Efektivitas Perawatan Kombinasi Ekstrak Laminaria Japonica Dan Cistanche Tubulosa dalam Pertumbuhan Rambut

Kontak: emily.li@wecistanche.com

Kyungha Shin1# dkk

Karena kerontokan rambut kulit kepala telah meningkat baru-baru ini bahkan pada orang muda, yang secara serius mempengaruhi kualitas hidup individu,pertumbuhan rambut-efek stimulasi ekstrak Laminaria japonica (LJE) danCistanche tubulosaekstrak (CTE) diselidiki. Setelah memastikan fase anagen folikel di bawah pencukuran, tikus jantan C57BL/6 dioleskan secara dermal dengan Minoxidil 3 persen atau diberikan secara oral dengan kombinasi LJE dan CTE（Cistanche tubulosaekstrak)selama 21 hari. Minoxidil mendorong pertumbuhan kembali rambut dan meningkatkan aktivitas -glutamyl transpeptidase (-GTP) dan alkaline phosphatase (ALP). Selain itu, tingkat faktor pertumbuhan epidermal (EGF) dan faktor pertumbuhan endotel vaskular (VEGF) yang diatur oleh Minoxidil. Co-administrasi LJE dan CTE（Cistanche tubulosaekstrak)pada 54 mg/kg LJE ditambah 162 mg/kg, CTE (Cistanche tubulosaekstrak)memberikan efek promosi sinergis pada pertumbuhan kembali rambut, sebanding dengan 3 persen Minoxidil. LJE secara istimewa meningkatkan aktivitas ALP, sementara CTE（Cistanche tubulosaekstrak)meningkatkan aktivitas -GTP dan ALP serta ekspresi EGF dan VEGF. Model peradangan kantong udara in vivo, eksudasi vaskular yang diinduksi karagenan, dan peningkatan konsentrasi oksida nitrat dan prostaglandin E2 dalam eksudat secara sinergis ditekan oleh pemberian bersama LJE dan CTE（Cistanche tubulosaekstrak). Selain itu, infiltrasi sel inflamasi secara substansial dihambat oleh pengobatan kombinasi. Hasilnya menunjukkan bahwa pengobatan oral kombinasi dengan LJE dan CTE（Cistanche tubulosaekstrak)dosis dan rasio yang tidak tepat mencegah kerontokan rambut dan memperbaiki alopecia, yang mungkin sebagian dimediasi oleh aktivitas anti-inflamasinya.

Kata kunci Pertumbuhan rambut, radang, Laminaria japonica,Cistanche tubulosa, pengobatan kombinasi

Cistanche tubulosaekstrak memiliki banyak fungsi

Baru-baru ini, kerontokan rambut di kulit kepala telah meningkat bahkan pada orang muda, yang secara serius mempengaruhi kualitas hidup seseorang. Meskipun kebotakan bukanlah salah satu masalah kesehatan, kebotakan dapat menyebabkan stres sosial yang sangat tidak nyaman secara psikologis. Oleh karena itu, sangat menarik untuk mengembangkan bahan pencegahan dan/atau terapi baru untuk kerontokan dan pertumbuhan kembali rambut. Terlepas dari pasar miliaran dolar, ada beberapa produk yang efektif saat ini tersedia [1].
Folikel rambut merombak diri selama periode siklus pertumbuhan (anagen), regresi (catagen), istirahat (telogen), dan shedding (eksogen) [2]. Selama katagen, banyak sel folikel mengalami kematian sel terprogram (apoptosis) [3], mengurangi ukuran folikel saat folikel memasuki telogen. Aktivasi sel punca epitel yang jarang terjadi yang terletak di daerah tonjolan folikel membuat regenerasi folikel pada permulaan fase anagen berikutnya [4]. Keturunan sel punca membentuk matriks folikel baru selama anagen awal, dan batang rambut serta selubung akar dalam berasal dari sel matriks yang relatif tidak berdiferensiasi ini [5]. Diketahui bahwa ukuran folikel rambut dan durasi fase anagen masing-masing menentukan ukuran (diameter) dan panjang batang rambut. Pertumbuhan siklik rambut ini diatur oleh berbagai faktor pertumbuhan.

Minoxidil, finasteride, dan Propecia tersedia secara komersial untuk memperlambat kerontokan rambut dan memfasilitasi pertumbuhan kembali rambut. Minoxidil adalah vasodilator yang memberikan efek samping untuk memfasilitasipertumbuhan rambut[6] yang mungkin karena aktivitas penyediaan nutrisi dan pembukaan saluran kalium [7,8]. Minoxidil efektif untuk alopecia androgenik, di antara perawatan kebotakan lainnya, meskipun efektivitasnya menghilang dalam beberapa bulan setelah penghentian pengobatan. Sebagai perbandingan, finasteride dan Propecia, terapi hiperplasia prostat jinak dan kanker prostat, telah terdaftar di banyak negara untuk androgenetic alopecia (pola kebotakan pria). Finasteride dan Propecia adalah antiandrogen sintetik, menghambat reduktase tipe II 5-, suatu enzim yang mengubah testosteron menjadi dihidrotestosteron (DHT) dalam sel papila di bagian bawah folikel rambut [9].

Laminaria japonica, Undaria pinnatifida, dan Cladosiphon okamuranus, tersebar luas di banyak negara, telah digunakan sebagai terapi dalam pengobatan Oriental untuk waktu yang lama. Dalam penelitian sebelumnya, fucoidan, kompleks polisakarida sulfat, telah diekstraksi dan diidentifikasi dari rumput laut dan dikonfirmasi memiliki aktivitas anti-oksidatif, anti-koagulasi, anti-kanker, dan anti-inflamasi [10,11]. Setelah itu, efek menguntungkan fucoidan pada penyakit inflamasi, iskemia, disfungsi imun, dan tumor telah ditunjukkan [12,13]. Di samping itu,Cistanche tubulosaekstrak (CTE) juga telah banyak digunakan untuk pengobatan tradisional di Cina. CTE（Cistanche tubulosaekstrak)meningkatkan aliran darah dengan menurunkan kadar kolesterol darah [14]. Baru-baru ini dilaporkan bahwa CTE menurunkan produksi tumor-necrosis factor- (TNF- ) dan interleukin-4 (IL-4) yang merupakan faktor utama produksi nitric oxide (NO) pada jalur inflamasi. [15]. Kami juga menunjukkan bahwa fucoidan dari ekstrak Laminaria japonica (LJE) dan CTE（Cistanche tubulosaekstrak)peradangan yang dilemahkan secara sinergis in vitro dan in vivo [16]. Khususnya, telah ditunjukkan bahwa ada hubungan yang erat antara peradangan kulit (terutama kelenjar lakrimal) dengan alopecia [17]. Dengan demikian, aspek anti-inflamasi pengobatan alopecia muncul [18].
Berdasarkan aktivitas peningkatan aliran darah dan peradangan, kami menyelidiki kemanjuran kombinasi LJE dan CTE（Cistanche tubulosa ekstrak)padapertumbuhan rambutdan mekanisme yang mendasarinya, dibandingkan dengan 3 persen Minoxidil (Hyundai Pharmaceutical, Seoul, Korea), yang terkenalpertumbuhan rambutpenambah.

Cistanche tubulosaekstrak baik untukPertumbuhan rambut

Bahan dan metode

Bahan:

LJE dan CTE (Cistanche tubulosaekstrak)diperoleh dari Misuba RTech Co., Ltd. (Asan, Korea). Serbuk kering Laminaria japonica diekstraksi dalam air murni pada 60oC selama 24 jam, disaring melalui membran 0,45 m, didesinfeksi, dan dikeringkan dengan semprotan.Cistanche tubulosadiekstraksi dalam etanol 80 persen, didesinfeksi, dipekatkan, dan dikeringkan. LJE dan CTE (Cistanche tubulosaekstrak)disimpan pada 4oC, dicampur (1:3) dan dilarutkan dalam air murni sebelum digunakan, dan diberikan secara oral dalam volume 5 mL/kg.
Hewan
Tikus C57BL/6 jantan untukpertumbuhan rambutpenelitian dan tikus ICR jantan untuk penelitian peradangan dibeli dari Daehan Biolink (Eumseong, Korea), dan ditempatkan di ruangan dengan kondisi lingkungan yang konstan (23±2ºC; 45-65 persen kelembaban relatif; 12-jam cahaya -siklus gelap; 150-300 kecerahan lux). Pakan pelet dan air murni tersedia ad libitum. Semua percobaan hewan telah disetujui oleh Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) dari Chungbuk National University (CBNU), Korea, dan dilakukan sesuai dengan Prosedur Operasi Standar (SOP) dari Laboratory Animal Research Center, CBNU.

Perawatan untuk pertumbuhan rambut

Setelah dipastikan fase anagen dengan mengamati warna kulit homogeny pink pada kulit punggung mencit C57BL/6 (umur 6 minggu, n=8/kelompok) setelah dilakukan clipping pada fase telogen, rambut dicukur [1,19 ,20]. Dari hari berikutnya, tikus tanpa goresan yang terlihat dipilih dan secara lisan
diobati dengan LJE (18 atau 54 mg/kg), CTE (54 atau 162 mg/kg), atau campurannya (18 plus 54 atau 54 plus 162 mg/kg) sekali sehari selama 21 hari. LJE dosis rendah (18 mg/kg) dan CTE (54 mg/kg) berasal dari perkiraan dosis manusia 100 mg/tubuh (70 kg) dan 300 mg/tubuh setelah translasi luas permukaan berat badan (Km{{14} } untuk manusia/Km=3 untuk mouse), masing-masing. LJE dan CTE dosis tinggi（Cistanche tubulosaekstrak)ditetapkan pada 3 kali lipat, sendiri atau dalam kombinasi, untuk menilai efek sinergis maksimum [16]. Minoxidil (3 persen, 0.2 mL) dioleskan sekali sehari pada kulit yang dicukur dengan jadwal yang sama dengan pengobatan LJE/CTE.

Pengamatan kasar pertumbuhan rambut

Pada hari-hari dengan interval 3-hari setelah bercukur dan selama perawatan, tikus dibius ringan dengan dietil eter, dan foto diambil pada bagian punggungnya. Rasio pertumbuhan kembali rambut (area yang tumbuh kembali/area yang dicukur) pada foto dianalisis menggunakan sistem analisis citra komputerisasi (Imageinside, Daejeon, Korea).

Pemeriksaan mikroskopis folikel rambut

Pada hari ke 14 dan 21, mencit dikorbankan dengan deep anestesi dengan dietil eter, dan kulit punggungnya dibuang [1]. Kulit punggung dipotong menjadi dua bagian. Bagian jaringan yang difiksasi dengan formalin, tertanam parafin (diameter 5 m) dari satu bagian diwarnai dengan hematoxylin-eosin untuk memeriksa jumlah folikel rambut dan temuan histologis. Bagian lain dari jaringan dibekukan dalam nitrogen cair untuk uji enzim dan immunoassay.

Uji aktivitas enzim

Jaringan kulit dihomogenisasi dalam 4 volume buffer fosfat (pH 7,4). Homogenat disentrifugasi pada 3,000 rpm selama 20 menit, dan supernatan digunakan untuk pengujian aktivitas -glutamyl transpeptidase (-GTP) dan alkaline phosphatase (ALP) menggunakan p-nitrofenil fosfat (PNPP)-DEAV sebagai substrat [1,21].

Cistanche tubulosa

Kuantifikasi faktor pertumbuhan

Faktor pertumbuhan epidermal (EGF) dan faktor pertumbuhan endotel vaskular (VEGF) dikuantifikasi dengan menggunakan kit enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) (R&D Systems, Minneapolis, USA) sesuai dengan instruksi pabrik [1,22].

Pengobatan untuk peradangan

Tikus ICR (7 minggu, n=8/kelompok) diobati secara oral dengan LJE (18 atau 54 mg/kg), CTE（Cistanche tubulosaekstrak)(54 atau 162 mg/kg), atau campurannya (18 ditambah 54 atau 54 ditambah 162 mg/kg) sekali sehari selama 7 hari [16]. Pada hari pertama LJE dan CTE（Cistanche tubulosaekstrak)perlakuan, tikus disuntikkan secara subkutan dengan 10 mL udara steril ke bagian belakang untuk membentuk kantong [16,23,24]. Setelah 2 dan 5 hari, kantong disuntikkan kembali dengan 5 mL udara. Satu jam setelah LJE dan CTE terakhir（Cistanche tubulosaekstrak)pengobatan, 1 mL karagenan (1 persen dalam saline; Sigma-Aldrich, St. Louis, USA) atau kendaraannya (saline) disuntikkan ke dalam kantong.

Analisis eksudat

Kantong udara dicuci dengan 1 mL salin dingin 6 jam setelah injeksi karagenan, dan volume bersih cairan lavage dicatat [16]. Jumlah total sel inflamasi termasuk neutrofil, monosit, dan limfosit ditentukan menggunakan penghitung colter.

Konsentrasi NO dan prostaglandin E2 (PGE2) ditentukan oleh reagen Griess (Sigma-Aldrich) dan enzim immunoassay (EIA) menggunakan kit Correlate-EIA (Assay Designs, Ann Arbor, USA), masing-masing [16].

Analisis statistik

Data disajikan sebagai mean±standard error. Signifikansi statistik ditentukan dengan analisis varians satu arah, diikuti dengan uji multi-perbandingan posthoc Tukey. Nilai-P<0.05 were="" considered="" to="" be="" statistically="">

Hasil

Aplikasi Minoxidil (3 persen ), bahan referensi, sangat memudahkanpertumbuhan rambutdari tikus C57BL/6, menunjukkan cakupan hampir penuh (92,4 persen ) dari area yang dicukur (Gambar 1, 2B) dibandingkan dengan 29,2 persen pada pertumbuhan normal (Gambar 1, 2A) pada hari ke 21. Meskipun kurang efektif dibandingkan aplikasi Minoxidil , pengobatan oral LJE juga memfasilitasipertumbuhan rambut, yang mengarah ke cakupan 33,5 dan 69,1 persen pada 18 dan 54 mg/kg, masing-masing (Gambar 1, 2C, 2D). CTE（Cistanche tubulosaekstrak)juga efektif dalam meningkatkanpertumbuhan rambut, mencapai cakupan 73,6 dan 80,4 persen masing-masing pada 54 dan 162 mg/kg (Gambar 1, 2E, 2F). Khususnya, terapi kombinasi dengan LJE dosis tinggi (54 mg/kg) dan CTE（Cistanche tubulosaekstrak)(162 mg/kg) sangat meningkatkanpertumbuhan rambutdari hari ke-12, sebanding dengan efek Minoxidil (Gambar 1, 2H), meskipun dosis rendah LJE (18 mg/kg) dan CTE（Cistanche tubulosaekstrak)(54 mg/kg) memberikan efek sinergis hanya pada fase awal (Gambar 1, 2G).

Gambar 1. Waktu pertumbuhan kembali rambut mencit yang diberi Minoxidil, atau ekstrak Laminaria japonica (LJE) dan/atauCistanche tubulosaekstrak (CTE). ,

biasa; ●, aplikasi Minoxidil (3 persen ); , 18 mg/kg LJE; , 54 mg/kg LJE; , 54 mg/kg CTE; , 162 mg/kg CTE; , 18 mg/kg LJE ditambah 54 mg/kg CTE; , 54 mg/kg LJE ditambah 162 mg/kg CTE（Cistanche tubulosaekstrak).

Gambar 2. Temuan kotor representatif dari pertumbuhan kembali rambut tikus yang diobati dengan Minoxidil, atau ekstrak Laminaria japonica (LJE) dan/atauCistanche tubulosaekstrak (CTE) pada hari ke-21.

A, biasa; B, aplikasi Minoxidil (3 persen); C, 18 mg/kg LJE; D, 54 mg/kg LJE; E, 54 mg/kg CTE（Cistanche tubulosaekstrak); F, 162 mg/kg CTE; G, 18 mg/kg LJE ditambah 54 mg/kg CTE; H, 54 mg/kg LJE ditambah 162 mg/kg CTE（Cistanche tubulosaekstrak).

Dibandingkan dengan folikel rambut normal (Gambar 3A), aplikasi Minoxidil meningkatkan integritas folikel rambut, menunjukkan folikel yang lebih besar dan batang rambut yang lebih tebal (Gambar 3B). Efek seperti itu juga ditemukan pada kulit tikus yang diobati dengan LJE dan/atau CTE（Cistanche tubulosaekstrak)(Angka 3C-3H). Terutama, khasiat penguatan folikel rambut dari pengobatan kombinasi LJE dan CTE (Cistanche tubulosaekstrak)sebanding dengan Minoxidil.

Gambar 3. Temuan mikroskopis representatif dari pertumbuhan kembali rambut tikus yang diobati dengan Minoxidil, atau ekstrak Laminaria japonica (LJE) dan/atauCistanche tubulosaekstrak (CTE) pada hari ke-21.

A, biasa; B, aplikasi Minoxidil (3 persen); C, 18 mg/kg LJE; D, 54 mg/kg LJE; E, 54 mg/kg CTE（Cistanche tubulosaekstrak); F, 162 mg/kg CTE（Cistanche tubulosaekstrak); G, 18 mg/kg LJE ditambah 54 mg/kg CTE; H, 54 mg/kg LJE ditambah 162 mg/kg CTE

Aplikasi minoxidil meningkatkan aktivitas -GTP yang menginduksi folikel rambut ke fase anagen sebesar 90-120 persen pada hari ke 14 dan 21, dibandingkan dengan tingkat kulit normal (Gambar 4). LJE (54 mg/kg) juga meningkatkan aktivitas enzim, meskipun variasinya tinggi. CTE memberikan efek serupa, secara signifikan meningkatkan aktivitas -GTP pada hari ke-14. Menariknya, pengobatan kombinasi LJE dan CTE（Cistanche tubulosaekstrak)selanjutnya meningkatkan aktivitas enzim lebih tinggi daripada ketika ekstrak digunakan sendiri.
Aktivitas ALP, penanda pertumbuhan tulang dan angiogenesis, meningkat secara signifikan di kulit pada hari ke 14 dan 21 setelah aplikasi topikal Minoxidil (Gambar 5). LJE dan CTE（Cistanche tubulosaekstrak)juga meningkatkan aktivitas ALP setelah pemberian oral dengan cara yang bergantung pada dosis. Khususnya, aktivitas enzim ditingkatkan secara sinergis dengan pengobatan kombinasi dengan LJE dan CTE.

Gambar 4. Pengaruh Minoxidil (MXD, 3 persen ), atau ekstrak Laminaria japonica (LJE) dan/atauCistanche tubulosaekstrak (CTE) (dalam mg/kg) pada aktivitas -glutamyl transpeptidase ( -GTP) pada hari ke 14 (A) dan 21 (B) pengobatan.

*Berbeda secara signifikan dari kontrol (Nor) normal (P<>

Gambar 5. Pengaruh Minoxidil (MXD, 3 persen ), atau ekstrak Laminaria japonica (LJE) dan/atauCistanche tubulosaekstrak (CTE) (dalam mg/kg) pada aktivitas alkaline phosphatase (ALP) pada hari ke 14 (A) dan 21 (B) pengobatan.

*Berbeda secara signifikan dari kontrol (Nor) normal (P<>

Dalam analisis EGF, yang terkenalpertumbuhan rambutfaktor, aplikasi Minoxidil meningkatkan tingkat EGF 3,5 kali lipat dari kontrol normal pada hari ke 14 dan 21 (Gambar 6). LJE (18 mg/kg) meningkatkan EGF hanya pada hari ke 21, sedangkan CTE (162 mg/kg) sangat meningkatkan produksinya pada hari ke 14 dan 21. Sangat menarik untuk dicatat bahwa perlakuan kombinasi LJE dan CTE（Cistanche tubulosaekstrak)bahkan pada dosis rendah menunjukkan efek sinergis yang nyata.

Perlakuan minoxidil juga meningkatkan kadar VEGF sebesar 50-80 persen di atas nilai kontrol (Gambar 7). Meskipun LJE tidak efektif, CTE (Cistanche tubulosaekstrak)memberikan efek peningkatan yang luar biasa. Selain itu, terapi kombinasi LJE dan CTE（Cistanche tubulosaekstrak)menunjukkan aktivitas sinergis pada fase awal pada hari ke-14.

Gambar 6. Pengaruh Minoxidil (MXD, 3 persen ), atau ekstrak Laminaria japonica (LJE) dan/atauCistanche tubulosaekstrak (CTE) (dalam mg/kg) pada kandungan faktor pertumbuhan epidermal (EGF) pada hari ke 14 (A) dan 21 (B) perlakuan.

*Sangat berbeda dari kontrol normal(Nor) (P<>

Gambar 7. Pengaruh Minoxidil (MXD, 3 persen ), atau ekstrak Laminaria japonica (LJE) dan/atauCistanche tubulosaekstrak (CTE) (dalam mg/kg) pada kandungan faktor pertumbuhan endotel vaskular (VEGF) pada hari ke 14 (A) dan 21 (B) pengobatan.

*Berbeda secara signifikan dari kontrol (Nor) normal (P<>

Injeksi karagenan ke dalam kantong udara tikus ICR meningkatkan volume eksudat di dalam kantong 6 kali tingkat kontrol (Tabel 1). Peningkatan eksudasi tersebut secara signifikan dilemahkan oleh pengobatan dengan LJE (18 dan 54 mg/kg) atau CTE（Cistanche tubulosaekstrak)(54 dan 162 mg/kg). Khususnya, pengobatan kombinasi dengan LJE dan CTE lebih lanjut menurunkan volume eksudat, dibandingkan dengan efek individu. Jumlah sel inflamasi secara drastis meningkat dengan injeksi karagenan: 34,6, 4,2, dan 24,9 kali lipat tingkat kontrol untuk neutrofil, monosit, dan limfosit, masing-masing (Tabel 1). Namun, LJE dan CTE（Cistanche tubulosaekstrak)secara signifikan mengurangi sel-sel inflamasi dengan cara yang bergantung pada dosis, di mana LJE agak lebih unggul daripada CTE（Cistanche tubulosaekstrak). Diharapkan, efek sinergis dalam infiltrasi sel inflamasi dicapai dengan pemberian bersama LJE dan CTE（Cistanche tubulosaekstrak).
Sejalan dengan infiltrasi sel inflamasi di kantong, kandungan NO dan PGE2 di kantong juga meningkat drastis setelah injeksi karagenan (Tabel 1). Dibandingkan dengan efek ringan LJE, CTE（Cistanche tubulosaekstrak)menurunkan konsentrasi NO secara nyata. Pengobatan kombinasi LJE dan CTE（Cistanche tubulosaekstrak)selanjutnya menurunkan tingkat NO dengan cara yang bergantung pada dosis. Dengan cara yang sama, peningkatan level PGE2 ditekan secara sinergis oleh terapi kombinasi LJE dan CTE (Tabel 1).

Diskusi

Kepala manusia memiliki rata-rata 100,000 folikel rambut. Selama seumur hidup, setiap folikel tumbuh dan rontok sekitar 20 kali, menunjukkan kerontokan rambut setiap hari sebanyak 100 helai [25]. Rambut rontok termasuk alopecia dan kebotakan adalah kondisi yang menyedihkan bagi pria dan wanita, terutama di masyarakat modern. Oleh karena itu, sangat penting untuk mengembangkan terapi baru yang mencegah kerontokan rambut dan meningkatkan pertumbuhan kembali rambut. Dalam hal ini, pengobatan alternatif telah menarik minat peneliti.

Aspek morfologi, histokimia, dan biokimia terkait penuaan dari pola kebotakan pria telah diungkapkan oleh serangkaian penelitian pada kera ekor tunggul. Pada kebotakan pola pria, fase telogen memanjang, sedangkan fase anagen memendek. Oleh karena itu, dianggap bahwa untuk memperbaiki kerontokan rambut, pemeliharaan pemanjangan folikel rambut yang terjadi dari awal anagen hingga pertengahan anagen sangat penting [26]. Dalam penelitian ini, kami menunjukkanpertumbuhan rambut-memfasilitasi aktivitas pengobatan kombinasi LJE dan CTE（Cistanche tubulosaekstrak). Yang paling penting, resep kombinasi LJE (54 mg/kg) dan CTE (162 mg/kg) menunjukkan aktivitas pertumbuhan kembali rambut yang sangat baik, terlepas dari pemberian ekstrak secara oral. Khususnya, efek terapi kombinasi sebanding dengan aplikasi dermal dari konsentrasi tinggi (3 persen) dari senyawa murni Minoxidil, meskipun konsentrasi bahan aktif LJE dan CTE（Cistanche tubulosaekstrak)di kulit setelah pemberian oral tidak dikonfirmasi.
Pada kulit tikus yang bersepeda, aktivitas -GTP diucapkan selama anagen tetapi sangat berkurang selama telogen [27]. Di kulit, enzim ada secara eksklusif di selubung akar luar dan dalam folikel rambut di bawah tingkat kelenjar sebaceous di mana -GTP tidak ada [27]. Sebagai perbandingan, ALP diekspresikan secara jelas dalam unit pilosebaceous, dan aktivitasnya meningkat di area pertumbuhan kembali rambut. ALP sebagai faktor angiogenik meningkatkan suplai nutrisi ke papila dermal dan dengan demikian menginduksi ketebalan selama anagen [28]. Namun, dikonfirmasi bahwa aktivitas ALP menurun pada kulit alopesia [21]. Dalam studi mekanistik, senyawa referensi Minoxidil secara nyata meningkatkan aktivitas -GTP dan ALP, menyiratkan bahwa Minoxidil memfasilitasipertumbuhan rambuttidak hanya dengan menginduksi folikel rambut
ke fase anagen tetapi juga dengan meningkatkan aliran darah melalui angiogenesis. Karena LJE meningkatkan aktivitas ALP, diusulkan agar LJE menunjukkan efek yang menguntungkan padapertumbuhan rambutmelalui potensi angiogeniknya, seperti yang disimpulkan dari penelitian sebelumnya bahwa fucoidan, bahan aktif LJE, memiliki aktivitas meningkatkan aliran darah [29]. Sebagai perbandingan, CTE（Cistanche tubulosaekstrak)meningkatkan aktivitas -GTP dan ALP, menunjukkan efeknya pada induksi fase anagen serta peningkatan aliran darah. Menurut tindakan sinergis pada enzim -GTP dan ALP, diyakini bahwa pertumbuhan kembali rambut yang lebih tinggi dapat dicapai dengan pemberian bersama LJE dan CTE（Cistanche tubulosaekstrak).
Telah diketahui bahwa beragam sitokin dan faktor pertumbuhan termasuk EGF dan VEGF terlibat dalam regulasi morfogenesis dan pertumbuhan rambut [30,31]. Sangat menarik untuk dicatat bahwa faktor-faktor yang diturunkan dari sel papilla dermal memiliki aktivitas kemotaktik pada sel-sel di sekitarnya, yang pada gilirannya menyebabkan peningkatanpertumbuhan rambut[32]. EGF diekspresikan dalam hubungannya dengan perkembangan folikel rambut [33,34]. Meskipun ekspresi EGF dan reseptornya (EGFR) di selubung akar luar diatur ke bawah dengan selesainya pertumbuhan folikel, ekspresi mereka pulih ketika sel-sel folikel memasuki fase anagen. VEGF memainkan peran penting yang terlibat dalam angiogenesis selama reaksi inflamasi dan perkembangan tumor [35]. Terutama, jaringan vaskular terkait erat dengan siklus pertumbuhan rambut [36-38]. Oleh karena itu, dipastikan bahwa ekspresi gen VEGF bervariasi sesuai dengan siklus rambut manusia [39].

Dari hasil penelitian ini dijelaskan bahwapertumbuhan rambutEfek promosi dari Minoxidil mungkin karena potensinya untuk mengatur EGF dan VEGF yang memfasilitasi pertumbuhan folikel serta angiogenesis. Meskipun LJE tidak mempengaruhi ekspresi VEGF, hal itu meningkatkan kandungan EGF di kulit setelah pemberian oral. Sebagai perbandingan, CTE（Cistanche tubulosaekstrak)efektif dalam ekspresi EGF dan VEGF. Khususnya, LJE dan CTE（Cistanche tubulosaekstrak)memberikan efek aditif pada ekspresi faktor pertumbuhan.

Selain pemanjangan rambut, integritas folikel rambut sangat meningkat setelah perawatan dengan Minoxidil, LJE, dan/atau CTE（Cistanche tubulosaekstrak)dalam pemeriksaan mikroskopis. Pada fase awal kerontokan rambut dan kebotakan pada pasien manusia dan model hewan, integritas folikel terganggu dan ketebalan batang rambut berkurang, sedangkan integritas folikel dan ketebalan batang pulih pada rambut yang beregenerasi. Menariknya, efek positif seperti itu pada integritas dan pertumbuhan kembali komponen rambut dicapai dengan pemberian oral LJE plus CTE（Cistanche tubulosaekstrak), di mana efeknya sebanding dengan aplikasi topikal dari Minoxidil konsentrasi tinggi. Oleh karena itu, diharapkan kombinasi asupan oral LJE plus CTE（Cistanche tubulosaekstrak)bisa menjadi resep yang relatif nyaman dibandingkan dengan penggunaan kulit Minoxidil.
Dalam model alopecia tikus, infiltrasi limfosit sensitif steroid di sekitar folikel rambut adalah umum, menunjukkan pola yang mirip dengan imunoterapi alopecia manusia dengan peradangan kelenjar lakrimal [17,40]. Dalam penelitian ini, peradangan kulit yang diinduksi karagenan secara nyata dilemahkan oleh LJE dan CTE（Cistanche tubulosaekstrak)perlakuan; yaitu, eksudasi vaskular dan infiltrasi sel inflamasi ditekan secara sinergis. Dalam analisis kuantitatif, mediator inflamasi utama NO dan PGE 2 secara substansial dikendalikan setelah pemberian oral bersama LJE dan CTE (Cistanche tubulosaekstrak). Menariknya, karena LJE menunjukkan aktivitas anti-inflamasi yang lebih tinggi daripada fucoidan semi-murni [16], diasumsikan bahwa mungkin ada bahan aktif tambahan, selain fucoidan, dalam LJE.

Secara keseluruhan, hasilnya menunjukkan bahwa pengobatan oral kombinasi dengan LJE dan CTE（Cistanche tubulosaekstrak)meningkatkan kerontokan rambut dengan mengatur faktor pertumbuhan dan aktivitas enzim terkait dan sebagian melalui potensi anti-inflamasi. Oleh karena itu, disarankan bahwa kombinasi termasuk LJE dan CTE（Cistanche tubulosaekstrak)dosis dan rasio klinis yang tidak tepat bisa menjadi resep kandidat untuk pasien rambut rontok.

Cistanche tubulosaekstrak produk

Ucapan Terima Kasih

Penelitian ini didukung secara finansial oleh Pengembangan Industri Unggulan untuk Kawasan Ekonomi dari Kantor Industri Terkemuka Chungcheong, Institut Teknologi untuk Kemajuan Korea (KIAT) dan Kementerian Ekonomi Pengetahuan (MKE), dan sebagian oleh Program Pengembangan Teknologi Pangan Bernilai Tambah Tinggi , Kementerian Pertanian, Pangan dan Urusan Pedesaan (MAFRA; hibah nomor 113034-3).

Konflik kepentingan

Para penulis menyatakan bahwa tidak ada konflik kepentingan keuangan untuk mempublikasikan hasil ini.

Dari: ' Efektivitas pengobatan kombinasi ekstrak Laminaria japonica dan Cistanche tubulosa dalam pertumbuhan rambut' olehKyungha Shin1# dkk

--- Lab Anim Res 2015: 31(1), 24-32http://dx.doi.org/10.5625/lar.2015.31.1.24

REFERENSI

1. Kim JS, Kang BS, Park HJ, Kim DY, Hwang SY, Nam SY, Yun YW, Lee BJ. Mempromosikan efek campuran ekstrak herbal pada pertumbuhan kembali rambut pada tikus C3H/HeJ. J Biomed Res 2009; 10(3): 99-108.
2. Paus R, Cotsarelis G. Biologi folikel rambut. N Engl J Med 1999; 341(7); 491-497.
3. Cotsarelis G. Folikel rambut: sekarat untuk diperhatikan. Am J Pathol 1997; 151(6): 1505-1509.
4. Cotsarelis G, Sun TT, Lavker RM. Sel penahan label berada di area tonjolan unit pilosebaceous: implikasi untuk sel induk folikel, siklus rambut, dan karsinogenesis kulit. Sel 1990; 61(7): 1329-1337.
5. Oshima H, Rochat A, Kedzia C, Kobayashi K, Barrandon Y. Morfogenesis dan pembaruan folikel rambut dari sel induk multipoten dewasa. Sel 2001; 104(2): 233-245.
6. Burton JL, Marshall A. Hipertrikosis karena minoksidil. sdr. J Dermatol 1979; 101(5): 593-595.
7. Meisheri KD, Cipkus LA, Taylor CJ. Mekanisme kerja vasodilatasi yang diinduksi minoxidil sulfate: peran untuk peningkatan K plus permeabilitas. J Pharmacol Exp Ada 1988; 245(3): 751-760.
8. Buhl AE, Waldon DJ, Baker CA, Johnson GA. Minoxidil sulfate adalah metabolit aktif yang merangsang folikel rambut. J Invest Dermatol 1990; 95(5): 553-557.
9. Kaufman KD, Dawber RP. Finasteride, inhibitor alfa-reduktase Tipe 2 5, dalam pengobatan pria dengan alopecia androgenetik. Ahli Opini Investigasi Narkoba 1999; 8(4): 403-415.
10. Feldman SC, Reynaldi S, Stortz CA, Cerezo AS, Damont EB. Sifat antivirus fraksi fucoidan dari Leathesia difformis. Fitomedis 1999; 6(5): 335-340.
11. Wang J, Zhang Q, Zhang Z, Lagu H, Li P. Potensi antioksidan dan antikoagulan kapasitas fraksi fucoidan berat molekul rendah diekstraksi dari Laminaria japonica. Int J Biol Makromol 2010; 46(1): 6-12.
12. Bojakowski K, Abramczyk P, Bojakowska M, Zwoliñska A, Przybylski J, Gaciong Z. Fucoidan meningkatkan aliran darah ginjal pada tahap awal cedera iskemia/reperfusi ginjal pada tikus. J Physiol Pharmacol 2001; 52(1): 137-143.
13. Li N, Zhang Q, Song J. Evaluasi toksikologi fucoidan yang diekstraksi dari Laminaria japonica pada tikus Wistar. Bahan Kimia Makanan Toksikol 2005; 43(3): 421-426.
14. Shimoda H, Tanaka J, Takahara Y, Takemoto K, Shan SJ, Su MH. Efek hipokolesterolemia ekstrak Cistanche tubulosa, obat mentah tradisional Cina, pada tikus. Am J Chin Med 2009; 37(6): 1125-1138.
15. Yamada P, Iijima R, Han J, Shigemori H, Yokota S, Isoda H. Efek penghambatan acteoside diisolasi dari Cistanche tubulosa pada pelepasan mediator kimia dan produksi sitokin inflamasi oleh sel RBL-2H3 dan KU812. Planta Med 2010; 76 (14): 1512-1518.
16. Kyung J, Kim D, Park D, Yang YH, Choi EK, Lee SP, Kim TS, Lee YB, Kim YB. Efek anti-inflamasi sinergis dari ekstrak Laminaria japonica fucoidan dan Cistanche tubulosa. Lab Anim Res 2012; 28(2): 91-97.
17. Chee E, Fong KS, Al Jajeh I, Nassiri N, Rootman J. Asosiasi peradangan kelenjar lakrimal dengan alopecia areata. Orbit 2015; 34(1): 45-50.
18. Brzezinska-Wcislo L, Bergler-Czop B, Wcislo-Dziadecka D, LisSwiety A. Aspek baru pengobatan alopecia areata. Postepy Dermatol Alergol 2014; 31(4): 262-265.
19. Hattori M, Ogawa H. Analisis biokimiapertumbuhan rambutdari aspek penuaan dan aktivitas enzim. J Dermatol 1983; 10(1): 45-54.
20. Lee SH, Lee HJ, Baek IJ, Yon JM, Nam SY, Lee BJ, Yun YW, Kim YB, Hwang SY, Hong JT. Efek lotion kulit kepala DREAMMO® padapertumbuhan rambutpromosi dalam model alopecia tikus C57BL/6. Lab Anim Res 2006; 22(1): 91-96.
21. Handjiski BK, Eichmüller S, Hofmann U, Czarnetzki BM, aktivitas Paus R. Alkaline phosphatase dan lokalisasi selama siklus rambut murine. Br J Dermatol 1994; 131(3): 303-310.
22. Lintas MJ, Dixelius J, Matsumoto T, Claesson-Welsh L. transduksi sinyal reseptor VEGF. Tren Biochem Sci 2003; 28(9): 488-494.
23. Shin S, Jeon JH, Park D, Jang JY, Joo SS, Hwang BY, Choe SY, Kim YB. Efek anti-inflamasi dari ekstrak etanol Angelica gigas dalam model peradangan kantong udara-Carrageenan. Exp Anim 2009; 58(4): 431-436.
24. Kim D, Park D, Kyung J, Yang YH, Choi EK, Lee YB, Kim HK, Hwang BY, Kim YB. Efek anti-inflamasi dari ekstrak superkritis Houttuynia cordata dalam model peradangan kantong udara karagenan. Lab Anim Res 2012; 28(2): 137-140.
25. Rebora A. Patogenesis alopecia androgenetik. J Am Acad Dermatol 2004; 50(5): 777-779.
26. Shirai A, Ikeda J, Kawashima S, Tamaoki T, Kamiya T. KF19418, senyawa baru untukpertumbuhan rambutpromosi model tikus in vitro dan in vivo. J Dermatol Sci 2001; 25(3): 213-218.
27. Kawabe TT, Kubicek MF, Johnson GA, Buhl AE. Penggunaan aktivitas gamma-glutamyl transpeptidase sebagai penanda siklus rambut dan induksi anagen pada folikel rambut tikus. J Invest Dermatol 1994; 103(1): 122-126.
28. Hamada K, Suzuki K. Evaluasi indeks biokimia sebagai penanda siklus rambut pada tikus C3H. Exp Anim 1996; 45(3): 251-256.
29. Park SJ, Lee KW, Lim DS, Lee S. Fucoidan polisakarida tersulfasi merangsang diferensiasi osteogenik sel induk turunan adiposa manusia. Pengembangan Sel Induk 2012; 21(12): 2204-2211.

30. Danilenko DM, Ring BD, Pierce GF. Faktor pertumbuhan dan sitokin dalam pengembangan dan siklus folikel rambut: wawasan terbaru dari model hewan dan potensi terapi klinis. Mol Med Hari Ini 1996; 2(11): 460-467.
31. Ozeki M, Tabata Y. In vivo mempromosikan pertumbuhan folikel rambut tikus dengan pelepasan terkontrol faktor pertumbuhan. Biomaterial 2003; 24 (13): 2387-2394.
32. Fujie T, Katoh S, Oura H, Urano Y, Arase S. Efek kemotaktik dari faktor turunan sel papila dermal pada sel selubung akar luar. J Dermatol Sci 2001; 25(3): 206-212.
33. Stenn KS, Paus R. Kontrol siklus folikel rambut. Physiol Rev 2001; 81(1): 449-494.
34. Chapman RE, Hardy MH Pengaruh faktor pertumbuhan epidermal tikus yang disuntikkan secara intradermal dan dioleskan pada pertumbuhan wol, folikel kulit dan wol domba merino. Aust J Biol Sci 1988; 41(2): 261-268.
35. Dvorak HF, Brown LF, Detmar M, Dvorak AM. Faktor permeabilitas vaskular/faktor pertumbuhan endotel vaskular, hiperpermeabilitas mikrovaskular, dan angiogenesis. Am J Pathol 1995; 146(5): 1029-1039.
36. Ellis RA, Moretti G. Pola vaskular terkait dengan folikel rambut catagen di kulit kepala manusia. Ann NY Acad Sci 1959; 83: 448-457.
37. Stenn KS, Fernandez LA, Tirrell SJ. Sifat angiogenik dari folikel rambut vibrissa tikus berhubungan dengan bohlam. J Invest Dermatol 1988; 90(3): 409-411.
38. Yano K, Brown LF, Detmar M. Pengendalianpertumbuhan rambutdan ukuran folikel oleh angiogenesis yang dimediasi VEGF. J Clin Invest 2001; 107(4): 409-417.
39. Lachgar S, Charveron M, Ceruti I. Distribusi tahap folikel rambut VEGF mRNA dengan hibridisasi fluoresensi in situ dikombinasikan dengan mikroskop laser confocal. Dalam: Penelitian Rambut untuk Milenium Berikutnya (Van Neste DJJ, ed), Elsevier, Amsterdam, 1996; hal 407-12.
40. Freyschmidt-Paul P, Sundberg JP, Happle R, McElwee KJ, Metz S, Boggess D, Hoffmann R. Keberhasilan pengobatan kerontokan rambut seperti alopecia areata dengan sensitizer kontak squaric acid dibutyl ester (SADBE) pada tikus C3H/HeJ . J Invest Dermatol 1999; 113(1): 61-68.