Cistanche Tubulosa Melindungi Neuron Dopaminergik Melalui Regulasi Apoptosis Dan Faktor Neurotropik Berasal Sel Glial: in Vivo Dan in Vitro-Ⅱ

Tes Perilaku

Tes Renang (Zhu et al., 2014)

Koordinasi gerak tubuh mencit diukur dengan tes renang. Tikus-tikus tersebut secara individual ditempatkan dalam tangki air (tinggi 25 cm dan diameter 10 cm) berisi 10 cm air dan diuji di lingkungan yang tenang untuk mencatat durasi stasioner mereka selama 5 menit.

Uji Lapangan Terbuka (Kawai et al., 1998)

Aktivitas lokomotor diukur dengan menggunakan uji lapangan terbuka. Tikus diuji di lingkungan yang tenang dan penerangan redup dan ditempatkan satu per satu dalam wadah akrilik transparan berukuran 30 cm × 30 cm × 15 cm dengan kotak pemisah berukuran 6 cm × 6 cm di bagian bawah. Tikus diberi waktu 10 menit untuk beradaptasi dengan lingkungan dan kemudian jumlah grid ambulasi dan frekuensi pemeliharaan masing-masing tikus diukur lima kali berturut-turut untuk mendapatkan nilai rata-rata.

CISTANCHE TUBULOSA ALAMI UNTUK MENINGKATKAN FUNGSI SEKSUAL PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Pengambilan Sampel Jaringan Otak

Sebelum pengambilan sampel jaringan, tikus diberi makan ad libitum dengan akses gratis terhadap air dan mendapat intervensi obat selama 14 hari berturut-turut. Empat tikus di setiap kelompok dipilih dan segera dipenggal. SN (Bregma: −2.75 mm −2.92 mm) dari masing-masing hewan diisolasi dan ditempatkan di atas es. Jaringan otak dibilas dengan larutan natrium klorida dingin 0,9% untuk menghilangkan darah dan dikeringkan pada kertas saring sebelum disimpan pada suhu −80◦C. Empat tikus dari masing-masing kelompok dianestesi secara intraperitoneal dan dada mereka dibuka. Jarum infus kemudian dimasukkan ke ventrikel kiri masing-masing hewan. Untuk mengeluarkan darah dalam sistem peredaran darah, pelengkap atrium kanan dipotong dan hewan tersebut diinfus dengan larutan garam normal 4◦C sampai hati menjadi pucat untuk memastikan perfusi berturut-turut. Setelah limbah atrium kanan menjadi jernih, setiap hewan diberi perfusi dengan fiksatif paraformaldehyde 4%. Setelah perfusi, jaringan otak masing-masing hewan kemudian dibedah dengan hati-hati dan difiksasi dalam paraformaldehyde 4% selama 24 jam. Jaringan otak yang diperbaiki kemudian dibilas dengan air mengalir, didehidrasi dalam serangkaian larutan etanol, dan dibersihkan dalam larutan xilena. Kemudian dilanjutkan dengan perendaman dan penyisipan parafin.

Perubahan Kuantitas DA Diukur dengan HPLC

SN bubuk nano dari masing-masing kelompok ditempatkan dalam penangas es yang mengandung larutan natrium klorida 0,9% (perbandingan 1:9). Jaringan otak dihomogenisasi menggunakan pengganggu sel ultrasonik dan disentrifugasi pada 1200 rpm selama 20 menit pada suhu 4◦C untuk mendapatkan supernatan. Untuk HPLC, digunakan kolom Hypersil AA-ODS (2,1 mm × 200 mm, 5 µm) pada suhu kolom 30◦C. Deteksi fluoresensi dilakukan pada 280 nm λex dan 340 nm λem. Volume injeksi adalah 10 μL.

Ekspresi TH, GDNF, GFR 1 dan Ret Terdeteksi oleh Imunohistokimia

Bagian parafin (ketebalan 5 µm) dari jaringan otak individu diisolasi dari masing-masing hewan dan ditempatkan dalam penangas air hangat bersuhu 40◦C untuk diratakan dan ditempelkan pada slide kaca. Semua slide jaringan diinkubasi dalam oven 60◦C selama 3-6 jam, diikuti oleh dewaxing xylene, dehidrasi etanol gradien, dan pengambilan antigen dengan menginkubasi dalam buffer asam sitrat dan memanaskan dalam microwave selama 20 menit. Slide jaringan kemudian diinkubasi dalam larutan H2O2 3% pada suhu kamar selama 10 menit. Setelah dicuci tiga kali dalam PBS, slide jaringan diinkubasi dengan serum normal dalam ruang tertutup pada suhu kamar selama 20 menit. Pewarnaan imunohistokimia dilakukan sesuai dengan instruksi pabrik. Penganalisis gambar Motic Med 6.0 digunakan untuk menghitung nilai kepadatan optik terintegrasi dalam sel yang diwarnai positif.

Analisis Western Blot pada Jaringan Otak Tikus

Penelitian ini menilai ekspresi protein tirosin hidroksilase (TH), GDNF, GFR 1, Ret, Bcl2, dan Bax. Lisat otak dari masing-masing kelompok dihomogenisasi selama 3{{10}} menit di atas es, diikuti dengan sentrifugasi suhu rendah, 20,000 rpm, pada 4 ◦C selama 5 menit untuk mengumpulkan supernatan. Sampel protein dipisahkan pada tekanan konstan menggunakan gel SDS-PAGE 10% seperti dijelaskan di atas. Konsentrasi antibodi primer: TH 0,15 mg/ml, GDNF 0,5 mg/ml, GFR 1 0,8 mg/ml, Ret 0,63 mg/ml, Bcl-2 0,34 mg/ml, dan Bax 0,11 mg/ml. Prosedurnya sama seperti di atas.

CISTANCHE TUBULOSA ALAMI UNTUK ANTI AGING ANTI-ALZHEIMER PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Analisis Statistik

Penelitian ini menggunakan software statistik SPSS 20.0 untuk pengolahan dan analisis data. Nilai parameter dinyatakan sebagai mean ± standar deviasi (¯x ± S). ANOVA digunakan untuk analisis data faktor tunggal. LSD atau tes Games-Howell digunakan untuk membandingkan kelompok. P< 0.05 (or P < 0.01) was considered as a statistically significant difference.

HASIL

Komponen Aktif Nanopowder C. tubulosa

Dalam rentang pemindaian 200-400 nm, ECH pada C. tubulosa dan VER pada 330 nm memiliki puncak serapan maksimum, yang muncul dalam waktu 20 menit. ICA memiliki puncak serapan maksimum pada 270 nm dan muncul setelah 20 menit (Gambar 1A). Hasil penelitian menunjukkan bahwa sampel negatif tidak mengganggu pendeteksian (Gambar 1B). Sampel dan kontrol memiliki puncak kromatografi yang sama dan sampel negatif tidak memiliki puncak kromatografi. Hal ini menunjukkan bahwa bahan lain dalam sampel tidak mengganggu komponen yang diukur. Selain itu, ketiga komponen dan puncak yang berdekatan dapat mencapai garis dasar pemisahan dan derajat pemisahan lebih besar dari 1,5.

C. tubulosa Nanopowder Mengurangi MPP+ -Menginduksi Sitotoksisitas pada Sel MES23.5

Viabilitas sel MES23.5 berkurang secara signifikan dengan meningkatnya konsentrasi MPP+. Gambar 2F menunjukkan sitotoksisitas yang signifikan dari berbagai konsentrasi MPP+.

C. tubulosa nanopowder mengurangi sitotoksisitas yang diinduksi MPP+-dan meningkatkan viabilitas sel MES23.5. Gambar 2G menunjukkan bahwa bubuk nano C. tubulosa dengan dosis 10–250 µg/mL memberikan efek perlindungan yang bergantung pada dosis pada sel MES23.5 yang diobati dengan MPP+-.

Efek Sitomorfologi Nanopowder C. tubulosa

Sel MES23.5 normal memiliki adhesi sel yang baik dan berbentuk gelendong dengan batas sel dan sinapsis yang jelas. Sel MES23.5 MPP+-yang rusak menunjukkan adhesi dan penyusutan sel yang buruk, dan banyak yang tersuspensi dalam media dengan sinapsis yang berkontraksi. Sel-sel ini berkumpul, menyusut dan membulat dengan vakuola di dalamnya, dan intinya hancur atau hancur. Bubuk nano C. tubulosa dalam dosis berbeda meningkatkan sitomorfologi sel MES23.5 dalam derajat yang berbeda dengan meningkatkan adhesi sel dan pembersihan sinaptik kelompok kendaraan. Sel MES23.5 pada kelompok pengobatan C. tubulosa dosis tinggi menunjukkan morfologi yang mirip dengan kelompok kontrol normal (Gambar 2A – E).

Pengaruh Nanopowder C. tubulosa pada Ekspresi TH dan Apoptosis dalam Sel

Gambar 3 menunjukkan penurunan yang signifikan dalam ekspresi protein TH pada kelompok kendaraan. Ekspresi protein TH meningkat secara berbeda pada kelompok yang diobati dengan dosis C. tubulosa yang berbeda. Namun uji LSD menunjukkan tidak ada perbedaan yang signifikan antara ketiga kelompok perlakuan.

Gambar 4 menunjukkan hasil penilaian apoptosis menggunakan flow cytometry. Tingkat apoptosis pada kelompok kendaraan secara signifikan lebih tinggi dibandingkan kelompok lain. Sel yang diobati dengan dosis berbeda dari bubuk nano C. tubulosa menunjukkan tingkat penurunan laju apoptosis yang berbeda dibandingkan dengan kelompok kendaraan. Sel pada kelompok perlakuan C. tubulosa dosis menengah dan tinggi mengalami peningkatan laju apoptosis paling signifikan dibandingkan dengan kelompok perlakuan C. tubulosa lainnya. Uji LSD menunjukkan tidak ada perbedaan yang signifikan antara kedua kelompok yang diberi perlakuan tetapi terdapat perbedaan yang signifikan juga antara kelompok dosis rendah.

Pengaruh Nanopowder C. tubulosa terhadap Ekspresi Protein Bcl2/Bax dalam Sel

Gambar 5 menunjukkan bahwa ekspresi protein Bcl2 dalam sel kelompok kendaraan secara signifikan lebih rendah dibandingkan dengan kelompok kontrol normal. Sebaliknya, ekspresi protein Bax dalam sel kelompok kendaraan secara signifikan lebih tinggi dibandingkan kelompok kontrol normal. Kelompok perlakuan C. tubulosa menunjukkan peningkatan ekspresi protein Bcl2 dan penurunan ekspresi protein Bax pada sel MES23.5 yang diobati dengan MPP+-. Di antara ketiga kelompok perlakuan, terdapat perbedaan yang signifikan pada tes LSD. Efek ini bergantung pada dosis.

Tes Perilaku

Hasil tes Berenang menunjukkan bahwa tikus dalam kelompok kendaraan memiliki durasi diam yang relatif lama, yang meningkat seiring waktu. Pada hari ke 14, tikus dalam kelompok kendaraan memiliki durasi stasioner yang jauh lebih lama dibandingkan tikus pada kelompok kontrol normal. Durasi stasioner tikus di

yang berdosis rendahC.tubulosakelompok perlakuan tidak berbeda nyata dengan tikus pada kelompok wahana. Namun, durasi stasioner tikus dalam kelompok pengobatan C. tubulosa dosis tinggi secara signifikan lebih pendek dibandingkan dengan tikus dalam kelompok kendaraan.

Hasil uji lapangan terbuka menunjukkan bahwa setelah kerusakan yang disebabkan MPTP pada tikus, tikus dalam kelompok kendaraan menunjukkan penurunan yang signifikan dalam kemampuan mereka untuk melakukan aktivitas spontan seperti yang ditunjukkan oleh frekuensi pemeliharaan. Setelah 14-hari administrasiC. tubulosa nanopowder, tikus dalam kelompok perlakuan dosis sedang dan tinggi memiliki frekuensi pemeliharaan yang jauh lebih tinggi dibandingkan dengan tikus dalam kelompok kendaraan (Gambar 6A, B).

Pengaruh Nanopowder C. tubulosa terhadap Kandungan DA pada Tikus

Perubahan konten DA pada SN ditentukan oleh HPLC. Ditemukan bahwa kandungan DA di otak kelompok kendaraan berkurang secara signifikan. Kandungan DA pada otak tikus PD pada kelompok perlakuan C. tubulosa dosis rendah tidak berbeda secara signifikan dengan tikus pada kelompok wahana. Namun,pengobatan C. tubulosameningkatkan kadar DA di otak tikus PD dengan cara yang tergantung pada dosis. Otak tikus PD yang diobati dengan C. tubulosa dosis tinggi memiliki kandungan DA yang jauh lebih tinggi dibandingkan otak tikus dalam kelompok kendaraan (Gambar 6C).

Pengaruh Nanopowder C. tubulosa terhadap Ekspresi TH pada Tikus

Jumlah sel TH-positif dan tingkat ekspresi protein TH pada SN tikus PD yang diinduksi MPTP lebih rendah dibandingkan dengan tikus pada kelompok kontrol. Setelah pengobatan C. tubulosa, jumlah sel TH-positif dan tingkat ekspresi protein TH pada SN tikus PD yang diinduksi MPTP meningkat, dengan perbedaan yang signifikan antara kelompok perlakuan C. tubulosa dosis tinggi dan kelompok kendaraan. dengan tes LSD; dan terdapat perbedaan yang signifikan antara ketiga kelompok yang diberi perlakuan (Gambar 7).

Pengaruh Nanopowder C. tubulosa terhadap Ekspresi Protein GDNF dan Reseptornya, GFR 1 dan Ret pada Mencit

Ekspresi protein GDNF dan reseptornya, GFR 1 dan Ret, dalam sel yang diwarnai positif, dievaluasi menggunakan imunohistokimia. Analisis Western blot digunakan untuk mengevaluasi tingkat ekspresi protein di SN dari berbagai kelompok tikus. Temuan untuk kelompok yang berbeda serupa dengan menggunakan dua metode deteksi. Ekspresi GDNF dan protein reseptornya, GFR 1 dan Ret, dalam sel yang diwarnai positif di SN tikus dalam kelompok kendaraan, secara signifikan lebih rendah dibandingkan tikus pada kelompok kontrol normal. Dosis pengobatan C. tubulosa yang berbeda meningkatkan jumlah sel GDNF-, GFR 1-, dan Ret-positif (Gambar 8A–S).

Ekspresi protein GDNF, GFR 1, dan Ret pada SN tikus pada kelompok kendaraan secara signifikan lebih rendah dibandingkan tikus pada kelompok kontrol. Meningkatkan konsentrasi pengobatanC. tubulosa nanopowersecara signifikan meningkatkan ekspresi protein ini. Ekspresi protein GDNF, GFR 1, dan Ret pada SN tikus pada kelompok perlakuan C. tubulosa dosis tinggi secara signifikan lebih tinggi dibandingkan pada tikus pada kelompok kendaraan (P< 0.01; Figures 8T, U). 

Pengaruh Nanopowder C. tubulosa terhadap Ekspresi Protein Bcl2/Bax pada Mencit

Ekspresi protein Bcl2 berkurang secara signifikan dan ekspresi protein Bax meningkat secara signifikan pada SN tikus dalam kelompok kendaraan (P< 0.01) compared with the mice in the normal control group. High-dose C. tubulosa treatment significantly increased Bcl2 protein expression and significantly reduced Bax protein expression in the brains of the vehicle mice (P < 0.01; Figure 9). LSD test showed there was no significant difference between the middle-dose and high-dose groups but a significant difference between the low-dose group. 

DISKUSI

PD dan Apoptosis

PD adalah kelainan neurodegeneratif. Menurut Zhang dkk. (2005), prevalensinya adalah 10,7% pada populasi Cina yang berusia di atas 55 tahun dan 1,67% pada mereka yang berusia di atas 65 tahun. Jumlah pasien PD meningkat setiap tahunnya seiring dengan percepatan penuaan global, sehingga memberikan beban keuangan yang berat pada keluarga pasien. dan masyarakat pada umumnya. Di otak, neuron dopaminergik terutama terlibat dalam sintesis dan sekresi DA. Mereka tersebar luas di sistem saraf pusat dan terutama terletak di SN (80%). TH adalah enzim pembatas laju utama untuk sintesis DA. Dengan demikian, penghambatan aktivitas TH mengurangi sintesis DA (Huot dan Parent, 2007). Perubahan patologis dan biokimia utama PD adalah apoptosis neuron dopaminergik di SN, penurunan DA nigrostriatal yang signifikan, dan pembentukan badan Lewy di neuron dopaminergik (Dexter dan Jenner, 2013). Etiologi PD melibatkan faktor genetik terkait, faktor lingkungan, dan penuaan sistem saraf (Allam et al., 2005). Patogenesis PD masih belum jelas dalam pengobatan modern. Sejak akhir tahun 1960an, terapi penggantian levodopa telah berhasil digunakan untuk mengobati PD dan telah diakui sebagai titik balik utama dalam pengobatan PD. Namun, penerapan terapi ini dalam jangka panjang menyebabkan efek samping dan terapi tersebut tidak mengatasi penyebab utama PD (Del Sorbo dan Albanese, 2008). Oleh karena itu, penelitian aktif untuk obat-obatan baru atau metode pengobatan yang menargetkan perlindungan neuron dopaminergik sangat penting untuk mengobati PD.

Dalam penelitian sebelumnya, penerapan pelabelan ujung akhir dUTP yang dimediasi deoksinukleotidil transferase terminal menunjukkan bahwa 0,6%–4,8% neuron dopaminergik di SN pasien PD menunjukkan apoptosis (Mochizuki et al., 1996). Mikroskop elektron menunjukkan ciri-ciri apoptosis, termasuk kondensasi kromatik dan badan apoptosis dalam sel dopaminergik (Anglade et al., 1997). Tompkins dkk. (1997) melakukan analisis ultrastruktural otopsi jaringan otak dari pasien dengan PD, AD, dan penyakit Lewy body difus (DLBD). Mereka menemukan badan apoptosis pada lapisan padat SN pada pasien PD dan DLBD, memberikan bukti konklusif adanya apoptosis neuron pada PD dan penyakit terkait. Oleh karena itu, pengurangan atau penekanan apoptosis pada neuron dopaminergik merupakan hal mendasar untuk pengobatan PD.

Penelitian sebelumnya menunjukkan bahwa MPTP menginduksi gejala mirip PD. MPTP melintasi sawar darah-otak dan dimetabolisme oleh oksidase monoamine tipe B di astrosit. Ini kemudian diubah menjadi MPP+ beracun, yang terakumulasi di mitokondria neuron dopaminergik melalui asupan protein transporter DA. Dengan demikian menghasilkan radikal bebas oksigen berlebih yang menghambat aktivitas kompleks I rantai pernapasan mitokondria dan sintesis ATP. Peristiwa ini selanjutnya mendorong pembentukan radikal bebas dan reaksi stres oksidatif, dan pada akhirnya menyebabkan degenerasi dan kematian neuron dopaminergik. Oleh karena itu, penelitian ini menggunakan MPP+ untuk membangun kendaraan in vitro di neuron dopaminergik MES23.5 dan MPTP untuk menginduksi tikus kendaraan untuk verifikasi bersama. Berdasarkan hasil uji MTT, MPP+ secara signifikan mengurangi viabilitas sel MES23.5, menunjukkan bahwa MPP+ bersifat sitotoksik terhadap neuron dopaminergik. Hasilnya juga menunjukkan bahwa C. tubulosa secara efektif meningkatkan ekspresi protein anti-apoptosis dan menghambat peningkatan apoptosis yang diinduksi MPP{11}}.

PD dan GDNF

GDNF adalah faktor neurotropik, yang pertama kali diisolasi oleh Lin et al. (1993). Lin dkk. (1993) juga menunjukkan bahwa GDNF memiliki efek nutrisi spesifik pada neuron dopaminergik di otak tengah tikus. GDNF, neurturin (NTN), persephin (PSP), dan artemin (ART) merupakan keluarga GDNF. Mereka adalah protein sekretorik yang serupa secara struktural dan terkait secara fungsional (Kotzbauer et al., 1996; Baloh et al., 1998; Milbrandt et al., 1998; Woodbury et al., 1998).

Reseptor GDNF terdiri dari dua komponen. Komponen pertama, GFR, difiksasi pada membran luar glikosilfosfatidilinositol (GPI) dan ditambatkan pada permukaan connexin. Komponen kedua adalah protein Ret. Penelitian telah menunjukkan bahwa ada empat jenis GFR: GFR 1, GFR 2, GFR 3 dan GFR 4. GFR 1 adalah reseptor GDNF dengan afinitas tinggi (Onochie et al., 2000; Chen et al., 2001; Lindahl dkk., 2001). Protein ret adalah reseptor fungsional GDNF. Molekul homodimer GDNF langsung berikatan dengan GFR 1 membentuk kompleks dan berinteraksi dengan Ret, menghasilkan dimerisasi dan aktivasi Ret. Karena autofosforilasi Ret, Ret mengaktifkan beberapa jalur pensinyalan TH yang umum. Dengan tidak adanya protein Ret, GDNF menyebabkan fosforilasi protein MAPK, PI-3, dan PLC-, selain ekspresi mRNA dan aktivitas fungsional C-fos melalui protein reseptornya, GFR 1 (He et al., 2008).

Penelitian telah menunjukkan bahwa GDNF memiliki efek perlindungan terkuat pada neuron dopaminergik (Rangasamy et al., 2010; Campos et al., 2012). Pada kendaraan yang menggunakan MPTP dan 6-hydroxydopamine (6-OHDA) untuk menginduksi kerusakan pada neuron dopaminergik, GDNF melindungi neuron dopaminergik dengan mengurangi apoptosis dan mendorong pertumbuhan aksonal untuk menginduksi diferensiasi sel induk (Lucas et al., 2012; Littrell dkk., 2013). Lin dkk. (1993) menunjukkan bahwa GDNF secara khusus meningkatkan kelangsungan hidup, diferensiasi, dan pertumbuhan aksonal neuron dopaminergik untuk meningkatkan penyerapan DA dalam neuron. Penelitian ini juga menunjukkan bahwa GDNF tidak hanya mencegah toksisitas akut namun juga mengurangi toksisitas jangka panjang MPP+ atau 6-OHDA pada neuron dopaminergik, dan selanjutnya mencegah kematian sel pada sel yang mengalami stres atau rusak (Yu et al., 2010). Selain itu, GDNF mendorong proliferasi dan diferensiasi sel induk saraf menuju neuron dopaminergik di otak tengah (Lindsay, 1995) untuk menyelamatkan neuron dopaminergik dari degenerasi retrograde (Hong-Juan et al., 2011).

Penelitian telah menunjukkan bahwa ekspresi GDNF di SN berkurang secara signifikan pada kendaraan hewan (Yang et al., 2010). Hal ini menunjukkan bahwa ini mungkin merupakan salah satu mekanisme patogenesis pada tikus PD. Suntikan 5-15 µg/hari GDNF ke dalam ventrikel lateral atau striatum hewan pembawa yang diinduksi MPTP selama tiga bulan berturut-turut mendorong perbaikan nigrostriatal dari sistem dopaminergik pada hewan pembawa (Grondin et al., 2002). Studi pengobatan GDNF untuk PD pada kendaraan hewan telah menunjukkan bahwa injeksi GDNF intraserebral ke berbagai wilayah otak, seperti SN, nukleus kaudatus, dan ventrikel lateral, memperbaiki gangguan pergerakan yang terkait dengan model hewan PD, termasuk penurunan aktivitas motorik, kekakuan otot dan getaran (Grondin dkk., 2002). Namun, GDNF tidak bisa langsung melewati sawar darah otak. Oleh karena itu, injeksi GDNF ke otak lokal melibatkan risiko dan kesulitan besar dalam penerapan klinis. Aplikasi untuk memperkenalkan GDNF eksogen melalui mikrosfer pelepasan terkontrol, kapsul pelepasan berkelanjutan, dan gen virus masih dipelajari (Liang et al., 2010; Yang et al., 2010; Qiao et al., 2012). Mengingat keterbatasan berbagai teknik untuk memasukkan GDNF eksogen ke dalam otak, agen neuroprotektif yang mendorong pelepasan GDNF endogen sangat penting untuk aplikasi klinis.

PD danC.tubulosabubuk nano

PD lebih sering terjadi pada orang dewasa paruh baya dan lanjut usia. Teori TCM menganggap bahwa PD terutama terletak di otak dan terutama disebabkan oleh defisiensi hati dan ginjal, selain defisiensi energi vital dan darah. Menurut teori ini, pengobatan PD harus fokus pada penguatan ginjal dan sumsum tulang.Yang dkk. (2010)menggunakan uji klinis acak, tersamar ganda, dan terkontrol plasebo dan menemukan bahwa terapi kombinasi menggunakan Madopar dan resep penguat ginjal meringankan disfungsi motorik pasien PD. Hasil pengobatannya lebih baik dibandingkan terapi tunggal menggunakan Madopar. Kemanjuran pengobatan monoterapi TCM atau resep senyawa pada PD telah dikonfirmasi pada model hewan PD dan aplikasi klinis. Aplikasi TCM untuk memperkuat ginjal dan meningkatkan sirkulasi darah mengurangi dosis monoterapi untuk PD menggunakan Madopar. Beberapa penelitian menunjukkan bahwa TCM memperbaiki gejala PD dan melindungi neuron dopaminergik, yang mungkin terkait erat dengan peningkatan ekspresi GDNF endogen (Hong-Juan dkk., 2011; Qiao dkk., 2012).

Senyawa penguat ginjal yang digunakan dalam penelitian ini,C.tubulosabubuk nano, terkandungCistanche, epimedium, DanRhizoma poligonati. Penelitian modern menunjukkan bahwa komposisi kimianyaCistancheadalah ECH, yang melindungi neuron dopaminergik di SN pada tikus PD yang diinduksi MPTP dan menghambat pengurangan DA dan transporter DA (Zhao dkk., 2010). Selain itu, ini mencegah pengurangan DA yang diinduksi 6-OHDA dan melindungi neuron dopaminergik striatal (Chen dkk., 2007). Epimedium menghambat aktivasi caspase-3 dan menjalankan peran neuroprotektif (Liu dkk., 2011). Flavonoid epimedium secara efektif meningkatkan proliferasi dan diferensiasi sel induk saraf (Yao dkk., 2010).

Dalam penelitian ini,C.tubulosananopowder memusuhi peningkatan MPP+- menginduksi apoptosis dengan cara yang bergantung pada dosis. Ini secara signifikan meningkatkan ekspresi TH disecara in vitrokendaraan dan memiliki efek anti-apoptosis yang signifikan pada neuron dopaminergik. Tikus kendaraan yang diinduksi MPTP menunjukkan gangguan perilaku dan secara signifikan mengurangi ekspresi TH di jaringan otak tengah dan tingkat DA, yang merupakan gambaran patologis khas PD. Dosis yang berbedaC.tubulosananopowder memperpendek durasi stasioner, meningkatkan aktivitas otonom, memperbaiki gangguan perilaku, meningkatkan kadar DA di otak, dan meningkatkan ekspresi TH di kendaraan. Hasil ini menunjukkan hal ituC.tubulosananopowder memberikan efek perlindungan pada neuron dopaminergik, sehingga meningkatkan gangguan perilaku kendaraan. Dosis yang berbedaC.tubulosananopowder meningkatkan ekspresi protein GDNF dan protein reseptornya di otak tikus kendaraan. Dosis tinggiC.tubulosapengobatan secara signifikan meningkatkan regulasi ekspresi Bcl2 dan mengurangi ekspresi Bax, yang menunjukkan hal ituC.tubulosabubuk nanomungkin meningkatkan ekspresi dan sekresi GDNF di otak tikus yang rusak karena MPTP. Selain itu, obat ini mungkin memberikan efek neuroprotektif pada neuron dopaminergik dan meminimalkan apoptosis neuron melalui peran dukungan neurotropik GDNF.

Penelitian ini menunjukkan hal ituC.tubulosananopowder memberikan efek perlindungan pada neuron dopaminergik di keduanyasecara in vitroDansecara alamidan meningkatkan ekspresi TH untuk meningkatkan konten DA. Ini juga memperbaiki gangguan perilaku pada tikus kendaraan yang diinduksi MPTP, mengatur ekspresi protein GDNF dan protein reseptornya di SN, dan memiliki efek anti-apoptosis pada tikus PD. Mekanisme yang mendasari efek klinis dariC.tubulosabubuk nano pada PD mungkin melibatkan peningkatan kandungan GDNF endogen di otak dan dengan demikian mengurangi kerusakan neuron dopaminergik.

CISTANCHE TUBULOSA ALAMI UNTUK MENINGKATKAN FUNGSI SEKSUAL PHGS75% ECH 30% ACT 12