Respons Dikotomis Terhadap Hipoksia Janin Kronis Menyebabkan Fenotip Penuaan yang Telah Ditentukan Ⅱ
Nov 29, 2023
Hipoksia
Ginjal Janin
Memperlihatkan Profil Ekspresi Protein yang Dideregulasi Untuk menjelaskan jalur molekuler yang mendasari IUGR yang dipicu oleh hipoksia, ginjal yang baru diisolasi dari janin E18.5 yang hipoksia atau normoksik menjadi sasaran pembuatan profil proteom bottom-up menggunakan sistem nano-LC (Dionex UltiMate 3{{9 }}00 RSLC) digabungkan dengan spektrometer massa orbitrap resolusi tinggi (Thermo QExactive). Analisis komponen utama menunjukkan perbedaan mencolok antara ginjal hipoksia dan normoksik (Gambar 2A). Secara total, 6307 protein diidentifikasi (FDR <0,01, tambahan Tabel S2) dimana 436 di antaranya dideregulasi secara signifikan (FDR <0,05); 284 dengan kelimpahan meningkat dan 152 dengan kelimpahan menurun. Pengelompokan anotasi fungsional menggunakan ontologi gen (18-20) mengungkapkan pengayaan protein pengikat mitokondria, lisosom, RNA, dan DNA spesifik, serta protein yang terlibat dalam proses metabolisme spesifik atau respons imun bawaan (Gbr. 2, B– D) . Kami mengkategorikan protein-protein ini sehubungan dengan (1) pembentukan nefron, (2) adaptasi metabolik, dan (3) percepatan penuaan, sebagaimana disajikan dan dibahas dalam paragraf berikut.
Replikasi DNA yang Ditekan dan Sintesis Protein Berkontribusi pada Terkendalinya Pembentukan Nefron Baru pada Hipoksia Kronis
Kejadian buruk selama perkembangan seperti hipoksia janin kronis sering dikaitkan dengan penurunan jumlah nefron (27, 29-32). Namun, mekanisme mendasar yang secara meyakinkan menjelaskan temuan ini jarang dapat dibuktikan. Mengelompokkan semua 64 protein yang dideregulasi milik istilah GO "pengikatan DNA" dan "pengikatan RNA" (peta panas ditunjukkan pada Gambar tambahan S2) menggunakan database STRING (22) mengungkapkan beberapa subjaringan termasuk perbaikan DNA, replikasi DNA, penyambungan mRNA, dan protein ribosom (Gbr. 3A). Daftar proses atau jalur yang diperkaya secara lebih komprehensif ditunjukkan pada Gambar 3B (FDR < 0.05). Dari jumlah tersebut, "Ribosome" dan "replikasi DNA" termasuk di antara istilah teratas dari protein yang ditekan, sedangkan penyambungan mRNA dan "degradasi RNA" termasuk di antara istilah teratas dari protein yang diinduksi. Proses perbaikan DNA menunjukkan pola ekspresi bipartit. Di sini, protein yang terlibat dalam eksisi nukleotida atau perbaikan ketidakcocokan ditekan, tetapi protein yang memediasi "perbaikan eksisi basa" diinduksi. Selain itu, tingkat kelimpahan penghambat siklus sel p27Kip1 meningkat dua kali lipat (Gambar 3C) dan penanda proliferasi Ki67 adalah 3.4-kali lipat berkurang (Gambar 3D), yang bersama-sama menunjukkan perlambatan sel proses pembagian. Secara khusus, tingkat ekspresi mRNA dari Mki67, gen yang mengkode Ki67, secara signifikan ditekan dalam sel tubular proksimal primer tikus yang dikultur dalam kondisi hipoksia (Gambar 3E). Represi ini dimediasi melalui hipermetilasi daerah promotor Mki67 pada ginjal janin yang hipoksia (Gambar 3F). Jadi, pada ginjal janin yang hipoksia, sintesis DNA, translasi mRNA, dan sebagian besar proses perbaikan DNA tampaknya terhambat, sehingga mengurangi kemampuan sel untuk tumbuh dan berkembang biak. Secara agregat di sini, untuk pertama kalinya, data profil proteom memberikan bukti molekuler yang berpotensi menjelaskan berkurangnya pembentukan nefron.
Sistem Kekebalan Tubuh Bawaan dan Stres Oksidatif Diaktifkan dalam Kondisi Hipoksia Kronis
Salah satu istilah yang paling diperkaya yang muncul dalam analisis anotasi fungsional dari 436 protein dan istilah paling atas untuk protein terinduksi adalah "Degranulasi neutrofil" (Gambar 2, B dan C), yang menunjukkan aktivasi berkelanjutan dari sistem kekebalan bawaan diginjal janin hipoksia. Dari 34 protein terkait, 29 diinduksi dan lima ditekan (merah muda pada Gambar 4A). Di antara protein yang diinduksi terdapat banyak enzim terkait glikolitik dan lisosom, beberapa anggota keluarga protein S100A, faktor penghambat migrasi makrofag sitokin inflamasi (MIF), serta protein granul primer dan sekunder protein granul neutrofil (NGP), myeloperoxidase (MPO) , Cathelicidin (CAMP), protein pengenalan peptidoglikan 1 (PGLYRP1), dan laktoferin (LTF). Untuk memverifikasi antisipasi invasi neutrofil pada ginjal janin hipoksia dan untuk mengungkap lokasinya di dalam jaringan, bagian ginjal diwarnai untuk MPO. Sel-sel MPO-positif membentuk kelompok di zona nefrogenik korteks ginjal, di dekat pembuluh darah, berdekatan dengan tubulus proksimal, dan kadang-kadang dapat ditemukan di daerah medula sampel hipoksia (Gambar 4D dan Gambar tambahan. S3, A -C). Sebaliknya, ginjal janin normoksik tidak menunjukkan infiltrasi atau akumulasi neutrofil (Gambar 4C). Caveolin-1 (CAV1) terbukti meningkatkan migrasi transelular sel imun (33). Oleh karena itu, CAV1 diinduksi pada ginjal janin hipoksia (Gambar tambahan S3D), menunjukkan peningkatan pewarnaan pembuluh darah ginjal termasuk yang melintasi daerah kortikal ginjal janin (Gambar 4, E dan F). Degranulasi neutrofil menghasilkan ledakan spesies oksigen reaktif lokal yang menyebabkan peningkatan stres oksidatif dan kerusakan jaringan termasuk oksidasi DNA. Penanda penting oksidasi DNA adalah 8-hidroksi-2′ -deoksiguanosin (8-OHdG), yang ditingkatkan di tubulus proksimal dan di zona nefrogenik ginjal janin hipoksia (Gbr. 4, G dan H), di sekitar pengelompokan neutrofil. Peningkatan DNA rusak 8-OHdG ini terjadi meskipun terjadi induksi MGMT dan OGG1 secara simultan (Gbr. 4, I dan J), dua enzim yang bertanggung jawab untuk menghilangkan 8-OHdG. Hasil ini menunjukkan aktivasi berkelanjutan dari sistem kekebalan bawaan pada ginjal yang sedang berkembang, yang menyebabkan lebih banyak kerusakan jaringan selain stres hipoksia. Seiring dengan tidak efektifnya perbaikan lesi jaringan ini, lingkaran setan mungkin terjadi yang selanjutnya mengganggu nefrogenesis.
ARA. 2. Profil protein mengungkapkan banyak perubahan yang terkait dengan hipoksia. A, analisis komponen utama dari data proteomik menunjukkan pemisahan yang jelas antara ginjal janin normoksik dan hipoksia. B–D, pengelompokan anotasi fungsional dari semua protein yang dideregulasi secara signifikan (B), protein terinduksi (C), dan protein tereduksi (D) Fraksi jalur yang berubah secara signifikan (sumbu x) diplot terhadap signifikansi pengayaannya (y- sumbu). Ukuran setiap poin mengkodekan jumlah total anggota di jalur tersebut. Protein yang terinduksi menunjukkan pengayaan proses metabolisme (glikolisis), protein mitokondria atau lisosom, dan protein yang terlibat dalam respons sistem kekebalan (degranulasi neutrofil), sedangkan protein tereduksi diperkaya untuk jalur pengikatan DNA dan RNA (konstituen struktural ribosom).
(PGLYRP1), dan laktoferin (LTF). Untuk memverifikasi antisipasi invasi neutrofil pada ginjal janin hipoksia dan untuk mengungkap lokasinya di dalam jaringan, bagian ginjal diwarnai untuk MPO. Sel-sel MPO-positif membentuk kelompok di zona nefrogenik korteks ginjal, di dekat pembuluh darah, berdekatan dengan tubulus proksimal, dan kadang-kadang dapat ditemukan di daerah medula sampel hipoksia (Gambar 4D dan Gambar tambahan. S3, A -C). Sebaliknya, ginjal janin normoksik tidak menunjukkan infiltrasi atau akumulasi neutrofil (Gambar 4C). Caveolin-1 (CAV1) terbukti meningkatkan migrasi transelular sel imun (33). Oleh karena itu, CAV1 diinduksi pada ginjal janin hipoksia (Gambar tambahan S3D), menunjukkan peningkatan pewarnaan pembuluh darah ginjal termasuk yang melintasi daerah kortikal ginjal janin (Gambar 4, E dan F). Degranulasi neutrofil menghasilkan ledakan spesies oksigen reaktif lokal yang menyebabkan peningkatan stres oksidatif dan kerusakan jaringan termasuk oksidasi DNA. Penanda penting oksidasi DNA adalah 8-hidroksi-2′ -deoksiguanosin (8-OHdG), yang ditingkatkan di tubulus proksimal dan di zona nefrogenik ginjal janin hipoksia (Gbr. 4, G dan H), di sekitar pengelompokan neutrofil. Peningkatan DNA rusak 8-OHdG ini terjadi meskipun terjadi induksi MGMT dan OGG1 secara bersamaan (Gbr. 4, I dan J), dua enzim yang bertanggung jawab untuk menghilangkan 8-OHdG. Hasil ini menunjukkan aktivasi berkelanjutan dari sistem kekebalan bawaan pada ginjal yang sedang berkembang, yang menyebabkan lebih banyak kerusakan jaringan selain stres hipoksia. Seiring dengan tidak efektifnya perbaikan lesi jaringan ini, lingkaran setan mungkin terjadi yang selanjutnya mengganggu nefrogenesis.
Adaptasi Metabolik terhadap Hipoksia Menghasilkan Glikolisis yang Diucapkan pada Ginjal Janin
Hipoksia kronis adalah suatu kondisi parah di mana sel harus beradaptasi melalui perubahan metabolisme agar dapat bertahan hidup. Yang terpenting dari hal ini adalah pemeliharaan produksi ATP seluler yang jika tidak ada oksigenasi yang cukup memerlukan peralihan dari fosforilasi oksidatif ke glikolisis. Dari semua istilah yang dihasilkan dari penjelasan fungsional, "proses glikolitik" adalah yang paling signifikan (Gambar 2B). Kesepuluh enzim (merah ①–⑩ pada Gambar 5A) yang diperlukan untuk konversi glukosa menjadi piruvat diinduksi dalamginjal janin yang hipoksiadibandingkan dengan kontrol normoksik (peta panas ditunjukkan pada Gambar 5C). Selain itu, ekspresi transporter glukosa 1 (SLC2A1, oranye pada Gambar. 4A) dan laktat dehidrogenase A (LDHA, merah tua pada Gambar. 5A) juga ditingkatkan, yang seharusnya memfasilitasi peningkatan penyerapan glukosa ke dalam sel dan peningkatan pengurangan glukosa. piruvat menjadi laktat, masing-masing. Pemanfaatan alternatif piruvat dalam siklus asam sitrat tampaknya terhambat (1) oleh peningkatan ekspresi piruvat dehidrogenase kinase 1 (PDK1, merah tua pada Gambar 5A), yang menonaktifkan kompleks piruvat dehidrogenase di mitokondria dan dengan demikian oksidasi piruvat menjadi asetil-KoA; dan (2) dengan berkurangnya kadar piruvat karboksilase (PC), yang mengkatalisis konversi piruvat menjadi oksaloasetat. Di sisi lain, fruktosa-1,6-bisphosphatase 1 (FBP1, biru pada Gambar 5A) berkurang, yang selanjutnya meningkatkan potensi fluks glukosa menuju piruvat. Semua perubahan enzimatik ini mendukung produksi laktat, dan tentu saja, konsentrasi laktat meningkat pada ginjal janin yang hipoksia (Gambar 5B). Peningkatan produksi laktat dapat menyebabkan pengasaman yang tidak menguntungkan. Namun, kami menemukan di antara protein yang diperkaya, transporter monokarboksilat SLC16A3 dan SLC5A8 (oranye pada Gambar 5A), yang diketahui mengeluarkan laktat ke ruang ekstraseluler untuk menghindari efek toksik dari pengasaman sitoplasma. Dengan demikian, model kami menunjukkan kemampuan luar biasa ginjal janin untuk beradaptasi terhadap hipoksia kronis dengan meningkatkan aktivitas glikolitik,
ARA. 3. Pembentukan nefron baru pada hipoksia berhubungan dengan penekanan replikasi DNA dan sintesis protein. A, jaringan interaksi protein dari protein pengikat DNA dan RNA yang berubah secara signifikan yang berasal dari database STRING menunjukkan beberapa kelompok protein: protein ribosom (biru), protein yang terlibat dalam replikasi DNA (hijau), perbaikan DNA (ungu), dan penyambungan mRNA ( merah). Penanda proliferasi Ki67 (Mki67) ditandai dengan warna hitam, menyoroti hubungan eratnya dengan perbaikan DNA dan replikasi DNA. B, pilihan jalur protein pengikat DNA dan RNA yang berubah secara signifikan dari database KEGG dan Reactome yang menunjukkan perubahan paling menonjol padaginjal hipoksia, digambarkan dalam urutan signifikansi yang menurun. Proses penyambungan RNA dan degradasi RNA diperkaya (merah), sedangkan jalur translasi RNA, replikasi DNA, dan perbaikan ditekan (biru). Hanya proses dengan FDR<0.05 are shown. C and D, the cell cycle inhibitor p27Kip1 was enhanced (unpaired two-tailed t test, Welch's correction, p = 0.0095), whereas the expression of the proliferation marker Ki67 was reduced (unpaired two-tailed t test, Welch's correction, p = 0.0078) in hypoxic fetal kidneys. E, hypoxia reduced the mRNA expression level of Mki67 in mouse primary proximal tubular cells (unpaired two-tailed t test, p < 0.0001). F, this reduction was mediated by hypermethylation of the Mki67 promoter in hypoxic fetal kidneys. Open circle unmethylated, black circle methylated (Fisher's exact test, p = 0.0016; Mann–Whitney U-test, p = 0.0431)
ARA. 4. Protein yang terlibat dalam respon inflamasi dan stres oksidatif diperkaya dalam nefron yang baru terbentuk di bawah hipoksia. A, penggambaran ke-34 protein yang berubah secara signifikan untuk anotasi yang disebut degranulasi neutrofil (lingkaran merah muda) di antara semua protein signifikan (lingkaran abu-abu lebih besar) dan tidak signifikan (lingkaran abu-abu lebih kecil) pada kumpulan data kami. 29 memiliki tingkat kelimpahan yang lebih tinggi, sedangkan lima lainnya berkurang. B, peta panas yang menunjukkan semua protein merah muda di (A) dan induksi atau represinya pada hipoksia, digambarkan dalam urutan penurunan kelimpahan protein. C – H, gambaran imunohistokimia yang representatif dari E18.5 normoksik atauginjal hipoksiamenunjukkan infiltrasi neutrofil dan stres oksidatif. C dan D, imunohistokimia untuk penanda neutrofil myeloperoxidase (MPO) mengungkapkan pengelompokan sel-sel ini di dekat nefron yang baru terbentuk (tanda bintang) dan berdekatan dengan pembuluh darah ginjal (panah) ginjal janin yang hipoksia (D). Pada kontrol normoksik (C), sel MPO-positif jarang ditemukan. (Batang skala 100 μm). E dan F, imunohistokimia yang menggambarkan peningkatan ekspresi caveolin-1 (CAV1) dalam pembuluh darah ginjal ginjal janin hipoksia (F) dibandingkan dengan kontrol (E) (Skala batang 200 μm). G dan H, 8-hidroksi-2′ -deoksiguanosin (8-OHdG), penanda kerusakan DNA oksidatif, secara nyata ditingkatkan pada nefron yang baru terbentuk (tanda bintang) di korteks ginjal dan di sel tubulus proksimal (panah) ginjal hipoksia (H), sedangkan hanya sedikit sel yang diwarnai pada jaringan normoksik (G) (Batang skala 200 μm). I dan J, peningkatan kerusakan DNA ini terjadi meskipun terjadi peningkatan O-6-metilguanin-DNA metiltransferase (MGMT; uji t dua sisi tidak berpasangan, p=0.0002) (I) dan {{ 15}}oxo guanine glikosilase (OGG1; uji t dua sisi tidak berpasangan, p=0.0063) (J), dua enzim yang terlibat dalam perbaikan DNA teroksidasi.
yang memastikan produksi ATP yang cukup dan kelangsungan hidup dalam kondisi buruk ini.
Hipoksia Janin Mempromosikan Impor Protein Mitokondria Kompensasi dan Perakitan Rantai Pernafasan
Selain peningkatan glikolisis, kami menemukan banyak perubahan dalam tingkat kelimpahan protein mitokondria (peta panas ditunjukkan pada Gambar tambahan. S4). Pembuatan jaringan protein menggunakan STRING mengungkapkan beberapa kelompok yang terdiri dari protein yang terlibat dalam translokasi protein menjadi mitokondria, fosforilasi oksidatif, dan protein ribosom mitokondria (Gambar 5, D dan E). Sebagai catatan, banyak protein yang terkait dengan membran dalam mitokondria diinduksi, tempat terjadinya fosforilasi oksidatif (OXPHOS). OXPHOS mencakup lima kompleks multiprotein yang tersusun di sepanjang membran dalam mitokondria. Di antara protein yang diinduksi adalah komponen kompleks OXPHOS (NDUSF6), III (UQCR10), IV (COX6B1, COXC, dan COX7A2), dan V (ATP5J, MTATP8), tetapi juga UQCC3 dan SCO2, yang diperlukan untuk perakitan dan fungsi yang benar. kompleks dan IV, masing-masing (Gambar 5D dan Gambar tambahan. S4). SDHC dan SDHD, subunit kompleks ll, juga diregulasi (masing-masing 1.6- dan 2.5-kali lipat), namun tidak mencapai signifikansi statistik. Selain itu, tidak hanya komponen rantai pernapasan yang diperkaya pada janinginjal hipoksia, tetapi juga banyak protein yang memediasi impornya ke mitokondria. Ini termasuk anggota translocase membran luar (TOM - TOMM22), dan kompleks translocase membran dalam TIM22 (TIMM22, TIMM9, dan TIMM10 dan kompleks TIMM8-TIMM13-yang terkait (Gbr. 5D dan Gambar tambahan . S4). Di antara 21 protein mitokondria dengan kelimpahan yang berkurang terdapat empat protein ribosom mitokondria, serta protein yang terlibat dalam katabolisme asam amino, biosintesis vitamin, atau oksidasi beta asam lemak (Gambar 5, D dan E, dan Gambar tambahan. S4) Temuan ini menunjukkan adanya potensi disfungsi mitokondria dan upaya nyata untuk meregenerasi protein yang rusak (34), meskipun terjadi peningkatan glikolisis dan penurunan sintesis protein secara keseluruhan.
Biogenesis Lisosom dan Autophagy Ditingkatkan diGinjal Janin HipoksiaLisosom adalah organel kedua yang tampaknya diperkaya dalam kondisi hipoksia. Namun, dibandingkan dengan mitokondria, di mana 36% proteinnya tereduksi, hampir semua protein terkait lisosom mengalami peningkatan regulasi (Gambar 6, A dan B). Diantaranya adalah sembilan hidrolase asam lisosom, mewakili hampir 20% hidrolase asam lisosom yang dijelaskan dalam jalur KEGG untuk lisosom: empat pro-teas (CTSA, CTSF, CTSZ, TPP1), tiga glikosidase (GAA, NAGA, NEU1), lisosomal asam fosfatase 2 (ACP2), dan asam lisosom lipase A (LIPA). Selain itu, kami menemukan bukti peningkatan biogenesis lisosom dan organel terkait. Tiga dari delapan komponen BLOC1 (biogenesis kompleks organel terkait lisosom 1) diinduksi secara signifikan (Gambar 6, C – E), serta transporter pertukaran H/Cl 5 (CLCN5), yang merupakan pemain penting dalam pengasaman endosom (Gbr. 6F). Sebagai catatan, Snapin (BLOC1 subunit 7) juga berperan dalam pengasaman lisosom dan pematangan serta fungsi autofagosom. Protein terinduksi lain yang diketahui berperan dalam autophagy adalah Atg7 dan Bnip3 (Gambar 6, G dan H). Persyaratan lain untuk fluks autofagik adalah pengelompokan lisosom perinuklear, yang dimediasi oleh kompleks Ragulator lisosom (35, 36) dan dua keluarga protein motorik yang berlawanan. Yang mengejutkan, empat dari lima anggota subunit perancah Regulator (LAMTOR1, 2, 3, dan 5) diinduksi secara signifikan (Gambar 6, A dan B); LAMTOR4 juga diinduksi 1.{29}}kali lipat, tetapi tidak mencapai signifikansi statistik. Lebih lanjut, kinesin, yang memediasi pergerakan organel ke luar, menunjukkan kecenderungan untuk ditekan, sedangkan anggota keluarga dynein yang memfasilitasi pergerakan ke dalam diinduksi, meskipun tidak signifikan secara statistik (tambahan Gambar. S5). Secara kolektif temuan ini memberikan bukti kuat bahwa fungsi tata graha lisosom ditingkatkanginjal janin yang hipoksia, sepenuhnya kompatibel dengan kebutuhan yang diantisipasi untuk memperbarui mitokondria yang rusak.
Prematur
Penuaan Mencontohkan Aspek Adaptasi Hipoksia yang Dihadapi Janus Bertentangan dengan mekanisme perbaikan dan peremajaan kompensasi, kami menemukan 15 protein deregulasi yang termasuk dalam istilah GO "Penuaan" (Gambar 7A), mewakili kategori ketiga adaptasi hipoksia: penuaan yang dipercepat . Sementara sebagian besar protein ini berperan dalam salah satu proses degranulasi neutrofil dan lisosom yang dijelaskan di atas (MIF, MPO, PSEN1), mitokondria (NDUFS6, FADS1, MTCO1, CYP27B1), glikolisis (ALDOC), dan perbaikan DNA (OGG1) ; beberapa telah dijelaskan berdampak langsung pada masa hidup tikus. Secara khusus, kelimpahan protein klotho dan sirtuin 6 menurun pada E18.5 hipoksiaginjal janin(Gbr. 7, B dan C). Sirtuin 6 adalah enzim yang diekspresikan di mana-mana dengan aktivitas protein deasetilase dan mono-ADP ribosil transferase yang terlibat dalam regulasi beberapa fungsi seluler, termasuk peradangan, glikolisis, dan perbaikan DNA. Penghancurannya menyebabkan progeria parah pada tikus dengan berkurangnya masa hidup 1 hingga 3 bulan (37, 38). Ginjal adalah tempat utama sintesis klotho (yaitu, tubulus berbelit-belit distal—DCT menyumbang sebagian besar protein dengan sintesis tambahan di tubulus berbelit-belit proksimal), yang bertindak secara lokal sebagai beta-glukuronidase yang terikat membran. Berkurangnya kelimpahan klotho tampaknya merupakan proses spesifik karena protein DCT lainnya termasuk CALB1 tidak diubah. Klotho juga disekresikan ke dalam sirkulasi baik melalui pembelahan bagian ekstraseluler dari bentuk yang terikat membran atau melalui translasi varian sambungan alternatif. Tingkat sirkulasi klotho (sKL) menurun seiring bertambahnya usia (39, 40), yang mendorong kami untuk menilai konsentrasinya dan sirtuin 6 dalam darah utama janin E18.5 hipoksia atau normoksik. Memang benar, konsentrasi sKL dan sirtuin 6 berkurang secara signifikan pada janin E18.5 yang hipoksia (Gambar 7, D dan E). Lebih jauh lagi dan yang penting, kadar klotho dan sirtuin 6 dalam serum juga masih berkurang secara signifikan pada tikus tua (Gambar 7, F dan G), yang menunjukkan penurunan permanen kedua protein ini sepanjang hidup. Bagi Klotho, hal ini tampaknya disebabkan oleh penurunan tingkat ekspresi mRNA secara signifikan pada ginjal keturunan hipoksia berusia 15-bulan (Gbr. 7H). Namun, tingkat ekspresi mRNA ginjal sirtuin 6 tidak berubah antara tikus normoksik dan hipoksia (Gambar 7I). Lebih lanjut, perubahan dalam metilasi DNA telah terbukti menjadi salah satu mekanisme terpenting tidak hanya untuk pembaharuan dan diferensiasi sel progenitor nefron (41), namun juga untuk ekspresi klotho (42, 43). Namun, berbeda dengan hipermetilasi Mki67 (Gambar 3F), promotor klotho mengalami hipometilasi selama hipoksia kronis (Gambar tambahan S6). Pola metilasi Sirt6 tidak dapat ditentukan. Sejauh pengetahuan kami, model IUGR kami adalah model pertama yang menggambarkan mekanisme yang menyebabkan fenotip penuaan dini, melalui sinergi kerusakan inflamasi, perbaikan yang tidak efektif, perubahan metabolisme, dan berkurangnya jumlah protein antipenuaan yang sudah terjadi sejak lahir.
Pengurangan Protein Antipenuaan sebagai Respon terhadap Hipoksia Kronis Dilestarikan Antara Tikus dan Manusia Dalam rangkaian percobaan terakhir, kami menanyakan apakah interaksi antara hipoksia kronis dan penurunan kadar protein antipenuaan dalam serum merupakan fenomena yang dilestarikan secara evolusi. Untuk mencapai hal ini, sampel serum dari studi terkontrol (10) yang terdiri dari sembilan sukarelawan sehat (delapan laki-laki, satu perempuan) dikumpulkan 2 minggu sebelumnya (permukaan laut, SL), pada tiga titik waktu selama 28-hari tanpa gangguan tinggal di 3454 m (ketinggian tinggi, HA3, HA9, HA28), dan 1, 7, dan 14 hari setelah mereka kembali ke SL (RSL1, RSL7, RSL14) dianalisis untuk sKL dan SIRT6 (Gbr. 8). Sampel yang diperoleh di SL berfungsi sebagai kontrol untuk setiap peserta. Kadar serum sKL dan SIRT6 menurun di dataran tinggi dan keduanya mencapai relevansi statistik pada H28. Setelah kembali ke permukaan laut, sKL meningkat ke tingkat yang lebih tinggi daripada sebelum berada di ketinggian di RSL7 dan kembali normal di RSL14 (Gbr. 8A). Di sisi lain, SIRT6 terus menurun setelah kembali ke permukaan laut dan hanya mulai menurun lagi di RSL14 (Gambar 8B), menunjukkan perbedaan regulasi dari kedua protein anti-penuaan ini. Singkatnya, temuan ini menunjukkan bahwa penurunan kadar klotho dan sirtuin 6 serum umumnya memerlukan paparan kondisi hipoksia kronis dan dengan demikian mungkin mewakili proses evolusi yang sangat dilestarikan.
Layanan Pendukung Wecistanche-Ekspor cistanche terbesar di Cina:
Surel:wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/Telp:+86 15292862950
Belanja Untuk Detail Spesifikasi Lebih Lanjut:
https://www.xjcistanche.com/cistanche-toko
