Pengaruh Ekstrak Kulit Pisang Sucrier Terhadap Penghambatan Melanogenesis Melalui ERK Signaling Pathway
Apr 25, 2023
Abstrak
Hiperpigmentasi adalah jenis kelainan pigmentasi yang disebabkan oleh ekspresi berlebih dari kandungan melanin yang mengaktifkan masalah estetika parah seperti melasma, bintik, ephelides, lentigo, dan bentuk lain pada kulit manusia. Beberapa bahan pemutih telah dibatasi penggunaannya karena efek samping atau stabilitasnya seperti asam kojic, asam askorbat, dan hidrokuinon dapat bertindak sebagai zat sitotoksik yang terkait dengan dermatitis dan kanker kulit. Untuk menemukan zat yang aman, penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kemampuan beberapa komponen dalam ekstrak kulit pisang Sucrier (SBP) dalam menghambat proses melanogenesis melalui jalur pensinyalan p38 pada sel melanoma tikus B16F10. Aktivitas tirosinase dan kandungan melanin seluler menurun tergantung dosis setelah pengobatan SBP. Selanjutnya, SBP menurunkan ekspresi melanogenesis terkait protein sebagai faktor transkripsi terkait mikrofthalmia (MITF) dan protein tirosinase setelah 24 jam inkubasi dengan perangsang hormon perangsang -melanosit (MSH). Temuan menunjukkan bahwa SBP mengandung agen yang efektif untuk penghambat hiperpigmentasi melalui jalur pensinyalan p38 tanpa efek apa pun pada jalur ERK, dan selanjutnya mengatur ekspresi MITF dan produksi keluarga enzim tirosinase.
Menurut studi yang relevan,cistancheadalah ramuan umum yang dikenal sebagai "ramuan ajaib yang memperpanjang hidup". Komponen utamanya adalahcistanoside, yang memiliki berbagai efek sepertiantioksidan, antiinflamasi, Danpromosi fungsi kekebalan tubuh. Mekanisme antara cistanche dan pemutihan kulit terletak pada efek antioksidan glikosida cistanche.Melaninpada kulit manusia dihasilkan oleh oksidasi tirosin yang dikatalisis oleh tirosinase, dan reaksi oksidasi membutuhkan partisipasi oksigen, sehingga radikal bebas oksigen dalam tubuh menjadi faktor penting yang mempengaruhi produksi melanin.Cistanchemengandung cistanoside, yang merupakan antioksidan dan dapat mengurangi pembentukan radikal bebas dalam tubuhmenghambat produksi melanin.
Klik Dimana Saya Dapat Membeli Cistanche
Untuk info lebih lanjut:
david.deng@wecistanche.com WhatsApp:86 13632399501
Kata kunci:kulit pisang yang lebih segar; senyawa fenolik; tirosinase; faktor transkripsi terkait mikrofthalmia; melanogenesis
Perkenalan
Melanin diproduksi di dalam melanosom yang merupakan organel penting di dalam sel melanosit. Melanosit terletak di lapisan basal epidermis kulit. Setelah proses produksi, melanin adalah pigmen yang bertanggung jawab untuk pewarnaan kulit, rambut, dan mata yang berfungsi sebagai antioksidan alami, agen detoksifikasi, dan kation khelator yang kuat dan juga dapat bertindak sebagai perlindungan universal terhadap kerusakan akibat sinar UV [1]. Produksi melanin yang tidak normal dapat menyebabkan gangguan pigmen seperti hipopigmentasi dan hiperpigmentasi. Hipopigmentasi menyebabkan vitiligo, albinisme, dan masalah rambut abnormal sementara hiperpigmentasi menyebabkan bintik-bintik, melasma, bintik-bintik penuaan, dan hiperpigmentasi pasca inflamasi. Kecenderungan genetik, perubahan hormonal terutama estrogen juga yang lainnya seperti penyakit hati, tumor, kanker, malnutrisi, atau fungsi kelenjar hipofisis yang tidak teratur adalah faktor intrinsik termasuk faktor ekstrinsik seperti paparan sinar UV, dan zat beracun adalah penyebab utama hiperpigmentasi [2] .
Tirosinase adalah enzim langkah pembatas laju yang menargetkan proses merangsang dan menghambat proses produksi melanin. Stimulasi melanin digunakan sebagai agen penyamakan atau perawatan depigmentasi rambut. Ekspresi tirosinase dikendalikan oleh faktor transkripsi terkait mikroftalmia (MITF) yang merupakan faktor transkripsi spesifik melanosit yang mengontrol diferensiasi, proliferasi, dan kelangsungan hidup melanosit [3, 4]. Tanggung jawab MITF terhadap melanogenesis adalah untuk meningkatkan ekspresi tirosinase dengan mengikat DNA dalam struktur homodimer atau hetero dimer dengan protein MiT, situs pengikatan ini melibatkan E-Box dan M-Box yang mengapit nukleotida timidin yang menstimulasi langkah-langkah berkelanjutan untuk produksi enzim melanogenik. seperti protein 1 yang berhubungan dengan tirosinase (TRP-1), protein yang berhubungan dengan tirosinase-2 (TRP-2) dan tautomerase dopakrom. Regulasi MITF dimulai dari transduksi sinyal setelah -MSH berikatan dengan reseptor MC1R yang menstimulasi mitogen-activated protein kinase (MARKs) yaitu serine/threonine kinase dan juga termasuk extracellular signaling-regulated kinase (ERK) dan juga p38. Beberapa penelitian menemukan bahwa sintesis melanin dikendalikan oleh beberapa jalur pensinyalan seperti phosphotidylineasital-3-kinase (PI3K/AKT) yang dapat ditekan oleh bahan alami yang mengandung gugus polifenol melalui jalur pensinyalan ERK sel melanoma tikus B16F10 [5,6 ].
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh penghambatan melanogenesis dari ekstrak kulit pisang Sucrier (SBP). SBP mungkin mengandung beberapa jenis senyawa polifenol yang bertindak sebagai penghambat tirosinase seperti katekin, prosianidin, asam ferulat, dan asam galat yang dideteksi oleh ekspresi jalur pensinyalan ERK yang memengaruhi produksi enzim melanogenik seperti TRP-1 dan TRP-2 [7-10].
Bahan dan metode
Kimia dan Material
Robek (7 hari setelah panen) Kulit pisang sucrier (Musa spp.) dari Provinsi Kampangpetch, Thailand. Kulit pisang dicuci dengan air kemudian dijemur sampai benar-benar kering, dihaluskan dengan blender, dan diekstraksi dengan cara direndam dengan metanol 60 persen selama 24 jam (MW24), disentrifugasi dengan etanol 95 persen selama 10 menit pada suhu 4 derajat (E4), didihkan dalam DI air pada 60 derajat selama 20 menit (W60) dan didihkan dalam 95 persen metanol pada 60 derajat selama 20 menit (M60). Langkah selanjutnya adalah mengecilkan volume dengan rotary evaporator pada suhu 40 derajat dan mengeringkan dengan freeze dryer Christ Alpha- 4 LD plus.
Budaya sel
Sel melanoma tikus B16F10 dibudidayakan dalam media Dulbecco's Modified Eagle's (DMEM) yang dilengkapi dengan 10 persen serum janin sapi pada suhu 37 derajat dalam inkubasi dengan 5 persen CO2. Setelah 24 jam inkubasi, kemudian media diubah menjadi media bebas serum dengan konsentrasi ekstrak kulit pisang sucrier (SBP) yang berbeda dengan stimulasi -MSH. Kemudian sel dipanen dengan trypsinization untuk percobaan selanjutnya.
Uji viabilitas sel
Sitotoksisitas ekstrak SBP diukur dengan uji MTT. Sel-sel (5 ×10 3) diunggulkan ke 96 pelat sumur dan dibudidayakan dalam DMEM selama 24 jam pada suhu 37 derajat dalam inkubasi dengan 5 persen CO2 kemudian mengubah media menjadi media bebas serum dengan konsentrasi berbeda dari ekstrak SBP untuk 48 jam. Setelah perlakuan, media dibuang dan dicuci dua kali dengan PBS dingin, 100 ul larutan MTT (5mg/ml) ditambahkan ke dalam masing-masing sumur, diinkubasi pada suhu 37 derajat selama 4 jam kemudian diukur dengan pembaca ELISA pada 420 nm.
Uji kandungan melanin
Sel yang dipanen dilisiskan dalam buffer lisis dingin (20 mM natrium fosfat pH 6,8, 1 persen tritonX-100, 1mM PMSF, dan 1 mM EDTA) dan kemudian disentrifugasi 1.200 rpm pada 4 derajat selama 10 menit untuk memisahkan supernatan sementara pelet melanin dilarutkan dalam 200 ul 1N NaOH selama 60 menit pada 80 derajat. Pembaca ELISA digunakan untuk mengukur absorbansi pada 415 nm. dan dihitung dibandingkan dengan kandungan protein dari uji kandungan protein asam bicinchoninic (BCA) (Pierce Biotechnology, Packford, IL, USA).
analisis noda barat
Supernatan yang dipisahkan selama perkembangan lisis sel diambil untuk difraksinasi pada SDS-PAGE dan kemudian dipindahkan ke membran nitroselulosa chemiluminescence Hybond yang ditingkatkan (Amersham, Little Chalfont, UK) dan probe dengan antibodi primer terhadap tirosinase (Santa Cruz, Biotechnology, Santa Cruz , CA, AS), MITF ( Merck Millipore Darmstadt, Jerman), ERK (Merck Millipore Darmstadt, Jerman), P38 ( Merck Darmstadt Millipore, Jerman), dan antibodi monoklonal terhadap B-Actin (AC-15, Sigma Aldrich ). Sejak saat itu, inkubasi membran dengan visualisasi kompleks antibodi sekunder terkonjugasi peroksidase Horseradish dan kuantifikasi sinyal dengan perangkat lunak ImageJ.
Analisis statistik Semua informasi dianalisis dengan rata-rata ± standar deviasi (SD). Tes ANOVA satu arah digunakan untuk mengukur perbedaan antara setiap kumpulan informasi. Nilai-P kurang dari 0.05 dianggap signifikan secara statistik.
Hasil
Senyawa fenolik
Tujuan dari percobaan ini adalah untuk mengukur efikasi pelarut yang digunakan untuk ekstraksi dan juga metode yang dapat mengekstraksi senyawa fenolik sebanyak mungkin. Sebagian besar senyawa fenolik larut dengan sangat baik ketika diekstraksi dengan larutan polar tinggi seperti air, metanol (MeOH), etanol (EtOH), aseton, etilasetat, propanol, asam asetat, atau campurannya dalam berbagai porsi [11]. Gambar 1A menunjukkan bahwa W60 dapat mengekstrak senyawa fenolik sebanyak 16,24 µg/ml diikuti M60, E4, dan MW24 dengan total fenol masing-masing 13,89, 9,21, dan 8,38 µg/ml. Sitotoksisitas SBP diuji dengan uji reduksi MTT yang mengukur lingkungan reduksi dari fungsi mitokondria sel hidup dengan mengukur pembentukan formazan untuk mengakses efek sitotoksik. Hasilnya ditemukan bahwa SBP pada konsentrasi terindikasi (hingga 500 µg/ml) dengan inkubasi 48 jam. Sitotoksisitas tidak menunjukkan efek yang signifikan setelah pengobatan SBP (Gbr. 1B).
Efek SBP pada aktivitas enzim dan kandungan melanin dalam sel B16F10
Untuk menguji supresi melanogenesis SBP, langkah pertama yang dilakukan adalah menguji kemampuan penghambatan enzim tirosinase jamur dibandingkan dengan asam kojic yang merupakan agen pemutih komersial. SBP (MW24) memiliki kemanjuran yang lebih tinggi daripada asam Kojic dan ekstraksi lainnya pada konsentrasi yang sama (100-500 µg/ml). MW24 memiliki persentase penghambatan tirosinase tertinggi (66.39-77.05 persen ) sedangkan asam kojic hanya memiliki persentase penghambatan tirosinase sebesar 44.68-59.93 persen seperti yang ditunjukkan pada Gambar 1C. Sejak saat itu, MW24 dengan persentase penghambatan tirosinase tertinggi dipilih untuk pengukuran anti-melanogenesis dengan produksi melanin dari sel B16F10. Kandungan melanin sel B16F10 berkurang setelah pengobatan SBP (MW24) (Gbr. 2A). Jumlah kandungan melanin sel B16F10 menurun secara signifikan setelah distimulasi dengan -MSH dan diobati dengan SBP (MW24) selama 24 jam dengan cara yang tergantung dosis seperti yang ditunjukkan pada Gambar 2B.
Efek SBP (M24) pada tingkat ekspresi protein tirosinase dan MITF
Analisis western blot digunakan untuk aktivitas tirosinase dan MITF dengan mengukur kadar ekspresi protein setelah diberi perlakuan dengan SBP (MW24) selama 24 jam. Regulasi enzim melanogenik seperti TRP-1, dan TRP-2 dihasilkan dari efek transkripsi MITF dan kadar protein tirosinase. Hasilnya menunjukkan bahwa SBP (MW24) mampu mengatur turun ekspresi protein tirosinase dan MITF yang bergantung pada dosis seperti yang ditunjukkan pada Gambar 3.
Efek SBP (M24) pada penghambatan melanogenesis melalui jalur pensinyalan mitogen-activated protein kinase (MAPKs)
Dalam melanogenesis, keluarga MAPKs kinase terutama ERK dan p38 berhubungan langsung dengan prosedur ini [12]. Pensinyalan ERK akan mengatur ke bawah sementara pensinyalan p38 akan mengatur ke atas selama terjadinya produksi melanin. Namun, fosforilasi ERK dan p38 akan memiliki prosedur kebalikan dari produksi melanin. Hasilnya menunjukkan efek yang jelas setelah pengobatan SBP (MW24) dengan -MSH yang diaktifkan dengan immunoblotting ke jalur pensinyalan MAPK. SBP (MW24) sedikit menurunkan ekspresi protein p38 dan meningkatkan fosforilasi p38. Hasil ini menunjukkan cara untuk menghambat proses melanogenesis melalui jalur p38 tanpa efek pada ERK tetapi fosforilasi kadar protein ERK sedikit menurun setelah pengobatan -MSH dan SBP (MW24) seperti yang ditunjukkan pada Gambar 4.
Diskusi
Kulit pisang sucrier merupakan limbah pertanian yang memiliki kandungan zat aktif yang melimpah, terutama pada kelompok senyawa fenolik dan karotenoid yang merupakan metabolit sekunder yang dibuat tumbuhan untuk mekanisme pertahanan diri (Anonim, 2010). Zat ini dapat ditemukan di daun, kulit kayu, buah, kulit, dan biji hampir semua tumbuhan. Senyawa fenolik dan karotenoid merupakan zat fitokimia yang memiliki khasiat baik untuk kesehatan manusia. Zat-zat tersebut terdiri dari anti-inflamasi, anti-virus, analgesik, antioksidan, anti-karsinogen, dll [13]. Secara umum, senyawa fenolik dapat larut dengan baik dalam pelarut polar tinggi. Untuk percobaan, ekstraksi MW24 harus dapat mengekstraksi senyawa fenolik secara maksimal karena prosedur ekstraksi dari uji Folin-Cicualteu. Senyawa polar rendah diekstraksi terlebih dahulu kemudian diikuti oleh zat polar tinggi tergantung pada rasio pencampuran akhir pelarut dalam prosedur. Hasil penelitian menunjukkan bahwa W60 dapat mengekstraksi senyawa fenolik paling banyak, kemungkinan karena suhu 60 derajat Celcius dapat menjadi suhu yang sesuai untuk mengekstraksi senyawa fenolik [11]. Dapat juga diasumsikan bahwa SBP mungkin mengandung zat polar tinggi yang larut dengan baik dalam air. Ketika membandingkan jumlah senyawa fenolik total seperti yang ditunjukkan pada Gambar. 1A, W60, M60, E4, dan MW24 menunjukkan kemungkinan kelarutan zat, secara signifikan.
Setelah jumlah total senyawa fenolik diketahui, kita dapat melanjutkan untuk menentukan jenis dan jumlah zat flavonoid dan karotenoid. Kami menemukan ekstrak SBP (MW24) mengandung asam ferulic setinggi 906,62 mg/100g dan juga ditemukan sejumlah kecil lutein dan -karoten yang dikategorikan dalam kelompok karotenoid masing-masing sebesar 1,23 dan 2,37 mg/100g. SBD (MW24) masih memiliki persentase penghambatan tirosinase yang tinggi. Oleh karena itu, SBP (MW 24) dipilih untuk studi lebih lanjut.
Dari uji sitotoksisitas, tidak ditemukan sitotoksik yang signifikan dari SBP meskipun jumlah konsentrasi penggunaan mencapai 500 µg/ml. mungkin karena sejumlah kecil karotenoid dalam ekstraksi memiliki kemampuan untuk melindungi sel. Zat dalam kelompok ini memiliki sifat antioksidan yang dapat menghentikan racun melalui Cytochrome P-450 terutama -carotene yang memiliki peran merangsang fungsi kekebalan dengan berinteraksi dengan Reaction Oxygen Species (ROS). Hal ini akan mendukung efektivitas senyawa fenolik yang memiliki sifat ROS scavenging effect untuk menurunkan sitokin inflamasi [14]. Jadi, SBD (MW24) tidak hanya tidak memiliki efek toksik, tetapi juga memiliki peran perlindungan sel.
Studi kami juga menemukan bahwa SBP (MW24) memiliki kemampuan menghambat melanogenesis sel B16F10. Ekspresi tirosinase dan MITF berkurang setelah pengobatan SBP (MW24) keduanya dinilai dengan tirosinase jamur dan analisis Western blot dengan cara yang tergantung dosis. Tes ini menunjukkan bahwa SBP (MW24) dapat menekan pembentukan melanin dengan mengatur jalur pensinyalan p38 ke bawah dan mengatur fosforilasi p38 yang mengaktifkan degradasi protein MITF dan kemudian berpengaruh untuk menurunkan ekspresi keluarga enzim melanogenik seperti tirosinase. Supresi p38 menurunkan fungsi cAMP Response Binding Protein (CREB) yang merupakan faktor transkripsi penting yang bekerja dengan PAX3 dan SOX10 yang menempel pada M-BOX gen MITF untuk mengaktifkan ekspresi protein MITF yang memengaruhi proses produksi melanin dan aktivitas kelangsungan hidup sel [15 ]. Secara umum, mengaktifkan ERK mengarah pada fosforilasi MITF pada serin 73 yang menyebabkan ubiquitinasi dan akhirnya degradasi. Sebagian besar senyawa alami dapat menghambat melanogenesis melalui proses stimulasi jalur pensinyalan ERK, tetapi SBP (MW24) tidak secara signifikan mempengaruhi jalur pensinyalan ERK [16].
Banyak penelitian menemukan bahwa senyawa fenolik dan karotenoid dapat menghambat produksi pigmen melanin karena beta-karoten memiliki kemampuan menyerap foton UVB selain itu juga memiliki sifat antioksidan yang larut dalam lemak dan senyawa fenolik dapat mengaktifkan Nrf2, memblokir reseptor ROS, mengurangi peradangan. produksi sitokin dan menginduksi ekspresi y-GSC yang mendukung penelitian kami tetapi dengan cara penghambatan melanogenesis yang berbeda [17]. Selain itu asam ferulic yang terdapat pada SBP (MW24) merupakan zat utama dalam kelompok senyawa fenolik yang dikonfirmasi oleh beberapa penelitian bahwa ia memiliki sifat anti-melanogenesis karena dapat memodulasi ekspresi vascular endothelial growth factor (VEGF), menginduksi nitric oxide. synthase, bertindak sebagai gen penekan tumor dan juga berhubungan dengan prosedur produksi pigmen melanin. Dalam larutan SBP (MW24), asam ferulat dapat meningkatkan efektivitas bila dicampur dengan karotenoid atau fosfolipid lainnya karena kelarutan air, kelarutan lipid, dan bioavailabilitas akan meningkat sehingga meningkatkan penghambatan melanogenesis sel B16F10 [18]. Implikasi dari semua hasil menyimpulkan bahwa SBP (MW24) dapat mereduksi melanogenesis secara efektif.
Singkatan
MITF: faktor transkripsi terkait mikroftalmia; -MSH: -melanosit merangsang hormon; MC1R: reseptor melanokortin-1; TRP1: protein terkait tirosinase 1; TRP2: protein terkait tirosinase 2; MAPK: protein kinase yang diaktifkan-mitogen.
Terima kasih
Pekerjaan ini didukung oleh hibah dari Royal Golden Jubilee Ph.D.: RGJPHD. Thailand. (PH.D./0017/2558).
Kontribusi Penulis
RH, KT, KS, dan UP menyusun dan merancang percobaan; RHCHL dan MC melakukan percobaan; RH dan MC dan CHL menganalisis data; RH menyumbangkan reagen/bahan/alat analisis; RH dan CHL menulis makalah.
Minat Bersaing
Para penulis telah menyatakan bahwa tidak ada kepentingan yang bersaing.
Referensi
1.Regnault MR, Gadaud N, Boulinguez S, Tournier E, Lamant L, Gladieff L, dkk. Hiperpigmentasi retikulat terkait kemoterapi: serangkaian kasus dan tinjauan literatur. Dermatologi 2015; 231: 312-8.
2. Ali A. Dermatologi Ulasan Bergambar. Pendidikan McGraw Hill 2010. ISBN978-0-07-179323-0.
3. Garraway LA, Widlund R, Rubin MA, Getz G, Berger AJ, Ramaswamy S, Beroukhim R, dkk. Analisis genomik integratif mengidentifikasi MITF sebagai onkogen kelangsungan hidup garis keturunan yang diamplifikasi dalam melanoma ganas. Alam 2005; 436: 117–22.
4. Busca R, Ballotti R. Cyclic AMP pembawa pesan utama dalam pengaturan pigmentasi kulit. Penelitian Sel Pigmen dan Melanoma 2000; 13: 60-9.
5. Zhou J, Ren T, Li Y, Cheng A, Xie W, Xu L, dkk. Oleoylethanolamide menghambat -melanocyte stimulating hormone merangsang melanogenesis melalui jalur pensinyalan ERK, Akt, dan CREB dalam sel melanoma B16. Oncotarget 2017; 8: 56868-79.
6. Onkoksoong T, Jeayeng S, Poungvarin N, Limsaengurai S, Thamsermsang O, Tripatara P, Akarasereenont P, Panich U. Formula antipiretik 22 herbal Thailand (APF22) menghambat melanogenesis yang dimediasi UVA melalui aktivasi Nrf2-antioksidan yang diatur pertahanan. Penelitian Phytotherapy 2018; 32: 1546-54.
7. Singh B, Singh JP, Kaur A, Singh N. Senyawa bioaktif dalam pisang dan manfaat kesehatannya yang terkait - Tinjauan. Kimia Pangan 2015; 1: 1-11.
8. Leerach N, Yakaew S, Phimnuan P, Soimee W, Nakyai W, Luangbudnark W, Viyoch J. Efek pisang Thailand (kelompok Musa AA) dalam mengurangi akumulasi produk akhir oksidasi pada kulit tikus yang disinari UVB. Jurnal Fotokimia & Fotobiologi, B: Biologi 2017; 168: 50-58.
9. Digantung OLEH, Kim SY, Jung JM, Won CH, Choi JH, Lee MW. Klotrimazol agen antimikotik menghambat melanogenesis dengan mempercepat degradasi tirosinase yang dimediasi oleh ERK dan PI3K-/Akt. Dermatologi Eksperimental 2015; 24: 381-400.
10. Shen T, Heo SI, Wang MH. Keterlibatan jalur pensinyalan MAPK dan ERK p38 dalam efek anti-melanogenik metil 3,5- caffeoyl quinate dalam sel melanoma tikus B16F10. Interaksi Kimia-Biologis 2012; 199: 106-11.
11. Ruesgas-Ramón M, Figueroa-Espinoza MC, Durand E. Aplikasi Deep Eutectic Solvents (DES) untuk Ekstraksi Senyawa Fenolik: Gambaran Umum, Tantangan, dan Peluang. Jurnal Kimia Pertanian dan Pangan 2017; 10: 3591-3601.
12. Tsao YT, Kuo CY, Kuan YD, Lin HC, Wu LH, Lee CH. Ekstrak Astragalus membranaceus Menghambat Melanogenesis melalui ERK Signaling Pathway. Jurnal Internasional Ilmu Kedokteran 2017; 3: 1049-53.
13.Chang TS. Tinjauan terbaru tentang penghambat tirosinase. Jurnal Internasional Ilmu Molekuler 2009; 26: 2440-75.
14. Juturu V, Bowman JP, Deshpande J. Keseluruhan warna kulit dan efek pencerah kulit dengan suplementasi oral isomer lutein dan zeaxanthin: uji klinis double-blind, terkontrol plasebo. Dermatologi Klinis, Kosmetik, dan Investigasi 2016; 7: 325-332.
15. Bell RE, Levy C. Tiga m: melanoma, faktor transkripsi terkait mikro-ophthalmia, dan microRNA. Penelitian Melanoma Sel Pigmen 2011; 24: 1088–106.
16. Zhou J, Ren T, Li Y, Cheng A, Xie W, Xu L, Peng L. Oleoylethanolamide menghambat -melanosit merangsang melanogenesis yang distimulasi hormon melalui jalur pensinyalan ERK, Akt, dan CREB dalam sel melanoma B16. Oncotarget 2017; 23: 56868-79.
17. Toews DPL, Hofmeister NR, Taylor SA. Evolusi dan Genetika Pemrosesan Karotenoid pada Hewan. Tren Genetik 2017; 33: 171-182.
18. Li L, Liu Y, Xue Y, Zhu J, Wang X, Dong Y. Persiapan kompleks asam ferulat-fosfolipid untuk meningkatkan kelarutan, pembubaran, dan aktivitas penghambatan melanogenesis seluler B16F10. Jurnal Pusat Kimia 2017; 22: 11-26.
Untuk info lebih lanjut: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501
