N-Succinyl-S-Farnesyl-L-Cysteine ​​(SFC): Analog Isoprenylcysteine ​​​​Novel Dengan Aktivitas Anti-Peradangan In Vitro Dan Sifat Pelindung Kulit Klinis

Mohon hubungi{0}}untuk informasi lebih lanjut

Abstrak:Selama 15 tahun terakhir, analog isoprenylcysteine ​​​​(IPC) molekul kecil telah diidentifikasi sebagai kelas baru antiinflamasi topikal yang potensial. Studi klinis telah menunjukkan bahwa IPC aman dan efektif dalam mempromosikan kulit yang sehat ketika dioleskan. Karya ini bertujuan untuk mendemonstrasikan N-Succinyl-S-farnesyl-L-cysteine ​​(SFC) sebagai molekul IPC baru yang memberikan spektrum manfaat yang luas untuk kulit. Garis sel promyelocytic manusia HL -60, sel endotel mikrovaskular dermal manusia (HDMECs), fibroblas dermal manusia (HDFs), dan keratinosit epidermal manusia normal (NHEKs) terpapar dalam kultur ke berbagai penginduksi untuk memicu spesies oksigen reaktif, sitokin, atau produksi kolagenase. Sebuah 49-subjek acak double-blind, kendaraan-kontrol, percobaan split-face dilakukan dengan 1 persen SFC gel, atau 5 persen Niacinamide, dan kendaraan diterapkan selama 12 minggu untuk mengevaluasi anti-kerut dan anti-penuaan titik akhir. Kami menunjukkan bahwa SFC menghambat pelepasan sitokin pro-inflamasi yang diinduksi GPCR dan TLR di NHEK dan HDMEC dari beberapa penginduksi inflamasi seperti UVB, bahan kimia, cathelicidin, dan bakteri. SFC berhasil mengurangi oksidasi yang diinduksi GPCR pada neutrofil yang berbeda. Selain itu, studi photoaging menunjukkan bahwa SFC mengurangi produksi kolagenase (pro-MMP-1) yang diinduksi UVA pada HDF. Penilaian klinis gel SFC 1 persen menunjukkan peningkatan di atas sarana untuk pengurangan kerutan, hidrasi, tekstur, dan penampilan kulit secara keseluruhan. N-Succinyl-S-farnesyl-L-cysteine ​​(SFC) adalah molekul kecil anti-inflamasi baru dan merupakan IPC farnesyl-cysteine ​​​​pertama yang terbukti secara klinis meningkatkan penampilan dan tanda-tanda penuaan, sementara juga memiliki potensi untuk memperbaiki gangguan kulit inflamasi .

Silakan klik di sini untuk tahu lebih banyak

Kata kunci:isoprenilsistein; anti penuaan; kosmetik; reseptor berpasangan G-protein; reseptor seperti tol

1. Perkenalan

Analog molekul kecil isoprenylcysteine ​​(IPC) telah diidentifikasi sebagai kelas baru yang potensial dari anti-inflamasi topikal. Analog IPC mengandung 15-atau 20-rantai samping karbon yang melekat pada asam amino sistein, meniru C-terminus protein CAAX yang diproses, yang penting untuk penargetan membran heterotrimerik dan protein G kecil yang memediasi sinyal reseptor dalam sel eukariotik. Analog IPC menghambat aktivasi sinyal pada kompartemen membran dengan bersaing dengan kelompok isoprenoid untuk situs pengikatan prenil [1,2] dan dengan mengganggu transduksi sinyal dengan mencegah pembentukan protein G heterotrimerik dan/atau mungkin dengan memblokir interaksi efektor protein G hilir [ 3-5].

Sejak penemuan awal N-Acetyl-S-farnesyl-L-cysteine ​​(AFC) sebagai analog IPC pertama yang secara efektif menurunkan respons inflamasi pada trombosit, makrofag, dan neutrofil[6-8], beberapa analog IPC yang berbeda telah ditemukan dan dilaporkan menyediakan berbagai aktivitas yang berbeda pada kulit, termasuk penghambatan pelepasan sitokin pro-inflamasi yang diinduksi G-protein (GPCR), edema, dan infiltrasi neutrofil ketika dioleskan [9]. Misalnya, N-acetylglutaminoyl-S-farnesyl-L-cysteine ​​(SIG-1191) menunjukkan sifat anti-inflamasi dan hidrasi pada keratinosit manusia dan kulit 3D manusia [10]. Studi yang lebih baru menunjukkan bahwa analog IPC juga benar-benar menunjukkan peradangan yang dimediasi non-G-protein pada keratinosit epidermis manusia, fibroblas dermal manusia, sel endotel dermal manusia, dan sel mononuklear darah perifer dengan membatalkan reseptor seperti tol 2,4, dan 6 ( Sinyal TLR2,TLR4,TLR6) dan reseptor sel T (TCR)[11,12]. Selanjutnya, analog phytyl-cysteine ​​​​IPC juga telah terbukti efektif secara klinis melawan jerawat [13] dan penuaan kulit [14], menyoroti efektivitas kelas senyawa ini dalam memblokir peradangan kulit, dan memperbaiki kondisi kulit yang berbeda ketika dioleskan.

Cistanche dapat anti-penuaan

Di sini, dilaporkan bahwa novelIPCanalogN-Succinyl-S-farnesyl-L-cysteine ​​(SFC) (Gambar S1) memiliki berbagai sifat anti-inflamasi dan pelindung kulit untuk membantu memperlambat peradangan dan penuaan dengan mekanisme aksi yang sebelumnya tidak diketahui. Studi yang menggunakan sel endotel dermal menunjukkan bahwa SFC menghambat cathelicidin (L-37) peradangan yang diinduksi GPCR. Selain itu, studi in vitro pada keratinosit epidermis menunjukkan bahwa SFC berhasil menghambat pelepasan sitokin pro-inflamasi dari beberapa stresor lingkungan seperti UVB, bahan kimia, dan bakteri.cistanche tubulosa dosis redditStudi photoaging menunjukkan bahwa SFC dapat berhasil mengurangi produksi kolagenase (pro-MMP-1) yang diinduksi UVA pada fibroblas dermal. Mengingat profil aktivitas multi-fungsi di kulit ini, kami kemudian menguji SFC secara klinis dalam studi split face, double-blind, terkontrol kendaraan, dan menunjukkan bahwa 1 persen gel SFC ditoleransi dengan baik dan secara signifikan mengungguli kendaraan yang menunjukkan peningkatan signifikan di semua titik akhir klinis , termasuk pengurangan kerut, hidrasi, dan penampilan kulit secara keseluruhan.

2. Bahan-bahan dan metode-metode

2.1.Bahan Kimia dan Reagen

All reagents were purchased from Sigma Chemical Co. (St. Louis,MO, USA).Organic solvents were purchased from Fisher Scientific (Hampton, NH, USA). SFC was synthesized according to methods as described in US patent US10314802B2. All chemicals were ana-lyzed by LC/MS (Agilent 1100), H,and l3CNMR (500 MHz and 125 MHz, Bruker) for structural identity,and confirmed to be >95 persen murni dengan HPLC analitis (Agilent 1200). 2.2.Perawatan Sel

Sel HL-60 (CCL-240TM) diperoleh dari American Type Culture Collection (ATCC; Manassas,VA, USA), ditumbuhkan dalam kultur suspensi, dan diinduksi untuk berdiferensiasi menjadi bentuk myeloid matang (dHL{ {2}}) dengan penanaman dengan adanya 1,3 persen (y/v) dimetil sulfoksida (DMSO)[15]. Uji burst dilakukan seperti yang dijelaskan sebelumnya [16]. Secara singkat dHL-60 (2×10 derajat sel/mL) diinkubasi dengan formil-Met-Leu-Phe-OH((MLP) untuk menginduksi pelepasan superoksida dari neutrofil. Deteksi anion superoksida diukur dengan reduksi ferricytochrome c ke ferrocytochrome c dengan membaca absorbansi pada 550 nm. Campuran reaksi uji dibuat dalam Hanks' Balanced Salt Solution (HBSS) dengan 160 uM sitokrom c, 100 U/mL superoksida dismutase (SOD), dan 16 uM TPA ({ {18}}O-Tetradecanoylphorbol 13-asetat) Absorbansi diukur dalam pembaca pelat pada 550 nm sebagai titik akhir (setelah 20 menit pemaparan).

Sel primer manusia yang diperoleh dari donor neonatus dibeli dari Ther-moFisher (NHEKs, HDFs; Carlsbad, CA, USA) dan ScienCell (HDMECs; Carlsbad, CA, CA, USA). Sel (1 × 1 0 sel derajat /mL) ditumbuhkan pada kondisi normal (5 persen CO2; 37 derajat), dan kemudian diinkubasi selama 2 jam dengan senyawa (0,1 persen v/v kendaraan etanol) dalam media segar yang kekurangan faktor pertumbuhan dalam rangkap tiga. NHEK diinduksi oleh 5 ng/mL TPA, 25 m//cm2 broadband 305 ± 12 nm UVB (Daavlin; Bryan, OH, USA) atau 10 ug/mL peptidoglikan. HDMEC dan HDF diinduksi dengan 10 ug/mL LL-37(Tocris Bioscience; Bristol, UK) dan broadband 12,5J/cm2 350±12 nm UVA (Daavlin; Bryan, OH, USA), masing-masing. Sel menjadi sasaran uji viabilitas dengan senyawa tetrazolium [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-( 4-sulfofenil)-2H-tetrazolium, garam bagian dalam; MTS] assay (Promega; Madison, WI, USA). Supernatan media dipanen setelah induksi 24 jam untuk pengukuran sitokin (TNF-, IL-6, IL-8) dan kolagenase (pro-MMP-1).

2.3.Enzyme-Linked Immunosorbent Assays (ELISA)

Tingkat sitokin manusia dan kolagenase diukur dari supernatan media kultur jaringan dengan sandwich ELISA, menggunakan standar yang sesuai dan mengikuti protokol pabrik. Kit IL-6 dan IL-8 dibeli dari BD Biosciences (San Jose, CA, USA). Kit Pro-MMP-1 dan TNF- dibeli dari R&D Systems Inc. (Minneapolis, MN, AS).

2.4.Studi Klinis

Uji klinis pada sukarelawan sehat dilakukan di SGS Stephens (Studi# C20-J156; Tokyo, JP), dan persetujuan tertulis yang sesuai dengan International Council for Harmonization (ICH) E6(r2) Bagian 4.8.10 diperoleh dari setiap mata pelajaran. Ini adalah penelitian tunggal dengan pusat, split face, double-blind vehicle-controlled dengan total 49 wanita Jepang yang menyelesaikan penelitian 12-minggu. Subyek ditugaskan ke salah satu dari dua sel pengobatan, sesuai dengan pengacakan yang telah ditentukan. Dalam setiap sel, subjek diacak lebih lanjut untuk menggunakan SFC atau niacinamide di satu sisi wajah, dan kontrol kendaraan di sisi lain dari wajah (sel 1: 31 subjek menerima 1 persen gel dan kendaraan SFC, dan sel 2:18 subjek menerima 5 persen niacinamide gel dan kendaraan) (Lihat Tabel S1 untuk daftar bahan lengkap).berapa banyak cistanche yang harus diambil?Penelitian ini dilakukan berdasarkan "Pedoman Evaluasi Produk Anti-Kerut" oleh Japanese Cosmetic Science Society. Subyek menerapkan bahan tes ke sisi yang ditetapkan dari area kaki gagak dan seluruh setengah wajah 2x sehari. Subyek melakukan aplikasi pertama dari bahan uji di klinik setelah menyelesaikan evaluasi dasar. Evaluasi klinis dilakukan pada kunjungan pertama (awal dan 15 menit pasca-aplikasi), kunjungan kedua (minggu 8) dan kunjungan ketiga (minggu 12).cistancheKondisi kerutan kaki gagak dipilih dalam rentang ringan hingga sedang (skor {{0}} menurut skala Japanese Society of Cosmetic Chemists (JSCC) di mana0=tidak ada dan7=kedalaman yang signifikan kerutan diamati). Penilaian klinis parameter efikasi dinilai secara terpisah di sisi kanan dan kiri wajah global menggunakan skala poin Griffith 10-yang dimodifikasi, dengan skor setengah poin ditetapkan seperlunya (0—tidak ada (kondisi terbaik),1 hingga 3= ringan,4 hingga 6=sedang,7 hingga 9=berat (kondisi terburuk yang mungkin)). Parameter kemanjuran dinilai menurut jangkar skala yang terdaftar di Tabel 1.

2.5.Analisis Statistik

Signifikansi statistik ditentukan dengan ANOVA diikuti dengan uji perbandingan berganda Dunnett menggunakan nilai-p kurang dari 0.05 sebagai perbedaan yang signifikan. Untuk semua pengukuran antibakteri dan kadar sitokin, sampel diuji dalam rangkap tiga. Kurva dosis-respons sitokin dihasilkan dengan mencocokkan data dengan Hill, persamaan tiga parameter menggunakan perangkat lunak Sigma Plot (Systat Software Inc., Chicago, IL, USA), dari mana IC50 dan penghambatan maksimum ditentukan.

3. Hasil

3.1. SFC Menghambat Stres dan Peradangan Oksidatif yang Diinduksi GPCR

Reseptor peptida formil-1(FPRL1) adalah GPCR yang terletak di permukaan neutrofil dan sel endotel yang memainkan peran penting dalam menanggapi sejumlah besar rangsangan inflamasi[17]. Misalnya, N-Formyl Methionyl-leucyl-phenylalanine (fMLP) adalah peptida kemotaktik yang mengikat FPRL1 merekrut neutrofil, dan pada saat kedatangan mereka, memicu pelepasan spesies oksigen reaktif (ROS) yang cepat dan berbagai fungsi antimikroba [18] . Namun, jika perekrutan neutrofil berlanjut, disregulasi signifikan dari kaskade inflamasi terjadi, yang berimplikasi pada infiltrasi neutrofil dalam patogenesis rosacea dan beberapa penyakit kulit lainnya. Cathelicidin (LL-37) adalah ligan FPRL1 lain dengan aktivitas pleiotropik, termasuk sifat antimikroba, perekrutan, dan peradangan yang telah dikaitkan dengan dermatitis atopik, psoriasis, dan rosacea [20].apa itu cistanche?Dengan demikian, kami berusaha untuk menyelidiki apakah SFC dapat berhasil memodulasi FPRL1-meledak oksidatif dan peradangan yang dimediasi. Menggunakan neutrofil terdiferensiasi (DHL-60)[21], fMLP ditambahkan untuk memulai ROS, dan hasilnya menunjukkan bahwa SFC secara efektif memblokir pembentukan superoksida dengan cara yang bergantung pada dosis IC50=25 M）（Gambar 1A） dengan efek non-toksik Gambar S2）. Selain itu, sel endotel mikrovaskular dermal manusia (HDMECs) yang diobati dengan 10 ug/mL LL-37 menginduksi produksi berlebih dari sitokin pro-inflamasi IL-6. Pengobatan dengan SFC menghambat pelepasan IL-6 tergantung dosis sebesar 100 persen (Gambar 1B) dengan efek non-toksik (Gambar S2) dan potensi serupa (IC50=2 uM) dengan obat eksim FK{{ 19}} (IC50=1 uM), dan secara signifikan lebih baik daripada perawatan rosacea metronidazole(IC50=14 uM) dan asam azelaic (IC50 =100 uM). Klobetasol glukokortikoid topikal menunjukkan aktivitas anti-inflamasi terkuat seperti yang diharapkan IC50=0.08 M; data tidak ditampilkan）.

3.2. SFC Melindungi terhadap UVA dan UVB-Induced Photoaging

Sinar ultraviolet (UV) adalah pemicu stres lingkungan umum yang menyerang kulit kita setiap hari. Panjang gelombang UVA yang lebih panjang (320-400 nm) menembus jauh ke dalam dermis, sementara panjang gelombang yang lebih pendek, energi yang lebih tinggi, UVB (290-320 nm) terutama mempengaruhi epidermis kita.

Secara khusus, UVA menginduksi sekresi matriks metaloproteinase (MMPs), yang memainkan peran utama dalam photoaging kulit [22]. MMP-1, juga dikenal sebagai kolagenase interstisial, memecah kolagen (Tipe I, II, dan III), berkontribusi pada munculnya garis-garis halus dan kerutan. Untuk menentukan potensi anti-kerut SFC, kami menyaring kemampuannya untuk mengurangi pelepasan pro-MMP-1 yang diinduksi UVA dari fibroblas dermal manusia (HDF). SFC yang bergantung pada dosis menghambat produksi pro-MMP-1 yang menunjukkan potensi luar biasa dengan ICso=10 pM (Tabel 2) dengan efek non-toksik (Gambar S2), sementara bahan aktif anti-penuaan kosmetik seperti asam askorbat dan a-tokoferol tidak mengurangi pelepasan pro-MMP-1 pada tingkat konsentrasi tertinggi yang diuji (Tabel 2). Mirip dengan UVA, paparan UVB yang lama memicu kaskade peradangan dan produksi sitokin pro-inflamasi yang memainkan peran kunci dalam penuaan kulit akibat sinar matahari [23]. Secara khusus, keratinosit epidermis manusia normal yang terpapar UVB memicu pelepasan interleukin-6 (IL-6) dan tumor necrosis factor-a (TNF-a), yang juga dikaitkan dengan kulit kering [24] . Hasil kami menunjukkan bahwa SFC memblokir pelepasan IL-6 dan TNF-x dengan cara yang bergantung pada dosis dengan ICso=10 pM dan 100 pM, masing-masing, dengan efek tidak beracun (Gambar S2).bioflavonoidSelain itu, potensi kuat ini 4-5 kali lipat lebih besar daripada yang diamati untuk asam askorbat dan -tokoferol yang juga menunjukkan sifat anti-inflamasi (Tabel 2).

3.3.SFC Melindungi dari Peradangan yang Diinduksi Kimia dan Bakteri

Selain sinar UV dari sinar matahari, banyak pemicu stres lingkungan eksogen lainnya yang memicu peradangan pada kulit, dan dapat mempercepat proses penuaan kulit secara alami jika dibiarkan tanpa perlindungan. Dua penyebab tersebut adalah bahan kimia dan bakteri. 12-O-tetradecanoyl--phorbol-13-acetate (TPA) adalah bahan kimia iritan yang umum digunakan untuk menguji aktivitas anti-inflamasi topikal in vivo [9]. Selain itu, penelitian sebelumnya menunjukkan keratinosit epidermal manusia normal (NHEKs) yang diobati dengan TPA menghasilkan peningkatan produksi beberapa mediator pro-inflamasi [25,26]. Uji NHEK berbasis sel kami menunjukkan induksi TPA signifikan yang konsisten dari TNF-a, dan bahwa SFC menghambat pelepasannya dengan cara yang bergantung pada dosis dengan IC50=0.75 uM (penghambatan maksimum 70 persen )(Gambar 2A) dengan efek non-toksik (Gambar S2). Sementara itu, clobetasol glukokortikoid anti-inflamasi yang diuji pada 3 uM menunjukkan penghambatan maksimum hanya 58 persen, menunjukkan bahwa SFC lebih kuat dalam pengujian spesifik ini.

TLRs memainkan peran penting dalam kulit yang mengatur respon imun bawaan terhadap patogen, dan pensinyalan TLR2 secara khusus telah terbukti memainkan peran kunci dalam patogenesis beberapa penyakit dermatologis [27]. Peptidoglikan (PGN) adalah produk dinding sel bakteri dan ligan reseptor seperti tol-2(TLR2). Hasil kami menunjukkan bahwa SFC yang bergantung pada dosis mengurangi pelepasan interleukin-8 (IL-8) ​​yang diinduksi PGN di NHEK dengan ICso=0.8 uM, sebanding dengan clobetasol dengan IC{{11 }} M Gambar 2B）.

3.4. SFC Mengurangi Kerutan dan Memperbaiki Beberapa Parameter Kulit Lainnya pada Subyek Manusia Fotoaging kulit wajah adalah salah satu dari beberapa faktor yang berkontribusi terhadap tanda-tanda visual penuaan, dan ditandai dengan adanya garis-garis halus, kerutan, dan perubahan pigmentasi. Data yang dilaporkan di sini menunjukkan bahwa aktivitas anti-inflamasi, anti-penuaan, dan perlindungan ledakan oksidatif SFC in vitro bisa efektif dalam memperlambat penuaan dan peradangan kulit dini ketika dioleskan ke subjek manusia. Jadi, kami berusaha untuk mengevaluasi SFC secara klinis untuk menilai aktivitasnya pada aplikasi topikal. SFC diformulasikan pada 1 persen dalam gel, dan dievaluasi dalam studi dengan kontrol kendaraan, buta ganda, di mana itu diterapkan dua kali per hari selama 12 minggu. Sebelum penelitian ini, gel SFC diuji dalam 100 subjek uji tempel penghinaan berulang pada manusia dan terbukti aman untuk kulit (data tidak ditampilkan).

Sebanyak 49 wanita menyelesaikan penelitian dengan semua subjek menggunakan kendaraan di satu sisi wajah mereka, dan untuk sisi lain, 31 subjek menggunakan 1 persen gel SFC; 18 subjek sisanya menggunakan 5 persen niacinamide sebagai pembanding, seperti yang sebelumnya telah terbukti memperbaiki penampilan kulit wajah [28]. Hasil penilaian klinis kerutan di area kaki gagak menunjukkan peningkatan yang signifikan secara statistik dari awal dan pembawa pada minggu ke 8 dan 12 untuk 1 persen gel SFC, sementara 5 persen niacinamide hanya menunjukkan peningkatan yang signifikan pada minggu ke 12 (Gambar 3). Pada minggu 8,1 persen gel SFC menunjukkan peningkatan~32 persen, sementara 5 persen niacinamide dan pembawa hanya menunjukkan~11 persen dan~6 persen peningkatan masing-masing (Gambar 3). Selain pengurangan kerutan, gel SFC 1 persen secara signifikan mengungguli kendaraan di beberapa titik akhir lainnya, termasuk tekstur (taktil) dan hidrasi (visual) pada minggu ke 8 dan 12 cahaya/luminositas/kecerahan, dan tekstur (visual) pada minggu ke-12, dan secara keseluruhan munculnya kondisi kulit (sehat) pada wajah pasca aplikasi (Tabel 3). Selain itu, di beberapa titik akhir, gel SFC 1 persen tidak hanya mengungguli kendaraan, tetapi juga niacinamide. Misalnya, analisis parameter pancaran/luminositas/kecerahan pada minggu ke-12 mengungkapkan bahwa subjek yang menggunakan gel SFC 1 persen menunjukkan peningkatan ~52 persen yang signifikan secara statistik dibandingkan dengan hanya ~22 persen untuk mereka yang menggunakan 5 persen niacinamide (Tabel 3). Gel SFC 1 persen juga secara signifikan mengungguli 5 persen niacinamide pada minggu ke-8 untuk hidrasi (~42 persen versus~3 persen )(Tabel3). Terakhir untuk titik akhir kekencangan kulit (taktil), meskipun tidak secara signifikan mengungguli kendaraan, gel SFC 1 persen menunjukkan peningkatan yang signifikan secara statistik sebesar 19 persen dari baseline (nilai p {{40}}.031), sedangkan kulit yang dirawat dengan kendaraan saja meningkat sebesar~10 persen (nilai p 0,063), dan 5 persen kelompok perlakuan niacinamide menunjukkan peningkatan 0 persen. Secara keseluruhan, hasil ini menunjukkan SFC ketika dioleskan secara klinis meningkatkan tanda-tanda penuaan dan meningkatkan kesehatan kulit.

4. Diskusi

Molekul IPC pertama, N-acetyl-S-farnesyl-L-cysteine ​​(AFC) ditemukan lebih dari 30 tahun yang lalu [6,29], dan kemudian terbukti efektif mengurangi edema dan infiltrasi neu-trofil bila dioleskan in vivo model hewan peradangan dan hipersensitivitas kontak [9]. Beberapa turunan farlnesyl-cysteine ​​​​lainnya telah dilaporkan berhasil menghambat peradangan dan pelepasan stres oksidatif [21]. Selain itu, molekul IPC jauh lainnya, SIG -1191, telah terbukti memiliki aktivitas anti-inflamasi di NHEK, dan aktivitas pelembab potensial ketika dioleskan ke kulit manusia 3D [10] Secara keseluruhan, hasil ini menyoroti potensi untuk golongan senyawa ini digunakan untuk memperbaiki kondisi kulit dan/atau mengobati penyakit kulit. Terlepas dari profil aktivitas in vitro dan in vivo yang menjanjikan, tidak ada senyawa IPC terfarnesilasi yang telah diuji secara klinis untuk aktivitasnya. Jadi, kami berusaha untuk menentukan untuk pertama kalinya aktivitas farnesilasi IPC N-Succinyl-S-farnesyl-L-cysteine ​​(SFC) dalam studi klinis, dan untuk mulai menjelaskan mekanisme kerjanya untuk menjelaskan manfaat ini.

Molekul IPC telah dilaporkan memodulasi GPCRs, reseptor seperti tol (TLRs), dan peroksisom proliferator-activated receptor gamma (PAR-y) signaling [30]; Namun, mekanisme efek anti-inflamasi ini tidak dipahami dengan baik. Memanfaatkan sel endotel mikrovaskular dermal, AFC sebelumnya terbukti menghambat pensinyalan inflamasi GPCR purinergik (pelepasan sitokin yang diinduksi reseptor ATP-P2Y) [31]. Selain itu, SIG-1191 ditunjukkan untuk mengontrol ekspresi penanda hidrasi kulit aquaporin 3 (AQP3) melalui jalur protein kinase/ekstraseluler yang diatur sinyal (MEK) yang diaktifkan oleh mitogen [10]. Selain itu, senyawa IPC SIG-1273 dan SIG-1459 mengatur pensinyalan TLR dan reseptor sel T (TCR), yang memainkan peran penting dalam patogenesis akne dan dermatitis atopik [11,12]. Di sini, kami menunjukkan bahwa SFC memodulasi pensinyalan GPCR-FPRL1 dengan berhasil memblokir pelepasan pro-inflamasi FPRL1 yang diinduksi cathelicidin (LL-37) di HDMECs. Dengan secara khusus menargetkan mediator inflamasi yang dilepaskan oleh HDMECs, SFC dapat menjadi inhibitor ampuh peradangan kronis, karena IL{26}} memainkan peran penting dalam beberapa mekanisme dan gangguan kulit, termasuk penyembuhan luka [32]. Selanjutnya, mediator inflamasi yang diturunkan dari sel epitel telah disarankan untuk berperan dalam rosacea dan psoriasis oleh LL-37 [33,34], yang merupakan molekul efektor penting dalam penyakit kulit ini, serta dermatitis atopik [20 ]. Seperti yang dilaporkan di sini, baik obat anti-inflamasi rosacea metronidazol (IC=o=14 uM) dan asam azelaic (IC50 =100 uM), serta pengobatan dermatitis atopik FK{{37} } (IC50 =1 uM), mengurangi pelepasan sitokin yang diinduksi LL-37-FPRL1-dengan potensi yang berbeda. SFC menampilkan potensi yang mirip dengan FK-506, mengungguli kedua senyawa obat rosacea, dan menghambat pelepasan ROS yang diinduksi FPRL-1- (Gambar 1A) dari neutrofil. Secara keseluruhan, data ini menunjukkan kemampuan molekul IPC untuk berinteraksi pada berbagai jalur pensinyalan dan tipe sel yang berbeda yang penting untuk peradangan kulit. Untuk tujuan ini, selama ~ 20 tahun terakhir, TLR2 telah muncul sebagai reseptor penting dalam gangguan kulit inflamasi seperti jerawat, rosacea, dermatitis atopik, dan lain-lain [27,35-37]. Diekspresikan di kulit kita, TLR2 adalah bagian dari lini pertama pertahanan kekebalan inang sebagai respons terhadap patogen yang menyerang. Pensinyalan TLR2 bekerja di hulu GPCR, TCR, dan PPAR yang sebelumnya terbukti dimodulasi oleh analog IPC. Hasil yang disajikan di sini menunjukkan bahwa SFC secara potensial menghambat pelepasan IL-8 yang diinduksi PGN-TLR-8 dari NHEK (Gambar 2B), dan berhasil mengurangi pelepasan TNF-a yang diinduksi TPA dalam keratinosit (Gambar 2A). TPA dikenal sebagai aktivator protein kinaseC (PKC), yang juga memainkan peran penting dalam pensinyalan GPCR. Dengan demikian, SFC juga dapat menghambat respons pensinyalan inflamasi di hilir pelepasan sitokin yang diinduksi PKC di NHEK.

Peradangan kronis adalah pemain kunci dalam mendorong penyakit kulit dan penuaan. Seperti yang dilaporkan di sini, selain menghambat sinyal inflamasi yang diinduksi GPCR dan TLR, SFC juga memblokir peradangan yang diinduksi UVB dan UVA, serta produksi MMP-1 di fibroblas, yang mendegradasi kolagen dan mempercepat penuaan kulit [22]. Produksi MP-1 diatur dengan meningkatkan aktivitas MAP kinase/AP-1 [38]. Mengingat kemampuan SFC untuk memberikan aktivitas anti-inflamasi pada keratinosit dan sel endotel, dan memperlambat stres oksidatif dan penuaan foto pada neutrofil dan fibroblas dermal, kami berhipotesis bahwa spektrum aktivitas SFC yang luas akan bermanfaat bagi kulit manusia bila dioleskan. Data klinis yang disajikan di sini menunjukkan bahwa gel SFC 1 persen secara signifikan mengurangi kerutan, meningkatkan hidrasi, tekstur kulit, mencerahkan kulit, dan penampilan kulit yang sehat secara keseluruhan lebih baik daripada kendaraan. Hasil ini sangat menarik, mengingat sebagian besar studi klinis kosmetik dilakukan tanpa kontrol kendaraan. Lebih jauh lagi, sifat mempromosikan kesehatan kulit SFC dalam kasus tertentu menunjukkan peningkatan yang signifikan lebih dari 5 persen niacinamide, bahan acuan kosmetik anti-penuaan dan anti-inflamasi (Tabel 3). Sementara studi tambahan masih harus dilakukan untuk lebih menjelaskan mekanisme aksi SFC yang berkaitan dengan peradangan kulit dan penuaan, kami mengusulkan di sini hipotesis kerja tentang bagaimana SFC menganugerahkan kegiatan mempromosikan kesehatan kulit yang mengatur beberapa target, termasuk pensinyalan TLR dan GPCR ( Gambar 4). Secara keseluruhan, hasil ini menunjukkan SFC secara klinis meningkatkan tanda-tanda penuaan, dan mungkin efektif dalam meningkatkan kesehatan kulit dan memerangi beberapa gangguan dermal inflamasi.

Artikel ini disarikan dari Cosmetics 2021, 8, 110. https://doi.org/10.3390/cosmetics8040110 https://www.mdpi.com/journal/cosmetics