatan kulit dan pengobatan penyakit kulit, lebih efektif dan aman menahan komponen atau obat jauh di dalam kulit daripada masuk ke dalam peredaran darah. Dalam penelitian kami, meskipun quercetin tidak menembus dermis ke dalam medium, percobaan retensi kulit menunjukkan bahwa dibandingkan dengan quercetin bebas, niosom meningkatkan penetrasi quercetin ke dalam epidermis.

Oleh karena itu, niosom dapat menjadi sistem pengiriman yang menjanjikan untuk tujuan kosmetik dan pengobatan penyakit kulit. Quercetin sangat larut dalam lemak dan kelarutannya yang rendah dalam air telah membatasi pengembangan dan aplikasinya. Niosom bermuatan quercetin tidak hanya meningkatkan kelarutan air tetapi juga penyerapan transdermal quercetin. Quercetin-niosomes mengalami 3-peningkatan retensi kulit di atas larutan quercetin-propanediol. Setelah menambahkan 1 persen propanediol, penambah penetrasi, ke dalam formulasi asli niosom Span60-RH40, penyerapan transdermalnya meningkat, sebanding dengan transfersom kuersetin.

4. Bahan dan Metode

4.1. Bahan

Quercetin, morin, festin, myricetin, rutin, dan breviscapine dibeli dari DATIAN Biology Co (Shanxi, China), -arbutin dari Beijing Brilliance Biochemical Co, Ltd (Beijing, China), dan 1,1-diphenyl{{ 3}}picrylhydrazyl (DPPH) dari Guangzhou Qiyun Bio-technology Co (Guangzhou, China). Natrium dihidrogen fosfat, dinatrium hidrogen fosfat, dimetil sulfoksida (DMSO), dan etil alkohol absolut dibeli dari PABRIK REAGEN KIMIA DAMAO (Tianjin, Cina). Span60 dibeli dari Tianjin Kemiou Chemical Reagent Co, Ltd (Tianjin, China), dan Cremophor RH40 dari Guangzhou Jiefu Trading Co, Ltd (Guangzhou, China). Tikus Sprague-Dawley jantan (200 ± 20 g) digunakan dan dipasok oleh Pusat Eksperimen Hewan Guangdong (Guangzhou, Cina). Tikus disimpan di bawah suhu standar, kelembaban, dan kondisi cahaya, dengan diet dan air hewan pengerat standar. Penelitian ini disetujui oleh Komite Etika Hewan Eksperimental Universitas Farmasi Guangdong (NO. SPF2017120, Guangzhou, Cina).

4.2. In Vitro Aktivitas Penghambatan Tirosinase Flavonoid

Uji penghambatan tirosinase dilakukan berdasarkan penelitian sebelumnya dengan sedikit modifikasi [2]. Aktivitas penghambatan tirosinase ditentukan menggunakan spektrofotometer dengan memantau pembentukan dopakrom pada 493 nm. Sistem reaksi, seperti yang ditunjukkan pada Tabel 7, mengandung 0.5 mL berbagai konsentrasi flavonoid, termasuk arbutin, quercetin, morin, festin, rutin, dan breviscapine, dan 0.5 mL tirosinase (120 unit/mL dalam buffer fosfat, pH 6,8), yang digabungkan dengan 1,5 mL buffer fosfat (pH 6,8). Setelah inkubasi pada 30 ◦C selama 10 menit, 0,5 mL l-tirosin ditambahkan ke dalam sistem. Sistem reaksi diinkubasi pada 30 ◦C selama 20 menit dan absorbansi ditentukan pada 493 nm. Arbutin digunakan sebagai kontrol positif. Tingkat penghambatan sampel dinyatakan sebagai konsentrasi penghambatan 50 persen (IC50).

4.3. Aktivitas Antioksidan In Vitro dari Flavonoid

Aktivitas antioksidan flavonoid diukur dengan tingkat pemutihan DPPH, dilaporkan oleh Blois [60]. Dalam bentuk radikalnya, DPPH menyerap pada panjang gelombang 515 nm, tetapi penyerapannya menurun saat direduksi oleh antioksidan atau senyawa radikal. Aktivitas scavenging radikal DPPH dari flavonoid dievaluasi sesuai dengan metode yang dijelaskan oleh Rui Yang, dengan beberapa modifikasi [61]. Secara singkat, 5 mL DPPH (30 µg/mL) dicampur dengan 0,1 mL etil alkohol absolut dan 0,1 mL sampel dengan konsentrasi berbeda. Kemudian, absorbansi campuran ditentukan pada 515 nm. Aktivitas penangkapan radikal DPPH dihitung sebagai berikut:

4.4. Formulasi Niosom

Berdasarkan penelitian sebelumnya dan makalah yang diterbitkan yang menunjukkan bahwa Span60 adalah surfaktan umum yang digunakan untuk membentuk niosom [15,27,31], kami merancang sistem formulasi surfaktan non-ionik dengan menggunakan Span60 dan RH40 pada rasio massa yang berbeda. Konduktivitas, viskositas, dan ukuran sebagai indeks diselidiki untuk menentukan rasio yang tepat dari surfaktan non-ionik pembentuk liposom.

Rasio massa Span60 dan RH40 yang diselidiki adalah 4:16, 6:14, 8:12, 9:11, 10:10, 12:8, 13:7, 14:6 , 15:5, dan 16:4 (berat total: 2 g). Span60 dilebur pada suhu 80 ◦C kemudian dicampur dengan RH40 dengan pengaduk selama 2 menit. Kemudian, campuran dihidrasi dengan 100 mL air masing-masing pada suhu 80 ◦C selama 10 menit. Konduktivitas (DDS-11Konduktometer, Shanghai Ridao Scientific Instruments Co., Ltd., Shanghai, Tiongkok), viskositas (viskometer Ubbelode, 0,4–0,5 mm, Pabrik Instrumen Kaca Liangjing Shanghai, Shanghai, Tiongkok), dan ukuran (Nano-ZS90, Malvern, Malvern, UK) dari sistem surfaktan non-ionik diukur pada suhu kamar.

4.5. Persiapan dan Evaluasi Niosom Bermuatan Quercetin

4.5.1. Persiapan Niosom Berisi Quercetin

Berdasarkan gambar TEM dari sistem Span{{0}}RH40 (Gambar 3), Span60, dan RH40 pada rasio massa 9:11, niosom berbentuk bola atau oval tampak terbentuk. Oleh karena itu, niosom bermuatan quercetin disiapkan dengan rasio massa Span60/RH40 9:11 menggunakan alat pengaduk magnet. Span60 (0,9 g), RH40 (1,1 g), dan quercetin (30 mg) dilebur bersama. Kemudian, 100 mL air murni pada 80 ◦C ditambahkan ke dalam campuran dan dihidrasi selama 10 menit. Niosom yang mengandung quercetin dibentuk dan kemudian didinginkan hingga suhu kamar. Niosom bening diperoleh dengan memproses dengan homogenisasi tekanan tinggi pada 1500 bar.

4.5.2. Ukuran, Potensi Zeta, dan Morfologi Niosom Bermuatan Quercetin

Ukuran dan potensi zeta dari niosom kosong dan niosom bermuatan quercetin diukur menggunakan Malvern Zetasizer (ZS90 plus MPT-2, Malvern, Malvern, UK). Morfologi niosom bermuatan quercetin ditandai dengan mikroskop elektron transmisi. Sampel quercetin-niosom diendapkan pada kisi tembaga dan setelah 1 menit, sampel berlebih dihilangkan dengan kertas saring. TEM digunakan untuk mengamati sampel setelah pewarnaan negatif dengan asam fosfotungstat.

4.5.3. Efisiensi Jebakan Obat

Efisiensi penjeratan obat dari niosom yang mengandung quercetin ditentukan dengan menggunakan teknik sentrifugasi kolom mini. Minicolumn disiapkan menggunakan dispersi Sephadex G50 terhidrasi ke dalam jarum suntik 5mL, yang disentrifugasi selama 30 detik pada 900 rpm. Sebuah alikuot niosom yang mengandung quercetin (400 µL) dimasukkan ke dalam kolom kecil dan elusi dikumpulkan dengan menggunakan sentrifugasi pada 1500 rpm selama 3 menit. Elusi diencerkan menjadi 10 mL dengan metanol dan vorteks, dan 10 µL sampel yang disaring diinjeksikan ke dalam kromatografi cair kinerja tinggi (HPLC). Kemudian, quercetin bebas dielusi dengan sentrifugasi dengan 25 mL metanol 80 persen, dan kandungan quercetin ditentukan dengan HPLC.

4.6. Kelarutan Air dan Kesetimbangan Kelarutan Quercetin

Kelarutan quercetin dalam air diukur dengan 15 mL air murni, buffer fosfat dengan nilai pH yang berbeda (pH 5.0, 6.0, 6.8, 7.4, 8.0) , dan kelebihan quercetin, dan ditempatkan ke dalam vial. Botol dikocok selama 24 jam dalam penangas air 37 ◦C dan supernatan ditentukan dengan HPLC setelah sentrifugasi.

Kesetimbangan kelarutan quercetin dilakukan menggunakan sistem n-oktanol-air dengan perbandingan n-oktanol/air 1:1, 1:2, 1:3, 1:4, 1:5, 1:6, 1: 7, dan 1:8. Kemudian, 70 µg/mL larutan quercetin dibuat dengan larutan n-oktanol jenuh air dan 1 mL larutan quercetin 70 µg/mL diambil dalam delapan vial kemudian 1 mL, 2 mL, 3 mL, 4 mL, 5 mL , 6 mL, 7 mL, dan 8 mL air murni ditambahkan ke masing-masing vial.

Kelarutan kesetimbangan quercetin dalam sistem buffer n-oktanol pada nilai pH yang berbeda juga dipelajari. Rasio n-oktanol-buffer dipilih pada 1:2 berdasarkan hasil kesetimbangan kelarutan quercetin dalam sistem n-oktanol-air. Volume 2 mL larutan quercetin 70 µg/mL dan 4 mL larutan buffer fosfat jenuh n-oktanol pada nilai pH yang berbeda ditambahkan ke vial dan vial dikocok selama 24 jam dalam suhu 37 ◦C mandi air. Kemudian, 0,2 mL larutan quercetin dalam lapisan n-oktanol diambil dan diencerkan menjadi 5 mL (sekitar 2,8 µg/mL) menggunakan fase gerak (metanol-1 persen asam fosfat=60:40). Sampel ditentukan dengan HPLC. Larutan kuersetin n-oktanol standar (70 µg/mL) diencerkan dan ditentukan seperti dijelaskan di atas.

4.7. Fotostabilitas Quercetin-Niosomes

Larutan metanol Quercetin (300 µg/mL) ditambahkan ke vial transparan dan ditempatkan di bawah sinar matahari. Kemudian, kandungan quercetin ditentukan dengan HPLC pada 0, 12, 24, 36, 48, 60, dan 72 jam. Quercetin-niosom dimasukkan ke dalam botol transparan dan ditempatkan di dalam ruang uji stabilitas cahaya (PTOP-500B, Zhejiang TOP Instrument Co., Ltd., Zhejiang, China) dengan pencahayaan 4500 ± 500 LX selama 10 hari. Sampel quercetin-liposom 0,2 g diambil pada hari ke 0, 5, dan 10, dan dilarutkan dalam 10 mL etanol. Sampel ditentukan dengan HPLC setelah sentrifugasi dan filtrasi dengan membran filter Millipore 0,22 µm. Fotostabilitas dievaluasi dengan persentase quercetin yang tersisa pada waktu iradiasi yang berbeda, dibandingkan dengan sampel yang tidak terpapar.

4.8. Studi Rilis In Vitro

4.8.1. Kelarutan Quercetin dalam Media Rilis Berbeda

Kelarutan quercetin diselidiki dalam media pelepasan yang berbeda, termasuk {{0}}.1 persen , 0.2 persen , 0.3 persen , 0.4 persen , {{10}}.6 persen , dan 0.8 persen Tween80 larutan berair, serta 0.2 persen , 0.4 persen , dan 0,6 persen larutan air SDS. Larutan berair 15 mL Tween80 dan SDS pada konsentrasi berbeda dan kelebihan quercetin ditempatkan ke dalam masing-masing vial. Botol dikocok dalam penangas air 32 ◦C selama 24 jam. Setelah 24 jam, 5 mL suspensi disentrifugasi pada 3000 RMP selama 15 menit dan 0,2 mL supernatan diencerkan menjadi 2 mL dan ditentukan menggunakan HPLC.

4.8.2. Pelepasan Obat dengan Dialisis

Studi kelarutan quercetin disajikan pada Tabel 5 mengilustrasikan bahwa 0,8 persen Tween80 (pH 5.0) larutan berair memenuhi kondisi sink dan sesuai dengan nilai pH kulit manusia. Oleh karena itu, perilaku pelepasan quercetin bebas dan quercetin-liposom diselidiki dalam larutan air 0.8 persen Tween80 (pH 5.0).

Kantung dialisat (8000–14,000 batas berat molekul) diproses dengan larutan EDTA 2 persen NaHCO3 dan 1 mmol/mL. Sebanyak 10 mL (300 µg/mL) Quercetin-niosomes dan larutan quercetin-propanediol ditambahkan ke dalam kantong dialisat dan ditempatkan ke dalam bejana disolusi yang berisi 1000 mL larutan berair 0,8 persen Tween80 (pH 5,0) pada suhu 32 ◦C. Bejana disolusi ditempatkan pada magnetic stirrer dengan kecepatan 100 rpm. Media pelepasan (2 mL) ditarik pada 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12, dan 24 jam, dan diganti dengan media pelepasan kosong (2 mL). 2 mL media pelepasan ditarik disentrifugasi pada 3000 r / menit selama 15 menit dan disaring. Quercetin yang dirilis dikuantifikasi oleh HPLC.

4.9. Studi Permeasi Obat Ex Vivo dan Retensi Kulit

Tikus dikorbankan dengan cara dislokasi serviks, rambut di bagian perut dicukur, kemudian kulit perut dipisahkan dan dimasukkan ke dalam larutan garam fisiologis. Setelah itu, jaringan subkutan (otot, lemak, dan pembuluh darah) diangkat menggunakan gunting bedah dan forsep hemostatik dan kemudian disimpan pada suhu 4 ◦C dengan salin fisiologis untuk penyelidikan lebih lanjut.

Studi permeasi dan retensi kulit obat dari quercetin-niosomes, quercetin-niosomes-1 persen propanediol, quercetin-transfersomes (terdiri dari fosfolipid dan Tween80 pada rasio massa 9:11), dan quercetin bebas Larutan -propanediol dilakukan untuk menyelidiki pengiriman transdermal mereka menggunakan perangkat difusi transdermal TK-20B dengan area difusi efektif 2,99 cm2. Kemudian, solusi 0.6 persen Tween80 dipilih sebagai media pelepasan penetrasi. Jaringan kulit ditempatkan di antara sel difusi dan sel reseptor, dan 0.4 mL preparat quercetin (setara dengan 120 µg quercetin) dioleskan ke kulit. Media penetrasi (0,5 mL) ditarik dari sel reseptor pada 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12, dan 24 jam dengan penggantian media penetrasi baru (0,5 mL). Media penetrasi ditarik pada titik waktu yang berbeda diencerkan menjadi 7 mL dengan metanol dan ditentukan dengan HPLC setelah sentrifugasi dan filtrasi.

Setelah percobaan permeasi, percobaan retensi kulit obat dilakukan. Setelah 24 jam, jaringan kulit diisolasi, kemudian dipotong seluruhnya dalam 7 mL metanol setelah mencuci quercetin pada permukaan menggunakan air suling dan diekstraksi selama 40 menit secara ultrasonik. Kemudian, sampel divorteks dan disentrifugasi, dan supernatan dianalisis menggunakan HPLC setelah disaring melalui membran filter Millipore 0,22 µm.

4.10. Metode HPLC

Kolom analitik adalah Dimark C18 (150 mm × 4,6, 5 µm). Fase gerak terdiri dari metanol dan 1 persen H3PO4 (60:40, v/v). Laju alir diatur ke 1 mL/menit pada 30 ◦C dan volume injeksi 10 µL. Puncak quercetin terdeteksi pada 363 nm.

4.11. Analisis statistik

Data dinyatakan sebagai rata-rata eksperimen ± standar deviasi (SD) dan dianalisis menggunakan analisis varians satu arah (ANOVA), diikuti dengan post-test perbandingan berganda Tukey. Perbedaan statistik yang menghasilkan P < 0.05 dianggap signifikan secara statistik.

5. Kesimpulan

Kami menskrining quercetin, flavonoid alami yang memiliki kemampuan memutihkan dan antioksidan yang kuat, dan memformulasikan liposom menggunakan sistem surfaktan nonionik untuk meningkatkan kelarutan, fotostabilitas, dan kemampuan penetrasi kulit dari quercetin.

Kontribusi Penulis:

Konseptualisasi, WC dan XL; metodologi, WC; perangkat lunak, YH; validasi, BL, YH, dan ZC; analisis formal, BL; investigasi, JY; sumber daya, HX; kurasi data, BL; tulisan—penyusunan draf asli, BL; tulisan—ulasan dan penyuntingan, XL; visualisasi, WC; pengawasan, XL; akuisisi pendanaan, XL

Pendanaan:

Penelitian ini tidak menerima pendanaan eksternal.

Konflik kepentingan:

Para penulis menyatakan tidak ada konflik kepentingan.

Referensi

1. Chhikara, N.; Kaur, R.; Jaglan, S.; Sharma, R.; Gat, Y.; Panghal, A. Senyawa bioaktif dan aplikasi farmakologis dan makanan dari Syzygium cumini—A review. Fungsi Makanan. 2018, 9, 6096. [Referensi Silang] [PubMed]

2. Carol López de Dicastillo Carol López Bustos, F.; Valenzuela, X.; López-Carballo, G.; Vilarino, JM; Galotto,MJ Berry Chili, Ugni molinae, Turcz. Ekstrak buah dan daun dengan sifat antioksidan, antimikroba, dan penghambat tirosinase yang menarik. Makanan Res. Int. 2017, 102, 119–128.

3. Chiari, SAYA; Vera, DM; Palacios, SM; Carpinella, MC Aktivitas penghambatan Tirosinase dari 6-flavanon tersubstitusi isoprenoid yang diisolasi dari Dalea elegans. Bioorg. Kedokteran kimia 2011, 19, 3474–3482. [Referensi Silang] [PubMed]

4. Sirat, HM; Rezali, MF; Ujang, Z. Isolasi dan Identifikasi Pemulungan Radikal dan Penghambatan Tirosinase Polifenol dari Tibouchina semidecandra. J.Agri. Makanan Kimia. 2010, 58, 10404–10409. [Referensi Silang] [PubMed]

5. Xiong, Z.; Liu, W.; Zhou, L.; Chen, J. Jamur (Agaricus bisporus) polifenol oksidase dihambat oleh apigenin: Analisis multi-spektroskopi dan simulasi docking komputasi. Makanan Kimia. 2016, 203, 430–439. [Referensi Silang] [PubMed]

6. Yan-Zhen, Z.; Da-Fu, C.; Geng, D.; Guo, R. Efek Substituen pada Aktivitas Pemulungan Radikal Apigenin. Molekul 2018, 23, 1989.

7. Handjani-Vila, RM; Ribier, A.; Rondot, B.; Vanlerberghie, B. Dispersi fase pipih lipid non-ionik dalam produk kosmetik. Int. J.Cosmet. Sains. 1979, 1, 303–314. [Referensi Silang] [PubMed]

8. Yoshida, H.; Lehr, CM; Kok, W.; Junginger, HM; Verhoef, JC; Bouwstra, JA Niosomes untuk pemberian oral obat peptida. J.Kontrol. Rilis 1992, 21, 145–153. [Referensi Silang]

9. Uchegbu, JIKA; Ganda, JA; Kelland, LR; Turton, JA; Florence, AT Aktivitas Doxorubicin Niosomes terhadap Garis Sel Kanker Ovarium dan Tiga Model Tumor Vivo Mouse. J. Sasaran Obat. 1996, 3, 399–409. [Referensi Silang]

10. Alsarra, IA; Bosela, AA; Ahmad, SM; Mahrous, GM Proniosomes sebagai pembawa obat untuk pengiriman transdermal ketorolac. eur. J. Farmasi. Biofarm. 2005, 59, 485–490. [Referensi Silang]

11. Hong, M.; Zhu, S.; Jiang, Y.; Tang, G.; Pei, Y. Penargetan tumor yang efisien dari hidroksi camptothecin memuat liposom PEGylated yang dimodifikasi dengan transferin. J.Kontrol. Rilis 2009, 133, 96–102. [Referensi Silang] [PubMed]

12. Tavano, L.; Muzzalupo, R.; Picci, N.; de Cindio, B. Co-enkapsulasi antioksidan ke dalam pembawa liposomal: studi rilis Gastrointestinal untuk aplikasi nutraceutical. Surfing Koloid. B Biointerface 2014, 114, 82–88. [Referensi Silang] [PubMed]

13. Sohrabi, S.; Haeri, A.; Mahboubi, A.; Mortazavi, A.; Dadashzadeh, S. Chitosan gel-embedded moxifloxacin niosomes: Sistem hibrida antimikroba yang efisien untuk infeksi luka bakar. Int. J.Biol. Makromol. 2016, 85, 625–633. [Referensi Silang] [PubMed]

14. Kumar, N.; Goindi, S. Vesikel surfaktan nonionik yang dirancang secara statistik untuk pengiriman dermal itrakonazol: Karakterisasi dan evaluasi in vivo menggunakan model infeksi Tinea pedis standar. Int. J. Farmasi. 2014, 472, 224–240. [Referensi Silang] [PubMed]

15. Cerqueira-Coutinho, C.; Dos Santos, EP; Mansur, CR Niosomes sebagai Nano-Delivery System di Bidang Farmasi. Kritik. Pdt. Carr Narkoba. Sistem. 2016, 33, 195. [Referensi Silang]

16. Ya, MI; Huang, HC; Liaw, JH; Huang, MC; Huang, KF; Hsu, FL Dermal delivery by niosomes of black tea extract as a sunscreen agent. Int. J. Dermatol. 2013, 52, 239–245. [Referensi Silang] [PubMed]

17. Manconi, M.; Sinico, C.; Valenti, D.; Loy, G.; Fadda, AM Niosomes sebagai pembawa tretinoin. I. Persiapan dan properti. Int. J. Farmasi. 2002, 234, 237–248. [Ref Silang] 18. Manconi, M.; Valenti, D.; Sinico, C.; Lai, F.; Loy, G.; Fadda, AM Niosom sebagai pembawa tretinoin: II. Pengaruh penggabungan vesikular pada fotostabilitas tretinoin. Int. J. Farmasi. 2003, 260, 261–272. [Referensi Silang]

19. Kunitake, T.; Takahata, Y. Sebuah membran bilayer sintetis. Selai. kimia Soc. 1977, 99, 3860–3861. [Referensi Silang]

20. Brady, JE; Evans, DF; Kachar, B.; Ninham, BM Gelembung spontan. Selai. kimia Soc. 1984, 106, 4279–4280. [Referensi Silang]

21. Kaler, E.; Murthy, A.; Rodriguez, B.; Zasadzinski, J. Pembentukan vesikel spontan dalam campuran berair dari surfaktan berekor tunggal. Sains 1989, 245, 1371–1374. [Referensi Silang] [PubMed]

22. Kaler, EW; Herrington, Kuala Lumpur; Murthy, AK; Zasadzinski, JAN Fase perilaku dan struktur campuran surfaktan anionik dan kationik. J.Fis. kimia 1992, 96, 6698–6707. [Referensi Silang]

23. Uchegbu, JIKA; Vyas, SP Vesikel berbasis surfaktan non-ionik (niosom) dalam pemberian obat. Int. J. Farmasi. 1998, 172, 33–70. [Referensi Silang]

24. Mahale, NB; Thakkar, PD; Mali, RG; Walunj, DR; Chaudhari, SR Niosomes: Novel rilis berkelanjutan sistem vesikuler stabil nonionik-Sebuah ikhtisar. Lanjut Ilmu Antarmuka Koloid. 2012, 183–184, 46–54. [Referensi Silang] [PubMed]

25. Udupa, N.; Chandraprakash, KS; Umadevi, P.; Pillai, GK Formulasi dan Evaluasi Niosom Methotrexate. Pengembang Narkoba. Komunal. 1993, 19, 12. [Ref Silang]

26. Uchegbu, JIKA; Florence, AT Non-ionic surfactant vesicles (niosomes): Fisik dan kimia farmasi. Lanjut Ilmu Antarmuka Koloid. 1995, 58, 1–55. [Referensi Silang]

27. Yoshioka, T.; Sternberg, B.; Florence, AT Persiapan dan sifat vesikel (niosom) monoester sorbitan (Span 20, 40, 60 dan 80) dan tryster sorbitan (Span 85). Int. J. Farmasi. 1994, 105, 1–6. [Referensi Silang]

28. Manosroi, A.; Wongtrakul, P.; Manosroi, J.; Sakai, H.; Sugawara, F.; Yuasa, M.; Abe, M. Karakterisasi vesikel yang dibuat dengan berbagai surfaktan nonionik yang dicampur dengan kolesterol. Surfing Koloid. B Biointerface 2003, 30, 129–138. [Referensi Silang]

29. Alsarra, IA Evaluasi proteasom sebagai strategi alternatif untuk mengoptimalkan pengiriman transdermal piroksikam. J. Mikroenkapsulasi. 2009, 26, 272–278. [Referensi Silang]

30. Sharma, S.; Das, A.; Dasgupta, A.; Lee, WM; Kim, JO; Oh, DH; Kim, DD; Kim, JS; Yoo, OLEH; Choi, HG; et al. Formulasi dan penilaian in vitro minoxidil niosomes untuk meningkatkan pengiriman kulit. Int. J. Farmasi. 2009, 377, 1–8.

31. Junyaprasert, VB; Singh, P.; Suksiriworapong, J.; Chantasart, D. Sifat fisikokimia dan perembesan kulit Span 60/Tween 60 niosom asam ellagic. Int. J. Farmasi. 2012, 423, 303. [Referensi Silang] [PubMed]

32. Manosroi, A.; Khanrin, P.; Lohcharoenkal, W.; Götz, F.; Manosroi, W.; Manosroi, J. Peningkatan penyerapan transdermal melalui kulit tikus gallidermin dimuat dalam liposom. Int. J. Farmasi. 2010, 392, 304–310. [Referensi Silang] [PubMed]

33. Auda, SH; Fathalla, D.; Fetih, G.; El-Badri, M.; Shakeel, F. Niosom sebagai sistem penghantaran obat transdermal untuk celecoxib: Studi in vitro dan in vivo. Polim. Banteng. 2016, 73, 1229–1245. [Referensi Silang]

34. Manosroi, A.; Jantrawut, P.; Manosroi, J. Aktivitas anti-inflamasi gel yang mengandung niosom elastis baru yang dijebak dengan amonium dietil diklofenak. Int. J. Farmasi. 2008, 360, 156–163. [Referensi Silang] [PubMed]

35. Shahiwala, A.; Misra, A. Studi dalam aplikasi topikal Nimesulide yang biasanya terperangkap. J. Farmasi. Farmasi. Sains. 2002, 5, 220–225. [PubMed]

36. Pardakhty, A.; Varshosaz, J.; Rouholamini, A. Studi in vitro niosom polioksietilen alkil eter untuk pengiriman insulin. Int. J. Farmasi. 2007, 328, 130–141. [Ref Silang] 37. Abdelbary, G.; El-Gendy, N. Niosome-Encapsulated Gentamicin untuk Pengiriman Terkendali Ophthalmic. Aaps Pharmscitech 2008, 9, 740–747. [Referensi Silang] [PubMed]

38. Wadda Abbad, S.; Yu, F.; Munyendo, WLL; Wang, J.; Lv, H.; Zhou, J. Formulasi, karakterisasi dan farmakokinetik niosom hidrat Morin dibuat dari berbagai surfaktan non-ionik. Int. J. Farmasi. 2013, 456, 446–458. [Referensi Silang]

39. Mishra, J.; Swain, J.; Mishra, AK Menyelidiki Perubahan Tergantung Suhu dari Hidrasi Antarmuka dan Viskositas Tween20: Kolesterol (1:1) Membran Niosome menggunakan Fisetin sebagai Probe Molekul Fluorescent. Fisika. kimia kimia Fisika. 2018, 20, 13279–13289. [Referensi Silang]

40. Procházková, D.; Boušová, I.; Wilhelmová, N. Sifat antioksidan dan prooksidan dari flavonoid. Fitoterapia 2011, 82, 513–523. [Referensi Silang]

41. Cherrak, SA; Mokhtari-Soulimane, N.; Berroukeche, F.; Bensenane, B.; Cherbonnel, A.; Merzouk, H.; Elhabiri, M. In Vitro Antioksidan versus Metal Ion Chelating Sifat Flavonoid: Investigasi Struktur-Aktivitas. PLoS SATU 2016, 11, e0165575. [Referensi Silang] [PubMed]

42. Amik, D.; Davidovic-Amic, D.; Beslo, D.; Rastija, V.; Lucic, B.; Trinajstic, N. SAR dan QSAR tentang Aktivitas Antioksidan Flavonoid. Kur. Kedokteran kimia 2007, 14, 827–845. [Referensi Silang] [PubMed]

43. Machado, ND; Fernando, JADI; De Rossi, kanan; Fernandez, MA Cyclodextrin memodifikasi niosom untuk merangkum senyawa hidrofilik. RSC Adv. 2018, 8, 29909–29916. [Referensi Silang]

44. Imran, M.; Syah, MR; Ullah, F.; Ullah, S.; Elhissi, AMA; Nawaz, W.; Ahmad, F.; Sadiq, A.; Ali, I. Nanocarrier liposomal berbasis Glikosida untuk peningkatan kinerja Cefixime in-vivo. Int. J. Farmasi. 2016, 505, 122–132. [Referensi Silang] [PubMed]

45. Hao, Y.; Zhao, F.; Li, N.; Yang, Y.; Li, K. Mempelajari enkapsulasi colchicine yang tinggi dengan sistem yang berisik. Int. J. Farmasi. 2002, 244, 73–80. [Referensi Silang]

46. ​​Anandam, S.; Selvamuthukumar, S. Fabrikasi nanospons siklodekstrin untuk pengiriman Quercetin: karakterisasi fisikokimia, photostability, dan efek antioksidan. J.Mater. Sains. 2014, 49, 8140–8153. [Referensi Silang]

47. Lv, X.; Liu, T.; Ibu, H.; Tian, ​​Y.; Li, L.; Li, Z.; Gao, M.; Zhang, J.; Tang, Z. Persiapan Mikroemulsi Berbasis Minyak Atsiri untuk Meningkatkan Kelarutan, Stabilitas pH, Fotostabilitas, dan Permeasi Kulit Quercetin. AAPS PharmSciTech 2017, 18, 3097–3104. [Referensi Silang]

48. Azzi, J.; Jraij, A.; Auezova, L.; Fourmentin, S.; Greige-Gerges, temuan H. Novel untuk enkapsulasi dan pengawetan Quercetin dengan siklodekstrin, liposom, dan obat-dalam-siklodekstrin-dalam-liposom. Makanan HydroColloid 2018, 81, 328–340. [Referensi Silang]

49. Smith, GJ; Thomsen, SJ; Markham, KR; Andary, C.; Cardon, D. Fotostabilitas dari 5-hidroksi flavon, flavonol, glikosidanya, dan kompleks aluminiumnya yang terjadi secara alami. J. Photochem. Fotobiol. Kimia. 2000, 136, 87–91. [Referensi Silang]

50. Kubo, I.; Kinsthori, I. Flavonols dari bunga saffron: Aktivitas penghambatan dan mekanisme penghambatan tirosinase. J.Agri. Makanan Kimia. 1999, 47, 4121–4125. [Referensi Silang]

51. Kim, YJ; Uyama, penghambat H. Tyrosinase dari sumber alami dan sintetis: Struktur, mekanisme penghambatan, dan perspektif untuk masa depan. Sel. Mol. Sains Kehidupan. 2005, 62, 1707–1723. [Referensi Silang] [PubMed]

52. Kim, D.; Taman, J.; Kim, J.; Han, C.; Yoon, J.; Kim, N.; Seo, J.; Lee, C. Flavonoid sebagai Penghambat Tyrosinase Jamur: Sebuah Studi Quenching Fluoresensi. J.Agri. Makanan Kimia. 2006, 54, 935–941. [Referensi Silang] [PubMed]

53. Kipas, M.; Zhang, G.; Hu, X.; Xu, X.; Gong, D. Quercetin sebagai penghambat tirosinase: Aktivitas penghambatan, perubahan konformasi, dan mekanisme. Makanan Res. Int. 2017, 100, 226–233. [Referensi Silang] [PubMed]

54. Didem ¸Söhreto ˘glu Suat, S.; Burak, B.; Özel, A. Penghambatan tirosinase oleh beberapa flavonoid: Aktivitas penghambatan, mekanismenya dengan studi in vitro dan silico. Bioorg. kimia 2018, 81, 168–174. [Referensi Silang] [PubMed]

55. Gopinath, D.; Ravi, D.; Karwa, R.; Rao, B.; Shashank, A.; Rambhau, D. Farmakokinetik Zidovudine Mengikuti Pemberian Bolus Intravena dari Persiapan Novel Niosome tanpa Kolesterol. Arzneimittelforschung 2011, 51, 924–930. [Referensi Silang] [PubMed]

56. Ghosh, S.; Ghatak, C.; Banerjee, C.; Mandal, S.; Kuchlyan, J.; Sarkar, N. Transisi Spontan dari Micelle-Vesicle-Micelle dalam Campuran Surfaktan Kationik dan Cairan Ionik Seperti Surfaktan Anionik: Template Vesikular Unilamellar Kecil Nonlipid Murni yang Digunakan untuk Pelarut dan Studi Relaksasi Rotasi. Langmuir 2013, 29, 10066–10076. [Referensi Silang]

57. Sakai, T.; Ikoshi, R.; Toshida, N.; Kagaya, M. Formasi Vesikel Stabil Secara Termodinamik dan Transisi Vesikel ke Misel dari Surfaktan Anionik Ekor Tunggal dalam Air. J.Fis. kimia B 2013, 117, 5081. [Ref Silang]

58. Ghosh, S.; Mondal, S.; Pan, A.; Mitra, RK; Ghosh, S. Cairan ionik yang dimediasi misel menjadi transisi vesikel dari surfaktan gemini kationik: Investigasi spektroskopi. Materi Lunak 2018, 14, 4185–4193.

59. Mukherjee, B.; Patra, B.; Layek, B.; Mukherjee, A. Pelepasan asiklovir yang berkelanjutan dari nano-liposom dan nano-liposom: Sebuah studi in vitro. Int. J. Nanomed. 2007, 2, 213–225.

60. Blois, MS Penentuan Antioksidan dengan Penggunaan Radikal Bebas yang Stabil. Alam 1958, 181, 1199–1200. [Referensi Silang]

61. Rui, Y.; Ying, G.; Weixin, W.; Chen, H.; Dia, Z.; Jia, A.-Q. Kapasitas antioksidan fenolat pada bunga Camellia nitidissima Chi dan identifikasinya dengan HPLC Triple TOF MS/MS. PLoS ONE 2018, 13, e0195508.

Ketersediaan Sampel:

Sampel senyawa tidak tersedia dari penulis.

© 2019 oleh penulis. Penerima Lisensi MDPI, Basel, Swiss. Artikel ini adalah artikel akses terbuka yang didistribusikan berdasarkan syarat dan ketentuan lisensi Creative Commons Attribution (CC BY) (http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/).

Diterima: 2 April 2019; Diterima: 21 Juni 2019; Diterbitkan: 24 Juni 2019

For more information:1950477648nn@gmail.com