Pengaruh Ekstrak Air Cistanche Tubulosa Terhadap Mikrobiota Usus Mencit Yang Mengalami Gangguan Usus

1. Perkenalan

Mikroorganisme usus terutama berkolonisasi di lumen usus dan lapisan mukosa dan saling bermutasi dengan inangnya melalui pertukaran material dan energi, transformasi, dan proses lainnya [1]. Mereka merupakan pusat sinyal yang mengintegrasikan pesan-pesan lingkungan, seperti pola makan, dengan sinyal genetik dan kekebalan tubuh, sehingga mempengaruhi metabolisme, kekebalan, sistem saraf, dan respons tubuh terhadap infeksi [2]. Biasanya, ada keseimbangan dinamis antara flora usus dan inang; Namun, disbiosis usus dapat menyebabkan perubahan keseimbangan kesehatan/penyakit, gangguan kekebalan, dan banyak penyakit [3]. Perubahan moderat pada mikrobiota usus dapat diterima oleh inang; Namun, hal ini masih memberikan peluang untuk memperkuat perubahan pada faktor-faktor yang memberatkan lainnya, seperti bakteriofag, bakteriosin, dan stres oksidatif [4].

CISTANCHE TUBULOSA UNTUK MENINGKATKAN MIKROBIOTA Usus Usus PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Penelitian sebelumnya telah menunjukkan hal ituekstrak etanol Cistanche tubulosa(CT), formula herbal tradisional Tiongkok, dapat mengatur komposisi mikroba usus pada tikus [5], dan total glikosida CT menyesuaikan mikrobiota usus yang terganggu [6]. Spesies Cistanche, yang terutama menjadi parasit pada akar spesies Tamarix, juga disebut "ginseng gurun", dan tonik yang terdiri dari batang Cistanche deserticola (CD) dan Cistanche tubulosa (CT) digunakan sebagai obat herbal [7 ].Thkomponen kimia utama CT phenyletanol glikosida (PHGs), yang merupakan zat antioksidan [8, 9], ditemukan meningkatkan disfungsi reproduksi [10], menekan aktivasi sel stellate hati, memblokir konduksi jalur sinyal di TGF{{3} }/ SMAD [11], dan mencegah fibrosis hati yang diinduksi albumin serum sapi pada tikus [12]. Di antara lebih dari 100 komponen dalam CT, polisakarida juga merupakan salah satu zat penting dengan kandungan melimpah [13, 14]. Penelitian sebelumnya telah menunjukkan bahwa polisakarida C. deserticola menginduksi melanogenesis dalam melanosit, mengurangi stres oksidatif [15], mengurangi disfungsi kognitif dengan mengatur proses antioksidan dan anti-inflamasi pada tikus [16], melindungi sel PC12 terhadap cedera yang disebabkan oleh OGD/RP [17 ],meningkatkan penyerapan echinacoside in vivo, dan mempengaruhi mikrobiota usus [18].

Probiotik adalah mikroorganisme hidup nonpatogen yang memiliki manfaat kesehatan dan memberikan keseimbangan mikroba dalam saluran pencernaan bila diberikan dalam jumlah yang cukup (19).ThMereka dapat meningkatkan respon imun seluler nonspesifik yang ditandai dengan aktivasi makrofag, sel pembunuh alami (NK), dan limfosit T sitotoksik antigen spesifik dan pelepasan berbagai sitokin dengan cara yang spesifik terhadap strain dan bergantung pada dosis [20]. Strain probiotik meningkatkan sifat-sifat epitel usus melalui modulasi TJ, dan strain probiotik spesifik telah terbukti mengatur ekspresi musin, sehingga mempengaruhi sifat-sifat lapisan lendir dan secara tidak langsung mengatur sistem kekebalan usus [21]. Strain bakteri asam laktat (BAL) dan Bifidobacterium merupakan probiotik utama yang telah digunakan di banyak bidang [22-26].ThManfaat kesehatannya sangat banyak, dan kapasitas antioksidannya menjadi faktor penting dalam fungsinya yang berhubungan dengan kesehatan [27]. Probiotik dapat mengkelat ion logam untuk mencegahnya mengkatalisis oksidasi [28, 29]; mereka juga dapat meningkatkan ekspresi enzim antioksidan [30, 31], menghasilkan berbagai metabolit dengan aktivitas antioksidan [32, 33], memediasi jalur sinyal antioksidan [34-36], dan mengatur enzim yang memproduksi spesies oksigen reaktif (ROS) dan respon mikroorganisme usus terhadap stres oksidatif [37].

Sebuah penelitian baru-baru ini menunjukkan bahwa polisakarida CD bisamerangsang pertumbuhan beberapa bakteri asam laktat, yang dapat bermanfaat bagi kesehatan manusia [38]. Namun, kandungan polisakarida dalam CD berbeda dengan CT [7, 39], dan perbedaan ini dapat menyebabkan efek berbeda pada mikroorganisme usus. Lebih jauh lagi, meskipun polisakarida CD dapat mengurangi stres oksidatif dengan mengaktifkan jalur NRF2/HO-1 [15], efek dari satu polisakarida mungkin berbeda dari efek keseluruhan dari beberapa komposisi pada CT.Thkami, perlu untuk secara tepat menentukan efek ekstrak air CT pada mikroorganisme usus. Selain itu, PHG juga dapat melawan stres oksidatif [40] dan menekan respons inflamasi yang dimediasi lipopolisakarida dengan mengaktifkan jalur Keap1/Nrf2/HO-1 [41].ThOleh karena itu, penentuan efek ekstrak air CT sangat bermanfaat. Selain itu, efek konstituen tertentu dari ekstrak CD berair terhadap stres oksidatif dan flora usus menunjukkan bahwa resistensi terhadap stres oksidatif mungkin berkorelasi dengan perubahan flora usus.

Untuk mengisi kesenjangan pengetahuan mengenai topik yang disebutkan di atas, kami menyelidiki efek ekstrak air CT pada mikrobiota usus tikus dengan kelainan flora usus.ThHasil ini akan memberikan informasi berharga tentang mekanisme yang memungkinkan CT mengubah flora usus dan memberikan resistensi usus terhadap stres oksidatif.

2. Bahan-bahan dan metode-metode

2.1. Hewan Eksperimental.

Sebanyak 18 tikus C57BL/6J jantan kelas SPF, dengan berat 18–22 g, dibeli dari Pusat Hewan Eksperimental Universitas Kedokteran Xinjiang dengan nomor lisensi SCXK (baru) 2018-0003.ThMereka ditempatkan di kandang dalam kondisi standar: 12 jam fotoperiode terang/gelap, suhu 23 ± 2 derajat, dan kelembaban 55 ± 5%.ThHewan-hewan tersebut diberi pakan komersial (51% ekstrak bebas nitrogen, 25% protein kasar, 4,6% lemak kasar, 6,5% abu mentah, 4,0% serat kasar, dan 8,9% kelembapan) dan air keran.ThHewan-hewan tersebut dirawat sesuai dengan rekomendasi yang dijelaskan dalam Panduan Perawatan dan Penggunaan Hewan Laboratorium dari Institut Kesehatan Nasional.

CISTANCHE TUBULOSA ALAMI UNTUK MENINGKATKAN IMUNITAS PHGS75% ECH 30% ACT 12%

2.2. Ekstraksi Ekstrak Berair.

Irisan kering C. tubulosa, disediakan oleh Hotan Dichen Pharmaceutical Biotechnology Co., Ltd., digiling menjadi bubuk, dan dipilih butiran dengan ukuran partikel antara 20 dan 40 mesh.ThKondisi ekstraksi adalah sebagai berikut: perbandingan padat-cair 1:19, suhu 80 derajat, waktu gelombang mikro 6 menit, waktu ultrasonik 16 menit, daya gelombang mikro 400 W, dan daya ultrasonik 400 W.ThKandungan komponen utama ekstrak air diukur dengan HPLC (Agilent 1260 Infinity II, California, USA). Singkatnya, zat standar echinacoside (0.2 mg/mL) dan acteoside (0.2 mg/mL) dilarutkan dalam metanol 50% untuk dijadikan sebagai larutan zat referensi.Thid, 1 g ekstrak air CT dilarutkan dalam 100 mL metanol 50% dan didiamkan selama 30 menit.ThLarutan ekstrak diolah dengan USG pada 250 W dan 35 kHz selama 10 menit dan selanjutnya disentrifugasi pada 12,000 rpm/menit.ThSupernatan disaring dengan membran filter mikropori berukuran 0,45 μm.ThLarutan zat acuan dan filtratnya kemudian dideteksi dengan HPLC dengan kondisi sebagai berikut: silika gel berikatan oktadekil silan sebagai pengisi, metanol sebagai fase gerak A, dan asam format 00,1% sebagai fase gerak B.ThSuhu kolom ditetapkan 30 derajat, panjang gelombang deteksi ditetapkan 330 nm, dan volume injeksi adalah 10 μL.

2.3. Eksperimen.

Setelah satu minggu adaptasi, 18 tikus secara acak dibagi menjadi enam kelompok: A (normal dengan penambahan ekstrak air CT dosis menengah), B (normal tanpa ekstrak air CT), C (model tanpa ekstrak air), D ( model dengan penambahan ekstrak air CT dosis tinggi), E (model dengan penambahan ekstrak air CT dosis menengah), dan F (model dengan penambahan ekstrak air CT dosis rendah).Thkelompok e diperlakukan sebagai berikut: kelompok normal disiram dengan larutan garam normal, kelompok model disiram dengan cefixime (30 mg/kg, Shiyao Group Ouyi Pharmaceutical Co., Ltd., Shijiazhuang, Cina) dan larutan garam normal, tinggi Kelompok dosis diberi cefixime dan ekstrak air CT 221,14 mg/kg, kelompok dosis menengah diberi cefixime dan ekstrak air 165,54 mg/kg, dan kelompok dosis rendah diberi cefixime dan 110,57 mg/kg. dari ekstrak air.The Kelompok A disiram dengan 165,54 mg/kg ekstrak air, dan tidak ada cefixime yang ditambahkan. Cefixime diberikan setiap hari pada jam siang, dan zat lain diberikan setiap hari pada jam 15:00 jam. Selama percobaan, kelompok C, D, E, dan F dipertahankan dalam model gangguan usus.ThKotoran dikumpulkan setiap tujuh hari di atas meja operasi steril dan disimpan pada suhu -20 derajat.

2.4. Pengamatan Histopatologi Usus Mencit.

Pada akhir percobaan, tikus dibunuh dengan dislokasi serviks, dan isi usus besarnya dikumpulkan di atas meja steril yang dapat dioperasi dan disimpan pada suhu −80 derajat C; pada saat yang sama, sampel jaringan kolon difiksasi dalam formalin netral 10%.Thid, sampel didehidrasi menggunakan gradien konsentrasi etanol, dihialin menggunakan xilena, ditanam dalam parafin, dibelah, dan diwarnai dengan hematoksilin-eosin. Perubahan morfologi pada mukosa kolon diamati dan dibandingkan menggunakan mikroskop optik. Panjang vili dan kedalaman ruang bawah tanah di usus besar diukur, dan rasio panjang vili terhadap kedalaman ruang bawah tanah (nilai V/C) dihitung (51).

2.5. Ekstraksi DNA dan Konstruksi Perpustakaan.

DNA diekstraksi dari kotoran menggunakan EZNA ®Soil DNA Kit (Omega Bio-Tek, Norcross, GA, USA) sesuai dengan protokol pabrikan. Kualitas DNA ditentukan menggunakan fluorometer (QuantiFluor™ –ST, Promega Corporation, USA). Primer berpasangan di wilayah V3-V4 rDNA 16s dirancang untuk memperkuat wilayah tersebut dan menghasilkan fragmen DNA 466 bp.Thprimer majunya adalah 341F (-5- CCTACGGGNGGCWGCAG-3-), dan primer sebaliknya adalah 806R (-5-GGACTACHVGGGTATTCTAAT-3-). Setiap volume PCR adalah 25 μL, mengandung 2,5 μL buffer 10 × PCR, 2 μL dNTP, 1 μL setiap primer, dan 20–30 ng DNA templat.Thid, adaptor yang diindeks dipasang ke ujung amplikon untuk menghasilkan perpustakaan pengurutan.ThPerpustakaan ini divalidasi menggunakan fluorometer QuantiFluor™ dan diukur hingga 10 nmol.

2.6. Pengurutan Gen rRNA 16s dan Analisis Komunitas Mikroba.

The Platform Illumina (Illumina MiSeq) digunakan untuk mendapatkan data berpasangan 2 × 250 bp. Unit taksonomi operasional (OTU) diperoleh dengan menggunakan perangkat lunak Uparse melalui pengelompokan standar dengan kesamaan 97%.ThAlgoritme penugasan Bayesian yang naif dari pengklasifikasi RDP digunakan untuk menyelaraskan OTU dengan database Greengene Rilis 13.5 dan melakukan anotasi spesies.ThKeanekaragaman alfa mikrobiota usus dihitung menggunakan indeks Shannon dan Simpson, dan perbedaan antar kelompok dianalisis dengan analisis diskriminan Linear Effect Size (LEfSe).ThKeanekaragaman beta dianalisis dengan analisis koordinat utama (PCoA) dari ketidaksamaan Bray-Curtis. PICRUSt2 digunakan untuk memperkirakan kapasitas metabolisme mikroba dari mikrobioma usus [42].

2.7. Analisis Data Statistik.

SPSS 20 digunakan untuk ANOVA satu arah, dan data eksperimen dinyatakan sebagai X ± S; X menunjukkan nilai rata-rata, dan S menunjukkan standar deviasi.

CISTANCHE TUBULOSA ALAMI UNTUK MEMODERASI PERUBAHAN METABOLIK PHGS75% ECH 30% ACT 12%

3. Hasil

3.1. 8e Pengaruh Ekstrak Berair CT pada Morfologi Usus Besar.

The senyawa representatif (echinacoside dan acteoside) dan konsentrasi ekstrak CT divalidasi dengan HPLC (Gambar S1). Untuk menentukan efek ekstrak air pada usus, kami menyelidiki panjang vili usus besar dan kedalaman ceruk setelah pengobatan dengan ekstrak air CT.ThVili usus besar pada kelompok normal dan dosis tinggi (A, B, dan D) lebih panjang dan seperti jari, sedangkan vili usus besar pada kelompok model dan dosis rendah (C dan F) pendek, dan ujung usus besar vili rusak (Gambar 1). Oleh karena itu, ekstrak air CT dosis tinggi secara signifikan meningkatkan panjang vili usus besar dan mengurangi kedalaman resesi pada tikus dengan gangguan usus dibandingkan dengan tikus dalam kelompok model (P <0.01). Sebaliknya, kedalaman resesi tidak berbeda secara signifikan antara kelompok dosis tinggi dan kelompok normal (P > 0,05) (Tabel S1).ThHasil ini menunjukkan bahwa ekstrak air CT dosis tinggi dapat memperbaiki morfologi bagian dalam usus besar tikus yang mengalami gangguan usus.

3.2. 8e Pengaruh Ekstrak Air CT terhadap Keanekaragaman Mikrobiota Usus.

Kami melakukan pengurutan gen 16s rRNA untuk menyelidiki penyebab potensial perubahan morfologi di dalam usus besar dan menyelidiki perubahan mikrobiota usus setelah pengobatan dengan ekstrak air CT. Rata-rata 100.553 tag efektif, berkisar antara 77.734 hingga 125.144, diperoleh dari data mentah (Tabel S2).Thtag ini dikelompokkan menjadi 4932 OTU (Tabel S3). Kami kemudian menganalisis keragaman mikrobiota usus berdasarkan OTU ini.The Indeks Shannon dan Simpson menunjukkan tidak ada perbedaan antara kelompok A (normal dengan ekstrak air CT) dan kelompok B (normal tanpa ekstrak air CT) (Gambar 2(a)).Thdiindikasikan bahwa, pada tikus tanpa pengobatan cefixime, ekstrak air CT mungkin tidak memiliki efek tambahan yang menguntungkan atau merugikan pada keanekaragaman mikrobiota usus. Namun keragaman pada kelompok model (C) menunjukkan tren penurunan dibandingkan kelompok normal.ThTikus yang diobati dengan ekstrak air CT dosis tinggi dan menengah menunjukkan tanda-tanda pemulihan keanekaragaman, sedangkan fenomena seperti itu tidak diamati pada tikus yang diobati dengan ekstrak air CT dosis rendah (Gambar 2(a)). Sementara itu, PCoA mengungkapkan bahwa kelompok normal (A dan B) dan kelompok gangguan usus yang diberikan ekstrak air CT dosis tinggi (D) dan dosis menengah (E) cenderung memiliki jarak antar sampel yang lebih pendek dibandingkan pada kelompok model dan pada kelompok gangguan usus. kelompok suplemen ekstrak air CT dosis rendah (F) (Gambar 2(b)).ThHasil ini menunjukkan bahwa ekstrak air CT dapat membantumeningkatkan keanekaragaman mikrobiota ususpada tikus dengan gangguan usus.

3.3. Perubahan Komposisi Mikrobiota Usus yang Diobati dengan Ekstrak Air CT.

ThProfil komposisi mikrobiota dibandingkan antara kelompok yang berbeda. Pada tingkat filum, kelimpahan relatif Proteobakteri pada kelompok model lebih tinggi dibandingkan kelompok lain (Gambar 3(a)).ThPeningkatan Proteobacteria menunjukkan bahwa mikrobioma tikus model diubah oleh cefixime dan bahwa ekstrak air CT mungkin bermanfaat bagi mikrobiota usus karena peningkatan prevalensi Proteobacteria merupakan penanda utama gangguan flora usus [43-45]. Selain itu, pada tingkat genus, kelimpahan relatif Lactobacillus pada kelompok model menurun dibandingkan dengan kelompok normal dan dosis tinggi; namun, angka tersebut meningkat dibandingkan dengan kelompok dosis menengah dan rendah (Gambar 3(b)).ThHasil ini menunjukkan bahwa ekstrak air CT dosis tinggi mungkin mendorong pertumbuhan beberapa bakteri dari genus Lactobacillus.

Mikrobiota diferensial antara kelompok yang diteliti ditentukan lebih lanjut berdasarkan analisis LEfSe.ThAnalisis menunjukkan bahwa, setelah pengobatan dengan cefixime, kelimpahan relatif Turicibacter, Alphaproteobacteria, Acidobacteria, Betaproteobacteriales, dan Chloroflexi meningkat secara signifikan, sedangkan kelimpahan relatif kelompok Lactobacillus, Eubacterium_nodatum_, Pseudonocardiales , dan kelompok Christensenellaceae_R-7_menurun secara signifikan dibandingkan dengan kelompok normal (Gambar 4(a)). Yang mengejutkan, ketika kelompok model dilengkapi dengan ekstrak air CT dosis tinggi, kelimpahan relatif kelompok Muribaculaceae, Lactobacillus, Kineosporiaceae, kelompok Eubacterium nodatum, dan Pedobacter meningkat secara signifikan dibandingkan dengan kelompok model. Sementara itu, kelimpahan relatif Rhodobacter, Ruminococcaceae UCG_013, Roseburia, Ruminiclostridium_9, dan Candidatus Stoquefichus menurun secara signifikan dibandingkan dengan kelompok model (Gambar 4(b)).

3.4. Fungsi Mikrobiota Usus Terkait Perawatan dengan Ekstrak Air CT.

Kami menggunakan perangkat lunak PICRUSt2 untuk memprediksi jalur metabolisme mikrobiota usus, dan kelompok normal digunakan sebagai referensi untuk menganalisis perubahan pada kelompok lain. Di bawah pengobatan cefixime, kelimpahan relatif degradasi etilbenzena, biosintesis peptida nonribosom kelompok siderofor, dan metabolisme xenobiotik melalui jalur sitokrom P450 meningkat; setelah pengobatan dengan ekstrak air CT dosis tinggi dan menengah, kelimpahan relatifnya kembali ke tingkat normal. Sementara itu, kelimpahan relatif jalur metabolisme asam sianoamino menurun pada pengobatan cefixime; Namun, angka ini meningkat setelah pengobatan dengan ekstrak air CT dosis tinggi. Lebih lanjut, secara umum, perubahan jalur metabolit yang berbeda setelah pengobatan dengan cefixime adalah signifikan dibandingkan dengan kelompok normal; Namun, penambahan ekstrak air CT mampu mencegah perubahan yang berlebihan (Gambar 5).

4. Diskusi

Morfologi usus besar dapat diubah oleh pertumbuhan, pencernaan dan penyerapan, regulasi kekebalan tubuh, dan perbaikan cedera usus [46-50].ThRasio e V/C dapat secara komprehensif mencerminkan status pencernaan saluran usus dan berbanding lurus dengan kapasitas pencernaan dan penyerapan saluran usus [51, 52]. Dalam penelitian ini, biopsi vili dan relung serta data statistik menunjukkan bahwa ekstrak air dosis tinggi sebagian dapat memperbaiki kerusakan morfologi di dalam usus besar.

Untuk menyelidiki bagaimana ekstrak air mengubah morfologi usus dan mempengaruhi mikrobiota usus, kami meneliti perubahan flora usus. Kami menemukan bahwa kelimpahan relatif Proteobacteria, penanda utama gangguan flora usus, meningkat pada pengobatan dengan cefixime dibandingkan dengan tanpa pengobatan cefixime.ThMeski demikian, kelimpahan relatif penanda hub lainnya, Bacteroidetes dan Firmicutes, tidak mengalami perubahan signifikan

kelompok dominan di usus manusia; rasio Bacteroidetes/Firmicutes ditemukan menurun pada orang gemuk dibandingkan dengan orang kurus, dan rasio ini ditemukan meningkat seiring dengan penurunan berat badan pada orang yang menjalani dua jenis diet rendah kalori [38, 41, 43–45, 48, 53, 54]. Sementara itu, Turicibacter, yang berhubungan dengan obesitas [55], meningkat secara signifikan pada kelompok model dibandingkan dengan kelompok lain. Khususnya, keragaman mikrobiota usus pada tikus model ditingkatkan dengan penambahan ekstrak air CT. Kami mencatat beberapa bakteri usus spesifik pada tikus yang menjalani perawatan berbeda; misalnya, Lactobacillus dan Muribaculaceae adalah dua genera bakteri utama yang meningkat pada kelompok yang diberi ekstrak air CT dosis tinggi dibandingkan dengan kelompok model (Gambar 4). Penelitian terbaru menunjukkan bahwa polisakarida dari ekstrak air CT mempunyai pengaruh yang signifikan

pertumbuhan beberapa bakteri asam laktat, yang dapat bermanfaat bagi kesehatan inang [43]. Secara paralel, Muribaculaceae adalah organisme probiotik yang dikaitkan dengan umur panjang [57].ThHal ini menunjukkan bahwa mekanisme dimana ekstrak air CT meningkatkan mikrobiota usus mungkin mendorong atau melindungi pertumbuhan organisme probiotik. Bakteri lain yang patut diperhatikan adalah bakteri YE57. Meskipun ekstrak air CT dosis tinggi meningkatkan kelimpahan relatif bakteri YE57 dalam penelitian ini (Gambar 4), penelitian sebelumnya telah menemukan bahwa kelimpahannya lebih tinggi pada usus normal dibandingkan pada usus yang diobati dengan residu teh herbal konsentrasi tinggi. [58] dan kelimpahannya berkurang setelah intervensi dengan Bacillus licheniformis dikombinasikan dengan XOS (xilooligosakarida) [59].Thkami, peran bakteri ini dalam mikrobiota usus perlu dipelajari lebih lanjut. Selain itu, jumlah sampel yang relatif kecil dalam penelitian ini mungkin menyebabkan ukuran positif palsu dan negatif palsu, dan penelitian selanjutnya pada sampel yang lebih besar disarankan untuk memvalidasi penanda bakteri yang teridentifikasi.

Komposisi ekstrak air CT mungkin penting karena pengaruhnya terhadap komposisi dan perubahan fungsional mikrobiota usus tikus dengan gangguan usus. PHG adalah komponen aktif yang umum ditemukan pada CD dan CT, dan echinacoside diidentifikasi sebagai PHG utama pada CT [60]. Dalam beberapa dekade terakhir, echinacoside telah terbukti memiliki banyak aktivitas farmakologis, seperti efek antipenuaan dan neuroprotektif, peningkatan fungsi jantung, pengurangan hiperlipidemia dan hiperglikemia, dan pencegahan diabetes akibat obesitas dan sindrom metabolik [53, 61-65] . Kami mendeteksi perubahan jalur metabolisme mikrobiota usus.ThPengobatan cefixime menyebabkan pengayaan bakteri yang terkait dengan degradasi etilbenzena dan biosintesis peptida nonribosom kelompok siderofor, sedangkan pengobatan dengan ekstrak air CT dosis tinggi dan menengah dapat meringankan perubahan ini, menunjukkan bahwa ekstrak ini memoderasi komunitas bakteri terkait untuk fungsi-fungsi ini. Selain itu, peningkatan pengayaan bakteri terkait dengan jalur metabolisme asam sianoamino dalam pengobatan dengan ekstrak air dosis tinggi dan penurunan pengayaannya pada tikus model menunjukkan bahwa ekstrak air CT dapat meningkatkan metabolisme asam amino siano.ThPerubahan metabolit yang relevan mungkin memberikan ekstrak air ini aktivitas farmakologis.

Meskipun mekanisme ekstrak air CT mengubah komposisi dan fungsi mikrobiota usus rumit, ada beberapa petunjuk yang berspekulasi tentang mekanisme potensial tersebut. Telah dilaporkan bahwa bakteri asam laktat dan ekstrak air CT dapat melawan stres oksidatif. Stres oksidatif yang terjadi selama peradangan merupakan faktor umum yang memperburuk gangguan usus dengan mengurangi keragaman mikroba usus dan mendorong lonjakan bakteri tertentu (4). Sebaliknya, spesies oksigen reaktif juga mendorong pertumbuhan selektif kelompok bakteri melalui respirasi nitrat dan tetrationat [66-68]; misalnya bakteri dari famili Enterobacteriaceae dapat tumbuh dengan cepat sebagai akibat dari perubahan komposisi flora usus dalam kondisi oksidatif selama peradangan [69, 70]. Sebagian besar organisme hidup mengembangkan pertahanan enzimatik, pertahanan antioksidan nonenzimatik, dan mekanisme perbaikan untuk mengais radikal oksigen [71]. Namun, sistem antioksidan asli ini umumnya tidak cukup untuk mencegah kerusakan oksidatif pada organisme hidup. Beberapa antioksidan sintetik tambahan, termasuk butylated hydroxyanisole dan butylated hydroxytoluene, telah banyak digunakan untuk mengurangi oksidasi, namun keamanannya dipertanyakan [72, 73]. Oleh karena itu, para peneliti beralih untuk menemukan antioksidan yang lebih aman dan alami yang diperoleh dari bahan alami. Karena kemampuan polisakarida dan bakteri asam laktat untuk menghilangkan stres oksidatif, penentuan mekanisme antioksidan yang tepat dari ekstrak air CT pada mikrobiota usus memerlukan penyelidikan lebih lanjut di masa depan.

Kesimpulannya, kami menemukan bahwa ekstrak air CT mampumeningkatkan mikrobiota usus ususpada tikus dengan gangguan usus dengan mempromosikan keragaman,memoderasi perubahan metabolisme, dan merombak struktur mikrobiota usus, dan hasil ini dapat memberikan referensi untuk pengembangan obat terkait di masa depan.

CISTANCHE TUBULOSA ALAMI UNTUK REMODEL STRUKTUR MIKROBIOTA Usus PHGS75% ECH 30% ACT 12%