Surel:{0}}

Aktivitas Peningkatan Antidepresan Dan Kognitif Dari Cistanche Ramuan Tradisional Cina

Dongfang Wang,1 Haizhen Wang,2 dan Li Gu2

1Laboratorium Kunci Negara Bagian Biokontrol, Institut Hewan Ekonomi Perairan dan Laboratorium Kunci Provinsi Guangdong untuk Hewan Ekonomi Perairan, Sekolah Ilmu Hayati, Universitas Sun Yat-sen, Guangzhou 510275, Cina

2Pusat Penelitian Teknik Pangan dan Kesehatan Kementerian Pendidikan Negara, Universitas Sun Yat-sen, Guangzhou 510275, Tiongkok

Korespondensi harus ditujukan kepada Li Gu; Diterima 20 Februari 2017; Revisi 11 Mei 2017; Diterima 28 Mei 2017; Diterbitkan 28 Juni 2017 Editor Akademik: Ki-Wan Oh Hak Cipta © 2017 Dongfang Wang et al. Ini adalah artikel akses terbuka yang didistribusikan di bawah Lisensi Atribusi Creative Commons, yang mengizinkan penggunaan, distribusi, dan reproduksi tanpa batas dalam media apa pun, asalkan karya aslinya dikutip dengan benar. Lebih dari sepuluh persen orang menderita setidaknya satu episode depresi dan gangguan mental terkait dalam seumur hidup, dan depresi dan gangguan mental terkait adalah salah satu masalah kesehatan masyarakat terbesar di dunia. Sebuah teori sistem ganda menyatakan bahwa disregulasi sistem ganda mendasari patogenesis depresi dan gangguan mental terkait, dan terapi baru berdasarkan teori disregulasi sistem ganda sangat dibutuhkan. Dalam penelitian ini, efek antidepresan rebusan dari ramuanBentengdeserticolaYCMa dan Cistanchetubulosadiperiksa. HerbaBentengrebusan mengurangi periode imobilitas secara signifikan dalam uji suspensi ekor tikus. Tikus yang diobati dengan ramuan ramuan menunjukkan peningkatan kemampuan pembelajaran spasial dan memori dalam tes labirin air Morris. Kelompok yang diberi ramuan ramuan menunjukkan aktivitas monoamine oxidase (MAO) yang diregulasi ke bawah; konsentrasi dopamin (DA) di otak diregulasi, menunjukkan ramuanBentengrebusan meningkatkan rangsangan saraf; konsentrasi serum kortikosteron (CORT) diturunkan, menunjukkan bahwa tikus mendapat manfaat dari tingkat stres yang berkurang. Oleh karena itu, kemanjuran dan mekanisme antidepresan obat tradisionalCinaherbaBentengdieksplorasi dalam penelitian ini. HerbaBentengmenunjukkan potensi untuk dikembangkan sebagai terapi komplementer dan alternatif untuk depresi.

Cegah penyakit Alzheimer dengan cistanche

1. Perkenalan

Depresi dan gangguan mood terkait, dengan perkiraan 12-17 persen dari populasi mengalami setidaknya satu episode dalam seumur hidup, adalah salah satu penyebab utama cacat mental dan dianggap sebagai salah satu masalah kesehatan masyarakat utama di seluruh dunia.[1].Relevansi khusus, sebagian besar pasien dengan depresi menderita kehilangan ingatan, masalah konsentrasi, penurunan energi atau kelelahan, kehilangan minat atau kesenangan dalam hobi dan aktivitas, kesulitan tidur, bangun pagi-pagi, atau tidur berlebihan. Meskipun substrat saraf untuk kelainan pada depresi dan sindrom terkait tidak jelas, secara umum diterima bahwa penurunan neuroplastisitas dan ketahanan seluler menimbulkan patofisiologi depresi dan pengobatan yang berhasil mungkin tergantung pada intervensi tingkat neurotransmitter.[2]. Pendekatan pengobatan depresi pada dasarnya didasarkan pada sistem monoamine klasik

hipotesis, yang mengklaim bahwa disregulasi monoamina terutama serotonin (5-HT) dan norepinefrin (NE) berkontribusi pada patogenesis depresi, dan intervensi sistem neurotransmitter dengan agonis dopamin dan modulator dopamin-noradrenergik akan meringankan gejala depresi berat. gangguan [3]. Meskipun diresepkan secara luas, kemanjuran kuratif antidepresan dipertanyakan dan efek sampingnya tidak dapat diabaikan karena sebagian besar pasien tidak menanggapi manipulasi sistem monoamina [4]. Baru-baru ini, teori baru tentang patogenesis depresi menunjukkan bahwa beberapa sistem, termasuk jalur inflamasi, jalur stres oksidatif, aksis hipotalamus-hipofisis-adrenal (HPA), sistem metabolisme dan bioenergi, jalur neurotropik, sistem glutamat, sistem opioid, dan sistem kolinergik, terkait erat dengan terjadinya depresi [3]. Bukti menunjukkan bahwa beberapa intervensi target menghasilkan kemanjuran yang lebih baik daripada satu intervensi target tunggal [5]. Terapi baru berdasarkan teori disregulasi sistem ganda sangat dibutuhkan.

Produk herbal dilaporkan dikonsumsi lebih dari setengah populasi AS[6];minat dan permintaan untuk ramuan atau produk herbal sebagai cara tambahan untuk mengobati depresi tumbuh di seluruh dunia. Beberapa tanaman medis ditemukan untuk menunjukkan efek menguntungkan menghilangkan depresi. Herbal yang dilaporkan memiliki efek menekan depresi dan meningkatkan fungsi kognitif termasuk buckthorn laut.7], Ginkgo Biloba[8], Piper nigrum[9], Hypericum perforatum [10], Griffonia simplicifolia[11]. Pemberian kombinasi asam ferulat dan piperin menunjukkan efek seperti antidepresan sinergis pada tikus dengan memanipulasi sistem monoaminergik[7]. Albiflorin dicirikan oleh afinitas selektif yang tinggi terhadap reseptor neurotransmitter dan pengangkut dan secara signifikan meningkatkan konsentrasi ekstraseluler 5-HT dan NE di hipotalamus tikus yang bergerak bebas.[12]. Ramuan medis Melissa officinalis L. meredakan perilaku depresi tikus dengan memberikan pengaruh pada tingkat neurotransmitter serotonergik[13].Tumbuhan atau ramuan ini, dikembangkan sebagai pengobatan alternatif untuk depresi, membantu meringankan gejala depresi dan menyediakan sumber baru untuk pengembangan obat antidepresan. HerbaBentengspesies, didistribusikan di tanah gersang dan gurun bagian utara Cina, adalah ramuan obat tradisional Cina dan banyak digunakan untuk mengobati berbagai penyakit selama lebih dari 1,000 tahun di Cina. Berbagai khasiat ramuanBentengrentang rebusan antara afrodisiak [14], meningkatkan kekebalan tubuh[15], antioksidan [16], dan hepatoprotektif [17] properti. Decoctions C. deserticola menginduksi enzim steroidogenik testis [18], meningkatkan respon ereksi penis, dan memperpendek periode laten reaksi ereksi pada tikus yang dikebiri [19]. HerbaBentengtelah dilaporkan menghambat aktivitas neuron dopaminergik dengan mengatur gen penghambat apoptosis dan faktor neurotropik [20]. C.tubulosadecoctions mengubah disfungsi kognitif yang disebabkan oleh A� 1-42 melalui pemblokiran deposisi amiloid dan menghidupkan kembali fungsi neuron dopaminergik kolinergik dan hipokampus [21]. Properti neuroprotektif dari Cistanche herbal menyiratkan potensi terapeutik pada penyakit yang berhubungan dengan kognitif. Depresi adalah mode campuran umum dari reaksi emosional dengan kelupaan dan penurunan kognitif sebagai gejala umum [22]. Ramuan Cistanche umumnya digunakan sebagai obat tradisional Tiongkok untuk mengobati kelupaan; Selain itu, sebuah laporan baru-baru ini menunjukkan bahwa pemberian awal dewasa awal dari tepung jagung yang dilengkapi dengan C.tubulosabermanfaat untuk promosi umur panjang dan pembelajaran terkait penciuman dan peningkatan memori pada model Drosophila nonvertebrata [23]. Fakta-fakta ini menunjukkan sifat peningkatan kognitif dari ramuanBenteng; di sini dalam penelitian ini, untuk pertama kalinya, kami mengkarakterisasi sifat antidepresan dan hubungannya dengan aktivitas peningkatan kognitif pada model mamalia dengan mengatur sistem monoamina dan sumbu HPA. Menerangi sifat antidepresan dan mekanisme awal ramuanBentengdapat memperluas spektrum aplikasi ramuan Cistanche, yang dapat dikembangkan sebagai obat alternatif untuk depresi.

2. Bahan-bahan dan metode-metode

1.1. Bahan Tanaman dan Persiapan Rebusan. C. deserticola YCMa diperoleh dari Daerah Otonomi Nei Mongol, Cina; C.tubulosadiperoleh dari Daerah Otonomi Uygur Xinjiang, Cina. Sebelum direbus, herba (C. deserticola YCMa atau C. tubulosa) diperiksa untuk mendeteksi kandungan echinacoside dan verbascoside menggunakan HPLC (high-performance liquid chromatography) (Milford, MA, Waters, USA), dan produk yang memenuhi syarat (menurut to Pharmacopoeia of the People's Republic of China) digunakan untuk percobaan hewan. Rebusan diperoleh berdasarkan metode penguapan air yang dikembangkan oleh Pusat Penelitian Teknik Makanan dan Kesehatan Kementerian Pendidikan Negara, Universitas Sun Yat-sen. Cistanche deserticola YCMa kering 125 g dihancurkan dan diayak dengan ayakan 120-mesh kemudian serbuk dilarutkan dalam 3 L air ultra murni, dipanaskan

pada 100∘C selama 2 jam, kemudian didinginkan hingga suhu kamar, dan diayak; supernatan didaur ulang. Endapan kemudian dilarutkan dalam 2 L air ultra murni dan kemudian dipanaskan selama 1,5 jam dan didinginkan seperti disebutkan di atas untuk mendaur ulang supernatan; sedimen kemudian digunakan untuk mendaur ulang supernatan. Kandungan semua supernatan diperkaya dengan rotary vacuum evaporator pada suhu 60∘C; akhirnya, konsentrasi obat kasar ditetapkan sebagai 0,5 g/ml dan produk disimpan pada suhu -20∘C.

1.2. Echincoside dan Verbascoside Assay dengan Analisis HPLC. HPLC (kromatografi cair kinerja tinggi) digunakan untuk mengukur uji kualitatif dan kuantitatif echinacosida dan verbaskosida; verbascoside (kemurnian > 93 persen ) dan echinacosida (kemurnian > 93 persen ) dibeli dari National Institutes for Food and Drug Control (Beijing, China) dan digunakan sebagai kontrol standar.

1.3. Perawatan Hewan dan Perilaku Eksperimental. Subjek adalah tikus Kunming jantan SPF (bebas patogen spesifik) dengan berat 21∼25 gram, yang dipasok oleh Pusat Hewan Eksperimental Medis Provinsi Guangdong. Hewan-hewan itu ditempatkan di kandang plastik (sepuluh per kandang); kondisi lingkungan diatur sebagai berikut: kelembaban 40∼70 persen, suhu ruang 21 ± 1∘C, dan periode terang-gelap 12 jam: 12 jam. Semua percobaan hewan telah disetujui oleh Komite Etika Hewan Universitas Sun Yat-sen.

1.4. Uji Suspensi Ekor. Uji suspensi ekor dilakukan sesuai dengan protokol yang dijelaskan oleh Cryan et al. [24] dengan sedikit perubahan. Singkat cerita, pada hari ke-21, mencit digantung ekornya menggunakan tiang gantungan logam yang diikat dengan kateter nilon, dengan ketinggian kepala 50 mm dari lantai. Tikus digantung pada pengait pada pita perekat 10∼20 mm dari ujung ekornya dan diisolasi secara akustik dan visual dengan papan berdinding papan. Gerakan tubuh tikus dicatat dan gerakan pernapasan diabaikan. Sebelum hari percobaan, tikus ditangguhkan selama 8 menit untuk adaptasi.

1.5. Tes Labirin Air Morris. Uji labirin air dilakukan sesuai dengan deskripsi Vorhees et al. [25–27] menggunakan perangkat yang dikembangkan oleh Chinese Academy of Medical Sciences. Sebuah kolam berbentuk lingkaran (diameter 150 cm) berisi air (26

± 1∘C; tinggi rim (jarak permukaan air ke tepi dinding): 10 cm)

Tabel 1: Kandungan echinacoside dan verbascoside dalam bubuk dan rebusan C. deserticola YCMa dan C.tubulosa.

digunakan, platform penyelamatan melingkar (diameter: 11 cm; jarak

sampel

ECH persen VerBS persen antara titik pusat platform dan dinding kolam: 27 cm) terendam 1-1,5 cm di bawah permukaan air, dan area pengujian diterangi dengan pencahayaan tidak langsung (50 ± 10 lux) untuk menghindari pantulan. Empat lokasi awal digunakan, N, S, E, dan W. Untuk tes pembelajaran spasial, hewan dilatih setiap hari pada hari 9-11 di lokasi awal yang tetap. Periode latensi pelarian diukur untuk menampilkan memori spasial dan kemampuan belajar tikus. Jika tikus tidak dapat menemukan atau naik ke platform, tikus akan dibawa ke platform dan tinggal selama 10 detik. Setelah istirahat selama 60 detik, sesi latihan berikutnya akan dimulai. Data yang diperoleh dari tes pembelajaran spasial terakhir digunakan sebagai nilai dasar untuk pencetakan. Pada hari ke 23-28 dilakukan uji navigasi tempat dan spasial. Tes navigasi tempat berlangsung selama 6 hari dan diambil pada jam 1 siang, hewan ditempatkan ke dalam air dengan kepala menghadap dinding kolam searah jarum jam, dan periode latensi (dalam 2 menit) dicatat. Setelah tes navigasi tempat selesai, platform dihapus. Tikus ditempatkan ke dalam air dengan kepala menghadap dinding kolam di lokasi acak, dan jejak gerak dan frekuensi berenang tikus di mana platform berada dalam waktu 2 menit dicatat. Jejak gerakan direkam oleh perekam gerak tikus otonom multifungsi (YLS-1A, Yiyan Technology, Jinan, China).

echinacosida dalam cistanche

1.6. Deteksi Aktivitas MAO. Aktivitas MAO diukur menggunakan kit deteksi MAO (A034, Institut Bioteknologi Nanjing Jiancheng, Nanjing, Cina), dan deteksi dilakukan sesuai dengan protokol pabrikan. Homogenat dari jaringan otak diperoleh; 500 l dicampur dengan 300 l Agen1 dan 300 l Agen 2, diinkubasi selama 3 jam pada suhu 37∘C, kemudian berturut-turut ditambahkan 300 l Agen 3, 3 ml Agen 4, dan divortex selama 2 menit. Campuran reaksi disentrifugasi pada 3,000 rpm selama 10 menit, dan kerapatan optik supernatan ditentukan dengan spektrofotometer ultraviolet dan spektrum tampak (Lambda 25, PerkinElmer, USA) menggunakan cahaya eksitasi 242 nm.

1.7. Enzyme-Linked Immunosorbent Assay of Neurotransmitter dan ACTH dan CORT. Kit deteksi Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) untuk dopamin (DA), norepinefrin (NE), dan 5-hydroxytryptamine (5-HT) dibeli dari BLUE GENE, Shanghai. Kit deteksi ELISA dibeli dari Qiyun Biotech, Guangzhou.

Prosedurnya adalah sebagai berikut: percobaan dilakukan pada suhu kamar. Lapisi lubang pelat mikrotiter PVC dengan antibodi penangkap pada konsentrasi 1–10 �g/mL dalam buffer karbonat/bikarbonat (pH 9,6). Tutup piring dan inkubasi semalaman pada suhu 4∘C; cuci piring dengan PBS/tween 3 kali, dan situs pengikatan nonspesifik diblokir oleh Block Solution; kemudian cuci piring dengan PBS/tween 3 kali. Standar dan sampel diencerkan dalam Blocking Solution dan 100 l ditambahkan ke sumur pelat, dan pelat ditutup rapat dan diinkubasi pada suhu 37∘C selama 1 jam. Tambahkan 100 l antibodi deteksi yang diencerkan dan inkubasi pelat pada suhu

C. deserticola bubuk 1,27 ± 0.009 0.52 ± 0.003

C. tubulosabubuk 19,81 ± 0.66 2.45 ± 0.12

C. rebusan deserticola {{0}}.90 ± 0.001 0.20 ± 0,001 C.tubulosarebusan 5,90 ± 0.12 0.54 ± 0,05 Echincoside, ECH; glikosida fenilethanoid, PeGs; verbascoside, VerBS.

37∘C selama 1 jam; cuci piring dengan PBS/Tween 3 kali. Tambahkan 50 l larutan pengembangan warna dan jauhkan pelat dari cahaya dan inkubasi pada suhu kamar selama 15 menit; 50 l stop buffer ditambahkan untuk menghentikan reaksi. Ukur kerapatan optik (OD) untuk setiap sumur dengan pembaca pelat mikro yang disetel ke 405 nm dalam 30 menit.

1.8. Analisis statistik. Semua data direpresentasikan sebagai mean ± SEM (standard error of mean), perbedaan signifikan dianalisis dengan uji-t atau ANOVA satu arah dilanjutkan dengan uji jarak berganda Duncan menggunakan SPSS 16.0, dan perbedaan antara kelompok dengan � < 0.05="" dianggap="" signifikan="" secara="">

2. Hasil

2.1. Penentuan Kandungan Bahan Bioaktif Utama pada C. deserticola YCMa dan C.tubulosaSampel. Glikosida fenilethanoid seperti echinacoside dan verbascoside umumnya dianggap sebagai bahan bioaktif utama; oleh karena itu kandungan echinacosida dan verbaskosida pada C. deserticola YCMa dan C.tubulosasampel ditentukan dengan HPLC. Kromatogram HPLC ditunjukkan pada Gambar1, dan hasilnya menunjukkan bahwa kandungan total glikosida fenilethanoid dari C. deserticola YCMa kira-kira dua kali lipat dari C. tubulosa. Bobot echinacoside dan verbascoside, masing-masing, terhitung 1,27 ± 0.009 persen dan {{10}}.52 ± 0,003 persen bubuk yang dibuat dari C. deserticola YCMa dan 19,81 ± 0,66 persen dan 2,45 ± 0,12 persen bubuk yang dibuat dari C.tubulosa. Bobot echinacoside dan verbascoside, masing-masing, menyumbang {{0}}.90 ± 0.{{10}}01 persen dan 0,20 ± 0,001 persen rebusan C. deserticola YCMa dan 5,90 ± 0,12 persen dan 0,54 ± 0,05 persen bubuk yang dibuat dari C.tubulosa(Meja1).

2.2. Rebusan C. deserticola YCMa dan C. tubulosa Menurunkan Tingkat Stres dan Depresi. Tail suspension test (TST) adalah metode cepat dan klasik untuk menilai efek antidepresan obat pada tikus [24]; dalam penelitian ini, status tidak bergerak, yang disebabkan oleh stres jangka pendek dan tak terhindarkan karena digantung oleh ekor, digunakan sebagai sifat untuk mencerminkan tingkat depresi tikus. Kami memeriksa apakah rebusan C. deserticola YCMa dan C.tubulosadapat membalikkan imobilitas dan mendorong terjadinya perilaku terkait pelarian. Dibandingkan dengan kelompok kontrol, masa imobilitas kelompok stres meningkat sebesar 27,4 persen; dibandingkan dengan stres

Gambar 1: Profil kromatografi HPLC dari glikosida fenilethanoid dari bubuk C. deserticola YCMa dan C. tubulosa. Puncak 1 dan 2 masing-masing mewakili echinacosida dan verbaskosida.

Gambar 2: Pengaruh decoctions C. deserticola YCMa dan C. tubulosa pada periode imobilitas tikus suspensi ekor dalam 5 menit. Setelah adaptasi, kelompok eksperimen diberi ramuan ramuan Cistanche dengan gavage selama 21 hari dan kemudian digantung dengan ekor dan pergerakannya dipantau dalam 5 menit setelah suspensi; setiap kelompok terdiri dari 10 ekor mencit. L, M, dan H, masing-masing, mewakili rendah, sedang, dan tinggi; CD dan CT, masing-masing, mewakili

C. deserticola rebusan YCMa dan C. tubulosa. Semua data direpresentasikan sebagai mean ± SEM; P< 0.05="" was="" considered="" as="" significantly="" different="" and="" was="" marked="" as="">

kelompok,

kelompok yang diberi perlakuan rebusan herba C. deserticola YCMa konsentrasi sedang dan tinggi menunjukkan penurunan masa imobilitas yang bermakna secara statistik masing-masing sebesar 44,1 persen dan 56,1 persen ; kelompok yang diberi perlakuan konsentrasi sedang, tinggi

Rebusan herba C. tubulosa menunjukkan penurunan masa imobilitas yang signifikan secara statistik masing-masing sebesar 41,9 persen dan 47,7 persen (Gambar2). Hasil ini menunjukkan bahwa rebusan C. deserticola YCMa dan C.tubulosadapat menurunkan tingkat stres dan depresi tikus, dan rebusan C. deserticola YCMa menunjukkan kemanjuran yang sedikit lebih tinggi daripada C.tubulosarebusan.

1.1. Rebusan C. deserticola YCMa dan C. tubulosa Meningkatkan Pembelajaran Spasial dan Memori Mencit. Orang (baik remaja maupun dewasa) yang menderita depresi rentan

untuk menderita ketidakmampuan belajar [28]; rebusan C. deserticola YCMa dan C.tubulosaterbukti mengurangi tingkat stres dan depresi; kemudian kami memilih untuk menilai apakah rebusan C. deserticola YCMa dan C. tubulosa dapat mempengaruhi pembelajaran spasial dan memori dengan menggunakan model labirin air Morris, yang diterapkan secara luas dalam menilai pembelajaran spasial dan fungsi memori area otak terkait.[29]. Jejak gerak diklasifikasikan menjadi empat selama latensi pencarian; lintasan garis lurus menunjukkan tikus menunjuk dengan tepat posisi platform penyelamatan, lintasan kecenderungan menunjukkan bahwa tikus menunjukkan orientasi yang pada dasarnya benar, dan lintasan tipe tegang menunjukkan bahwa tikus berada dalam periode pelatihan awal atau menderita demensia, mencoba untuk menemukan tempat sasaran berdasarkan insting; lintasan pencarian acak menunjukkan bahwa tikus memiliki kemampuan penentuan posisi yang rendah dan mencari tempat target tanpa tujuan. Data diperoleh sesuai dengan kriteria.

Pengaruh decoctions C. deserticola YCMa dan C. tubulosa pada pembelajaran ruang angkasa dan kemampuan memori tikus yang stres ditunjukkan pada Gambar3. Setelah uji suspensi ekor, tikus menunjukkan periode latensi yang diperpanjang secara signifikan. Dibandingkan dengan kelompok stres, mencit yang diberi perlakuan C. deserticola YCMa dosis sedang dan tinggi dan rebusan C. tubulosa dosis rendah menunjukkan periode latensi yang lebih pendek; frekuensi tikus berenang di platform tersembunyi diregulasi secara signifikan pada kelompok yang diobati dengan rebusan C. deserticola YCMa dosis sedang dan tinggi. Hasil ini menunjukkan bahwa tikus yang stres mendapat manfaat dari pemberian ramuan ramuan Cistanche dan menunjukkan peningkatan dalam pembelajaran spasial dan memori.

1.2. Rebusan C. deserticola YCMa dan C.tubulosaMenurunkan Aktivitas Monoamine Oksidase. MAO mengkatalisis deaminasi oksidatif amina seperti tyramine, catecholamine, dan 5-hydroxytryptamine (5-HT) di otak dan jaringan perifer; penghambatan hasil aktivitas MAO dalam kemanjuran antidepresan [30]. Kami berusaha menjelaskan efek antidepresan oleh C. deserticola YCMa dan C.tubulosa; kemudian aktivitas MAO di otak ditentukan. Setelah uji suspensi ekor, aktivitas MAO diregulasi secara signifikan; aktivitas MAO pada kelompok yang diberi suspensi ekor kemudian dilanjutkan dengan dosis sedang dan tinggi

Gambar 3: Pengaruh C. deserticola YCMa dan C.tubulosadecoctions pada pembelajaran ruang dan kemampuan memori dari tikus pengekang stres. Setelah adaptasi, kelompok eksperimen diberi ramuan ramuan Cistanche secara gavage selama 21 hari dan kemudian diuji dengan

Labirin air R. Morris untuk penentuan pembelajaran spasial dan memori. L, M, dan H, masing-masing, mewakili rendah, sedang, dan tinggi; CD dan CT, masing-masing, mewakili C. deserticola YCMa dan C.tubulosarebusan. "#" dan "∗" masing-masing mewakili P< 0.05="" and="" p="" <="">

Gambar 4: Pengaruh C. deserticola YCMa dan C. tubulosa decoctions pada aktivitas otak monoamine oksidase (MAO) dari suspensi ekor tikus stres. Setelah adaptasi, kelompok eksperimen diberikan ramuan Cistanche rebusan secara gavage selama 21 hari dan kemudian digantung dengan ekor selama 5 menit, masing-masing kelompok terdiri dari 10 mencit, dan mencit dikorbankan untuk diambil jaringan otaknya. dan digunakan untuk pengukuran aktivitas MAO. L, M, dan H, masing-masing, mewakili rendah, sedang, dan tinggi; CD dan CT, masing-masing, mewakili rebusan C. deserticola YCMa dan C. tubulosa. P= 10; semua data direpresentasikan sebagai mean ± SEM; P < 0,05="" dianggap="" berbeda="" nyata="" dan="" ditandai="" sebagai="">

rebusan dari C. deserticola YCMa menunjukkan penurunan yang signifikan sekitar 13,9 persen 12,3 persen; Aktivitas MAO pada kelompok yang diberi suspensi ekor dan kemudian rebusan C. tubulosa dosis tinggi menunjukkan penurunan yang signifikan sekitar 13,2 persen (Gambar4).Data menunjukkan bahwa rebusan dari C. deserticola YCMa dan C. tubulosa dapat menghambat aktivitas MAO dan dapat berkontribusi pada antidepresan.

efek dan rebusan C. deserticola YCMa menunjukkan kemanjuran yang lebih kuat daripada C. tubulosa.

1.1. Pemberian Rebusan C. deserticola YCMa dan C. tubulosa Mengakibatkan Upregulation Konsentrasi Dopamin Pusat dan Downregulation Konsentrasi Kortikosteron Serum. Tingkat DA dan NE di

Gambar 5: Pengaruh C. deserticola YCMa dan C. tubulosa decoctions pada tingkat neurotransmitter otak tikus stres suspensi ekor. Setelah adaptasi, kelompok eksperimen diberi ramuan ramuan Cistanche dengan cara gavage selama 21 hari kemudian disuspensikan dengan ekor selama 5 menit, masing-masing kelompok terdiri dari 10 ekor mencit, dan mencit dikorbankan untuk diambil jaringan otaknya dan digunakan sebagai neurotransmiter otak. pengukuran tingkat. L, M, dan H, masing-masing, mewakili rendah, sedang, dan tinggi; CD dan CT, masing-masing, mewakili rebusan C. deserticola YCMa dan C. tubulosa. P= 10; semua data direpresentasikan sebagai mean ± SEM; P< 0.05="" was="" considered="" as="" significantly="" different="" and="" was="" marked="" as="">

pusat

sistem saraf pusat diukur untuk menentukan rangsangan saraf. Setelah 4 minggu uji suspensi ekor, dibandingkan dengan kelompok stres, tingkat DA kelompok yang diobati dengan dosis sedang C. deserticola YCMa telah diregulasi secara signifikan masing-masing sebesar 43,5 persen ; tingkat DA kelompok yang diobati dengan C. tubulosa dosis sedang juga meningkat secara signifikan (Gambar5(a)). Tingkat NE sedikit diregulasi pada kelompok yang diobati dengan rebusan kedua herbal dibandingkan dengan kelompok stres, dan tidak ada perbedaan statistik yang ditemukan (Gambar5(b)).Hasil ini mungkin menjelaskan mekanisme molekuler dari efek antidepresan dari ramuan Cistanche.

Adrenocorticotropic hormone (ACTH), hormon polipeptida yang diproduksi dan disekresikan oleh kelenjar hipofisis anterior, merangsang sekresi glukokortikosteroid dengan bekerja pada korteks adrenal, zona fasciculata [31]; kortikosteron, hormon steroid yang diproduksi oleh korteks kelenjar adrenal, terlibat dalam pengaturan proses fisiologis seperti peningkatan energi, reaksi kekebalan, dan respons stres.32], jadi kami memilih untuk mempelajari efek ramuan ramuan pada sumbu HPA. Dan konsentrasi ACTH dan kortikosteron dalam serum diukur. Setelah 4 minggu uji suspensi ekor, konsentrasi ACTH dan kortikosteron dari kelompok stres diregulasi secara signifikan (Gambar6).Tidak ada perubahan signifikan yang diamati pada kelompok perlakuan rebusan ramuan Cistanche dibandingkan dengan kelompok stres (Gambar6(a)).Dibandingkan dengan kelompok stres, konsentrasi serum kortikosteron dari kelompok yang diobati dengan rebusan C. deserticola YCMa dosis sedang dan tinggi diturunkan regulasinya secara signifikan; konsentrasi kortikosteron kelompok yang diobati dengan C. tubulosa dosis tinggi diturunkan regulasinya tetapi tidak ada perbedaan statistik yang signifikan

(Angka5(b)).Data menunjukkan bahwa rebusan dari keduanya

C. deserticola YCMa dan C. tubulosa dapat mengurangi konsentrasi serum kortikosteron dan mungkin terlibat dalam mengatur aksis HPA, dan rebusan C. deserticola YCMa menunjukkan kemanjuran yang lebih kuat daripada C. tubulosa.

1. Diskusi

Dalam penelitian ini, aktivitas antidepresan dan peningkatan memori dan pembelajaran ramuan Cistanche didefinisikan, yang mungkin menjelaskan fungsi ramuan Cistanche dan memberikan petunjuk untuk memperluas jangkauan aplikasi terapeutik. Studi sebelumnya menunjukkan bahwa ramuan Cistanche adalah obat Cina multifungsi dengan aktivitas biologis antipenuaan, antioksidan, estrogenik, antiosteoporosis, afrodisiak, dan efek anti-inflamasi [33]. Herb Cistanche telah diakui sebagai pengobatan untuk defisiensi ginjal, infertilitas, dan sembelit kronis (Komite Farmakope China, 2010). Ramuan ramuan Cistanche terdiri dari minyak atsiri, glikosida fenilethanoid nonvolatil (PeGs), iridoid, lignan, alditol, oligosakarida, dan polisakarida. Echinacoside dan verbascoside umumnya dipandang sebagai bahan bioaktif utama [34]. Ada empat spesies utama Cistanche termasuk C. deserticola YCMa, C. tubulosa, Cistanche Sinensis G. Beck, dan Cistanche salsa var. albiflorashi dkk. [35]; kami memilih C. deserticola YCMa dan C. tubulosa sebagai model kami untuk menentukan kandungan PeGs, dan C. deserticola YCMa memiliki kandungan PeGs yang lebih tinggi (Gambar1), yang mungkin menjelaskan kemanjuran yang lebih tinggi dari C. deserticola YCMa. Hasil penelitian menunjukkan bahwa kandungan bahan bioaktif utama menentukan khasiat dari ramuan Cistanche.

Gambar 6: Pengaruh decoctions C. deserticola YCMa dan C. tubulosa pada konsentrasi hormon serum pada tikus gantung yang stres. Setelah adaptasi, kelompok eksperimen diberi ramuan ramuan Cistanche dengan gavage selama 21 hari dan kemudian disuspensikan dengan ekor selama 5 menit, masing-masing kelompok terdiri dari 10 mencit, dan darahnya diambil dan digunakan untuk penentuan. kadar serum adrenocorticotrophic hormone (ACTH) dan corticosterone (CORT). L, M, dan H, masing-masing, mewakili rendah, sedang, dan tinggi; CD dan CT, masing-masing, mewakili rebusan C. deserticola YCMa dan C. tubulosa. P=10; semua data direpresentasikan sebagai mean ± SEM; P < 0,05="" dianggap="" berbeda="" nyata="" dan="" ditandai="" sebagai="">

Studi sebelumnya menunjukkan bahwa produk herbal Cistanche bermanfaat untuk mengobati gangguan neurodegeneratif dengan meningkatkan faktor pertumbuhan saraf (NGF) di hipokampus tikus [36,37], tetapi tidak ada penelitian yang dilaporkan tentang aktivitas belajar antidepresan dan kognitif ramuan Cistanche pada model mamalia. Dalam penelitian ini, ramuan ramuan Cistanche terbukti efektif untuk mengurangi tingkat stres dan secara substansial meningkatkan perilaku bertahan hidup pada uji suspensi ekor (Gambar2) dan meningkatkan pembelajaran spasial dan kapasitas memori dalam model labirin air (Gambar3). Lin dkk. membuktikan bahwa ramuan Cistanche meningkatkan memori terkait penciuman dalam model lalat buah [23]; kami memfokuskan penelitian kami pada efek antidepresan dan mengadopsi model hewan yang berbeda; hasilnya membuktikan bahwa ramuan Cistanche meningkatkan jenis varian fungsi kognitif, yaitu, kemampuan belajar spasial pada tikus. Menurut teori monoamine, pengalaman stres dan depresi terkait erat dengan tingkat neurotransmiter monoamine di otak, seperti DA, NE, 5-HT, dan epinefrin [38]. Dan kami menemukan bahwa ramuan ramuan Cistanche dapat merusak aktivitas MAO (Gambar4) dan menambah konsentrasi DA pusat (Gambar5(sebuah)). Anehnya, konsentrasi 5-HT sentral diturunkan oleh pengobatan rebusan ramuan Cistanche (data tidak ditampilkan), karena penelitian sebelumnya menunjukkan bahwa penurunan aktivitas 5-HT sentral dikaitkan dengan depresi [39]. Disregulasi sumbu hipotalamus-hipofisis-adrenal sering dikaitkan dengan depresi [40], intervensi dengan sistem reseptor glukokortikoid (GR) berhasil membalikkan fenotipe depresan pada tikus[41], dan kami menemukan bahwa ramuan Cistanche secara signifikan meringankan serum

konsentrasi CORT (Gambar6(b)).Modulasi sistem monoamina dan aksis HPA keduanya berkontribusi pada efek antidepresan ramuan Cistanche. Echinacosida dapat melewati sawar darah-otak dengan bebas dan bekerja pada sistem saraf pusat [42], yang mungkin menjelaskan mengapa ramuan ramuan Cistanche memiliki fungsi antidepresan. Untuk pertama kalinya, kami mengkarakterisasi properti antidepresan dan hubungannya dengan aktivitas peningkatan kognitif pada model tikus, dan mekanisme awal dieksplorasi. Namun, mekanisme sifat antidepresan Cistanche belum diklarifikasi pada tingkat molekuler, dan penelitian lebih lanjut diperlukan untuk menjelaskan mekanisme antidepresan komprehensif ramuan Cistanche.

Mengingat bahwa ramuan ramuan Cistanche adalah campuran senyawa, mungkin ada beberapa cara ramuan ramuan Cistanche memberikan efek antidepresan dan meningkatkan kemampuan belajar. Stres oksidatif mempengaruhi banyak fungsi seluler neuron dan kelebihan produksi spesies oksigen reaktif (ROS) menyebabkan kerusakan sel, apoptosis, dan kematian [43]. Echincoside yang diekstraksi dari batang C. salsa menunjukkan efek neuroprotektif dengan mengurangi produksi ROS dan apoptosis yang dimediasi mitokondria [44]; acteoside, senyawa antioksidan yang sangat kuat, mungkin sebagian bertanggung jawab atas efek neuroprotektif[45]. Selain metode rebusan tradisional, penerapan metode farmasi modern seperti kapsul glikosida pelepasan terkontrol dapat meningkatkan efek rebusan herbal, karena bahan bioaktif dapat dicerna dan didegradasi oleh saluran pencernaan [37].

Studi sebelumnya menunjukkan bahwa produk herbal Cistanche bermanfaat untuk mengobati gangguan neurodegeneratif dengan meningkatkan faktor pertumbuhan saraf (NGF) di hipokampus tikus [36,37], tetapi tidak ada penelitian yang dilaporkan tentang aktivitas belajar antidepresan dan kognitif ramuan Cistanche pada model mamalia. Dalam penelitian ini, ramuan Cistanche rebusan terbukti efektif untuk mengurangi tingkat stres dan secara substansial meningkatkan perilaku bertahan hidup dalam uji suspensi ekor (Gambar2) dan meningkatkan pembelajaran spasial dan kapasitas memori dalam model labirin air (Gambar3). Lin dkk. membuktikan bahwa ramuan Cistanche meningkatkan memori terkait penciuman dalam model lalat buah [23]; kami memfokuskan penelitian kami pada efek antidepresan dan mengadopsi model hewan yang berbeda; hasilnya membuktikan bahwa ramuan Cistanche meningkatkan jenis varian fungsi kognitif, yaitu, kemampuan belajar spasial pada tikus. Menurut teori monoamine, pengalaman stres dan depresi terkait erat dengan tingkat neurotransmiter monoamine di otak, seperti DA, NE, 5-HT, dan epinefrin [38]. Dan kami menemukan bahwa ramuan ramuan Cistanche dapat merusak aktivitas MAO (Gambar4) dan menambah konsentrasi DA pusat (Gambar5(sebuah)). Anehnya, konsentrasi 5-HT sentral diturunkan oleh pengobatan rebusan ramuan Cistanche (data tidak ditampilkan), karena penelitian sebelumnya menunjukkan bahwa penurunan aktivitas 5-HT sentral dikaitkan dengan depresi [39]. Disregulasi sumbu hipotalamus-hipofisis-adrenal sering dikaitkan dengan depresi [40], intervensi dengan sistem reseptor glukokortikoid (GR) berhasil membalikkan fenotipe depresan pada tikus[41], dan kami menemukan bahwa ramuan Cistanche secara signifikan meringankan serum

konsentrasi CORT (Gambar6(b)).Modulasi sistem monoamina dan aksis HPA keduanya berkontribusi pada efek antidepresan ramuan Cistanche. Echinacosida dapat melewati sawar darah-otak dengan bebas dan bekerja pada sistem saraf pusat [42], yang mungkin menjelaskan mengapa ramuan ramuan Cistanche memiliki fungsi antidepresan. Untuk pertama kalinya, kami mengkarakterisasi properti antidepresan dan hubungannya dengan aktivitas peningkatan kognitif pada model tikus, dan mekanisme awal dieksplorasi. Namun, mekanisme sifat antidepresan Cistanche belum diklarifikasi pada tingkat molekuler, dan penelitian lebih lanjut diperlukan untuk menjelaskan mekanisme antidepresan komprehensif ramuan Cistanche.

Mengingat bahwa ramuan ramuan Cistanche adalah campuran senyawa, mungkin ada beberapa cara ramuan ramuan Cistanche memberikan efek antidepresan dan meningkatkan kemampuan belajar. Stres oksidatif mempengaruhi banyak fungsi seluler neuron dan kelebihan produksi spesies oksigen reaktif (ROS) menyebabkan kerusakan sel, apoptosis, dan kematian [43]. Echincoside yang diekstraksi dari batang C. salsa menunjukkan efek neuroprotektif dengan mengurangi produksi ROS dan apoptosis yang dimediasi mitokondria [44]; asetonida, senyawa antioksidan yang sangat kuat, mungkin sebagian bertanggung jawab atas efek neuroprotektif[45]. Selain metode rebusan tradisional, penerapan metode farmasi modern seperti kapsul glikosida pelepasan terkontrol dapat meningkatkan efek rebusan herbal, karena bahan bioaktif dapat dicerna dan didegradasi oleh saluran pencernaan [37].

1. Kesimpulan

Dalam penelitian ini, kami menemukan bahwa rebusan C. deserticola

YCMa dan C. tubulosa menunjukkan efek antidepresan dan meningkatkan pembelajaran spasial dan kemampuan memori dalam model tikus, dan decoctions C. deserticola YCMa dan C. tubulosa memiliki dampak signifikan pada sumbu HPA;

C. deserticola YCMa menunjukkan fungsi farmakologis yang lebih kuat. C. deserticola dan C. tubulosa berpotensi untuk dikembangkan sebagai obat terapi alternatif untuk depresi.

Penyingkapan

Pandangan yang diungkapkan di sini adalah dari penulis dan tidak mencerminkan pandangan dari lembaga-lembaga ini.

Konflik kepentingan

Para penulis menyatakan bahwa mereka tidak memiliki konflik kepentingan.

Ucapan Terima Kasih

Proyek ini didukung oleh hibah dari National Natural Science Foundation (81503333) dan Science and Technology Support by Project in the Xinjiang Uygur Autonomous Region (Cina) (200840102-15).

Referensi

[1] RC Kessler, KA McGonagle, S. Zhao, et al., "Prevalensi seumur hidup dan 12-bulan gangguan kejiwaan DSM-III-R di Amerika Serikat: hasil dari Survei Komorbiditas Nasional," Arsip Psikiatri Umum, vol. 51, tidak. 1, hlm. 8–19, 1994.

[2] HK Manji, GJ Moore, G. Rajkowska, dan G. Chen, "Neuroplastisitas dan ketahanan seluler dalam gangguan mood," Psikiatri Molekuler, vol. 5, tidak. 6, hlm. 578–593, 2000.

[3] JD Rosenblat, RS McIntyre, GS Alves, KN ​​Fountoulakis, dan AF Carvalho, "Di luar target novel monoamina untuk depresi yang resistan terhadap pengobatan: Tinjauan komprehensif," Neuropharmacology saat ini, vol. 13, tidak. 5, hlm. 636–655, 2015.

[4] K. Wilson dan P. Mottram, "Sebuah perbandingan efek samping inhibitor reuptake serotonin selektif dan antidepresan trisiklik pada pasien depresi yang lebih tua: Sebuah meta-analisis," International Journal of Geriatric Psychiatry, vol. 19, tidak. 8, hlm. 754–762, 2004.

[5] S. Vezmar, B. Miljkovic´, K. Vucˇic´evic´ et al., "Farmakokinetik dan kemanjuran fluvoxamine dan amitriptyline dalam depresi," Journal of Pharmacological Sciences, vol. 110, tidak. 1, hlm. 98-104, 2009.

[6] CH Halsted, "Suplemen diet dan makanan fungsional: 2 sisi mata uang?" Jurnal Nutrisi Klinis Amerika, vol. 77, hlm. 1001S–1007S, 2003.

[7] J.-S. Tian, ​​C.-C. Liu, H. Xiang et al., "Investigasi pada efek antidepresan minyak biji buckthorn laut melalui pendekatan metabolomik berbasis GC-MS digabungkan dengan analisis multivariat," Food and Function, vol. 6, tidak. 11, hlm. 3585–3592, 2015.

[8] Y. Hou, MA Aboukhatwa, D.-L. Lei, K. Manaye, I. Khan, and

Y. Luo, "Flavonol alami anti-depresan memodulasi BDNF dan

beta-amyloid di neuron dan hipokampus tikus TgAD ganda," Neuropharmacology, vol. 58, no. 6, pp. 911-920 2010.

[9] J. Wattanathorn, P. Chonpathompikunlert, S. Muchimapura,

A. Priprem, dan O. Tankamnerdthai, "Piperine, makanan fungsional potensial untuk gangguan mood dan kognitif," Toksikologi Makanan dan Kimia, vol. 46, tidak. 9, hlm. 3106–3110, 2008.

[10] M. Shirai, Y. Kawai, R. Yamanishi, dan J. Terao, "Pendekatan makanan fungsional baru untuk pengendalian stres 5. Profil aktivitas antioksidan herbal antidepresan dan komponen aktifnya," Journal of Medical Investigation, vol. 52, hlm. 249–251, 2005.

[11] PS Kumar, T. Praveen, NP Jain, dan B. Jitendra, "A review on Griffonia simplicifollia - anti-depresan herbal yang ideal," International Journal of Pharmacy & Life Sciences, 2010.

[12] Z.-L. Jin, N. Gao, W. Xu et al., "Reseptor dan transporter mengikat dan profil aktivitas albiflorin diekstraksi dari Radix Paeonia Alba," Scientific Reports, vol. 6, ID Pasal 33793, 2016.

[13] S.-H. Lin, M.-L. Chou, W.-C. Chen et al., "Ramuan obat, Melissa officinalis L. memperbaiki perilaku tikus yang seperti depresi dalam tes renang paksa melalui pengaturan neurotransmitter serotonergik," Journal of Ethnopharmacology, vol. 175, pasal no. 9741, hlm. 266–272, 2015.

[14] H. Shimoda, J. Tanaka, Y. Takahara, K. Takemoto, S.-J. Shan, dan M.-H. Su, "Efek hipokolesterolemia dari ekstrak Cistanche tubulosa, obat tradisional Cina, pada tikus," American Journal of Chinese Medicine, vol. 37, tidak. 6, hlm. 1125– 1138, 2009.

[15] LI Xia, MA Yong-Qing, YX Song, JF Shui, dan LI Xiu-Wei, "Pengaruh zat pengatur tumbuh yang berbeda pada rasio kelangsungan hidup transplantasi bibit haloxyfop ammodendron dan rasio parasit cistanche deserticola," Journal of Chinese Bahan Obat, vol. 32, hlm. 1651–1654, 2009.

[16] Q. Xiong, S. Kadota, T. Tani, dan T. Namba, "Efek antioksidan fenilethanoid dari Cistanche deserticola," Buletin Biologi dan Farmasi, vol. 19, tidak. 12, hlm. 1580–1585, 1996.

[17] Y. Wu, L. Li, T. Wen, dan Y.-Q. Li, "Efek perlindungan echinacosida pada hepatotoksisitas yang diinduksi karbon tetraklorida pada tikus," Toxicology, vol. 232, tidak. 1-2, hlm. 50–56, 2007.

[18] T. Wang, C. Chen, M. Yang, B. Deng, GM Kirby, dan X. Zhang, "Ekstrak etanol Cistanche tubulosa memediasi kadar hormon seks tikus dengan induksi enzim steroidogenik testis," Pharmaceutical Biology, vol. 54, tidak. 3, hlm. 481–487, 2016.

[19] L. Gu, WT Xiong, YL Zhuang, JS Zhang, dan X. Liu, "Efek ekstrak Cistanche deserticola pada respons ereksi penis pada tikus yang dikebiri," Pakistan Journal of Pharmaceutical Sciences, vol. 29, tidak. 2, hlm. 557–562, 2016.

[20] SG Lin, SF Ye, JM Huang, et al., "Bagaimana obat-obatan Cina yang menguatkan ginjal menghambat apoptosis neuron dopaminergik?" Penelitian Regenerasi Saraf, vol. 8, tidak. 30, hlm. 2820–2826, 2013.

[21] C.-R. Wu, H.-C. Lin, dan M.-H. Su, "Pembalikan oleh ekstrak air Cistanche tubulosa dari defisit perilaku pada model tikus seperti penyakit Alzheimer: relevansi untuk deposisi amiloid dan fungsi neurotransmitter sentral," Pelengkap BMC dan Pengobatan Alternatif, vol. 14, hlm. 1–11, 2014.

[22] DR Lara, LW Bisol, dan LR Munari, "Efek antidepresan, menstabilkan suasana hati, dan prokognitif dari ketamin sublingual dosis sangat rendah pada depresi unipolar dan bipolar refraktori," International Journal of Neuropsychopharmacology, vol. 16, tidak. 9, hlm. 2111–2117, 2013.

[23] W. Lin, C. Yao, J. Cheng, S. Kao, F. Tsai, dan H. Liu, "Jalur molekuler terkait dengan promosi umur panjang dan peningkatan kognitif Cistanche tubulosa di Drosophila,"

Fitomedika, vol. 26, hlm. 37–44, 2017.

[24] JF Cryan, C. Mombereau, dan A. Vassout, "Uji suspensi ekor sebagai model untuk menilai aktivitas antidepresan: Tinjauan studi farmakologis dan genetik pada tikus," Neuroscience and Biobehavioral Reviews, vol. 29, tidak. 4-5, hlm. 571–625, 2005.

[25] CV Vorhees dan MT Williams, "Morris water maze: prosedur untuk menilai bentuk spasial dan terkait pembelajaran dan memori," Nature Protocols, vol. 1, tidak. 2, hlm. 848–858, 2006.

[26] R. Morris, "Pengembangan prosedur labirin air untuk mempelajari pembelajaran spasial pada tikus," Journal of Neuroscience Methods, vol. 11, tidak. 1, hlm. 47–60, 1984.

[27] A. Wolf, B. Bauer, EL Abner, T. Ashkenazy-Frolinger, dan A.

MS Hartz, "Baterai uji perilaku komprehensif untuk menilai pembelajaran dan memori pada tikus 129S6/Tg2576," PLoS ONE, vol. 11, tidak. 1, ID Artikel e0147733, 2016.

[28] BP Rourke, GC Young, dan AA Leenaars, "Sebuah ketidakmampuan belajar masa kanak-kanak yang mempengaruhi mereka yang menderita depresi remaja dan dewasa dan risiko bunuh diri.," Journal of Learning Disabilities, vol. 22, tidak. 3, hlm. 169–175, 1989.

[29] R. D'Hooge dan PP De Deyn, "Applications of the Morris water maze in the study of learning and memory," Brain Research Reviews, vol. 36, tidak. 1, hlm. 60–90, 2001.

[30] JC Shih, K. Chen, dan MJ Ridd, "Monoamine oksidase: dari gen ke perilaku," Tinjauan Tahunan Neuroscience, vol. 22, hlm. 197–217, 1999.

[31] SR Bornstein, WC Engeland, M. Ehrhart-Bornstein, dan JP Herman, "Dissosiasi ACTH dan glukokortikoid," Tren Endokrinologi dan Metabolisme, vol. 19, tidak. 5, hlm. 175–180, 2008.

[32] S. Whirledge dan JA Cidlowski, "Glukokortikoid, stres, dan kesuburan," Minerva Endocrinologica, vol. 35, tidak. 2, hlm. 109–125, 2010.

[33] L. Wang, H. Ding, H. Yu et al., "Cistanches Herba: Konstituen Kimia dan Efek Farmakologis," Obat Herbal Cina, vol. 7, tidak. 2, hlm. 135-142, 2015.

[34] Z. Li, H. Lin, L. Gu, J. Gao, dan C.-M. Tzeng, "Herba Cistanche (Rou Cong-Rong): Salah satu hadiah farmasi terbaik dari pengobatan tradisional Tiongkok," Frontiers in Pharmacology, vol. 7, pasal 41, 2016.

[35] HM Shi, J. Wang, MY Wang, PF Tu, dan XB Li, "Identifikasi spesies Cistanche dengan sidik jari ulangi urutan kimia dan antar-sederhana," Buletin Biologi dan Farmasi, vol. 32, tidak. 1, hlm. 142–146, 2009.

[36] JG Choi, M. Moon, HU Jeong, MC Kim, SY Kim, and

MS Oh, "Cistanches Herba meningkatkan pembelajaran dan memori dengan menginduksi faktor pertumbuhan saraf," Behavioral Brain Research, vol. 216, tidak. 2, hlm. 652–658, 2011.

[37] Q. Guo, Y. Zhou, C.-J. Wang et al., "Sebuah label terbuka, studi terkontrol nonplasebo pada kapsul glikosida cistanche tubulosa (Memoregain®) untuk mengobati penyakit Alzheimer sedang," American Journal of Alzheimer's Disease and other Dementias, vol. 28, tidak. 4, hlm. 363–370, 2013.

[38] M. Popoli, M. Gennarelli, dan G. Racagni, "Modulation of synaptic plasticity by stress and antidepressants," Bipolar Disorders, vol. 4, tidak. 3, hlm. 166-182, 2002.

[39] AJ Cleare, A. McGregor, dan V. O'Keane, "Bukti neuroendokrin untuk hubungan antara hipotiroidisme, berkurangnya aktivitas 5-HT sentral dan depresi," Clinical Endocrinology, vol. 43, tidak. 6, hlm. 713–719, 1995.

[40] NL Lopez-Duran, M. Kovacs, dan CJ George, "Disregulasi sumbu hipotalamus-hipofisis-adrenal pada anak-anak dan remaja yang mengalami depresi: sebuah meta-analisis," Psikoneuroendokrinologi, vol. 34, tidak. 9, hlm. 1272-1283, 2009.

[41] N. Barden, "Implikasi sumbu hipotalamus-hipofisis-adrenal dalam fisiopatologi depresi," Journal of Psychiatry and Neuroscience, vol. 29, tidak. 3, hlm. 185–193, 2004.

[42] M. Zhu, C. Lu, dan W. Li, "Paparan sementara terhadap echinacosida cukup untuk mengaktifkan pensinyalan Trk dan melindungi sel-sel saraf dari rotenone," Journal of Neurochemistry, vol. 124, tidak. 4, hlm. 571–580, 2013.

[43] T.-H. Lu, C.-C. Su, F.-C. Tang et al., "Asam kloroasetat memicu apoptosis dalam sel saraf melalui jalur sinyal stres retikulum endoplasma yang diinduksi spesies oksigen reaktif," Interaksi Kimia-Biologis, vol. 225, hlm. 1–12, 2015.

[44] Y.-H. Wang, Z.-H. Xuan, S. Tian, ​​dan G.-H. Du, "Echinacoside melindungi terhadap 6-disfungsi mitokondria yang diinduksi hidroksidopamin dan respons inflamasi dalam sel PC12 melalui pengurangan produksi ROS," Pengobatan Pelengkap dan Alternatif Berbasis Bukti, vol. 2015, ID Artikel 189239, 9 halaman, 2015.

[45] WF Chiou, LC Lin, dan CF Chen, "Acteoside melindungi sel endotel terhadap stres oksidatif yang diinduksi radikal bebas," Journal of Pharmacy and Pharmacology, vol. 56, tidak. 6, hlm. 743– 748, 2004.