Evaluasi Aktivitas Dan Mekanisme Antimelanogenik Lengkuas Di Silico Dan di Vivo
Mar 29, 2022
Kontak: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:{0}}
Ki Wung Chung, seorang Hyeong Oh Jeong, seorang Eun Kyeong Lee, seorang Su Jeong Kim, seorang Pusoon Chun,bHae Young Chung,*, a dan Hyung Ryong Moon*, seorang
Pigmentasi abnormal karena sintesis melanin yang berlebihan dapat menyebabkan masalah serius seperti bintik-bintik, bintik-bintik penuaan, dan melanoma. Inhibitor tirosinase telah menjadi target yang menarik untuk pengobatan hiperpigmentasi karena tirosinase adalah enzim pembatas laju dalam sintesis melanin. Skrining untuk inhibitor tirosinase yang kuat mengarah pada penemuan senyawa flavonoidgalanin, yang menunjukkan efek penghambatan penting pada tirosinase jamur. Nilai IC50 galanin (3,55±0,39 M) lebih rendah dibandingkan dengan asam kojat (48,55±1,79 M) yang digunakan sebagai kontrol positif. Dalam simulasi docking silico dan studi mekanistik menunjukkan bahwa galanin berinteraksi dengan situs katalitik tirosinase dan bersaing dengan tirosin. Dalam sel melanoma B16F10 yang dirangsang dengan -melanocyte-stimulating hormone, galanin menghambat aktivitas tirosinase serta produksi melanin. Meskipun dosis tinggigalaninyang sitotoksik, tidak ada efek sitotoksik yang diamati pada dosis rendah. Selain itu, kemanjuran in vivo galanin dievaluasi pada tikus tidak berbulu yang memiliki melanin HRM2. Seperti yang diukur dengan indeks pemutih kulit dan pewarnaan melanin, paparan UVB berulang meningkatkan sintesis melanin kulit. Aplikasi lengkuas secara signifikan mengurangi melanogenesis yang disebabkan oleh paparan UVB. Secara kolektif, data kami menunjukkan bahwagalaninmenunjukkan aktivitas penghambatan tirosinase yang kuat, yang menunjukkan bahwa itu mungkin agen pemutih kulit yang efektif.
Kata kuncigalanin; melanogenesis; pigmentasi; tirosinase
Lengkuas, senyawa flavonoid, ditemukan dalam konsentrasi tinggi di Alpinia officinarum dan Helichrysum) Penelitian sebelumnya menunjukkan bahwa galangin memiliki berbagai aktivitas farmakologis, melindungi tanaman dari radiasi UV, patogen, dan herbivora, dan memberikan aktivitas anti-bakteri dan antivirus.2– 4) Namun, ia juga memiliki sifat antioksidan, yang disebabkan oleh efek menguntungkannya.5) Lengkuas juga memberikan efek antikanker melalui penghambatan pertumbuhan sel kanker.6,7)
Melanin adalah pigmen biologis yang ditemukan di sebagian besar organisme. Dalam biologi kulit, melanin diproduksi oleh oksidasi asam amino tirosin. Dalam fisiologi normal, melanin mencegah cedera kulit melalui penyerapan radiasi UV yang berbahaya.8)Melanin yang disintesis dalam melanosit kulit didistribusikan ke keratinosit, di mana melanin berperan penting dalam perlindungan terhadap radiasi UV yang berbahaya.8) Namun, terlepas dari keuntungan tertentu, melanin yang berlebihan juga dapat menyebabkan masalah estetika dan penyakit kulit.9) Pigmentasi abnormal, seperti bintik-bintik, bintik-bintik penuaan, melasma, dan lentigin pikun, menyebabkan masalah serius pada fisiologi kulit normal.10,11) Oleh karena itu, modulasi melanogenesis merupakan strategi penting untuk pengobatan pigmentasi kulit yang berlebihan. Sejumlah enzim berpartisipasi dalam proses melanogenesis. Di antara berbagai enzim ini, tirosinase, yang mengkatalisis proses oksidasi L-tirosin menjadi 3,4-dihidroksifenilalanin (L-DOPA) dan L-DOPA menjadi dopakuinon, adalah yang paling penting.12) Proses-proses ini dimediasi oleh tirosinase adalah proses pembatasan kecepatan. Dalam kondisi abnormal, hiperaktivasi tirosinase telah terdeteksi dengan peningkatan produksi melanin total.13) Karena peran kuncinya dalam melanogenesis, tirosinase merupakan target yang menarik untuk agen depigmentasi.14) Dengan demikian, berbagai inhibitor tirosinase dari alami dan sintetis sumber telah dikembangkan. Banyak inhibitor tirosinase, termasuk hidroksikuinon, asam kojic, dan arbutin, sebelumnya telah digunakan dalam industri obat-obatan dan kosmetik. Meskipun beberapa inhibitor tirosinase telah dikembangkan secara komersial, efek samping sitotoksik telah menjadi jelas.12) Oleh karena itu, agen pemutih kulit yang efektif dan aman diperlukan.
Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengkarakterisasi galangin sebagai inhibitor tirosinase yang poten menggunakan berbagai metode eksperimen. Selama pencarian inhibitor tirosinase dari sumber alami, kami menemukan bahwa galangin secara signifikan mengurangi aktivitas tirosinase dengan potensi tinggi. Karena efek penghambatan galanin pada tirosinase sudah dilaporkan, kami fokus pada mekanisme penghambatan dan potensi dalam percobaan sel dan hewan.1) Menggunakan berbagai percobaan in silico, in vitro, dan in vivo, data kami menunjukkan bahwa galangin mungkin merupakan agen pemutih kulit yang kuat untuk perawatan pigmentasi kulit.
manfaat kesehatan cistanche tubolosa:pemutih kulit
BAHAN DAN METODE
Bahan:
Galangin, asam kojic, tirosinase jamur, L-tirosin, -melanocyte-stimulating hormone (-MSH), dan reagen kimia lainnya dibeli dari Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, USA).
Pengukuran Efek Inhibisi Tirosinase dan Mekanisme Inhibisi pada Sistem Bebas Sel
Untuk mengevaluasi kemanjuran dan mekanisme penghambatan galangin pada tirosinase, tirosinase jamur digunakan seperti yang dijelaskan sebelumnya. Secara singkat, 1000 unit tirosinase jamur dilarutkan dalam 20 L phosphate-buffered saline (PBS) dan ditambahkan ke 170 L campuran uji, yang mengandung 1 mM L-tirosin, 50 mM buffer fosfat (pH 6,5), dan 10 L bahan tes. Campuran diinkubasi pada suhu kamar (25 derajat) selama 30 menit. Jumlah dopakrom yang dihasilkan diukur secara spektrofotometri pada 492 nm (OD492) dalam pembaca lempeng mikro. IC50 dihitung dari pengulangan percobaan pada dosis galangin yang berbeda. Untuk menentukan mekanisme penghambatan galanin, uji kinetik tirosinase dilakukan. Berbagai konsentrasi L-tirosin (1, 2, 4, dan 8 mM) digunakan untuk uji penghambatan. Setelah pemeriksaan, setiap nilai diubah menjadi kebalikannya menurut plot Lineweaver-Burk. Hasil penelitian menunjukkan plot 1/V versus 1/[S]. Perpotongan setiap plot digunakan untuk menentukan mekanisme penghambatan.
Simulasi dok
Untuk simulasi docking protein-ligan in silico, kami menggunakan AutoDock4.2. Pengikatan yang berhasil diperoleh antara protein dan ligan. Struktur tiga dimensi (3D) tirosinase yang digunakan dalam struktur kristal berasal dari Agaricus bisporus (PDB ID: 2Y9X) dan tempat pengikatan tirosin yang telah ditentukan sebelumnya digunakan sebagai kantong docking.15) Simulasi docking dilakukan antara tirosinase dan galangin / asam kojat. Senyawa disiapkan untuk simulasi docking dengan langkah-langkah berikut: (1) struktur 2D diubah menjadi struktur 3D; (2) muatan dihitung, dan (3) atom hidrogen ditambahkan menggunakan program ChemOffice. Prediksi kemungkinan residu ikatan hidrogen antara senyawa dan tirosinase dan pembentukan farmakofor dihitung dengan LigandScout 3.0.
Sistem Kultur Sel
Sel murine melanoma B16F10 yang diperoleh dari American Type Culture Collection (Rockville, MD, USA) pertama kali digunakan untuk mengevaluasi efek galanin pada penghambatan tirosinase. Sel-sel dikultur dalam medium Eagle yang dimodifikasi Dulbecco (DMEM; WELGENE Inc., Korea, LM001-05) yang dilengkapi dengan 10 persen serum janin sapi (FBS; WELGENE Inc., S101-01) dan penisilin/streptomisin (100 IU/50 g/mL; WELGENE Inc., LS202-02) pada suhu 37 derajat dalam atmosfer yang dilembabkan yang mengandung 5 persen CO2 di udara. Untuk mengevaluasi efek galangin pada viabilitas sel, uji viabilitas sel dilakukan menggunakan kit yang tersedia secara komersial (EZ-1000, Dogen Bio, Korea). Secara singkat, sel-sel dikultur di 96-piring sumur dan diperlakukan dengan konsentrasi galangin yang berbeda. Setelah waktu yang ditentukan, absorbansi dibaca pada 450 nm dengan menggunakan microplate reader. Semua percobaan sel dilakukan setidaknya tiga kali untuk memastikan reproduktifitas.
Aktivitas Tirosinase
Aktivitas tirosinase pada sel B16F10 diperiksa melalui pengukuran laju oksidasi L-DOPA. Sel-sel dilapisi dalam piring 60π-sumur, diinkubasi dengan ada atau tidak adanya 1 M -MSH, dan kemudian dirawat selama 24 jam dengan galangin 5 dan 10 M. Pengobatan dengan asam kojic digunakan sebagai kontrol positif. Sel-sel dilisiskan dalam 500 L 50 mM buffer natrium fosfat (pH 6,8) yang mengandung 25 L 1 persen Triton X-100 dan 25 L 0,1 mM fenilmetilsulfonil fluorida dan kemudian dibekukan pada suhu -80 derajat selama 30 menit. Setelah pencairan dan pencampuran, lisat seluler diklarifikasi dengan sentrifugasi pada 12000 × g selama 30 menit pada 4 derajat. Supernatan (80 L) ditempatkan dalam pelat sumur 96-, ditambahkan 20 L L-DOPA (2 mg/mL), dan absorbansi dibaca pada 492 nm setiap 10 menit selama 1 jam pada 37 derajat menggunakan pembaca piring.
Ekstrak Cistanche: menghambat ekspresi tirosinase
Kandungan Melanin
Dalam penelitian ini, kandungan melanin digunakan sebagai indeks melanogenesis. Secara singkat, sel B16 dilapisi dalam piringan 60π dan diinkubasi dengan ada atau tidak adanya 1 M -MSH. Sel-sel kemudian diinkubasi selama 24 jam dengan atau tanpa galangin pada 5 dan 10 M. Perlakuan dengan asam kojic digunakan sebagai kontrol positif. Setelah dua kali pencucian dengan PBS, sampel dilarutkan dalam 500 L 1 NNaOH, diinkubasi pada suhu 60 derajat selama 1 jam, dan dicampur untuk melarutkan melanin. Absorbansi pada 405 nm diukur dengan menggunakan pembaca lempeng mikro.
Dalam Eksperimen Vivo
Kemanjuran depigmentasi in vivo dari galangin dinilai dalam percobaan hewan. Penelitian pada hewan dirancang oleh Bank Jaringan Penuaan, disetujui oleh Komite Perawatan Hewan Institusional Universitas Nasional Pusan, dan dilakukan sesuai dengan pedoman eksperimen hewan yang dikeluarkan oleh Universitas Nasional Pusan. Tikus tidak berbulu HRM2 jantan berusia enam minggu yang memiliki melanin diperoleh dari Hewan Laboratorium Hoshino (Yoshino, Saitama, Jepang) dan ditempatkan dalam kondisi yang terkendali (23±1 derajat , 55 persen ±5 persen kelembaban, 12-jam cahaya /siklus gelap) dengan akses gratis ke air dan diet laboratorium standar. Setelah masa aklimatisasi selama 1 minggu, mencit secara acak dibagi menjadi empat kelompok yang terdiri dari enam ekor hewan. Galangin (10 M) dan asam kojic (50 M) dibuat dalam larutan yang terdiri dari propilen glikol dan etanol (3:7). Larutan terlarut (200 L) atau pembawa dioleskan ke kulit punggung hewan sekali sehari. Hewan diiradiasi dengan UVB dari CROSSLINKER (BEX-800, Ultra-Lum Inc., CA, USA) pada 50 mJ/cm2 sesuai dengan jadwal percobaan hewan. Warna situs kulit diukur dengan menggunakan spektrofotometer CR-10 (Konica Minolta Sensing, Inc., Sakai, Osaka, Jepang) di mana warna dideskripsikan dengan nilai L*, a*, dan b* sesuai dengan sistem warna Commission International de L'Eclairage. Setelah hewan dikorbankan, kulit dikumpulkan, difiksasi dalam paraformaldehida 4 persen semalam pada suhu kamar, dan diwarnai untuk melanin dengan menggunakan kit pewarnaan Fontana-Masson dari American Master*Tech Scientific, Inc. (Lodi, CA, USA) di sesuai dengan instruksi pabrik. Secara singkat, irisan kulit diwarnai dengan larutan perak amoniak selama 60 menit pada 60 derajat, diinkubasi dalam 0,1 persen emas klorida, dan kemudian dalam 5 persen natrium tiosulfat.
Analisis Statistik
Uji-t Student digunakan untuk menganalisis perbedaan antara dua kelompok dan ANOVA digunakan untuk menganalisis perbedaan antarkelompok. Nilai p<0.05 were="" considered="" statistically="" significant.="" the="" analysis="" was="" performed="" using="" graphpad="" prism="" 5="" (graphpad="" software,="" la="" jolla,="" ca,="">
cistanche tubolosa
HASIL
Simulasi Silico Docking Galangi pada Tirosinase
Lengkuas adalah fitokimia alami dan mengandung bagian flavonoid dalam strukturnya (Gbr. 1). Awalnya, simulasi docking dilakukan antara tirosinase jamur (struktur tersier) dan senyawa (galangin, asam kojic, dan tirosin). Situs docking yang galangin dan asam kojic terikat sebelumnya ditentukan sebagai situs aktif tirosinase.15) Simulasi ini berhasil dan skor yang signifikan dicapai. Energi ikat antara galangin dan tirosinase adalah 7.67 kkal/mol, yang ditentukan dengan analisis menggunakan Autodock4.2. Energi ikat antara tirosinase dan asam kojic (kontrol positif) adalah -4,09 kkal/mol, dan -5,13 kkal/mol antara tirosinase dan substrat asli, tirosin (Tabel 1). Hasil ini menunjukkan bahwa galangin mengikat tirosinase dengan afinitas yang lebih tinggi dibandingkan interaksi lainnya. Berdasarkan hasil simulasi docking, kami mencari interaksi antara tirosinase dan senyawa menggunakan program LigandScout. Kami menemukan bahwa galangin berinteraksi dengan ASN-260, VAL-283, ALA-286, dan PHE-292, sedangkan asam kojic hanya berinteraksi dengan ASN-260 dan MET280 ( Gambar 2, Tabel 1). Oleh karena itu, interaksi ini dapat menjadi penentu utama aktivitas inhibitor dan memiliki efek penting pada skor docking.
Penentuan Efek dan Mekanisme Antimelanogenik pada Tirosinase Jamur
Berdasarkan hasil in silicore dan hasil lain yang dilaporkan sebelumnya, kami mengevaluasi efek dan mekanisme antimelanogenik menggunakan tirosinase jamur. Ketika diuji dengan tirosinase jamur dalam sistem bebas sel, khasiat penghambatan galangin lebih kuat daripada asam kojic (Gbr. 3A). Selain itu, aktivitas tirosinase yang bergantung pada dosis galangin (Gbr. 3B). Nilai IC50 galangin dan asam kojic dihitung dan disajikan pada Tabel 2. Nilai IC50 yang rendah dari galangin (3,55±0,39 M) menunjukkan bahwa potensinya jauh lebih tinggi daripada kojic asam (48,55±1,79 M). Mekanisme penghambatan galangin dievaluasi lebih lanjut menggunakan plot timbal balik ganda Lineweaver-Burk. Berbagai konsentrasi L-tirosin (1, 2, 4, dan 8 mM) dan galangin (0, 7,5, dan 15 M) digunakan untuk uji penghambatan. Perubahan tergantung waktu dalam absorbansi diukur dan hasil timbal balik ganda diplot (Gbr. 3C). Hasil penelitian menunjukkan bahwa plot 1/V versus 1/[S] menghasilkan tiga garis berbeda dengan kemiringan berbeda, yang berpotongan pada sumbu vertikal yang sama. Ketika konsentrasi senyawa meningkat, nilai Km meningkat, tetapi nilai Vmax tetap sama, yang menunjukkan bahwa galangin merupakan inhibitor kompetitif pengikatan tirosinase. Data ini setuju dengan hasil in silico bahwa galangin terikat, dan menghambat, situs aktif tirosinase.
Gambar 1. Struktur Lengkuas, Asam Kojic, dan Tirosin
Mengevaluasi Aktivitas Depigmentasi Lengkuas pada Sel Melanoma B16F10 Murine
Selanjutnya, aktivitas depigmentasi galangin dievaluasi menggunakan sel melanoma murine B16F10. Pertama, efek sitotoksik galangin pada sel melanoma murine B16F10 diuji. Seperti yang ditunjukkan pada Gambar. 4A, galangin secara signifikan menurunkan viabilitas sel pada dosis di atas 25 M. Oleh karena itu, untuk menghindari sitotoksisitas, kami menggunakan 5 M dan 10 M galangin dalam percobaan untuk mengevaluasi efek antimelanogenik. Sel B16F10 diperlakukan dengan galangin dengan adanya 1 M -MSH. Sintesis melanin total yang disebabkan oleh pengobatan -MSH terlihat dengan mata telanjang dan menunjukkan bahwa galangin berpotensi menghambat sintesis melanin yang dipicu -MSH (Gbr. 4B). -Pengobatan MSH secara signifikan meningkatkan aktivitas tirosinase dan kandungan melanin sel B16F10 (Gbr. 4C, D). Pengobatan lengkuas menghambat melanogenesis seluler, yang ditambah dengan -MSH dengan cara yang bergantung pada dosis (Gbr. 4C, D). Secara kolektif, hasil ini menunjukkan bahwa galangin bisa menjadi agen ampuh untuk penekanan melanogenesis melalui penghambatan tirosinase.
Tabel 1. Skor Docking dan Residu Interaktif Utama Senyawa
Efek lengkuas pada Pigmentasi Kulit di Vivo
Efek penghambatan galangin kemudian diperiksa pada tikus tidak berbulu yang memiliki melanin yang diperlakukan seperti yang dijelaskan oleh jadwal pada Gambar. 5A. Warna situs kulit diukur secara akurat dengan menggunakan spektrofotometer. Paparan UVB tikus menyebabkan penurunan nilai L*, yang mewakili pigmentasi (Gbr. 5B). Penurunan nilai L* yang diinduksi UVB secara signifikan diblokir pada hewan yang diberi galanin dibandingkan dengan hewan kontrol yang diobati dengan kendaraan, yang menunjukkan kemanjuran depigmentasi yang kuat dari galanin (Gbr. 5B). Nilai L* juga menunjukkan potensi galangin selama periode percobaan (Gbr. 5C). Selain itu, warna kulit yang terdeteksi dengan mata telanjang pada hari ke-14 juga menunjukkan potensi antimelanogenik galangin (Gbr. 5D). Pewarnaan Fontana–Mas son, yang menyoroti melanin, memverifikasi efek galangin. Sampel kulit hewan yang disinari UVB menunjukkan peningkatan bintik melanin (Gbr. 5E). Sesuai dengan data numerik dari spektrofotometri, hewan yang diberi galanin menunjukkan penurunan bintik melanin yang diwarnai dibandingkan dengan hewan kontrol yang diiradiasi UVB (Gbr. 5E). Secara kolektif, data ini menyarankan bahwagalaninadalah agen angiogenik waktu yang efektif dalam model melanogenesis in vivo yang diinduksi UVB.
Gambar 2. Hasil Simulasi In Silico Docking antara Tirosinase dan Senyawa Kandidat
DISKUSI
Telah dilaporkan sebelumnya bahwa galangin memberikan berbagai efek biologis, termasuk sitoprotektif. Meskipun aktivitas anti-tirosinase galangin telah dipelajari sebelumnya, mekanisme dan kemanjuran yang akurat dalam sistem kultur sel tidak sepenuhnya dijelaskan.1,16) Oleh karena itu, kami bertujuan untuk mengeksplorasi potensi dan mekanisme penghambatan galangin. Khasiat penghambatan galangin awalnya dievaluasi dengan menggunakan simulasi docking in silico. Simulasi docking mengungkapkan bahwa pengikatan galangin ke situs aktif tirosinase lebih stabil daripada substrat asli (tirosin) atau asam kojic (kontrol positif). Kemanjuran dan mekanisme penghambatan juga dikonfirmasi menggunakan tirosinase jamur. Akhirnya, kemanjuran penghambatan galangin terhadap melanogenesis dievaluasi dalam sel melanoma murine B16F10 yang distimulasi -MSH. Singkatnya, penelitian ini mengidentifikasi galanin sebagai agen ampuh.
Simulasi docking komputasional telah ditetapkan sebagai alat yang ampuh untuk menyaring dan mengevaluasi agen farmakologis baru.17) Hasil simulasi docking tidak hanya memberikan situs pengikatan tetapi juga afinitas pengikatan antara senyawa dan enzim, yang memberikan informasi awal tanpa perlu fisik eksperimen.18) Meskipun prediksi tidak selalu akurat dan memerlukan eksperimen lebih lanjut, simulasi docking mengurangi bahan dan sumber daya yang dibutuhkan dan juga dapat mendukung data eksperimen biologis. Simulasi docking komputasi kami menunjukkan bahwa galangin dapat mengikat lebih kuat ke tirosinase daripada tirosin atau asam kojic. Selanjutnya, jumlah residu yang berinteraksi antara galangin dan tirosinase lebih besar dibandingkan dengan tirosin atau asam kojic. Data docking awal diverifikasi lebih lanjut dengan menggunakan uji enzim tirosinase, yang menunjukkan bahwa IC50 galangin lebih rendah daripada asam kojic; dengan demikian, efek penghambatan galangin pada tirosinase lebih kuat daripada asam kojic.
Mekanisme penghambatan galangin pada tirosinase diteliti lebih lanjut dengan menggunakan tirosinase jamur. Karena data simulasi docking menunjukkan bahwa galangin mengikat ke situs aktif yang sama yang mengikat tirosinase, diantisipasi bahwa galangin dapat menjadi inhibitor kompetitif tirosinase. Hasil eksperimen mengungkapkan bahwa galangin secara kompetitif menghambat tirosinase dari mengikat substrat aslinya, tirosin, yang mengkonfirmasi hasil simulasi docking. Secara kolektif, hasil menunjukkan keandalan simulasi docking komputasi dan potensinya untuk menyaring inhibitor.
Kemanjuran galangin juga dievaluasi dalam sel melanoma murine B16F10. Galangi menunjukkan efek sitotoksik yang signifikan dalam sel B16F10 bila diberikan pada dosis tinggi. Ini konsisten dengan laporan sebelumnya tentang aktivitas antikanker galangin di beberapa lini sel kanker. 19,20) Karena efek sitotoksik, percobaan untuk memverifikasi efek anti melanogenik sel memerlukan pemilihan kondisi yang cermat. Namun, nilai IC50 galangin sangat rendah ketika diuji dalam sistem bebas sel yang tidak menunjukkan efek sitotoksik. Memang, kemanjuran galangin untuk penghambatan melanogenesis dapat diterima pada dosis rendah yang tidak menimbulkan sitotoksisitas. Dosis rendah galangin secara efektif mengurangi kandungan melanin, serta aktivitas tirosinase, dalam sistem kultur sel. Seiring dengan sistem bebas sel,galaninterbukti memiliki efek penghambatan yang kuat pada tirosinase dalam sistem kultur sel.
Akhirnya, efek antimelanogenik dari galangin dievaluasi dengan menggunakan tikus berbulu HRM2. Model tikus berbulu HRM2 memberikan dasar yang berguna untuk percobaan melanogenesis in vivo, karena tikus dapat menghasilkan melanin, terutama di bawah tekanan lingkungan.21,22) Dalam model tikus ini, galangin menunjukkan efek antimelanogenik yang signifikan pada sintesis melanin yang diinduksi UVB. Sepengetahuan kami, ini adalah studi pertama yang menunjukkan kemanjuran antimelanogenik galangin menggunakan model melanogenesis in vivo. Penting untuk menetapkan kemanjuran in vivo karena banyak penghambat melanogenesis lainnya telah gagal bekerja secara in vivo karena ketidakmampuan mereka untuk melintasi stratum korneum kulit. Kesimpulan,galanindiidentifikasi sebagai agen angiogenik hewan yang kuat secara in vivo. Kami menyimpulkan bahwa inhibitor tirosinase galangin menawarkan kandidat obat baru untuk pengobatan gangguan hiperpigmentasi.
kapsul cistanche
