Tingkat Latihan yang Sesuai Melemahkan Disbiosis Usus Dan Peningkatan Asam Valerat Untuk Meningkatkan Neuroplastisitas Dan Fungsi Kognitif Setelah Operasi pada Tikus Bagian 3

BAHAN DAN METODE

Protokol dan prosedur eksperimental telah disetujui oleh Komite Perawatan dan Penggunaan Hewan Institusional Universitas Virginia (Charlottesville, VA, USA; nomor protokol: 3114).

Memori adalah salah satu kemampuan yang sering kita perlukan dalam kehidupan sehari-hari. Hal ini dapat membuat orang lebih pintar, lebih sensitif, dan lebih kondusif terhadap karier dan hubungan interpersonal. Oleh karena itu, banyak orang yang ingin meningkatkan daya ingatnya. Ada hubungan antara protokol eksperimental dan memori. Mari kita jelajahi masalah ini selanjutnya.

Pertama, protokol eksperimental dapat membantu orang meningkatkan daya ingat mereka. Dalam percobaan, orang perlu mengikuti langkah-langkah tertentu untuk menyelesaikan operasi percobaan. Aktivitas selangkah demi selangkah ini dapat menempatkan otak manusia pada kondisi perhatian dan konsentrasi yang tinggi, sehingga meningkatkan kinerja fungsi otak. Pada saat yang sama, Anda perlu mengingat beberapa data eksperimen dan langkah eksperimen selama eksperimen, yang juga akan melatih fungsi memori otak. Dengan berulang kali berlatih dengan cara ini, daya ingat Anda akan meningkat secara bertahap.

Kedua, pengalaman indrawi selama proses memori juga berkaitan erat dengan desain rencana eksperimen. Dalam eksperimen, desainer sering kali menetapkan tugas spesifik tertentu selama eksperimen, sehingga peserta perlu mengulangi operasi yang sama beberapa kali, seperti mengingat dan menulis angka, mengingat dan mengenali blok warna, dll. Pengalaman berulang ini dapat memperkuat kemampuan seseorang. kemampuan perhatian dan memori, sehingga memudahkan orang untuk mengolah informasi tersebut menjadi memori jangka panjang.

Selain itu, dalam eksperimen, penggunaan bahan stimulus yang representatif (seperti gambar, suara, bau, dll) juga dapat memberikan hasil yang baik. Pasalnya rangsangan tersebut dapat memicu proses kegembiraan dan memori otak sehingga meningkatkan kemampuan memori seseorang. Pada saat yang sama, rangsangan tersebut juga dapat dibarengi dengan lingkungan dan situasi kehidupan, sehingga mengurangi terjadinya decoupling dan menjadikan informasi lebih mudah diingat dan lebih kohesif.

Singkatnya, rencana eksperimental memainkan peran penting dalam meningkatkan daya ingat manusia. Dengan melakukan eksperimen, orang dapat melatih kemampuan kognitifnya, meningkatkan tingkat daya ingatnya, dan pada saat yang sama meningkatkan fungsi otak. Oleh karena itu, kita harus terus mempelajari metode eksperimental baru dan berpartisipasi dalam lebih banyak eksperimen untuk meningkatkan tingkat ingatan kita dan memberikan kontribusi yang lebih besar pada karier, hubungan, dan kesehatan kita. Terlihat bahwa kita perlu meningkatkan daya ingat, dan Cistanche deserticola dapat meningkatkan daya ingat secara signifikan, karena Cistanche deserticola memiliki efek antioksidan, anti inflamasi, dan anti penuaan, yang dapat membantu mengurangi reaksi oksidasi dan inflamasi di otak, sehingga melindungi otak. kesehatan sistem saraf. Selain itu, Cistanche deserticola juga dapat mendorong pertumbuhan dan perbaikan sel saraf, sehingga meningkatkan konektivitas dan fungsi jaringan saraf. Efek ini dapat membantu meningkatkan daya ingat, kemampuan belajar, dan kecepatan berpikir, serta mencegah berkembangnya disfungsi kognitif dan penyakit neurodegeneratif.

Klik Ketahui Memori Jangka Pendek cara meningkatkannya

Semua percobaan pada hewan dilakukan oleh Panduan Institut Kesehatan Nasional untuk Perawatan dan Penggunaan Hewan Laboratorium (publikasi NIH nomor 80-23) yang direvisi pada tahun 2011. Sumber bahan utama tercantum dalam Tabel Sumber Daya Utama pada Bahan Pelengkap.

Hewan dan Desain Eksperimental

Tikus C57BL/6 J jantan berumur delapan minggu dengan berat 19–22 g ditempatkan di ruangan yang dipelihara dalam kondisi lingkungan yang konstan (suhu 22–24 derajat, siklus terang/gelap 12 jam, dan kelembapan 50 ± 10%) dengan akses gratis ke makanan dan air.

Semuanya diijinkan melakukan aklimatisasi selama satu minggu sebelum percobaan. Mereka secara acak dimasukkan ke dalam kelompok berikut pada percobaan pertama: (1) kelompok kontrol (tidak terkena anestesi dan pembedahan), (2) kelompok olahraga (dilakukan dengan kapasitas maksimal 35-40%, namun tidak terkena anestesi dan pembedahan) , (3) kelompok pembedahan (paparan arteri karotis kiri selama 15 menit dengan anestesi isofluran selama 2 jam), dan (4) hingga (6) kelompok Exe-l+Sur, Exe-m+Sur dan Exe-h+Sur: dilakukan pada usia 35 –40%, 55–60% dan 75–80% kapasitas maksimal, masing-masing, dan dikenai anestesi dan pembedahan.

Hewan-hewan tersebut digunakan untuk tes pembelajaran dan memori yang dimulai 4 hari setelah operasi (n=20) atau otak mereka diambil untuk pengujian biokimia pada 6 jam, 24 jam, 48 jam, 72 jam, 96 jam, dan 7 hari setelah operasi (n=9 atau 14), untuk pewarnaan imunofluoresen pada 48 jam dan 19 hari setelah operasi (n=6), dan untuk pewarnaan Golgi pada 19 hari setelah operasi (n=8).

Darah dan feses dari tikus dari 4 kelompok pertama diambil untuk mengukur SCFA pada 7 hari setelah operasi (n=7) dan untuk analisis 16 S pada 3 dan 7 hari setelah operasi (n=8) atau pada protokol latihan akhir 4-minggu (n=8) ​​atau pada waktu yang sama di 2 grup pertama (n=16). Tikus untuk pengambilan jaringan adalah kelompok tikus berbeda yang digunakan untuk pembelajaran dan tes memori. Pada percobaan kedua, tikus secara acak dimasukkan ke dalam (1) kelompok Transcontrol+Sur dan (2) kelompok Trans-exe+Sur.

Tikus pada kelompok pertama menerima 500 ul larutan feses dari kelompok kontrol melalui gavage lambung dan 600 ul melalui enema sekali sehari selama 7 hari berturut-turut setelah pengobatan antibiotik untuk menghilangkan mikrobiota usus asli pada penerima. Tikus pada kelompok kedua menerima 500 ul larutan tinja dari tikus latihan dengan gavage lambung dan 600 ul dengan enema sekali sehari selama 7 hari berturut-turut setelah pengobatan antibiotik. Kotoran dari penerima dipanen 14 hari setelah transplantasi tinja untuk analisis 16 S. Tikus-tikus itu kemudian dioperasi.

Pembelajaran dan memori dievaluasi mulai 4 hari setelah operasi (n=15). Otak dipanen untuk studi biokimia seperti pada percobaan pertama (n=10). Pada percobaan ketiga, tikus secara acak dimasukkan ke dalam (1) kelompok Transkontrol, dan (2) kelompok Trans-kontrol+Sur. Tikus pada kedua kelompok menerima transplantasi feses dari tikus kontrol. Kelompok kedua menjalani operasi 14 hari setelah transplantasi tinja. Hipokampus dipanen 2 hari setelah operasi untuk mengukur GDNF (n=10). Pada percobaan keempat, tikus secara acak dimasukkan ke dalam (1) kelompok kontrol (tikus naif yang tidak terpapar pada kondisi percobaan apa pun yang dijelaskan dalam penelitian ini), (2) kelompok antibiotik yang mendapat antibiotik selama 7 hari, dan (3) kelompok transkontrol yang mendapat transplantasi feses dari tikus kontrol.

Pembelajaran dan memori dinilai 19 hari setelah selesainya transplantasi tinja (26 hari setelah selesainya pengobatan antibiotik pada kelompok antibiotik) (n=12). Pada percobaan kelima, tikus secara acak dimasukkan ke dalam (1) kelompok kontrol, (2) kelompok Trans-kontrol yang menerima transplantasi feses dari tikus kontrol, dan (3) kelompok Trans-bedah yang menerima kantor transplantasi dari tikus yang dioperasi. 

Transplantasi tinja dilakukan seperti yang dijelaskan pada percobaan kedua. Kotoran dari penerima dipanen14 hari setelah transplantasi tinja untuk analisis 16 S (n=10). Pembelajaran dan memori dinilai 4 hari setelah sampel tinja dipanen (n=17). Pada percobaan keenam, tikus secara acak ditugaskan untuk (1) kelompok operasi ditambah saline normal yang menerima 200 μl normal saline (NS) dengan injeksi intraperitoneal satu kali. seminggu selama 4 minggu dan kemudian operasi, (2)latihan ditambah normal saline ditambah kelompok pembedahan yang mendapat 200 μl NS dengan injeksi intraperitoneal seminggu sekali selama 4-minggu latihan pada kapasitas maksimal 35–40% dan kemudian pembedahan, (3 ) kelompok olahraga plus asam valerat plus operasi yang menerima asam valerat (200 mg/kg dalam 200 µl) melalui injeksi intraperitoneal seminggu sekali selama 4-minggu latihan pada kapasitas maksimal 35–40% dan kemudian operasi.

Suntikan diberikan pada pagi hari pada hari latihan pertama dalam seminggu. Satu suntikan tambahan dilakukan pada hari operasi. Hasil perilaku (n=13) dan biokimia (n=10) dinilai seperti pada percobaan kedua. Pada percobaan ketujuh, C57BL jantan berumur 13-minggu (berat 23–27 g) jantan/ 6 tikus J secara acak dimasukkan ke dalam (1) kelompok kontrol, (2) kelompok NS yang menerima 4 μl NS melalui suntikan intracerebroventrikular sekali sehari selama 4 hari berturut-turut, dan (3) kelompok asam valerat yang menerima 4 mg/kg dalam 4 μl per intracerebroventrikular. suntikan sekali sehari selama 4 hari berturut-turut. Cerebroventricle kiri dan kanan disuntikkan dengan jadwal bergantian. Pembelajaran dan memori dinilai 4 hari setelah injeksi (n=15).

Pada percobaan kedelapan, mencit secara acak dimasukkan ke dalam (1) kelompok pembedahan ditambah dimetil sulfoksida (DMSO) yang mendapat suntikan DMSO intracerebral sekali sehari selama 4 hari berturut-turut dimulai pada hari pembedahan, (2) pembedahan ditambah kelompok antagonis C3ar yang mendapat antagonis C3ar (SB290157 ) dengan suntikan intracerebroventrikular sekali sehari selama 4 hari dimulai pada hari operasi, (3) latihan plus DMSO ditambah kelompok operasi yang mendapat DMSO dengan suntikan intracerebroventrikular sekali sehari selama 4 hari berturut-turut dimulai pada hari operasi setelah latihan 4-minggu pada usia 35 –40% kapasitas maksimal, dan (4) olahraga ditambah agonis C3ar ditambah kelompok pembedahan yang menerima C3aragonis dengan injeksi intracerebroventrikular sekali sehari selama 4 hari berturut-turut dimulai pada hari pembedahan setelah latihan 4-minggu dengan kapasitas maksimal 35–40% . Tes perilaku dimulai dari 4 hari setelah operasi seperti yang disebutkan di atas (n=15).

Pada percobaan kesembilan, tikus secara acak dimasukkan ke dalam (1) kelompok kontrol, (2) kelompok pembedahan, (3) kelompok pembedahan ditambah GDNF yang menerima GDNF melalui injeksi intracerebroventrikular ketika mereka menjalani pembedahan, dan (4) pembedahan ditambah GDNF yang dilemahkan dengan panas. kelompok yang menerima GDNF yang dilemahkan dengan panas melalui injeksi intracerebroventrikular ketika mereka menjalani operasi. Hippocampi dipanen 48 jam setelah operasi untuk studi ELISA (n=12). Setelah satu minggu aklimatisasi, tikus tua (tikus C57BL/6 J jantan berumur 18-bulan) dengan berat 30–36 g digunakan dalam tiga studi. Pada percobaan pertama, tikus tua secara acak dimasukkan ke dalam (1) kelompok kontrol, (2) kelompok olahraga dimana tikus melakukan latihan selama 4-minggu dengan kapasitas maksimal 35–40%, (3) kelompok pembedahan, dan (4) kelompok Exe+Sur di mana tikus melakukan latihan 4-minggu dengan kapasitas maksimal 35–40% sebelum operasi. Hewan digunakan untuk tes pembelajaran dan memori yang dimulai 4 hari setelah operasi (n=12) atau otak mereka diambil untuk pengujian biokimia pada 48 jam setelah operasi (n=10 atau 12), untuk pewarnaan imunofluoresen pada 48 jam dan 19 hari setelah operasi (n=6), dan untuk Golgistaining pada 19 hari setelah operasi (n=8).

Darah dan feses mencit dari 4 kelompok diambil untuk pengukuran SCFA pada 7 hari setelah operasi (n=7) dan untuk analisis 16 S pada 3 dan 7 hari setelah operasi (n=8) atau pada akhir protokol latihan 4-minggu atau pada waktu yang sama dalam 2 kelompok pertama (n=16). Tikus yang diambil jaringannya adalah kelompok berbeda yang digunakan untuk pembelajaran dan tes memori. Pada percobaan kedua, tikus tua secara acak dimasukkan ke dalam (1) kelompok Trans-Old Control+Sur, dan (2) kelompok Trans-Old Exe+Sur. Tikus-tikus ini dioperasi 14 hari setelah transplantasi tinja seperti dijelaskan dalam percobaan kedua pada tikus dewasa muda. Pembelajaran dan memori dievaluasi mulai 4 hari setelah operasi (n =10).

Pada percobaan ketiga, tikus tua secara acak ditugaskan untuk (1) operasi ditambah kelompok NS; (2) kelompok olah raga plus NS plus bedah; dan (3) kelompok olahraga plus asam valerat plus bedah. Tikus ini menerima pengkondisian olahraga dan asam valerat seperti yang dijelaskan dalam percobaan keenam pada tikus dewasa muda. Hasil perilaku diuji mulai 4 hari setelah operasi (n=11). Ukuran sampel (n) yang dijelaskan di atas mewakili jumlah hewan yang diacak ke dalam setiap kelompok/kondisi. Jumlah hewan ini adalah jumlah dari setidaknya 3 ulangan dari setiap percobaan. Hewan didistribusikan secara acak ke dalam kelompok berdasarkan tabel pengacakan yang dihasilkan komputer di setiap percobaan.

Penentuan kapasitas latihan maksimal dan latihan latihan

Sebelum operasi, tikus berumur {{0}}minggu dan 18-bulan diberikan latihan aerobik treadmill selama 4-minggu setelah penentuan kapasitas latihan maksimal masing-masing tikus. Penentuan ini dilakukan dengan cara yang mirip dengan yang dijelaskan sebelumnya [47, 48]. Secara singkat, tikus disesuaikan dengan treadmill pada hari pertama dengan pengaturan awal shock grid pada 25 V, 0,3mA, dan 2 Hz serta kecepatan dan kemiringan pada nol selama 10 menit. Kecepatan treadmill kemudian ditingkatkan menjadi 10 cm/s dengan kemiringan diatur ke 50 selama 10 menit. Selanjutnya, kecepatan dan kemiringan treadmill ditingkatkan menjadi 15 cm/pasir 100 selama 5 menit.

The speed was then increased by 5 cm/s every 5 min to an average maximal speed of 70 cm/s in young mice and 60 cm/s in old mice (around 65–75 cm/s and 55–65 cm/s, respectively), as they reached the criteria for exercise-induced exhaustion. These criteria were: (1) 10 consecutive seconds on the electric grid; (2) spending >50% waktu di jaringan; dan/atau (3) kurangnya motivasi untuk melakukan dorongan manual. Tikus segera dikeluarkan dari jalur masing-masing setelah satu atau lebih kriteria ini terpenuhi. Keesokan harinya, tikus berlari di atas treadmill yang sama dengan setengah kecepatan maksimal rata-rata (35 cm/s pada tikus muda atau 30 cm/s pada tikus tua) dan kemiringan 100 hingga mencapai salah satu kriteria kelelahan lagi, dan durasinya. latihan terus menerus dicatat sebagai kapasitas latihan maksimal masing-masing tikus. Setelah dua protokol ini, tikus ditempatkan secara terpisah selama 30 menit untuk menghindari perilaku agresif setelah berolahraga.

After resting for 2 days, mice assigned to exercise training groups were subjected to a 4-week protocol of forced treadmill running at 35–40%, 55–60%, or 75–80% of the maximal capacity, respectively, for 5 days a week. Mice that were shocked for >5% of the total daily exercise time in 2 consecutive days or >3% dari total waktu dalam 3 hari berturut-turut akan dikecualikan.

Kelompok yang tidak berolahraga dalam rangkaian percobaan yang sama dengan kelompok yang berolahraga ditempatkan pada treadmill yang tidak bergerak setiap hari selama sekitar 30-40 menit. Mereka menerima 10 kejutan dengan total 5 detik, jumlah rata-rata kejutan yang diterima tikus dalam kelompok olahraga setiap hari, selama mereka berada di treadmill yang tidak bergerak. Jika satu set percobaan tidak memiliki kelompok latihan, tidak ada tikus dalam set percobaan yang menerima kejutan.

Perawatan antibiotik

Untuk memfasilitasi kolonisasi mikrobiota yang ditransplantasikan, tikus penerima diberi pengobatan antibiotik sekali sehari selama 7 hari berturut-turut untuk menghilangkan mikrobiota usus aslinya seperti yang dijelaskan oleh kami dan yang lainnya [11, 36]. Singkatnya, setelah pembersihan dengan 10% magnesium sulfat (200 ul/10 g, dua kali dengan interval 3 jam) melalui gavage lambung pada hari pertama, tikus C57BL/6 J menerima amoksisilin/asam klavulanat (200 mg/kg), metronidazol ( 200 mg/kg) dan cefazolin (2 g/kg) melalui gavage andenema lambung (dalam 300 ul untuk gavage lambung dan 400 ul NS untuk enema) pada pagi hari sekali sehari selama 7 hari berturut-turut, dan amoksisilin/asam klavulanat (20 mg/kg) ), metronidazol (20 mg/kg) dan cefazolin (300 mg/kg) dalam 200 ul NS setiap hari melalui injeksi intraperitoneal selama 7 hari yang sama (pukul 16.00 hingga 17.00). Untuk mencegah kontaminasi silang bakteri, penanganan tikus dan penggantian kandang dan botol air setiap hari dilakukan oleh teknisi yang mengenakan pakaian bersih dan sarung tangan dalam tudung berventilasi. Kotoran dari tikus ini dipanen 24 jam setelah perlakuan terakhir untuk analisis 16 S untuk menentukan efeknya.

Transplantasi tinja

Pelet tinja segar dikumpulkan dalam waktu 30 menit setelah buang air besar dari tikus kontrol, tikus segera setelah latihan 4-minggu selesai, atau tikus 2 hingga 8 hari setelah operasi diencerkan dengan 100 mg/ml larutan garam steril. Semua pelet tinja sebanyak 7 –10 donor dengan masing-masing kondisi percobaan dicampur dan disuspensikan kembali dalam larutan garam. Secara singkat, kotoran dicampur dengan pusaran selama 5 menit dan kemudian dilewatkan melalui saringan sel nilon 70 μm untuk menghilangkan makanan yang tidak tercerna dan bahan partikulat. Tikus penerima menerima 500 ul larutan tinja melalui gavage lambung di pagi hari dan 600 ul melalui enema di sore hari mulai 24 jam setelah dosis terakhir antibiotik selama 7 hari berturut-turut. Tikus yang ditransplantasikan dipelihara selama 2 minggu setelah transplantasi tinja sebelum mereka dilakukan pengumpulan tinja untuk analisis 16 S dan pembedahan.

Anestesi dan pembedahan

Pembedahannya adalah paparan arteri karotis kiri seperti yang kami jelaskan sebelumnya [6]. Secara singkat, tikus dibius dengan isofluran 2% dan mempertahankan pernapasan spontan dengan masker wajah yang diberi oksigen 100% selama prosedur. Suhu rektal dipantau dan dipertahankan pada 37 derajat dengan bantuan selimut pemanas. Sayatan garis tengah leher berukuran 2-cm dan diseksi jaringan lunak dengan paparan arteri umum sepanjang 1-cm dilakukan tanpa kerusakan pada saraf vagus setelah tikus dibius dengan isofluran selama minimal 20 menit. Luka kemudian diirigasi dan ditutup dengan menggunakan jahitan bedah 4-0. Prosedur pembedahan dilakukan dalam kondisi steril dan berlangsung sekitar 15 menit pada tikus muda dan 12 menit pada tikus tua. Total durasi anestesi umum adalah 2 jam. Setelah operasi, semua hewan menerima suntikan subkutan 3 mg/kg bupivakain. Tidak ada respon terhadap cubitan jari kaki yang diamati selama anestesi.

Suntikan intracerebroventrikular

Seperti dijelaskan di atas, beberapa kelompok tikus menerima suntikan intracerebroventrikular. Singkatnya, tikus-tikus ini ditempatkan dalam kerangka kepala stereotactic dalam posisi tengkurap. Tempat suntikan terletak sebagai: 1.00 mm mediolateral,−0.3 mm anteroposterior dari Bregma, dan kedalaman dorsoventral −2.5 mm. Tikus yang menjalani operasi ditambah kelompok GDNF menerima injeksi intracerebroventrikular 1{{ 20}} ug/kg GDNF tikus rekombinan dalam 3 ul phosphate-buffered saline (PBS) seperti yang dijelaskan dalam penelitian sebelumnya [6, 26], dan tikus dalam operasi ditambah kelompok GDNF yang dilemahkan dengan panas menerima suntikan denaturasi panas (5 minat 1000C ) solusi GDNF. Tikus dalam pembedahan ditambah kelompok antagonis C3ar menerima 10 ug/kg SB290157 dalam 3 ul PBS yang mengandung 5% DMSO pada 0 jam, 24 jam, 48 jam, dan 72 jam setelah operasi. Tikus dalam latihan ditambah agonis C3ar dan kelompok bedah menerima 1 ug/kg agonis C3ar dalam 3 ul PBS yang mengandung 5% DMSO pada waktu yang sama dengan SB290157. Tikus dalam kelompok asam valerat percobaan keenam menerima 4 mg/kg asam valerat dalam 4 μl selama 4 hari berturut-turut.

Pengujian perilaku

Pembelajaran dan memori dievaluasi dengan pengenalan objek baru dan tes labirin Barnes. Semua tes perilaku dilakukan pada pukul 10:00 pagi−5:00malam di ruangan kedap suara. Tikus yang digunakan dalam tes pembelajaran dan memori tidak digunakan untuk studi biokimia untuk menghindari efek dari tes ini.

Tes pengenalan objek baru

Seperti yang kami dan orang lain jelaskan sebelumnya [20, 49, 50], tikus ditempatkan di ruang terbuka selama 5 menit untuk pembiasaan 4 hari setelah operasi. Tes tersebut dilakukan dengan cara sebagai berikut. Dua benda yang sama ditempatkan pada sudut ruangan yang berdekatan pada hari pembelajaran. Tikus dimasukkan ke dalam ruangan dengan punggung menghadap ke objek dan dibiarkan menjelajahi ruangan dengan bebas selama 5 menit. Hewan tersebut dieliminasi jika total waktu eksplorasi pada dua benda sama<5 s. One of the objects was replaced by a novel object 30 seconds or 24 hours later. The mouse was put into the chamber with their backs turned toward the objects and allowed to explore for 5 min. Animal behavior was recorded by ANY-maze behavioral tracking software (Stoelting Co., IL). Exploratory time of new (T2) and old (T1) objects within 5 min was recorded and the memorization ability of the mouse was quantified by discrimination index: DI = T2 / (T1 + T2). The DIs at 30 s and 24 hours after the training reflected the instant and long-term memory, respectively. The field was always provided with even light, and the objects and fields were cleaned with 70% ethanol after each test.

Labirin Barnes

Tujuh hari setelah operasi, hewan dimasukkan ke dalam labirin Barnes untuk menguji pembelajaran spasial dan memori mereka seperti yang telah kami jelaskan sebelumnya [6, 49]. Labirin Barnes adalah platform melingkar dengan 20 lubang dengan jarak yang sama (SDInstruments, San Diego, CA). Salah satu lubang itu terhubung ke ruang gelap yang disebut kotak target. Tes dimulai dengan menempatkan hewan di tengah-tengah labirin Barnes. Kebisingan yang tidak menyenangkan (85 dB) dan cahaya terang (200W) yang dipancarkan pada platform digunakan untuk mendorong tikus menemukan kotak ini. Setelah pelatihan selama 4 hari, memori referensi mereka diuji pada hari ke 5 dan hari ke 12. Tidak ada tes yang dilakukan selama periode tersebut. dari hari ke 5 hingga hari ke 12. Latensi untuk memasuki kotak target selama setiap percobaan direkam oleh sistem pelacakan video ANYMaze (Instrumen SD).

For more information:1950477648nn@gmail.com