Kontak: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Email:{0}}

Yu Lixin Chen Xueqiang Wu Qunfeng Dong Weiqin Guo Songhua Yu Jian Feng Wei Yang Lei Fu Yifeng Li Junjie Luo Cheng

1 Rumah Sakit ke-98 Tentara Pembebasan Rakyat Tiongkok, Huzhou, Zhejiang 313000

2 Universitas Pengobatan Tradisional Cina Zhejiang, Hangzhou, Zhejiang 310053

3 Rumah Sakit Ortopedi Pengobatan Tradisional Tiongkok Fuyang, Kota Hangzhou, Provinsi Zhejiang, Hangzhou 311400, Zhejiang, Tiongkok

Abstrak

Tujuan: Untuk mengamati efek dariBentengekstrak airpada penyembuhanosteoporosispatah tulang pada tikus dan untuk mengeksplorasi mekanismenya. Metode: Tikus betina SD tingkat SPF secara acak dibagi menjadi kelompok kontrol, kelompok model, dan kelompok perlakuan, dan dimodelkan sesuai dengan metode terkait. 24 jam setelah pemodelan fraktur, kelompok kontrol dan kelompok model diberi gavage normal saline, dan kelompok perlakuan gavage denganBentengekstrak air sekali sehari. Setelah 2 minggu dan 6 minggu intervensi, darah dikumpulkan dari aorta perut untuk mendeteksi interleukin. Tingkat TP (IL-1 B) dan transforming growth factor-B l (TGF-8 1), kumpulkan spesimen fraktur pada saat yang sama, lakukan pemindaian Micro-CT setelah fiksasi, ukur R0 I fraksi volume tulang kalus (BV/TV) dan parameter terkait lainnya Setelah dekalsifikasi, dehidrasi, dan penanaman, dibuat menjadi blok lilin untuk digunakan. Hasil: 6 minggu setelah model osteoporosis ditetapkan, kepadatan mineral tulang tikus pada kelompok model dan kelompok perlakuan lebih rendah dibandingkan dengan kelompok kontrol (P<0.05), but="" there="" is="" no="" significant="" difference="" between="" the="" treatment="" group="" and="" the="" model="" group.="" although="" the="" bone="" density="" of="" the="" treatment="" group="" is="" still="" lower="" than="" that="" of="" the="" control="" group="" after="" 2="" weeks="" and="" 6="" weeks="" of="" intervention,="" it="" is="" significantly="" higher="" than="" that="" of="" the="" model="" group=""><0.05). micro-ct="" scan="" shows="" the="" treatment="" group="" bv/tv,="" tb.="" sp,="" tb.="" n,="" tb.="" th,="" smi="" was="" better="" than="" the="" model="" group="" at="" 2="" and="" 6="" weeks="" after="" the="" intervention,="" and="" the="" bv/tv,="" tb.="" sp,="" smi="" parameters="" of="" the="" control="" group="" and="" the="" treatment="" group="" were="" not="" different="" from="" those="" of="" the="" treatment="" group.="" obviously,="" the="" micro-ct="" parameters="" of="" the="" model="" group="" at="" 2-time="" points="" were="" inferior="" to="" the="" control="" group.="" after="" 2="" weeks="" and="" 6="" weeks="" of="" intervention,="" comparing="" the="" serum="" ilt="" b="" and="" tgf-p="" 1="" levels="" of="" the="" 3="" groups,="" it="" was="" found="" that="" the="" il-1="" p="" levels="" of="" the="" treatment="" group="" were="" lower="" than="" those="" of="" the="" other="" two="" groups="" at="" 2="" weeks.="" at="" 6="" weeks,="" the="" il-1="" p="" levels="" of="" the="" treatment="" group="" were="" higher="" than="" those="" of="" the="" other="" two="" groups.="" the="" control="" group,="" but="" still="" significantly="" lower="" than="" the="" model="" group=""><0.05); in="" terms="" of="" tgf-b="" 1="" level,="" the="" treatment="" group="" was="" higher="" than="" the="" model="" group="" and="" the="" control="" group="" at="" 2="" and="" 6="" weeks,="" and="" there="" was="" no="" statistical="" difference="" between="" the="" control="" group="" and="" the="" control="" group.="" significance.="" conclusion:="" according="" to="" the="" analysis="" of="" bone="" mineral="" density,="" micro-ct="" scan="" parameters,="" and="" serum="" il-1="" b="" and="" tgf-b="" 1="" levels,="" it="" is="" found="" that="" the="" aqueous="" extract="" of="">Bentengdapat mempromosikan penyembuhanosteoporosispatah tulang, dan mekanismenya mungkin terkait dengan penghambatannya terhadaposteoporosispatah tulang. Setelah serum tikus IL-1 B dan mempromosikan sekresi TGF-8 1, yang dapat meningkatkan osteoporosis dan meningkatkan penyembuhan patah tulang.

Kata kunci: patah tulang osteoporosis, Cistanche, penyembuhan patah tulang, tikus

Osteoporosis adalah penyakit di mana kepadatan tulang menurun, struktur halus jaringan tulang hancur, dan kerapuhan tulang meningkat. Pasien dapat menyebabkan patah tulang di bawah sedikit kekuatan eksternal dalam kehidupan sehari-hari. Ini adalah penyakit klinis yang umum dan penyakit yang sering terjadi. Selain itu, jenis fraktur ini sebagian besar adalah pasien usia lanjut, sering dikaitkan dengan penyakit lain, dan sebagian besar fraktur bersifat kominutif, dengan stabilitas yang buruk, dan terkadang penyembuhan fraktur yang lambat atau tidak menyatu, dan ada tingkat kecacatan dan kematian yang tinggi. Saat ini, pengobatannya terutama melalui operasi, restorasi manual, dan pengobatan anti-osteoporosis. Ada kekurangan obat pengobatan yang ditargetkan untuk pasien denganosteoporosispatah tulang. Pengobatan tradisional Tiongkok memiliki sejarah panjang dalam mengobati osteoporosis dan memiliki efek positif. Banyak obat tradisional Cina telah terbukti memperbaiki tulang. Kemiskinan juga dapat mendorong penyembuhan patah tulang. Rongrong biasa digunakan sebagai obat representatif untuk menutrisi Yang ginjal dan berkhasiat menyehatkan hati dan ginjal. Pengobatan tradisional Tiongkok percaya bahwa ginjal mengatur tulang, dan pengobatan patah tulang juga tidak dapat dipisahkan dari ginjal dan esensinya. Farmakologi modern telah menemukan bahwa abu daging juga memiliki efek estrogenik tertentu. Penelitian ini bertujuan untuk menggunakan pengukuran kepadatan tulang, Micro-CT dan serum interleukin-13 ( IL-10 ), pengamatan kadar transforming growth factor-P KTGF-P 1) dan ekstrak air pasta hernia daging pada penyembuhanosteoporosispatah tulang pada tikus

Benteng

1Bahan dan metode

1.1 Hewan percobaan dan peralatan reagen: 52 tikus SD betina SPF dengan berat 210~250g dibesarkan di Pusat Percobaan Hewan di Universitas Pengobatan Tradisional Tiongkok Universitas Zhejiang. Yodium kompleks, Hangzhou Lonzo Medical Disinfectant Co., Ltd., nomor batch 20160720; Penisilin, North China Pharmaceutical Co., Ltd., nomor batch F3117217; IL-18 kit (nomor batch: 20160715), kit TGF-8 1 (nomor batch: 20160722); Pemindai kepadatan tulang sinar-X energi ganda, 0STE0C0RE2; Mikro-CT, Skyscan1176O

1.2 EkstraksiBentengekstrak air: rendam tanahcistanche(Zhejiang University of Traditional Chinese Medicine Pharmaceutical Factory) 10 kali air ultra murni selama 0,5 jam, rebusan penggorengan selama 1,5 jam, ulangi ekstraksi 2 kali, dan steamer putar cairan obat campuran Konsentrat hingga konsentrasi 1,5g /ml dan simpan di lemari es pada suhu 4 derajat untuk digunakan nanti.

1.3 Persiapan pemodelan: Poin-poinnya adalah sebagai berikut.

1.3. 1 Model osteoporosis: Tikus dipelihara secara adaptif selama 1 minggu sebelum pemodelan dan dibagi secara acak menjadi kelompok kontrol, kelompok model, dan kelompok perlakuan, masing-masing 16 ekor, 18 ekor, dan 18 ekor tikus, dan masing-masing kelompok didasarkan pada titik waktu 2 minggu dan 6 minggu. Masing-masing dibagi menjadi dua kelompok. Baik kelompok perlakuan maupun kelompok model dibius dengan 1 persen natrium pentobarbital (0.4ml/100g), kulit dibius, didesinfeksi, dibalut, dan kulit dipotong. Ovarium bilateral tikus diangkat. Kelompok kontrol hanya memiliki sayatan. Tidak

Pengangkatan ovarium

1.3. 2 Model fraktur: 6 minggu setelah model osteoporosis disiapkan, model fraktur akan disiapkan. Setelah tikus di masing-masing kelompok dibius, dilakukan pengukuran kepadatan mineral tulang femur tengah. , Insisi, buat model fraktur transversal femur tengah, perbaiki dengan kawat Kirschner 1mm, sterilkan dan jahit kulit sayatan

1.4 Intervensi obat: Deteksi sinar-X pada tulang paha dilakukan setelah pemodelan, tikus yang gagal dalam preparasi model dihilangkan, dan 80,000 unit penisilin disuntikkan secara intramuskular setelah pemodelan untuk mencegah infeksi. 24 jam setelah operasi, kelompok perlakuan diberi ekstrak air pasta hernia daging (konsentrasi 1,5g/ml, lg/kg, sekali sehari). Kelompok kontrol dan kelompok model diberi volume normal saline yang sama.

1.5 Pengumpulan sampel: Sampel tikus dikumpulkan 2 dan 6 minggu setelah intervensi. Setelah 1 persen anestesi natrium pentobarbital, 5-10ml darah dikumpulkan dari aorta perut untuk membuat serum dan disimpan dalam lemari pendingin -20B. meluangkan. Kemudian tikus dikorbankan dan sampel fraktur femur dikumpulkan dan ditempatkan dalam formaldehida netral 10 persen selama 72 jam.

1.6 Indikator pengujian: Poin-poinnya adalah sebagai berikut.

1.6. 1 Densitas mineral tulang: Semua tikus setelah model osteoporosis dibius sebelum model fraktur, dan kemudian densitas mineral tulang femur tengah diukur. Ketiga kelompok tikus menerima sampel setelah 2 dan 6 minggu intervensi, dan sampel difiksasi selama 72 jam kemudian diukur kepadatan tulangnya kembali.

1.6. 2 Micro-CT: Micro-CT scan dilakukan setelah sampel difiksasi selama 72 jam, dengan 200 gambar di atas dan di bawah ujung fraktur sebagai daerah yang diinginkan (R01), sudut pemindaian 360 derajat , arus 555uA, tegangan 42kV, filter Al 0. 2mm, resolusi 8.73um, setelah selesainya rekonstruksi gambar tiga dimensi dan analisis kalus. Parameter deteksi adalah sebagai berikut: fraksi volume tulang BV/TV, faktor model trabekular tulang (Tb. Pf); indeks model struktural (SMI), dll."

1.6.3 Penentuan serum IL-1P dan TGF-P1: Cairkan serum tikus dari lemari es pada derajat -20 , dan lakukan deteksi langkah demi langkah sesuai dengan IL-13 dan TGF" 1 petunjuk kit.

1.7 Metode statistik: gunakan perangkat lunak analisis statistik SPSS.19 untuk pemrosesan. Data eksperimen dinyatakan dalam mean ± standar deviasi (G±s), dan kepadatan mineral tulang dari tiga kelompok tikus. Parameter mikro-CT JL-1 P Level JGF- P 1 dirata-ratakan dengan analisis varians satu arah, dan perbandingan berpasangan antar kelompok digunakan Inspeksi, level inspeksi adalah P<0.>

2 hasil

2.1 Kepadatan tulang dari ketiga kelompok: lihat Tabel 1.

Tabel 1 Hasil kepadatan mineral tulang femur tengah masing-masing kelompok tikus (x±s, g/cm²)

Catatan: Dibandingkan dengan grup model, *P<0.05; compared="" with="" the="" control="" group.△=""><>

2.2 Penampang dua dimensi Micro-CT: penampang dua dimensi sagital memilih gambar sumbu longitudinal tulang paha pada setiap titik waktu di setiap kelompok (lihat Gambar 1), dan penampang melintang dua dimensi horizontal bagian memilih gambar ke-100 di bawah garis fraktur untuk perbandingan (Gambar 2) ), dapat dilihat dari gambar bahwa kalus masing-masing kelompok meningkat secara bertahap dari waktu ke waktu, tetapi plastis pada derajat yang berbeda 6 minggu setelah fraktur; pada saat yang sama, dapat dilihat bahwa kalus pada kelompok kontrol besar, dan korteks kalus tebal dan merangkak melintasi garis fraktur setelah 6 minggu, sedangkan kalus pada kelompok model Ada lebih sedikit tulang di kalus di 2 minggu, dan korteks kalus longgar setelah 6 minggu. Meskipun volume kalus pada kelompok perlakuan tidak besar pada 2 minggu, massa tulang pada kalus lebih banyak daripada kelompok model. Kalus lebih baik terbentuk setelah 6 minggu. Dan garis patahnya tidak jelas.

Kelompok kontrol Kelompok model Kelompok perlakuan

Gambar 1 Penampang sagital femur tengah dari masing-masing kelompok

Gambar 2 Bagian horizontal femur tengah masing-masing kelompok

2.3 Rekonstruksi tiga dimensi Micro-CT: rekonstruksi tiga dimensi kalus di ujung tulang paha yang patah ditunjukkan pada Gambar 3. Dapat dilihat dari Gambar 3 bahwa kalus terbentuk di sepanjang periosteum di kedua ujung fraktur garis 2 minggu setelah fraktur pada masing-masing kelompok, untaian fraktur pada masing-masing kelompok masih terlihat jelas terutama pada kelompok model dan kelompok perlakuan, sedangkan kalus pada kelompok kontrol tebal dan tebal, sebagian besar dengan pelat 6 minggu setelah fraktur . Tulang trabekular lebih dominan dan garis fraktur menghilang, sedangkan kelompok model tulang longgar dan garis fraktur kabur, tetapi kelompok perlakuan memiliki lebih banyak tulang kalus, tulang trabekular teratur dan tebal, serta garis fraktur tidak jelas.

Gambar 3 Rekonstruksi tiga dimensi kalus R0I pada ujung yang retak

2.4 Parameter mikro-CT: Gunakan perangkat lunak untuk menganalisis kalus di ujung yang retak. Lihat Tabel 2 untuk parameter terkait.

Tabel 2 Perbandingan parameter Micro-CT masing-masing kelompok (x±s)

Kelompok kontrol Kelompok model Kelompok perlakuan

Catatan: Dibandingkan dengan grup model, *P<0. 05;="" compared="" with="" the="" control="" group.=""><0.>

2.5 Serum IL-1 P .TGF-P level 1: lihat Tabel 3.

Tabel 3 Perbandingan kadar IL-1 P JGF-0 1 pada masing-masing kelompok G±s, n=8)

Catatan: Dibandingkan dengan grup model, *P<0.05; compared="" with="" the="" control="" group,=""><0.05 0="" 3="">

Dalam beberapa tahun terakhir, obat-obatan tradisional Tiongkok Yinyangdian, keberuntungan Drynaria, dan senyawanya (Pil Qing, Pil Liuwei Dihuang, dll.) telah terbukti dalam praktik klinis untuk memperbaiki osteoporosis secara signifikan. Jenis obat dan senyawa Cina ini banyak digunakan untuk menyehatkan hati dan ginjal. Hal ini sesuai dengan prinsip memelihara ginjal dan memperbaharui otot-otot pada tahap pertengahan dan akhir dari patah tulang. "Sepuluh hari. Pasta anggota badan yang berdaging pertama kali diterbitkan di "Materia Medica Shen Nong". , Hangat di alam, memiliki fungsi menyehatkan ginjal dan memperkuat Yang, mengisi kembali esensi dan sumsum, memberi nutrisi pada darah dan melembabkan kekeringan, dan warna yang menyenangkan dan memperpanjang hidup.

Dalam penelitian ini, kepadatan mineral tulang kelompok perlakuan lebih tinggi dibandingkan kelompok model setelah 2 dan 6 minggu intervensi (P<0.05). micro-ct="" scan="" bv/tv="" parameters="" showed="" the="" results="" and="" bone="" mineral="" density="" of="" the="" treatment="" group="" at="" two="" time="" points="" after="" the="" intervention="" the="" measurement="" results="" are="" consistent,="" and="" bv/tv="" is="" an="" important="" indicator="" for="" the="" evaluation="" of="">osteoporosispenyembuhan patah tulang. Ini secara langsung mencerminkan isi tulang kalus. Ini menunjukkan bahwa Rouganrong mungkin memiliki efek mempromosikan osteogenesis. Analisis mungkin efektif dalam pasta hernia daging. Bahan-bahannya memiliki efek mengatur BMP2, dan BMP2 adalah salah satu anggota keluarga TGF-8. Dan hasil ini juga dikonfirmasi oleh parameter lain dari Micro-CT scan (Tb. Spjb. N, Tb. Th. SMI). Tb. Sp dan SMI mencerminkan sifat biomekanik kalus, dan nilai-nilai dalam kelompok perlakuan secara signifikan lebih baik daripada kelompok model, ini juga lebih lanjut menunjukkan bahwa Roudongrong memiliki efek meningkatkan keropos tulang, mempromosikan osteogenesis, dan mempercepat penyembuhan patah tulang.

Dalam hal kadar serum IL-1B dan JGF-P 1, setelah 2 minggu dan 6 minggu intervensi, ditemukan bahwa kadar IL-1P kelompok perlakuan lebih rendah daripada dua lainnya. kelompok pada 2 minggu, dan pada 6 minggu. Meskipun tingkat IL-1 B kelompok perlakuan lebih tinggi dari kelompok kontrol, masih secara signifikan lebih rendah dari kelompok model (『<0.05); while="" the="" tgf-p="" 1="" level="" of="" the="" treatment="" group="" was="" higher="" than="" the="" model="" group="" and="" the="" control="" group="" at="" 2="" and="" 6="" weeks,="" and="" there="" was="" no="" statistically="" significant="" difference="" from="" the="" control="" group="" the="" level="" of="" il-1="" p="" directly="" affects="" the="" differentiation="" and="" activity="" of="" osteoclasts.="" an="" increase="" in="" its="" level="" will="" promote="" bone="" resorption="" and="" inhibit="" the="" proliferation="" and="" differentiation="" of="" osteoblasts.="" jhtgf-p="" 1="" is="" closely="" related="" to="" the="" proliferation,="" differentiation,="" and="" migration="" of="" osteoclasts.="" it="" has="" the="" effect="" of="" promoting="" cartilage="" and="" bone="" callus="" formation="" ⑵="" and="" accelerating="" the="" shaping="" of="" bone="" callus.="" this="" suggests="" that="">Bentengbisameningkatkan keropos tulang, mempromosikan osteogenesis, dan mempercepat penyembuhan patah tulang. Ini dapat mengurangi tingkat IL-13 diosteoporosistikus patah dan menghambat patah tulang. Aktivitas sel tulang tercapai; selain itu, mungkin juga terkait dengan fakta bahwaBentengdapat meningkatkan kadar TGF-B 1 pada tikus yang retak, meningkatkan diferensiasi osteogenik dan pematangan serta pembentukan kalus.

Singkatnya, berdasarkan analisis kepadatan mineral tulang, parameter pemindaian Micro-CT, dan kadar serum IL-1 P, TGF"1, ditemukan bahwa ekstrak air dariBentengbisameningkatkan keropos tulangdanmempromosikan penyembuhan patah tulang osteoporosis. Mekanismenya mungkin terkait dengan ini. Ini dapat menghambat sekresi serum ILT 8 dan mempromosikan sekresi TGF-B 1 pada tikus setelahosteoporosispatah tulang, sehingga meningkatkan osteoporosis dan mempromosikan penyembuhan patah tulang.

4 Referensi

[1] Ma Yuanzheng, Wang Yipeng, Liu Qiang, dkk. Pedoman diagnosis dan pengobatan osteoporosis pada lansia di China (2018) [J], Chinese Journal of Osteoporosis, 2018, 24(12): 1541-1567.

[2] Zhu Gang, Sun Haibin, Xu Gang, dkk. Efek terapeutik dan mekanisme ekstrak alkohol hernia daging pada tikus ovariektomi dengan osteoporosis[J]. Jurnal Universitas Jilin (Edisi Kedokteran), 2018, 44(1): 68-72.

[3] Karvande A, Khedgikar V, Kushwaha P, dkk. Ekstrak kayu batang dari Dalbergia sissoo mempromosikan penyembuhan patah tulang dan penerapannya pada tikus osteoporosis yang diinduksi ovariektomi [J]. Jurnal Farmasi dan Farmakologi, 2017, 69(10): 1381-1397.

[4] Kevin 0'Neill, Christopher MS, Nicholas AM, dkk. Penilaian micro-computed tomography dari perkembangan penyembuhan patah tulang pada tikus[j]. Tulang, 2012, (6): 1357-1367.

[5] Yao Xinmiao, Shi Xiaolin, Wang Jian, dkk. Konsensus ahli tentang diagnosis bertingkat dan pengobatan osteoporosis primer dengan pengobatan tradisional Tiongkok di Provinsi Zhejiang (2017) [J], Jurnal Pengobatan Tradisional Tiongkok Zhejiang, 2018, 53(4): 237- 241.

[6] Ma Meng, Zhang Zhiguo, Ma Xiaohui. Kemajuan penelitian dalam pencegahan dan pengobatan osteoporosis dengan obat-obatan Cina tunggal dan majemuk[J]. Panduan Medis Tiongkok, 2018, 20(8) =477-481.

[7] Zhang Yuequan, Zheng Danhong, Xu Jianfeng, dkk. Pengaruh pure keluarga daging gurun pada ekspresi protein BMP-2 pada tikus osteoporosis yang menua dengan cepat[J]. Jurnal Medis Ningxia, 2014, 36(12): 1114-1116